PDCD1、PDCD4、PDCD10在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义.pdf

基金项目:辽宁省科学技术计划项目(2 0 1 9 0 2 5 0)作者简介:崔 珺(1 9 8 2-),女,副主任检验师,研究方向:医学检验。通信作者:王云燕,女,副主任检验师,研究方向:医学检验,E-m a i l:w a n g y u n y a n 1 7 71 6 3.c o m。本文引用:崔 珺,张建霞,王 岩,等.P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义J.新疆医科大学学报,2 0 2 3,4 6(1 0):1 3 2 6-1 3 3 2.d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 9-5 5 5 1.2 0 2 3.1 0.0 1 1P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义崔 珺1,张建霞2,王 岩1,王云燕1(辽宁电力中心医院1检验科,2电诊科,沈阳 1 1 0 0 0 6)摘要:目的 探讨程序性细胞死亡蛋白1(P D C D 1)、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义。方法 选择2 0 1 5年2月-2 0 2 0年1 0月辽宁电力中心医院收治的2 5 6例膀胱癌患者为研究对象,采用免疫组化、实时荧光定量聚合酶链反应(R T-q P C R)、蛋白印迹法(W e s t e r n b l o t)法检测患者膀胱癌组织和癌旁组织中P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0的表达水平。在患者入院后采集静脉血,采用R T-q P C R法检测外周血P D C D 1 mR NA、P D C D 4 mR NA、P D C D 1 0 mR NA的表达水平。采用受试者工作特征曲线(RO C)分析外周血P D C D 1 mR NA、P D C D 4 mR-NA、P D C D 1 0 mR NA对膀胱癌诊断的价值,计算曲线下面积(A U C)。采用C o x多因素分析膀胱癌患者生存预后的影响因素。结果(1)免疫组化染色显示,P D C D阳性染色主要定位于癌细胞的细胞膜,在胞浆中也有少量表达。在2 5 6例膀胱癌组织标本中,P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0的阳性率分别为4 3.3%(1 1 1/2 5 6)、4 9.6%(1 2 7/2 5 6)、5 5.8%(1 4 3/2 5 6)。与阴性表达患者比较,P D-C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0阳性表达患者的病理分级及T分期更高,发生淋巴结转移的风险也更高,差异有统计学意义(P0.0 5)。(2)R T-q P C R及W e s t e r n b l o t检测显示,与癌旁组织相比,膀胱癌组织中P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0的mR NA和蛋白相对表达水平较低,差异有统计学意义(P0.0 5)。(3)外周血P D C D 1 mR NA、P D C D 4 mR NA、P D C D 1 0 mR NA表达对膀胱癌诊断的最佳临界值分别为1.4 7 5、1.0 0 5、1.2 7 6,A U C分别为0.9 3 2、0.9 4 1、9.3 8,当三者联合检测时,可将A U C提高至0.9 5 8。(4)C o x多因素分析发现,淋巴结转移、临床分期、肿瘤直径、P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0低表达均是影响膀胱癌患者预后的独立性危险因素(P0.0 5)。结论 膀胱癌组织中P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0表达水平明显降低,可成为诊断膀胱癌的一种新的生物标志物。关键词:膀胱癌;程序性细胞死亡蛋白;诊断;危险因素中图分类号:R 7 3 7.1 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 9-5 5 5 1(2 0 2 3)1 0-1 3 2 6-0 7d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 9-5 5 5 1.2 0 2 3.1 0.0 1 1E x p r e s s i o n a n d c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e o f P D C D 1,P D C D 4 a n d P D C D 1 0 i n p e r i p h e r a l b l o o d a n d t i s s u e s o f p a t i e n t s w i t h b l a d d e r c a n c e rC U I J u n1,Z H A N G J i a n