PFKL在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对预后的影响.pdf

收稿日期:基金项目:国家自然科学基金()作者简介:耿楼(),男,硕士研究生,住院医师,主要从事口腔癌症的研究.通信作者:顾文莉,副主任技师,E m a i l:l i l y g u c o m.P F K L在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对预后的影响耿楼a,王莹莹b,顾文莉a(上海交通大学医学院附属第九人民医院a 检验科;b 血液内科,上海 )摘要:目的探究肝型磷酸果糖激酶(P F K L)在口腔鳞状细胞癌(O S C C)中的表达情况及其对患者临床预后的影响.方法从癌症基因组图谱(T C G A)中下载O S C C患者的转录组数据和临床数据,使用R软件对癌组织和正常组织的基因表达差异进行统计分析.通过L a s s o和多因素回归分析筛选出个与P F K L共表达的预后相关基因,并以此构建预后模型.对模型中高、低风险组的差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(K E G G)富集分析.结果T C GA数据分析结果显示,P F K L在O S C C肿瘤组织中显著上调且与患者的不良预后相关;由P F K L相关基因构建的预后模型对O S C C患者的生存期有着良好的预测效果;K E G G富集结果显示在高风险组显著富集的通路集中在细胞增殖和促癌相关基因集.结论P F K L在O S C C患者肿瘤组织中高表达,其表达水平与临床分期、N分级和G分级有关,并且是O S C C预后不良的独立危险因子,可能通过多种信号途径促进O S C C的发生发展.关键词:肝型磷酸果糖激酶;口腔鳞状细胞癌;基因集富集分析;预后;信号通路中图分类号:R 文献标志码:A文章编号:()D O I:/j c n k i n c d m E x p r e s s i o no fP F K Li nO r a l S q u a m o u sC e l lC a r c i n o m aa n dI t sE f f e c t o nP r o g n o s i sG E N GL o ua,WA N GY i n g y i n gb,G U W e n l ia(a D e p a r t m e n t o fC l i n i c a lL a b o r a t o r y;b D e p a r t m e n t o fH e m a t o l o g y,S h a n g h a iN i n t hP e o p l esH o s p i t a l,S h a n g h a iJ i a oT o n gU n i v e r s i t yS c h o o l o fM e d i c i n e,S h a n g h a i ,C h i n a)A B S T R A C T:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t et h ee x p r e s s i o no f l i v e r t y p ep h o s p h o f r u c t o k i n a s e(P F K L)i no r a l s q u a m o u sc e l l c a r c i n o m a(O S C C)a n d i t se f f e c to nc l i n i c a l p r o g n o s i so fp a t i e n t s M e t h o d s T h e t r a n s c r i p t o m ea n dc l i n i c a l d a t ao fO S C Cp a t i e n t sw e r ed o w n l o a d e df r o mt h eC a n c e rG e n o m eA t l a s(T C GA),a n d t h ed i f f e r e n c e s i ng e n ee x p r e s s i o nw e r e s t a t i s t i c a l l ya n a l y z e du s i n g t h eRs o f t w a r e F i v ep r o g n o s i s r e l a t e dg e n e s c o e x p r e s s e dw i t hP F K Lw e r e s c r e e n e do u tb yL a s s oa n dm u l t i v a r i a t er e g r e s s i o na n a l y s i s t oe s t a b l i s hap r o g n o s t i cm o d e l T h ed