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SN∕T 3425-2012 菊花花枯病菌检疫鉴定方法(出入境检验检疫).pdf
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1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准? ? ? ? ? ? ? ?菊花花枯病菌检疫鉴定方法? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?发布? ? ? ? ? ? ? ? ? ?实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书?中华人民共和国出入境检验检疫行?业?标?准菊花花枯病菌检疫鉴定方法? ? ? ? ? ? ? ?中 国 标 准
2、出 版 社 出 版北京市朝阳区和平里西街甲?号? ? ? ? ? ?北京市西城区三里河北街? ?号? ? ? ? ? ?总编室? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?网址? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷?开本 ? ? ? ? ? ? ? ?印张 ?字数 ? ? 千字? ? ? ?年?月第一版? ? ? ?年?月第一次印刷印数? ? ?书号? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?定价? ? ? ?元书书书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位: 中华人民共和国浙江出入境检验检疫局、 浙江大学、
3、中华人民共和国杭州出入境检验检疫局、 中华人民共和国舟山出入境检验检疫局。本标准主要起草人: 陈吴健、 张明哲、 帅江冰、 楼兵干、 吴蓉、 吴志毅、 杨赛军、 林晓佳。犛 犖犜 菊花花枯病菌检疫鉴定方法范围本标准规定了植物检疫中菊花花枯病病菌犇 犻 犱 狔 犿 犲 犾 犾 犪犾 犻 犵 狌 犾 犻 犮 狅 犾 犪( , ) 的检疫鉴定方法。本标准适用于来自所有菊花花枯病菌发生国家或地区菊花切花、 植株中的菊花花枯病病菌的检疫鉴定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件, 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单)
4、适用于本文件。 进出境植物苗木检疫规程 进出境切花检疫规程 培养基制备指南第部分: 实验室培养基制备质量保证通则原理 分类地位英文名: ( ) 学名:犇 犻 犱 狔 犿 犲 犾 犾 犪 犾 犻 犵 狌 犾 犻 犮 狅 犾 犪( , ) 异名:犇 犻 犱 狔 犿 犲 犾 犾 犪犮 犺 狉 狔 狊 犪 狀 狋 犺 犲 犿 犻( ) ;犕 狔 犮 狅 狊 狆 犺 犪 犲 狉 犲 犾 犾 犪犾 犻 犵 狌 犾 犻 犮 狅 犾 犪 , 无性型:犃 狊 犮 狅 犮 犺 狔 狋 犪 犮 犺 狉 狔 狊 犪 狀 狋 犺 犲 犿 犻 菊花花枯病菌属于真菌界 , 子囊菌亚门 、 腔菌纲 、 座囊菌目 、 亚隔孢壳
5、属犇 犻 犱 狔 犿 犲 犾 犾 犪。其他信息参见附录 。 检疫鉴定依据根据菊花花枯病菌在寄主上的为害症状、 形态学特性作为鉴定依据( 参见附录、 附录、 附录 ) 。 近似种形态学特征与甜瓜蔓枯病菌犇 犻 犱 狔 犿 犲 犾 犾 犪 犫 狉 狔 狅 狀 犻 犪 犲较为近似( 参见附录) 。设备用具 仪器设备体视显微镜、 生物显微镜、 电子天平( 感量 ) 、 高压灭菌器、 超净工作台、 生物培养箱( 带荧光灯) 。犛 犖犜 实验用具标签、 定性滤纸、 样品袋、 保鲜袋、 手持放大镜、 镊子、 解 剖 刀、 酒 精 灯、 接 种 针、 培 养 皿 ( 直 径: ) 、 烧杯( ) 、 量筒(
6、) 、 三角瓶( ) 、 载玻片、 盖玻片、 微量移液器( 可调式范围: ) 、 移液器枪头( 、 、 ) 。试剂和培养基 试剂 溶液、 无水乙醇、 乙醇、 无菌双蒸水。 培养基马铃薯葡萄糖琼脂培养基( ) ( 参见附录 ) 。配制培养基时, 按照 的要求。抽样口岸查验进境菊花时, 按照 、 对来自疫区的菊花切花、 植株进行抽样与取样。检验方法 现场检测在光线充足的场所, 肉眼或借助放大镜仔细检查菊花的花瓣上有无斑点、 有无出现“ 半边花” ; 叶片有无扭曲或出现不规则黑褐色叶斑; 病部是否有黑色针头状分生孢子器, 将有以上症状的可疑切花或植株挑出, 进一步作实验室检验。标注品名、 数量、 生
7、产国及取样地点、 取样人和取样日期等样品信息。 实验室检测分离培养性状和形态学观察: 取病健交界的组织数块( 大小约) , 用 进行表面消毒 , 无菌水冲洗次, 置于 平板上, 于 黑暗下培养, 待菌落出现后观察菌落的形态、 颜色、 大小及子实体等培养性状, 显微镜检分生孢子的形态特征, 将与疑似分离物转到 平板上纯化, 保存备用。鉴定特征 症状特征菊花植株的所有部分, 包括根, 都能被侵染, 但是花和插条最容易被侵染。插条, 通常是顶芽先被侵染, 随后向下侵染整株植株。未开的花苞, 苞片和茎组织颜色变暗。在叶片上, 引起不规则的黑褐色叶斑, 宽。在茎上, 症状通常出现在靠近病叶的、 有伤口的
8、或者插条基部等部位。花上的症状: 侵染后, 花瓣出现斑点, 开始时只侵染花冠的一侧, 表现为畸形( 只有半边花) 。在浅色的花瓣上呈红色斑点, 在深色的花瓣上, 呈褐色。随后侵染快速发展, 被侵染的小花粘连在一起, 花冠完全腐烂。病菌向下侵染花梗, 造成组织变黑变弱, 引起花朵枯萎凋谢。在田间病组织上产生大量针头状的分生孢子器, 尤其花瓣上更多。初呈琥珀色, 后成熟变黑色, 很易发现。犛 犖犜 花和叶片的症状容易和灰葡萄孢引起的灰霉病相混淆, 插条的腐烂症状很像灰葡萄孢或腐霉引起的症状, 菊花花枯病引起的叶斑, 边缘清晰, 中间部位具特殊光泽。 病菌的培养性状病原真菌在 培养基上, 能在很广的
9、温度范围内生长。 都能生长良好, 最高温度是 , 最适温度 , 在下还能生长。在室温下培养, 菌落直径达 , 菌丝密集, 绒状。菌落下层后转橙红色, 中心部分呈黑褐色。菌落边缘不整齐, 越向中心菌丝层越紧密, 絮状, 分生孢子器就在中心区形成, 形成最适温度为 ; 接种后 下, 下形成分生孢子器; 子囊壳形成最适温度为 , 培养可形成, 以上不形成。( 参见图 ) 病菌形态特征分生孢子器, 埋生于寄主表皮以下, 用 倍放大镜观察可见, 壁薄, 球形, 大小有两种: 在花瓣上的小( ) , 聚生; 在茎和叶上的大( ) , 散生。分生孢子以液滴状或短柱形渗出, 无色, 具油滴, 无隔( ) 或有
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