x i a2,WA N G Y a n1,WA N G Y u n y a n1(1C l i n i c a l L a b o r a t o r y,2D e p a r t m e n t o f E l e c t r o d i a g n o s i s,L i a o n i n g E l e c t r i c P o w e r C e n t e r H o s p i t a l,S h e n y a n g 1 1 0 0 0 6,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e x p r e s s i o n a n d c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e o f p r o g r a mm e d c e l l d e a t h p r o-t e i n 1(P D C D 1),P D C D 4 a n d P D C D 1 0 i n p e r i p h e r a l b l o o d a n d t i s s u e s o f t h e p a t i e n t s w i t h b l a d d e r c a n c e r.M e t h o d s 2 5 6 p a t i e n t s w i t h b l a d d e r c a n c e r a d m i t t e d t o t h e l a b o r a t o r y o f t h e h o s p i t a l f r o m F e b r u a r y 2 0 1 5 第4 6卷 第1 0期新 疆 医 科 大 学 学 报V o l.4 6 N o.1 0 2 0 2 3年1 0月J o u r n a l o f X i n j i a n g M e d i c a l U n i v e r s i t yO c t.2 0 2 3 t o O c t o b e r 2 0 2 0 w e r e s e l e c t e d a s t h e s t u d y s u b j e c t s.T h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f P D C D 1,P D C D 4 a n d P D-C D 1 0 i n b l a d d e r c a n c e r t i s s u e s a n d a d j a c e n t t i s s u e s w e r e d e t e c t e d b y i mm u n o h i s t o c h e m i s t r y,R T-q P C R a n d W e s t e r n b l o t.A f t e r t h e p a t i e n t s a d m i s s i o n,v e n o u s b l o o d w a s c o l l e c t e d a n d t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o f P D C D 1 mR NA,P D C D 4 mR NA a n d P D C D 1 0 mR NA i n p e r i p h e r a l b l o o d w e r e d e t e c t e d w i t h u s i n g R T-q P C R.T h e d i a g n o s t i c v a l u e o f P D C D 1 mR NA,P D C D 4 mR NA a n d P D C D 1 0 mR NA i n p e r i p h e r a l b l o o d f o r b l a d d e r c a n c e r w a s a n a l y z e d w i t h t h e r e c e i v e r o p e r a t i n g c h a r a c t e r i s t i c c u r v e(RO C),a n d t h e a r e a u n d e r t h e c u r v e(A U C)w a s c a l c u l a t e d.C o x m u l t i v a r i a t e a n a l y s i s w a s u s e d t o a n a l y z e t h e f a c t o r s i n f l u e n c i n g t h e s u r v i v a l a n d p r o g n o s i s o f b l a d d e r c a n c e r p a t i e n t s.R e s u l t s (1)P D C D f r e e p o s i t i v e s t a i n i n g w a s m a i n l y l o-c a t e d i n t h e c e l l m e m b r a n e o f t u m o r c e l l s.T h e p o s i t i v e r