i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e dg e n e sb e t w e e nh i g ha n d l o wr i s kg r o u p sw e r e a n a l y z e db yK E G Ge n r i c h m e n t R e s u l t s T h eT C GAa n a l y s i ss h o w e d t h a tP F K Lw a s s i g n i f i c a n t l yu p r e g u l a t e d i nO S C Ca n dw a s a s s o c i a t e dw i t hp o o rp r o g n o s i so fp a t i e n t s T h ep r o g n o s t i cm o d e l c o n s t r u c t e db yP F K L r e l a t e dg e n e sh a dag o o dp r e d i c t i v ee f f e c to nt h e s u r v i v a l o fO S C Cp a t i e n t s T h eK E G Gp a t h w a ye n r i c h m e n t a n a l y s i s s h o w e d t h a t t h e s i g n i f i c a n t l ye n r i c h e dp a t h w a y sw e r ei n v o l v e di nc e l lp r o l i f e r a t i o na n dc a n c e r p r o m o t i n gg e n es e t si nt h eh i g h r i s kg r o u p C o n c l u s i o n P F K L i sh i g h l ye x p r e s s e d i n t u m o r t i s s u e s o fO S C Cp a t i e n t s,a n di t se x p r e s s i o n i s r e l a t e d t oc l i n i c a l s t a g e,Ng r a d e a n dGg r a d e I na d d i t i o n,i t i s a n i n d e p e n d e n t r i s k南昌大学学报(医学版)年第 卷第期J o u r n a l o fN a n c h a n gU n i v e r s i t y(M e d i c a lS c i e n c e s),V o l N o f a c t o r f o r p o o r p r o g n o s i s,a n dp r o m o t e s t h eo c c u r r e n c e a n dp r o g r e s s i o no fO S C Ct h r o u g hav a r i e t yo f s i g n a l i n gp a t h w a y s K E Y WO R D S:p h o s p h o f r u c t o k i n a s e,l i v e r t y p e;o r a l s q u a m o u sc e l l c a r c i n o m a;G e n eS e tE n r i c h m e n tA n a l y s i s;p r o g n o s i s;s i g n a l p a t h w a y口腔癌是最常见的头颈部恶性肿瘤之一,年全球约有口腔癌新发病例 万例,死亡病例 万例 .口 腔 鳞 状 细 胞 癌(O S C C)占 口 腔 癌 的 以上,起病隐匿,侵袭性强,易于复发和转移.近年来,临床尽管在O S C C诊断及治疗方面已取得较大进 展,但O S C C患 者 的年 生 存 率 仍 低 于 .因此,深入探索O S C C发生及进展过程中的潜在分子机制,有助于为合理制定靶向治疗或联合治疗策略提供依据,从而改善O S C C患者的生存预后.磷酸果糖激酶(P F K )是细胞糖酵解途径的第一个限速酶,催化果糖 磷酸转变为果糖,二磷酸,此 过 程 为 不 可 逆 反 应.P F K 包 括 肝 型(P F K L)、肌型(P F KM)和血小板型(P F K P)种亚型,各亚型在不同类型肿瘤中的表达情况不尽相同 .近年来,有关P F K L参与糖酵解促进肿瘤生长的研究报告陆续面世.比如,有研究 发现肺癌细胞中m i R 可下调P F K L的表达,抑制癌细胞糖酵解及肿瘤生长,且P F K L高表达的肺癌患者整体生存率较差.还有报道 称P F K L是T A p 的靶基因,在肿瘤 细 胞 中 高 表 达,T A p 可 增 强P F K L的表达,增强细胞的有氧糖酵解,促进肿瘤增殖.然而,P F K L在O S C C中发挥的调控功能及相关分子机制尚未明确,有待进一步探索.