顶空气相色谱系列讲座10_3页.docx

顶空气相色谱系列讲座（10）

介绍一种土法顶空色谱分析方法-2

上面（9）中将土法顶空色谱分析方法常用的设备拍成照片，图-1样品瓶有两种体积（9mL,12mL），根据样品用量不同选用；图-2密封钳（红色为封瓶口钳，黑色为开瓶口钳）；图-3取样器（从50μL~1000μL）能准确吸取液体样品的重要工具；图-4加热块（俯视和正视可调温度加热块图，用来加热样品瓶）。一般用10~25μL注射器抽取液上气体进样。
二、试剂和样品
⒈ 标准样品 含内标的乙醇溶液：用0.9%生理盐水配制0.4%乙醇和0.2%特丁醇（内标）；内标溶液：用0.9%生理盐水配制0.2%特丁醇（内标）；混合标样：用0.9%生理盐水配制甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、异丁醇和特丁醇七种醇各0.7%。
⒉ 被测样品——⑴ 提取死者肖小宝心血和胃内容各5mL ⑵ 吕某的静脉血各4mL，密封、冰冻保存立即送检
三、条件和图谱
⒈ 色谱条件——柱温：填充柱在100℃~160℃，毛细柱在40℃~60℃。柱前压：填充柱在270~350kpa，毛细柱在150~180kpa。样品瓶加热温度：均在75℃~85℃。样品瓶加温平衡时间：一般选用20~25min。
　　⒉ 结果图谱——

四、结果和讨论
⑴ 加有内标（特丁醇）含乙醇样品的定量分析，在数据处理条件设置合适情况下（如在含量低时，内设值峰宽不能用5而应改为2、最小面积相应改为100，不能设为500等），实践证明，采用土法顶空进样分析结果一样准确可靠，保留了顶空色谱分析方法的全部优点。

⑵ 样品加热平衡时间长点好，一般设为20min-25min，边加热边小振摇，有利乙醇的挥发。注射器在使用之前也需预热，并用被测样品瓶中气体洗涤饱和后方可进样。

⑶ 当顶空进样器坏了或分析不准确时，也有采用三氯乙酸沉淀蛋白，高速离心后，直接将上清液进样，这是一种要求在高温下进样，对柱子的污染会少点，但容易造成分离不彻底，计算不准确的后果。

⑷ 土法顶空进样与顶空进样器进样主要不同在加热块升温、样品瓶加热和振摇、抽取液上气体和注入色谱仪进样口等，全过程均为人工控制，手动完成，与顶空进样器全过程是自动化不同，容易造成重现性差。如内标物选择适当，操作误差不影响分析结果，但同一时间内平行操作十分重要。

⑸ 土法顶空进样需用注射针，一般使用10-25μL或1.0mL体积，在进样前需将注射针先预热，用被测液上气相抽洗或饱和注射针，然后抽取所需体积的气体注入气相色谱进样口，全部操作在相同条件下进行。