a t e s o f P D C D 1,P D C D 4 a n d P D C D 1 0 w e r e 4 3.3%(1 1 1/2 5 6),4 9.6%(1 2 7/2 5 6)a n d 5 5.8%(1 4 3/2 5 6),r e s p e c t i v e l y.T h e p a t i e n t s w i t h p o s i t i v e e x p r e s s i o n h a d h i g h e r p a t h o l o g i c a l g r a d e a n d T s t a g e,a n d h i g h e r r i s k o f l y m p h n o d e m e t a s t a s i s(P0.0 5).(2)R T-q P C R a n d W e s t e r n b l o t s h o w e d t h a t t h e r e l a t i v e e x p r e s s i o n l e v e l s o f P D C D 1,P D C D 4,P D C D 1 0 mR NA a n d p r o t e i n i n b l a d d e r c a n c e r t i s s u e s w e r e l o w e r t h a n t h o s e i n a d j a c e n t t i s s u e s,a n d t h e d i f f e r e n c e w a s s t a-t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P0.0 5).(3)T h e b e s t c r i t i c a l v a l u e s o f P D C D 1,P D C D 4 a n d P D C D 1 0 e x p r e s s i o n i n p e r i p h e r a l b l o o d f o r t h e d i a g n o s i s o f b l a d d e r c a n c e r w e r e 1.4 7 5,1.0 0 5 a n d 1.2 7 6,r e s p e c t i v e l y,a n d t h e A U C w e r e 0.9 3 2,0.9 4 1 a n d 9.3 8,r e s p e c t i v e l y.Wh e n t h e y w e r e d e t e c t e d t o g e t h e r,t h e A U C c o u l d b e i n-c r e a s e d t o 0.9 5 8.(4)C o x m u l t i v a r i a t e a n a l y s i s s h o w e d t h a t l y m p h n o d e m e t a s t a s i s,c l i n i c a l s t a g e,t u m o r d i a m e t e r,l o w e x p r e s s i o n o f P D C D 1,P D C D 4 a n d P D C D 1 0 w e r e i n d e p e n d e n t r i s k f a c t o r s a f f e c t i n g t h e p r o g n o s i s o f b l a d d e r c a n c e r p a t i e n t s(P0.0 5).C o n c l u s i o n T h e e x p r e s s i o n o f P D C D i n b l a d d e r c a n c e r w a s d e c r e a s e d s i g n i f i c a n t l y,w h i c h m a y b e a n e w b i o m a r k e r f o r d i a g n o s i s o f b l a d d e r c a n c e r.K e y w o r d s:b l a d d e r c a n c e r;p r o g r a mm e d c e l l d e a t h p r o t e i n;d i a g n o s i s;r i s k f a c t o r s 膀胱癌是起源于膀胱上皮细胞的恶性肿瘤,在世界范围内,其发病率呈逐渐上升趋势,是全球第六大常见的恶性肿瘤,每年约有1 1万名男性和7万名女性的新增病例1。约8 0%的膀胱癌患者在首次诊断时被诊断为非肌层浸润性膀胱癌,其中约8 0%的患者在首次治疗后5年内会出现复发2。卡介苗是目前公认最为有效的膀胱癌灌注药物,对于高危患者其效果明显优于化疗药物灌注,能更好预防复发和进展;对于中危患者,卡介苗和化疗药物效果相当3。程序 性 细 胞 死 亡 蛋 白1(P r o g r a mm e d c e l l d e a t h p r o t e i n 1,P D C D 1)是癌细胞表面的一种蛋白质,其受体是介导肿瘤细胞免疫逃逸的免疫检查点分子4。