胞外聚合物对绿藻吸收无机砷的影响.pdf

分类号：密级：I l|J J|I l|圳|I|I 洲川川Y 3 6 8 0 6 9 8X 1 3 1单位代码：学号：洳：j 暗硕士学位论文1 0 3 3 52 1 6 1 4 0 2 3中文论文题目：胞外聚合物对绿藻吸收无机砷的影响英文论文题目：兰望兰!坠竺坠竺竺Q 竺兰!垒竺!坚!垒!卫Q!Y 望堕竺!i 竺s u b s t a n c e so ns o r p t i o no fi n o r g a n i ca r s e n i cb yg r e e n a l g a e申请人姓名：周防指导教师：张建英专业名称：环境科学研究方向：污染化学与毒理所在学院：环境与资源学院论文提交日期2 0 1 9 年1 2 月万方数据分类号：X!三!密级：丞单位代码：学号：洳：六暗硕士学位论文!Q 3 3 2 1 6 1 4 0 2 3中文论文题目：胞外聚合物对绿藻吸收无机砷的影响英文论文题目：兰望塾望竺望星Q 兰!垒竺竺!坠!塑!卫Q!Y 磐竺!=i s u b s t a n c e so ns o r p t i o no fi n o r g a n i ca r s e n i cb yg r e e na l g a e申请人姓名：周防指导教师：张建英专业名称：环境科学研究方向：污染化学与毒理所在学院：环境与资源学院论文提交日期2 0 1 9 年1 2 月万方数据论文作者签名：f 茎)堕指导教师签名：论文评阅人l：隐名评审评阅人2：隐名评审评阅人3：隐名评审答辩委员会主席：委员l：委员2：委员3：委员4：万方数据Tl_l n I I U e n C e0 le X t r a C e 儿U-a r 卫O l y m e r l CS UD S t a n C e So nS 0 r D n O n0 Il n o r g a n l Ca r S e n l CD y2 r e e na 1 2 a eA u t h o r ss i g n a t u r e：doS U p e r V l S 0 r 7SS l g n a t U r e：E x t e m a lR e v i e w e r s：A n I)n”n o u Sr e V i e wA n o n 弘n o u sr e V i e wE x 锄i n i n gC o m m i t t e eC h a i 印e r s o n：P r 0 Y o n g c h a oL i 锄吕C o l l e g eE n V i r o n R e s S c i，Z h 白i 觚gU n i V e r s i t yE x a m i n i n gC o m m i t t e eM e m b e r s：P r o fD a o h u iL i n，C o l l e g eE n V i r o n R e s S c i，Z h e j i 孤gU n i V e r s i t yP r o K-u nY a l l g，C o l l e g eE n V i r o n R e s S c i，Z h 句i 锄gU n i V e r S i t yP r o fS h u l i nZ h u a I l g，C o l l e g eE n V i r o n R e s S c i，z h 句i 觚gU n i V e r s i t yP r o fJ i a I l g y i n gZ h 舭吕C o l l e g eE n V i r o n R e s S c i，Z h 句i 锄gU I l i V e r s i t yD a t eo fo r a ld e f e n c e：N o v 锄b e r2 6，2 019万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝鎏盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝婆盘堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权堂姿太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：7 司眵导师签名：签字日期：矽门年f 2 月弓日f学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：签字日期：砂f 7 年二月多日电话：邮编：万方数据浙江大学硕士毕业论文致谢致谢2 0 1 6 年9 月，我怀揣着梦想踏入了浙大的校门，开始了攻读硕士学位的征程。一千多个日日夜夜成为了人生的一段珍贵旅途。此刻，静静的聆听着窗外传来的阵阵虫鸣，怀着感恩的心回忆在浙里的温暖时光。感谢导师张建英老师的悉心栽培!