本研究旨在以生物信息学为基础,结合细胞学实验探讨P F K L在O S C C中的表达、预后意义并预测其可能的调控机制,以期为O S C C的发病机制的阐明和靶向治疗策略的开发提供新的线索.材料和方法数据采集和患者分组从T C GA数 据 库(h t t p:/t c g a d a t a n c i n i hg o v/)中下载 例正常口腔组织和 例O S C C组织的转录组数据以及所有纳入研究的O S C C患者的临床资料数据.以O S C C组织中P F K L和P F K PmR NA表达量的中位数为界,在后续生存分析中将患者分成高表达和低表达组.P F K L在正常组织和O S C C组织的蛋白表达数据来自C P T A C数据库(h t t p s:/p r o t e o m i c s c a n c e r g o v/p r o g r a m s/c p t a c).主要试剂和细胞培养正常口腔上皮细胞HOK和O S C C细胞HN、HN 和HN 由上海口腔研究所惠赠.DMEM培养基,胰蛋白酶购自北京中生奥邦公司,胎牛血清购自美国H y c l o n e公司.一抗(P F K L和 a c t i n)购自美国A b c a m公司,二抗购自武汉爱博泰克公司.上述细胞均采用含有 胎牛血清和双抗的DMEM培养基进行培养,培养环境为 和 C O的细胞培养箱.P F K 表达水平差异及与患者临床病理学参数的关系分析比较O S C C患者正常组织和肿瘤组织中P F K L和P F K P的表达水平差异,以及其表达水平与不同临床病理学参数之间的关系.采用单因素和多因素C o x回归分析P F K L表达量及各临床参数与O S C C患者预后的关系并计算风险比(HR).蛋白免疫印迹实验(W e s t e r nb l o t)收集HOK、HN、HN 和HN 细胞,用R I P A裂解液裂解后分离总蛋白,蛋白定量后进行S D S P AG E电泳,结束后转移至硝酸纤维素膜上.用脱脂奶粉室温封闭h后,用稀释的一抗(P F K L ;a c t i n )在 冰箱中摇床上孵育过夜.次日用含吐温的磷酸盐缓冲液洗涤次,每次 m i n,后将膜置于二抗 山羊抗免I g G(HL)HR P 稀释液中室温孵育h,后再次洗膜次.用蛋白成像仪检测蛋白条带,使用I m a g eJ软件进行蛋白定量,分析P F K L的相对表达水平.与P F K L共表达的差异表达基因鉴定及预后模型建立使用l i mm a包分析O S C C和正常组织的差异表达基因,标准为“P,|l o gF o l d c h a n g e(F C)|”.随 后 进 行S p e a r m a n相 关 系 数 分 析,鉴 定 与P F K L共表达的基因.利用R语言s u r v m i n e r包进行C o x比例风险回归分析,筛选P F K L共表达差异基因中与O S C C患者总体生存率(O S)显著相关的基因.利用R语言中的s u r v i v a l包和g l m n e t包进行L a s s o回归分析,选择最优的纳入模型中,筛选耿楼等:P F K L在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对预后的影响P F K L共表达差异基因中与预后显著相关的基因.在L a s s o筛选的基础上,构建多因素C o x风险回归模型,并计算风险分数来评估患者的预后.风险评分()MYO H()H P()C o r f ()P A D I()A S C L,根据中位风险评分将O S C C患者分为高危组和低危组.基因集富集分析利用P F K L表达水平的中位数将O S C C样本分为高表达组和低表达组,并使用G S E A对组的差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(K E G G)通路富集分析.以P 表示富集的通路有统计学意义.结果P F K L和P F K P在O S C C组织中高表达O S C C组织中P F K L和P F K P的mR NA表达水平显著高于正常口腔组织(P ),而P F KM表达水平差异无统计学意义(P),见图 AC.并且,O S C C组织中P F K L和P F K P的表达水平显著高于癌旁组织(P ),而P F KM表达水平差异无统计学意义(P),见图 DF.癌组织87654PFKL mRNA表达量*正常组织癌组织987654PFKP mRNA表达量*正常组织AB8642PFKM mRNA表达量ns正常组织癌组织CPFKL mRNA表达量*癌旁组织癌组织87654PFKP mRNA表达量*癌旁组织癌组织DEPFKM mRNA表达量ns癌旁组织癌组织F7.06.56.05.55.04.54.09876543P ,n s:P.图P F K L和P F K P在O S C C组织中高表达P F K L和P F K P表达水平与临床特征之间的关系临床分期期患者肿瘤组织的P F K L表达水平显著高于期患者(P ),见 图 A;发生淋巴结转移的患者(N N)肿瘤组织的P F K L表达水平高于未发生淋巴结转移患者(N,P),见图 B;组织学分级G G 患者肿瘤组织P F K L表达水平高于G 患者(P),见图 C.