P D-1 蛋白由P D C D 1 基因编码,属于免疫球蛋白超家族的细胞表面受体,并在T细胞和前B细胞上表达P D-1的两个配体P D-L 1和P D-L 2,从而导致免疫耐受5。在正常情况下,P D-1通过与其配体P D-L 1、P D-L 2结合抑制T淋巴细胞的功能,从而抑制自身免疫应答。P D C D 4是新发现的与细胞周期及凋亡相关的抑癌基因,其编码的蛋白质可增强多种肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性,抑制肿瘤的发生发展和侵袭转移进程,也是第一个被发现作用于蛋白翻译阶段的肿瘤抑制物6。P D C D 1 0是从凋亡的人红白血病细胞系T F-1中克隆得到的一个凋亡相关基因,P D C D 1 0能够与多种蛋白相互作用,增强相关信号通路活性,与癌症的发生密切相关7。P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0三者在多种恶性肿瘤的发生发展中均发挥着重要作用,但目前关于三者表达与膀胱癌发生发展相关性的研究较少。本研究探究P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义,现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料 选择2 0 1 5年2月-2 0 2 0年1 0月辽宁电力中心医院收治的2 5 6例膀胱癌患者为研究对象,年龄2 37 7岁(中位年龄5 9岁),其中男性2 0 8例,平均年龄(5 8.61 2.4)岁,女性4 8例,平均年龄(6 2.31 1.7)岁。通过电子病历系统收集患者的临床资料,包括:年龄、性别、肿瘤大小和数目、肿瘤分级、肿瘤分期、淋巴结转移等。纳入标准:(1)患者均经病理检查确诊为移行细胞癌;(2)所有患者均接受手术治疗,手术方式包括经尿道电切或膀胱癌根治性切除术;(3)患者术前未接受任何化疗或放疗及膀胱内灌注;(4)组织标本保存于我院病理科或实验室,包括肿瘤组织及距肿瘤2 c m相应的非癌粘膜标本。排除标准:(1)临床资料不完整;(2)合并其他部位肿瘤;(3)严重心肝肾功能障碍。本研究通过辽宁电力中心医院伦理委员会批准,所有患者均签署7231 第1 0期 崔 珺,等:P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义知情同意书。1.2 指标的测定1.2.1 免疫组织化学染色法检测癌组织和癌旁组织P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0的阳性表达 取2 5 6例患者的膀胱癌组织及配对的癌旁组织经1 0%中性福尔马林固定,常规脱水,石蜡包埋,切成4 m的片。将切片用含1%H2O2的内源性过氧化物酶封闭,放入抗原修复液中,9 7加热1 5 m i n,自然冷却。组织切片上滴加5%山羊血清封闭液,室温下孵育2 0 m i n后,依次加入P D C D 1抗体、P D C D 4抗体、P D C D 1 0抗体,4孵育过夜。加入生物素化二抗,3 7孵育4 0 m i n,用二氨基联苯胺(D A B)显色。显微镜下进行观察,每张切片随机选择5个高倍视野,根据阳性着色率和色深计算表达,根据色深对细胞进行评分:0为无色,1为淡黄色,2为棕色,4为深棕色。根据染色细胞占计数细胞的百分比对细胞进行评分:0为无阳性细胞,1、2、3分别为阳性细胞5 0%。将这两项相乘,0表示阴性,12表示弱阳性,34表示中等强度阳性,51 2表示强阳性。每个样本的颜色深度和相关评分由2名病理医生以双盲方式独立评估,取平均值作为相应样本的表达强度。1.2.2 癌组织、癌旁组织和血清中P D C D 1、P D-C D 4、P D C D 1 0 mR NA 表达水平的测定 采用组织细胞R NA提取试剂盒(北京A i d L a b公司)提取2 5 6例患者癌组织、癌旁组织的总R NA。抽取患者晨起肘静脉血1 0 m L置于E D T A抗凝管,4下2 0 0 0 r/m i n离心1 5 m i n,留存血清,用血清总R NA提取试 剂 盒(北 京A i d L a b公 司)提 取 血 清 中 总R NA。用反 转 录 试 剂 盒(北 京A i d L a b公 司)将R NA反转录成c D NA,用P C R试剂盒(北京A i d-L a b公司)进 行 扩 增。P C R反 应 条 件 为:预 变 性1 5 m i n(9 5),变性1 5 s(9 5),退火3 0 s(9 5),延伸3 0 s(7 0),共4 0个循环。引物序列如表1所示,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(G l y c e r a l d e h y d e-3-p h o s-p h a t e d e h y d r o g e n a s e,GA P DH)为内参。