您在论文选题、文献调研、实验方案设计、论文撰写等方面不厌其烦地鼓励、指导和帮助我；在实验过程中给我提供了优越的科研平台和条件，帮助我拓宽了视野；也让我有幸接触到横向项目，更好地锻炼了我交流沟通、组织协调及团队协作的能力。三年多来，您以宽大的胸怀包容我的幼稚、任性、愚昧和懒散，对此我充满了歉意，我会谨记课题组“努力学习、快乐生活、追求卓越”的理念，不断打造更好的自己。同样感谢浙江大学环境与资源学院老师们的慷慨教诲!感谢国家级环境与资源实验教学示范中心老师们的热心帮助与支持!感谢课题组姜建惠、陈瑾、许荔萍、朱小奕师姐，黄飞师兄，以及刘耀轩、张帆、周佳佳、何孟阳等师弟师妹对我学习和生活上的关心和帮助。谢谢你们的一路陪伴，那些并肩作战与彼此温暖的时光值得一辈子珍藏。感谢周振同学的陪伴，谢谢你始终给予我力量，助我克服困难。最后特别感谢父母养育之恩12 0 19 年1 2 月于浙大紫金港万方数据浙江大学硕士毕业论文摘要摘要藻类自释放胞外聚合物(E x t r a c e l l u l a rp o l y m e r i cs u b s t a I l c e s，E P s)对无机砷的生物净化作用有着至关重要的影响。本研究运用无机三价砷A s 1 和无机五价砷A s V 的短期暴露实验，比较典型绿藻蛋白核小球藻C 而肠陀耽乃忧加f 加以和莱茵衣藻函肠聊y 如m D，l 嬲彤伽办口砌豇的E P S 释放量和无机砷吸收量，筛选出蛋白核小球藻作为受试生物，进一步研究蛋白核小球藻对A s 和A s V 的吸收作用以及E P S 对藻细胞吸收无机砷的影响，并且通过分析藻细胞表面Z e t a 电位、E P S 释放量及其活性官能团，探讨E P S 的影响特征。主要研究结果如下：(1)蛋白核小球藻对无机砷的净化能力显著优于莱茵衣藻，符合B i o 以y l l a I I l i c吸收动力学模型。通过5 3 0 0 岬o lL 1A s V 的暴露实验，发现砷胁迫下蛋白核小球藻的E P S 释放量显著高于莱茵衣藻，并且蛋白核小球藻与莱茵衣藻相比显示出更高的砷吸收能力。当A s V 暴露浓度为3 0 0 岬o lL 1 时，蛋白核小球藻E P S 释放量为莱茵衣藻E P S 释放量的3 5 5 倍，砷吸收量达到莱茵衣藻的2 2 9 倍。运用表面扫描电镜(S E M)，观察到3 0 0 岫1 0 lL-1A s V 暴露2 4h 的蛋白核小球藻细胞表面没有明显破损现象，然而相同暴露条件的莱茵衣藻细胞表面破裂，进一步证实了蛋白核小球藻较菜茵衣藻更适于净化砷污染水体。蛋白核小球藻对无机砷的吸收量在5 3 0 0 岬o lL 1A s l l l 和A s V 暴露浓度范围内呈浓度依赖性上升，吸收动力学符合B i o d y I l 锄i c 模型僻 o 9 5 1 5)，藻细胞对A s n l 和A s V 的最大吸收量分别为3 0 3p m o lg。1 和3 9 6 r n o lg。(2)E P S 增强了蛋白核小球藻对无机砷的表面吸附。无机砷暴露浓度为3 0 0p m o lL-1 时，含E P S 脱除的藻细胞(E P S F)比E P S 的藻细胞(E P S C)，对A s l u和A s V 的吸收量分别从2 5 3 岬o lg 一1 和3 9 6“m o lg 一1 上升至3 6 3 岬o lg。1 和6 9 lp m o lg，对A s m 和A s V 的吸附量从分别从2 3 6 8 5 岬o lg 1 和2 9 7 3 9p m o lg。1 下降到1 8 5 1 3 肛m o lg 1 和2 1 9 6 9 岬o lg。E P S F 细胞对A s l l l 和A s V 最大吸附吸收总和与E P S C 细胞相比分别减小了2 1 1 5 和2 4 8 1。根据B i o d y I l a m i c 模型的吸附吸收动力学拟合结果可知，3 0 0 岬o lL 1 A s u l 和A s V 暴露下E P S F 藻细胞的A s l H 和A s V 吸附速率常数相比E P S C 细胞减小了3 2 6 2 和2 9 0 7，吸收速率常数增加了4 2 2 1 和4 1 9 0。进一步分析不同p H 条件下藻细胞内砷的形态转化，发现p H6 0 8 5 时E P S C 和E P S F 藻细胞的总砷吸收量均随p H 上升而下降。相T T万方数据浙江大学硕士毕业论文致谢同p H 条件下，E P S F 藻细胞的A s 氧化、A s V 还原和甲基化作用低于E P S C 藻细胞，且E P S F 藻细胞的无机砷平均外排速率高于E P S C 藻细胞，表明E P S 有利于胞内无机砷的转化和累积。(3)E P S 释放量随藻细胞无机砷暴露浓度增加而增多，藻细胞吸收无机砷的特征影响因子有E P S 活性官能团和表面Z e t a 电位。5 3 0 0 岬o lL 1A s l l l 和A s V 暴露2 4h，蛋白核小球藻E P S 释放量随无机砷暴露浓度的增加而显著升高。