而P F K P的表达水平仅与O S C C患者的组织学分级有关(P),与临床分期和淋巴结转移状态均不相关,见图 DF.采用单因素C o x回归分析年龄、性别、吸烟、临床分期、T分级、N分级和P F K L表达水平对O S C C患者预后的影响.结果表明,T分级(HR ,P ),N分级(HR ,P )以及P F K L的表达水平(HR ,P )与患者不良预后相关.将单因素回归分析中有统计学差异的变量纳入多因素C o x分析中,结果显示,P F K L高表达(HR ,P )和T分级(HR ,P )是O S C C患者独立的不良预后因素.见表.南昌大学学报(医学版)年月,第 卷第期87654PFKL mRNA表达量*期期A87654PFKL mRNA表达量*N0N1N3B8765PFKL mRNA表达量*G1G2G3C987654PFKP mRNA表达量ns期期D987654PFKP mRNA表达量nsN0N1N3E987654PFKP mRNA表达量*G1G2G3FP,P,n s:P.图P F K L和P F K P表达与O S C C患者临床特征的关系表O S C C患者疾病特异性生存率的单因素和多因素C o x回归分析n 参数n单因素分析多因素分析HR(C I)PHR(C I)P年龄 ()性别女 男 ()吸烟否 是 ()临床分期 ()临床T分级T T T T ()()临床N分级N N N ()()P F K L表达高 低 ()()P F K L蛋白在O S C C组织和细胞中高表达利用U a l c a n数据库分析C P T A C数据并对结果进行可视化,以验证P F K L在O S C C组织中的蛋白表达水平以及与临床病理参数的关系.结果显示O S C C肿瘤组织中P F K L蛋白的表达水平显著高于正常组织(P ),见图 A;其中组织学分级G 的患者P F K L蛋白表达水平显著高于G 和G 患者(P 或P ),见图 B.蛋白免疫印记实 验 结 果 显 示,O S C C细 胞 系HN,HN 和HN 中P F K L蛋白的表达水平显著高于正常口腔上皮细胞HOK(P 或P ),见图 C.耿楼等:P F K L在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对预后的影响PFKL/-atin相对表达量*HN6*HN4HOKHN302.01.51.00.50.0C3210-1-2-3Z值*G1G2*G3B3210-1-2-3Z值*正常组织癌组织AP,P .图P F K L蛋白在O S C C组织和细胞中高表达P F K L相关基因预后模型的建立及验证以O S C C数据集作为训练集进行预后模型构建,以头颈部鳞状细胞癌数据集作为验证集进行模型验证.通过S p e a r m a n相关系数分析,在训练集中共鉴定出 个与P F K L共表达的基因,并采用C o x比例风险回归分析,得到 个与O S C C预后相关的基因,二者取交集共得到 个预后相关的P F K L共表达基因,见图 A.用L a s s o回归对上述分析得到的 个基因进行再次筛选,见图 B.使用十折交叉验证法建立模型,筛选出 个基因,见图 C.将筛选到的 个基因纳入多因素C o x回归分析,最终得到由个P F K L相关基因组成的O S C C患者预后预测模型,包括个高风险基因 H P,P A D I,和个 低 风 险 基 因 MYO H,C o r f 和A S C L,见图 D.训练集和验证集的风险曲线验证了该模型预测O S C C患者生存的准确性,见图 AB.通过绘制生存曲线,可以看出在训练集(HR,P )和验证集(HR,P )中风险越 高,生 存 期 越 短,见 图 CD.该模型在训练集中,年生存期对应的曲线下面积(R O C)分别为 ,;在验证集中对应的R O C分别为 ,说明该风险模型预测O S C C患者预后的准确性尚可,见图 EF.共表达分子预后分子A-3-4-5-6-7-212.612.412.212.011.811.611.4偏似然偏差42735444825334046481012181803log/C-3-4-5-6-7-20.60.40.20.0-0.2-0.4-0.6系数12233343480Blog/PHR（95%CI）基因总人数328328328328328MYO1HHPC20of141PADI13ASCL40.565(0.3360.949)1.454(1.0961.930)0.717(0.5540.926)1.130(1.0351.234)0.248(0.0850.726)0.0310.0100.0110.0060.0111.51.00.50.02.0DA:共表达分子和预后分子韦恩图;BC:P F K L相关基因的L a s s o回归分析;D:P F K L相关基因的多因素分析.