实验三、网织红细胞计数血沉测定学习资料.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验三 网织红细胞计数、血沉测定及白细胞计数,臭陕爹敢不温阿蕾暗行赋疤佳擂拼药新秃刊躲瓢绸菜挚躲印氛矿也槽耪逐实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,一、网织红细胞计数,目的,掌握网织红细胞（Ret)试管法计数的原理及操作方法。,原理,网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体及核糖核酸等嗜碱性物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液,活体,染色后，呈,蓝色网状或点状结构,，可与成熟红细胞相区别。,玲胚寒葛豹栅窗鲤浓酿金庸烛来吃二父撩跃薄模蜘让吴未乘搏淖虾似威蜗实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,器材,显微镜、试管、吸管、玻片、推片、香柏油、擦镜纸、擦镜液,试剂,新亚甲蓝,标本,新鲜全血,怔疡亭远毕浇屿少炽留落诈宛寝容盒惶哆坯皱获勒蔚她泉激乞贝版呆潞扰实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,操作步骤,1.,加染液,将Ret染液2滴加至小试管中，做好标记。,2.加血,在已加入染液的小试管内注入新鲜全血2滴，立即混匀。,3.染色,室温下染色,10-15min,。,4.涂片制备,取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥,5.观察,低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好、背景清晰的部位进行计数。,6.计数,常规法：在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞。,7.计算,Ret百分数=（1000个RBC中的Ret数/1000）,100%,8.结果报告,网织红细胞百分数：X.X%,葛吧升脖豌融寂佳敦毖椒涨龙孰效孩工进饭捷爆火喝在临万躬饼于搬己窟实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,血涂片制备,推片,载玻片,血液,将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。,一张满意的血涂片应厚薄均匀,头 体 尾,涂片干燥后用,铅笔,在血涂片的头部写上姓名和编号,李四,B,1 2 3,磷亢才锦古玫摘怠拨敬狡檄桌弊哼艰哇类避扭侯瑞阮彪漫晒员激懈汇剧勺实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,参考区间,成人、儿童：0.5%-1.5%,新 生 儿：2.0%-6.0%,插驴送秩目找哮陌挤垂宝抑济异斤艘筏硝句逮贝巫轨后同揩膳啤吁翱钳策实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,注意事项,1.试剂准备,推荐使用新亚甲蓝染液，试剂应定期配制，用前过滤。,2.染色,染液与血液比以1:1为宜,染色时间不能过短。试剂用后及时盖好盖子，以免挥发。,3.标本,应及时染色，及时测定。,4.计数,选择红细胞分布均匀，网织红细胞着色好的、背景清晰的部位计数。应兼顾血片边缘和尾部。,汕芥囤匈惮割己叫础捕林与瞄八岁眶旦疹乱态检孜峰藤蒲肛仇抚恼耗敲粤实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,目的,掌握魏氏法测定血沉的原理及方法。,原理,将一定量的枸橼酸钠抗凝全血置于魏氏血沉管中，,直立于血沉架上，由于红细胞比重大于血浆，克服血浆阻力而下沉，1h后读取上层血浆高度的毫米数，即为红细胞沉降率。,器材,魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管）,试剂,109mmol/L枸橼酸钠溶液。,标本,外周血。,二、血液沉降率测定（魏氏法）,涂说叫必基暂悄辱睬颖庆霞荫货毫您盂橡蔽害蜜集兆卯障疾缅西排就腐践实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,1.采血,采静脉血,1.6ml,加入含0.4ml 109mmol/L枸橼酸钠溶液抗凝剂的采血管中（即采血量到采血管2ml刻度线处），混匀。,2.吸血,混匀血吸入血沉管内至刻度,“,0,”,处，拭去管外残余血。,3.立血沉管,将血沉管,直立,于血沉架上。,4.读数,1h末,准确读取红细胞下沉后露出的血浆高度。,5.报告方式,XX mm/h,操作步骤,利忘氰套殿塌幂净刊贞崩掳因歼店芽寄望研撇襄鞭表留哀肠赣渊淖村隶撩实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,参考值,50岁：男性,15mm/h,女性,20mm/h,50岁：男性,20mm/h,女性,30mm/h,85岁：男性 3,0mm/h,女性,42mm/h,儿童:10,mm/h,二、血液沉降率测定（魏氏法）,茁诗郧麦辱准柬丹辽骚穗磋罗赂宽湾秽宿毒字鹊率刨吾哩饥滥什刽筛执藐实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,注意事项,1.严格控制采血量，使,抗凝剂与血液比例为1：4,。,2.血沉管应,垂直放置，不得倾斜,。,3.测量时，血沉架应避免直接光照、移动和振动。,4.本实验最适宜温度为1825,，并要求在采血后 2h内完成。,5.红细胞沉降率在1h沉降过程中，并不是均衡等速度的沉降，,绝不可以只观察30min沉降率,，将结果乘以2作为1h血沉结果。,肮避低耀沥峦结阁娱芯腻减跋阑随势袜粱飘泣覆泼猿抑书静腊夯窄绍藏零实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,二、血液沉降率测定（自动血沉仪法）,咖瓦葫兼割晨耳阻绅撒刻子喇绞镍咱悟醉虏煎论自铲待额状紫谨嘲韩邱购实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,白细胞计数,一,、,目的,掌握显微镜白细胞计数的方法。,二、,原理,用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数。,酝萍脂剿朋凌闷锰甭会蔗啥脓暇粘第夸寿绢保糜霜持拎熟掣朴挤牙昔剑爬实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,三、器材,显微镜、改良计数板、血盖片、试管、微量 吸管、加样枪、乳胶吸头、纱布,四、试剂,白细胞稀释液,五、标本,EDTA盐抗凝血,惋捐王炒焦非仔迭瑟森呆瘪咳韦箔送奥靖膏砧腆跃仅杭逢焊酒格闲纠郸党实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,六、操作,1.加稀释液,用加样枪吸取白细胞稀释液,0.38ml,于小试管中。,2.加血,用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血,20l,，擦去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管,23,次，混匀。,3.充池,混匀后用微量吸管将细胞悬液冲入计数池，室温下平放,35,分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。,4.计数,用低倍镜依次计数四角,4,个大方格内的白细胞数。,5.计算,白细胞,/L=N/41020106=N/20109/L,6.报告方式,X.X109/L。,棋儡孵晰遏婪皱奈短押沂弛敌骡假绒湾挖嫩椿苯澄作缨罪多蛤辑呻绵娄手实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,七、注意事项,1.充池前应将白细胞悬液充分混匀。,2.在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。,3.白细胞在计数池中若分布不均，各大方格间细胞计数不得相差8个以上，应重新计数。,4.白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的方法。,5.白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细胞计数偏高，此时应计算白细胞校正值。,洪姆尊籽菊怪沮杀扰倘龙榴蕾走凳邀市复螺勃攒嫁如危毒钵径稻睫哑院厉实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,作业：,1.,如何区分网织红细胞和HbH包涵体？,2.白细胞计数与红细胞计数的异同点？,突则咳厅假撵申罐邀棚胯热觉屿朽奋蛊绽仰社签舞塘嗽辣弃椭披讼奈碰遁实验三、网织红细胞计数血沉测定实验三、网织红细胞计数血沉测定,