P e a r S o n相关性分析显示，E P S 释放量与A s 和A s V 表面吸附量呈正相关，相关系数为0 9 7 2 和0 9 1 9，表明无机砷暴露升高可促进小球藻E P S 释放，并且E P S 释放量的增加可以进一步提高对无机砷的吸附作用。运用三维荧光光谱(3 D E E M)、傅里叶红外技术(F T I R)和X 射线光电子能谱(X P S)，发现无机砷与E P S 相互作用导致E P S 中酪氨酸类和色氨酸类物质荧光峰峰值下降6 3 5 一7 7 6，说明酪氨酸类和色氨酸类物质可与无机砷之间形成非荧光类络合物，并且进一步通过活性官能团的定性和半定量技术明确了一C o o H、O H、N H 2 为E P S 与A s m 和A s V发生相互作用的关键结合位点。蛋白核小球藻表面Z e t a 电位的结果显示，在p H为6 0、7 O、8 5 时，细胞表面Z e t a 电位随p H 增大而显著降低，说明p H 的增大导致藻细胞表面负电性增强，这主要归因于E P S 去质子化过程。藻细胞表面负电性的增加使得E P S 与无机砷的静电作用增强，进而降低了藻细胞对无机砷的吸收作用。关键词：绿藻；砷；生物吸收；胞外聚合物；细胞化学l I l万方数据浙江大学硕士毕业论文A B S T R A C TA BS T R A C TE x t r a c e U u l a rp o l y r n e r i cs u b s t a n c e s(E P S)h a V eas i g n j 6 c a n ti n f l u e n c eo ns o 印t i o np r o c e s so fi n o r g a n i ca r s e I l i cb ym i c r o a l g a e I I lm i ss t u d y，t y p i c a lf-r e s h w a t e rg r e e na l g a e 国肠愆玩乃忧胛D f d 瓠口锄d 鳓肠彬肪m D 刀伽陀加五口，协打w e r ec o m p a r e da sr e s e a r c ho b je c t sf o rs h o r t t e r me x p o s u r eo fa r s e I l i t e(A s)a n da r s e n a t e(A s V)b ya 1 1 a l y z i n gt h eE P Sp r o d c u t i o na n du p t a k ec 印a c i t yo fi n o r g；m i ca r s n e i c，a I l dCj 砂陀，z D f d 吣以w a ss e l e c t e dt om r t h e ri n v e s t i g a t ei t sA s a I l dA s Vs o r p t i o np r o c e s s e sa 1 1 dt h ei I l f l u e n c eo fE P So na r s e I l i cs o 印t i o ni nC 旭，z D 嗣瓠口T h eZ e t ap o t e n t i a lo fs u r f a c eo fa l g a lc e l l s，E P Sp r o d u c t i o na n di t ss u r f a c e6 m c t i o n a l 罂。o u p sw e r ed e t e c t e dt ou I l d e r s t a n de 虢c tc h a r a c t e r i s t i c so fE P S T h em a i l lf m d i n g sa r ea sf o l l o w s：(1)T h ep u r i f i c a t i o na b i l i 够o fC 刃，z o f d 钿口t oi I l o r g a I l i ca r s e I l i cw a sb e t t e rm a l lt h a to fC 陀切办口砌谢，a I l dt h eA s l l la n dA s Vu p t a k ep r o c e s so fC 刃，陀，z D f d D s 口c a nb ew e Ud e s c r i b e dw i t hB i o d y n 锄i cm o d e l m e nc e l l sw e r ee x p o s e dt o5 3 0 0 m o lL 一1A s Vf o r2 4h，E P Sp r o d u c t i o na n da r s e n a t es o 印t i o no fCp)，愆，z o 翻口w e r es i 鲥f i c a n t l y1 1 i g h e rm a nt h o s eo fC 陀砌五以，砌f E P Sp r o d u c t i o no fC 刃，陀以D f d b s 口a t3 0 0u m o lL。