图P F K L相关基因预后模型的建立南昌大学学报(医学版)年月,第 卷第期验证集风险评分6000400020000生存期/dMYO1HHPC20orf141PADI3ASCLStatus010.0-0.5-1.0-1.5-2.086420B低风险高风险训练集风险评分10-1-2-3400020000生存期/dMYO1HHPC20orf141PADI3ASCL5.02.50.0Status01A低风险高风险400030002000100050000HR=2.73(1.93-3.85)P0.0011.00.80.60.40.20.0生存概率C时间/d低风险高风险4000200060000HR=2.27(1.71-3.00)P0.0011.00.80.60.40.20.0生存概率D时间/d低风险高风险0.80.60.40.20.01.01-特异度E1年(AUC=0.694)3年(AUC=0.737)5年(AUC=0.748)1.00.80.60.40.20.0灵敏度低风险高风险0.80.60.40.20.01.01-特异度F1年(AUC=0.613)3年(AUC=0.687)5年(AUC=0.669)1.00.80.60.40.20.0灵敏度低风险高风险AB:训练集和验证集的风险曲线;CD:训练集和验证集的生存曲线;EF:训练集和验证集的,年生存期.图P F K L相关基因预后模型的验证K E G G基因富集分析K E G G富集分析结果表明,在高风险组显著富集的 通 路 有G/M检 查 点(N E S ,F D R ),E F靶标(N E S,F D R ),有丝分 裂(N E S ,F D R ),D NA修 复(N E S ,F D R ),MTO R C 信号通路(N E S ,F D R ),MY C靶标(N E S,F D R ),P I K AK T MTO R信号通路(N E S,F D R )和糖酵解(N E S,F D R ).见图.耿楼等:P F K L在口腔鳞状细胞癌中的表达及其对预后的影响图K E G G基因富集分析讨论O S C C是一种可严重影响患者生活质量的恶性肿瘤,它的典型特征是易发生局部侵袭和淋巴结转移.目前,O S C C的发病机制尚未得到明确阐述,但现有证据表明其是多基因和多通路共同调控的结果.口腔癌的治疗方法包括手术切除,放射治疗,化学药物治疗以及靶向治疗.有研究 报道表皮生长因子受体(E G F R)在大多数O S C C患者中高表达,针对E G F R的靶向药物西妥昔单抗已被批准临床使用,可用于铂类药物单药治疗失败的复发患者,或联合放射疗法的晚期患者.这是迄今为止唯一的O S C C靶向治疗药物,但效果仍欠佳,因此迫切需要开发新的治疗靶点,寻找高效、安全的新药物.本研究通过挖掘T C GA数据库,发现P F K L在O S C C肿瘤组织中的表达水平显著高于正常口腔组织及与其配对的癌旁组织,并且P F K L在O S C C中的高表达与患者的分级分期以及不良预后相关.P F K L作为糖酵解代谢途径中的一种限速酶,在乳腺癌,肝癌,食管癌等肿瘤中显著上调,并且与患者的不良预后有关 .在肝癌中,载脂蛋白M(A p o M)的敲低可增强甾醇调节元件结合蛋白(S R E B P)的表达水平,从而进一步增强P F K L启动子区域的活性,促进肝癌细胞的增殖和迁移.在食管癌中,抑制P F K L的表达可导致叉头盒转录因子O a(F O X O a)核易位以及B c l 样蛋白(B I M)的转录激活,最终抑制食管癌的进展,因此P F K L是食管癌潜在的治疗靶标.在乳腺癌中,T淋巴 瘤 侵 袭 转 移 诱 导 因 子(T i a m)可 以 与P F K L相互作用,通过增强P F K L的稳定性促进乳腺癌的恶性进展.以上研究表明P F K L在多种恶性肿瘤中发挥着促癌作用,但是其在O S C C中的预后价值以及可能的分子机制还鲜有报道.本研究为进一步探究P F K L在O S C C中作用机制,构建了P F K L相关基因的预后模型.模型验证证明该模型有良好的预测效能.根据模型中患者风险评分的中位值将其分成高、低风险组,K E G G富集分析发现细胞增殖基因集(G/M检查点,E F靶标,有丝分 裂,MY C靶标)和促癌相 关 基 因 集(D NA修复,P I K AK T MTO R信号通路,糖酵解)显著富集在高风险组.有研究 发现L I N C 可以升高糖酵解关键酶P KM的表达,激活P I K/AK T/mTO R信号通路,从而促进喉癌的进展.众所周知,肿瘤细胞即使在有氧环境中也优先通过糖酵解途径产生更多能量,而肿瘤细胞本身则会表现出高葡萄糖摄取率,同时产生过量乳酸.有研究 表明,有氧糖酵解产生大量的乳酸可上调D NA修复基因的表达,使得癌细胞对化学药物产生耐药性.在卵巢癌 中,己 糖 激 酶HK 的 上 调 可 通 过 激 活Wn t/c a t e n i n信号通路调控周期调节蛋白C y c l i nD 和c m y c促进癌细胞的增殖,还有研究 发现,利用s i R NA干扰果糖,双磷酸酶(P F K F B)的表达可使ME K/E R K/c M y c通路失活,显著降低了宫颈癌细胞的增殖和迁移能力.