表1 m R N A引物序列mR NA上游引物序列下游引物序列P D C D 15 -T T C G G T G G C T T T G G GA G T T T C-3 5 -T T T T G G C AT A G G GA C T T T G G-3 P D C D 45 -GAAA T C C A C G C G C T G C A GAA G-3 5 -G C A G C T G T T G C C C A GA T T C T-3 P D C D 1 05 -A T G T C G C G G G GA C T GA G-3 5 -G C C GA GA T T T GA C C G T G-3 GA P DH5 -G G G T C AA C G G T G GAA GA GA-3 5 -G G GA G G T AAA G C G C T GA GA-3 1.2.3 蛋白印迹实验(W e s t e r n b l o t)检测癌组织和癌旁组织中P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0蛋白表达水平 采用蛋白裂解缓冲液(R a d i o i mm u n o p r e c i p i-t a t i o n a s s a y l y s i s b u f f e r,R I P A,上海跃腾生物技术有限公司)提取2 5 6例患者癌组织、癌旁组织的总蛋白,采用B C A蛋白质分析试剂盒(F d B i o S c i e n c e,中国杭州)检测蛋白浓度。用1 2%的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(S D S-P AG E)分离蛋白,将蛋白转至P V D F膜上,用5%脱脂奶粉封闭1 h。加入P D C D 1抗体(15 0 0)、P D C D 4抗体(11 0 0 0)、P D C D 1 0抗体(15 0 0)或G A P D H抗体(15 0 0 0),4 反应过夜。次日加入辣根过氧化物酶标记的抗兔抗体(1 2 0 0 0),室温下反应1.5 h。采用E C L 2 0电化学发光仪成像,采用I m a g e J软件分析灰度值。1.3 统计学处理 采用S P S S 1 9.0软件进行数据分析,计量数据以均数标准差(x-s)表示,采用t检验;计数资料以例(%)表示,采用2检验。采用受试 者 工 作 特 征(R e c e i v e r o p e r a t i n g c h a r a c t e r i s t i c,R O C)曲线分析P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0的诊断效率。采用K a p l a n-M e i e r法分析P D C D 1、P D C D 4、P D-C D 1 0表达与患者术后生存时间的关系。采用C o x比例风险回归模型对影响膀胱癌患者生存的个体变量进行评估,以P0.0 5为差异有统计学意义。2 结果2.1 P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在癌组织和癌旁组织中的表达 P D C D阳性染色主要定位于癌细胞的细胞膜,在胞浆中也有少量表达,呈棕黄色。在2 5 6例癌组织标本中,P D C D 1阴性表达1 4 5例,弱阳性2 9例,中等阳性5 7例,强阳性2 5例;P D C D 4阴性1 2 9例,弱阳性3 9例,中等阳性3 1例,强阳性5 7例;P D C D 1 0阴性1 1 3例,弱阳性5 5例,中等阳性4 7例,强阳性4 1例。P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在癌旁组织中的阳性率及染色强度显著高于癌组织,见图1。2.2 P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0表达与患者临床病理特征的关系 P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在癌组织中的 阳 性 率 分 别 为4 3.3%(1 1 1/2 5 6)、4 9.6%8231 新 疆 医 科 大 学 学 报第4 6卷 (1 2 7/2 5 6)、5 5.8%(1 4 3/2 5 6)。与阴性表达患者比较,P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0的阳性表达患者的病理分级及T分期更高,发生淋巴结转移的风险也更高(P0.0 5),见表2。图1 免疫组化染色检测P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在癌组织和癌旁组织中的表达表2 P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0与膀胱癌临床特征的关系指标nP D C D 1阴性(n=1 4 5)阳性(n=1 1 1)2PP D C D 4阴性(n=1 2 9)阳性(n=1 2 7)2PP D C D 1 0阴性(n=1 1 3)阳性(n=1 4 3)2P年龄/岁 6 01 5 08 96 11.0 7 00.3 0 17 57 50.0 2 20.8 8 25 79 32.3 6 50.1 2 4 6 01 0 65 65 05 45 24 65 0性别 男性2 0 81 2 08 80.5 0 00.4 8 01 0 41 0 40.0 6 80.7 9 59 21 1 60.0 0 40.9 5 2 女性4 82 52 32 52 32 12 7肿瘤直径/c m 31 3 67 06 63.1 5 80.0 7 66 67 00.4 0 