农业农村部公告第628号-1-2022 转基因植物及其产品环境安全检测 抗簿番木瓜 第1部分：抗病性.pdf

2022?12?19发布2023?03?01实施转基因植物及其产品环境安全检测抗病毒番木瓜第1部分：抗病性04中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准备案号：XXXX-XXXX65.020.01BEvaluation of environmental impact of genetically modified plantsand its derived productsVirus-resistant papayaPart 1:Evaluation of disease resistance中华人民共和国农业农村部发 布农业农村部公告第 628 号1?2022CCS农业农村部公告第 号 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件是农业农村部公告第 号 转基因植物及其产品环境安全检测抗病毒番木瓜 的第部分.农业农村部公告第 号 已经发布了以下部分:第部分:抗病性;第部分:生存竞争能力;第部分:外源基因漂移;第部分:生物多样性影响.请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任.本文件由中华人民共和国农业农村部提出.本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口.本文件起草单位:农业农村部科技发展中心、中国热带农业科学院热带生物技术研究所.本文件主要起草人:张雨良、刘鹏程、郭安平、董文凤、谭燕华、曹扬、赵辉、张丽丽、霍姗姗、周霞.农业农村部公告第 号 转基因植物及其产品环境安全检测抗病毒番木瓜第部分:抗病性范围本文件规定了转基因抗病毒番木瓜对靶标病毒病抗性的检测方法.本文件适用于转基因抗病毒番木瓜对靶标病毒病抗性水平的检测.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.NY/T 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南番木瓜术语和定义下列术语和定义适用于本文件.转基因抗病毒番木瓜g e n e t i c a l l ym o d i f i e dv i r u s r e s i s t a n tp a p a y a通过基因工程技术培育出的抗病毒番木瓜品种(系).要求 试验材料转基因抗病毒番木瓜品种(系)及其对应的非转基因番木瓜品种(系)、感病对照番木瓜品种(系).上述种子或种苗质量应达到NY/T 的繁殖体的要求.资料记录 试验地名称与位置试验地的名称、地址、经纬度或全球地理定位系统(G P S)地标.绘制小区示意图.土壤资料记录土壤类型、土壤肥力、排灌情况、土壤覆盖物等内容.描述试验地近年种植情况.试验地周围生态类型记录试验地周围的主要栽培作物及其他植被情况,以及当地番木瓜常见病虫草害的名称及危害情况.气象资料记录试验期间试验地降水(降水类型、日降水量,以mm表示)和温度(日平均气温、最高和最低温度、积温,以表示)的资料.记录整个试验期间试验结果的恶劣气候因素,例如长期或严重的干旱、暴雨、冰雹、台风等.试验安全控制措施 隔离条件试验地四周 m以内无番木瓜品种(系)种植.隔离措施种植非番木瓜植物作为隔离带,面积极小的试验地设围栏,设专人监管.试验后的材料处理转基因番木瓜材料应单收、单储,由专人运输和保管.试验结束后,除需要保留的材料外,剩余的试验农业农村部公告第 号 材料灭活处理.试验结束后试验地的监管保留试验地的边界标记.当年和第二年不再种植番木瓜,由专人负责监管,及时去除并销毁自生苗和再生苗.对靶标病毒的抗性检测 供试病毒转基因抗病毒番木瓜靶标病毒流行株系.试验前先将病毒接种至感病对照番木瓜品种(系)幼苗叶片上,验证其活性.试验设计随机区组设计,次重复,每个小区面积不小于 m(mm),每小区种植至少 株番木瓜.播种及管理试验材料种子先用无菌水浸泡 h,然后置于 磷酸三钠溶液或其他表面杀菌剂溶液中浸泡 m i n,清水冲洗后置于恒温培养箱中()催芽,出芽后再播种于试验小区.常规栽培管理,在全生育期内不使用杀菌剂,杀虫剂的使用根据试验小区内害虫发生种类和程度而定,防止蚜虫传播病毒.病毒准备将已分离鉴定的供试番木瓜病毒株系分别人工接种至番木瓜易感品种(系)上,置于防虫温室内,在 条件下种植 d d后采收明显症状的病叶.接种物可长期保存在防虫温室内的易感番木瓜品种(系)植株上,或将新鲜病叶保存在 冰箱.病毒接种在幼苗片片真叶期(小苗株高约 c m),取保存的番木瓜靶标病毒供试株系的叶片汁液,人工接种在各处理番木瓜品种(系)顶部嫩叶上,每小区接种至少 株番木瓜,如有需要,进行二次接种.调查方法接种后 d(株高约 c m)开始调查发病率,每隔d调查次,直至发病率稳定为止,每小区调查 株.调查记录各品种(系)的接种日期、出苗数、病害症状始现期、累计发病株数等.发病情况用发病率D表示,按公式()计算.DNT ()式中:D 发病率的数值,单位为百分号();N 病株数,单位为株;T 调查总株数,单位为株.按附录A中表A 调查记录发病情况并进行病情分级.病情指数按公式()计算.I(NR)TM ()式中:I 病情指数;N 病害某一级别的植株数,单位为株;R 病害的相对病级数值;T 调查总株数,单位为株;M 病害的最高病级数值.结果分析与表述用方差分析的方法比较转基因番木瓜品种(系)与非转基因番木瓜品种(系)的抗病性的差异,按附录农业农村部公告第 号 A中表A 用病情指数判定抗性水平.结果表述为:转基因番木瓜的病情指数高于(或低于)非转基因番木瓜,有(或无)差异显著性.转基因抗病毒番木瓜的抗性水平为级别.农业农村部公告第 号 附录A(资料性)番木瓜环斑病毒病病情分级及番木瓜抗性评价标准A 番木瓜环斑病毒病病情分级见表A .表A 番木瓜环斑病毒引起的番木瓜病毒病病情级别的划分病情级别症状描述全株无病,植株生长正常心叶的叶脉为明脉,片真叶呈现花叶中上部叶片为轻度花叶多数叶片为花叶,少数叶片畸形多数叶片重度花叶,叶片畸形,出现“绿岛”,植株明显矮化几乎所有叶片表现很重的花叶,多数叶片畸形,出现“绿岛”,植株严重矮化,甚至枯死A 番木瓜环斑病毒病抗性评价标准见表A .表A 番木瓜对番木瓜环斑病毒病抗性的评价标准病情指数(I)抗性评价I 级抗(R)I 级中抗(MR)I 级中感(M S)I 级感(S)I级高感(H S)