上述研究进展提南昌大学学报(医学版)年月,第 卷第期示糖酵解可能通过调控多种信号通路而影响癌症的进展.综上所述,本研究表明P F K L的表达水平与O S C C患者的分期,N分级和G分级有关,是O S C C预后不良的独立危险因子,并可能通过多种信号途径促进O S C C的发生发展.参考文献:C HA TURV E D IA K,AN D E R S ON W F,L O R T E T T I E U L E N TJ,e ta l W o r l d w i d et r e n d si ni n c i d e n c er a t e sf o ro r a lc a v i t ya n do r o p h a r y n g e a lc a n c e r sJ JC l i n O n c o l,():B R AY F,F E R L AYJ,S O E R J OMA T A R AMI,e ta l G l o b a lc a n c e r s t a t i s t i c s :G L O B O C ANe s t i m a t e so f i n c i d e n c e a n dm o r t a l i t yw o r l d w i d ef o r c a n c e r si n c o u n t r i e sJ C AC a n c e r JC l i n,():B HA T T A C HA R YA A,R OYR,S N I J D E R SA M,e ta l T w od i s t i n c tr o u t e st oo r a lc a n c e rd i f f e r i n gi ng e n o m ei n s t a b i l i t ya n dr i s kf o rc e r v i c a ln o d e m e t a s t a s i sJ C l i n C a n c e rR e s,():K I MJW,P A R KY,ROHJL,e ta l P r o g n o s t i cv a l u eo fg l u c o s y l c e r a m i d es y n t h a s ea n dP g l y c o p r o t e i ne x p r e s s i o ni no r a lc a v i t yc a n c e rJI n t JC l i nO n c o l,():WUFL,S H IXK,Z HAN GR,e ta l R e g u l a t i o no fp r o l i f e r a t i o na n dc e l l c y c l eb yp r o t e i nr e g u l a t o ro f c y t o k i n e s i s i no r a ls q u a m o u sc e l l c a r c i n o m aJC e l lD e a t hD i s,():B ROOK EDG,VAND AME M,WA T T SCK W,e ta l T a r g e t i n g t h ew a r b u r ge f f e c t i nc a n c e r;r e l a t i o n s h i p s f o r a r y l p y r i d a z i n o n e sa s i n h i b i t o r so f t h ek e yg l y c o l y t i ce n z y m e p h o s p h o f r u c t o k i n a s e/,b i s p h o s p h a t a s e(P F K F B)JB i o o r gM e dC h e m,():T AN G H B,L E E M,S HA R P E O,e ta l O x i d a t i v es t r e s s r e s p o n s i v em i c r o R NA r e g u l a t e sg l y c o l y s i s i nd i v e r s eb i o l o g i c a l s y s t e m sJF A S E BJ,():L E EJH,L I U R,L IJ,e ta l S t a b i l i z a t i o no fp h o s p h o f r u c t o k i n a s ep l a t e l e t i s o f o r mb yAK Tp r o m o t e st u m o r i g e n e s i sJN a tC o mm u n,():Z AN C ANP,S O L AP E NNA M,F UR T A D O C M,e ta l D i f f e r e n t i a le x p r e s s i o no fp h o s p h o f r u c t o k i