20.5 2 65 48 22.3 1 40.1 2 8 31 2 07 54 56 35 75 96 1肿瘤数量 单发性1 7 61 0 27 40.3 9 60.5 2 98 29 43.2 5 30.0 7 18 09 60.3 9 40.5 3 0 多发性8 04 33 74 73 33 34 7病理分级 低分化8 07 285 2.7 2 80.0 0 02 25 82 4.3 9 00.0 0 01 76 32 4.7 2 90.0 0 0 中高分化1 7 67 31 0 31 0 76 99 68 0T分期 T 1-21 1 43 87 64 5.4 6 00.0 0 03 67 82 9.0 9 40.0 0 03 28 22 1.5 2 70.0 0 0 T 3-41 4 21 0 73 59 34 98 16 1淋巴结转移 无1 8 68 01 0 65 1.4 5 50.0 0 07 41 1 25 7.7 2 80.0 0 05 61 3 05 4.3 2 80.0 0 0 有7 06 556 555 71 39231 第1 0期 崔 珺,等:P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义2.3 P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0 m R N A和蛋白在癌组织及癌旁组织中的表达 P D C D 1 mR NA、P D-C D 4 mR NA、P D C D 1 0 mR NA在癌旁组织中的相对表达水平分别为(3.5 20.1 8)、(2.2 60.1 3)、(2.3 30.1 2),高于膀胱癌组织中的表达量分别为(1.3 50.0 8)、(1.1 70.1 0)、(1.3 50.0 9),差异有统计学意义(P0.0 5),见图2。W e s t e r n b l o t检测显示,与癌旁组织相比,膀胱癌组织中P D C D 1、P D-C D 4、P D C D 1 0蛋白相对表达水平较低,差异有统计学意义(P0.0 5),见图3。图2 P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0 m R N A在癌组织及癌旁组织中的表达图3 P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0蛋白在癌组织及癌旁组织中的表达2.4 膀胱癌患者外周血P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0 m R N A表达水平对膀胱癌的诊断价值 P D C D在膀胱癌患者外周血中表达的敏感性和特异性如图4所 示,RO C曲 线 发 现,P D C D 1 mR NA、P D C D 4 mR NA、P D C D 1 0 mR NA表达对膀胱 癌诊断的 最佳临界值分别为1.4 7 5、1.0 0 5、1.2 7 6,诊断的敏感度分别为8 6.9%、8 7.3%、8 5.4%,特异度分别为8 5.3%、9 3.3%、9 2.5%,A U C分别为0.9 3 2、0.9 4 1、9.3 8,当三者联合检测时,可将A U C提高至0.9 5 8。2.5 癌组织P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0表达与膀胱癌患者预后的关系 2 5 6例患者中位随访时间为6 2.8 9月,1 3 9例患者存活,1 1 7例患者死亡,总体生存率为5 4.3(1 3 9/2 5 6)。K a p l a n-M e i e r及l o g-r a n k检验显示,P D C D 1阳性组、阴性组患者的5年生存率分别为7 2.9%(8 1/1 1 1)、4 0.0%(5 8/1 4 5);P D-C D 4阳 性 组、阴 性 组 分 别 为7 7.2%(9 8/1 2 7)、3 1.8%(4 1/1 2 9);P D C D 1 0阳性组、阴性组分别为6 1.5%(8 8/1 4 3)、4 5.1%(5 1/1 1 3),差异均有统计学意义(P0.0 5),见图5。图4 外周血P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0表达水平对膀胱癌的诊断价值2.6 影响膀胱癌患者预后的危险因素评估 采用C o x回归模型分析影响膀胱癌预后的危险因素,结果发现,淋巴结转移、临床分期、肿瘤直径、P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0低表达均是影响膀胱癌患者预后的独立性危险因素(P0.0 5),见表3。