n a s e i s o f o r m sc o r r e l a t e sw i t ht h eg l y c o l y t i ce f f i c i e n c yo fb r e a s tc a n c e rc e l l sJM o lG e n e tM e t a b,():YAN GJ,L I JQ,L EYP,e t a l P F K L/m i R a x i s r e g u l a t e sg l y c o l y s i sb yi n h i b i t i n g AK T p h o s p h o r y l a t i o na n dp r e d i c t sp o o r s u r v i v a l i n l u n g c a n c e rJ AmJC a n c e rR e s,():L IL,L ILJ,L IW,e t a l T A p i n d u c e dp h o s p h o f r u c t o k i n a s e t r a n s c r i p t i o np r o m o t e s t h eW a r b u r ge f f e c t a n de n h a n c e s c e l lp r o l i f e r a t i o nJ N a tC o mm u n,():S U B R AMAN I AN A,T AMAYO P,MOO THA V K,e ta l G e n e s e t e n r i c h m e n t a n a l y s i s:ak n o w l e d g e b a s e da p p r o a c h f o ri n t e r p r e t i n gg e n o m e w i d ee x p r e s s i o np r o f i l e sJ P r o c N a t lA c a dS c iUSA,():B ONN E RJA,HA RA R IPM,G I R A L TJ,e t a l R a d i o t h e r a p yp l u sc e t u x i m a bf o rs q u a m o u s c e l lc a r c i n o m ao ft h eh e a da n dn e c kJ NE n g l JM e d,():V E RMO R K E NJB,T R I GOJ,H I T TR,e t a l O p e n l a b e l,u n c o n t r o l l e d,m u l t i c e n t e rp h a s e I I s t u d yt oe v a l u a t et h ee f f i c a c ya n dt o x i c i t yo f c e t u x i m a ba s a s i n g l e a g e n t i np a t i e n t sw i t h r e c u r r e n ta n d/o r m e t a s t a t i cs q u a m o u sc e l lc a r c i n o m ao ft h eh e a da n dn e c kw h o f a i l e d t o r e s p o n d t op l a t i n u m b a s e d t h e r a p yJJC l i nO n c o l,():Z HAN GX,B A IYP,Z HU W H,e t a l A p o Mr e g u l a t e sP F K Lt h r o u g ht h e t r a n s c r i p t i o n f a c t o rS R E B F t o i n h i b i t t h ep r o l i f e r a t i o n,m i g r a t i o na n dm e t a s t a s i so f l i v e rc a n c e rc e l l sJ O n c o lL e t t,():Z HE N GCC,YU X M,L I AN G Y Y,e ta l T a r g e t i n gP F K Lw i t hp e n f l u r i d o l i n h i b i t sg l y c o l y s i sa n ds u p p r e s s e se s o p h a g e a lc a n c e r t u m o r i g e n e s i s i na nAMP K/F O X O a/B I M d e p e n d e n tm a n n e rJ A c t aP h a r mS i nB,():L IN,WAN GXY,S UNJ,e ta l m i R p/T i a m m e d i a t e dg l y c o l y s i s r e p