0331 新 疆 医 科 大 学 学 报第4 6卷 图5 癌组织P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0表达与膀胱癌患者预后的关系表3 影响膀胱癌患者预后的C o x多因素分析指标S EW a l dP9 5%C I淋巴结转移0.1 9 90.0 9 74.3 1 80.0 3 91.0 1 31.4 6 8分化程度0.3 4 10.1 6 31.4 5 20.7 2 31.0 2 61.9 2 9浸润深度0.3 4 70.1 3 62.6 7 60.2 3 31.0 8 91.8 3 7临床分期0.4 7 10.1 5 98.8 8 30.0 0 51.1 7 62.1 7 8肿瘤直径2.0 1 10.2 8 29.2 3 60.0 0 01.0 5 32.6 3 1P D C D 1低表达0.2 5 30.1 3 03.6 4 10.0 4 81.0 0 51.6 3 5P D C D 4低表达0.4 5 00.1 5 88.4 6 30.0 1 01.4 5 22.6 3 2P D C D 1 0低表达0.6 5 40.2 5 47.5 5 10.0 0 90.4 6 81.7 4 13 讨论膀胱癌的预后较差,寻找新的生物学标志物对其早期诊治有重要意义8-9。早期的研究发现P D-C D参与了肿瘤的许多生物学过程,如肿瘤生长、迁移侵袭及细胞凋亡1 0。P D C D s家族的特征是具有保守 的D NA结 合 域。在 动 物 实 验 中,敲 低P D-C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0体细胞的小鼠可导致血管瘤和胸腺淋巴瘤的进展,这表明了P D C D s可能作为肿瘤生长的抑制因子发挥功能1 1。低表达的P D-C D s通过下调与应激抵抗、细胞周期停滞和细胞凋亡相关的靶基因在肿瘤进展中发挥关键作用1 2。本研究发现,癌组织P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0表达水平低于癌旁组织,并且其表达与病理分级、T分期、淋巴转移有关,提示三者与膀胱癌的发生发展有关。P D C D在膀胱癌中的作用机制目前尚未完全明确,P D C D 1可能通过免疫炎症而影响肿瘤微环境,进而影响肿瘤进展1 3。在膀胱癌中,P D C D 1的下调与高复发风险等不良结果密切相关,尤其是在高级别肿瘤中1 4。P D C D 4对细胞凋亡起着重要作用,可通过抑制基因转录以及翻译过程而抑制肿瘤细胞生长,可能成为抗肿瘤治疗的靶基因1 5。P D-C D 1 0是一种衔接蛋白,参与细胞增殖、迁移、分化、囊泡运输、血管发育等,在肿瘤发生发展中至关重要1 6。既 往 研 究 证 实,P D C D 1 0参 与 膀 胱 癌 进展1 7。本研究结果进一步证实了P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌发生发展中的作用。本研 究 发 现,血 清P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0 mR NA对膀胱 癌 早 期 诊 断 有 一 定 价 值。P D C D 1 mR NA、P D C D 4 mR NA、P D C D 1 0 mR NA表达对膀胱癌 诊 断 的 最 佳 临 界 值 分 别 为1.4 7 5、1.0 0 5、1.2 7 6,A U C分别为0.9 3 2、0.9 4 1、9.3 8,当三者联合检测时,可将A U C提高至0.9 5 8,提示诊断价值较高。另外,采用C o x回归模型分析影响膀胱癌预后的危险因素,结果发现P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0低表达均是影响 膀胱癌患者 预 后 的 独 立 性 危 险因素。综上所述,本研究发现膀胱癌组织中P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0表达水平明显降低,可成为膀胱癌的生物标志物用于早期诊断和预后评估。参考文献:1 AN T ON I S,F E R L AY J,S O E R J OMA T A R AM I,e t a l.B l a d-d e r c a n c e r i n c i d e n c e a n d m o r t a l i t y:a g l o b a l o v e r v i e w a n d r e-c e n t t r e n d sJ.E u r U r o l,2 0 1 7,7 1(1):9 6-1 0 8.2 C UMB E R B A T C H M G K,J U B B E R I,B L A C K P C,e t a l.1331 第1 0期 崔 珺,等:P D C D 1、P D C D 4、P D C D 1 0在膀胱癌患者外周血和组织中的表达及临床意义E p i d e m i o l o g y o f b l a d d e r c a n c e r:a s y s t e m a t i c r e v i e w a n d c o n-t e m p o r a r y u p d a t e o f r i s k f a c t o r s i n 2 0 1 8J.E u r U r o l,2 0 1 8,7 2(6):7 8 4-7 9 5.3 刘建萍.卡介苗膀胱灌注新进展J.临床泌尿外科杂志,2 0 2 0,3 5(1 1):9 3 3-9 3 8.4 GAO G,L I AN G X,MA W.S i n o m e n i n e r e s t r a i n s b r e a s t c a n c-e r c e l l s p r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o n a n d i n v