1A s Ve X p o s u r ew a s3 5 5t i m e sa sl l i g ha sm a to fC 比加办以，协f f，a I l d“sa r s e l l i cs o 印t i o nw a s2 2 9t i m e sa sl l i g ha st h a to fC 陀新办口，沈抗B a s e do nS E Mm o 印h o l o g i c a lo b s e a t i o n，Cp)，陀玎D 玉如s 口e x p o s e dt o3 0 0 m o lL 一1A s l I Im a i n t a i n e di t si n t a c tp r o t o p l a s t sr a t h e rt h a nC 陀砌 口砌f f，w 1 1 i c h 如n h e rc o n f i I m e dt 1 1 a tCp y 陀，z D 耐a s 口i sm o r es u i t a b l ef o rp h y c o r e m e d i a t i o no fa r S e m c T h eA s l l l a r l dA s Vu p t a k ep r o c e s so fC 陀行D f d 哪口c mb ew e l ld e s c m e dw i mB i o d y I l a I l l i cm o d e l俾2 O 9 515)，w i t hi n t r a c e l l u l a ru p t a k eo fA s l l la n dA s Vb yC 刃”力D 耐出口i n c r e a s i n gi nac o n c e n 仃a t i o n d e p e n d e n tm a n n e r a n dt h em a x i m a lu p t a k ec a p a c i t i e so fA s l l la n dA s Vb ya l g a lc e l l sw a s3 0 3p m o lg。1a I l d3 9 6 岬o lg 一，r e s p e c t i v e l y(2)E P Se I l l l a I l c e dA s l na I l dA s Va d s o 印t i o nc a p a c i t i e so fC 坨刀D f d 瓠以C o n l p a r e dw i t hE P S c o v e r(E P S C)a l g a lc e l l s，t h eA s l l l 锄dA s Vu p t a l【ec a p a c i t i e so fE P S f k e(E P S F)a l g a lc e l l su n d e r3 0 0“m o lL 1A s l l la I l dA s Ve x p o s u r ei n c r e a s e d舶m2 5 3 肛m o lg 1a I l d3 3 6 m o lg 一1t o3 3 6 m o lg。1a n d6 9 1 m o lg，w h i l et h eA s l l la 1 1 dA s Va d s o 叩t i o nc 印a c i t i e so fE P S Fc e l l sd e c r e a s e dr e l n a r k a b l yf r o m2 3 6 8 5I V万方数据浙江大学硕士毕业论文A B S T R A C Tm o lg 1a n d2 9 7 3 9 肛m o lg 一1t o1 8 5 1 3 n o lg 1a n d2 1 9 2 9 u n o lg-。T h eA s l a n dA s Vm a x i m u ms o 印t i o no fE P S Fc e l l sd e c r e a s e db y21 15 a n d2 4 81 i nc o n t r a s tt oE P S Cc e l l s B a s e do nt h er a t ec o n s t a n t so b t a m e df 硒mt h eb l o d y n a m l cm o d e l，A s l l la I l dA s Va d s o 印t i o nr a t ec o n s t a n t so fE P S Fc e l l sd e c r e a s e db y3 2 6 2 a l l d2 9 0 7 c o n l p a r e dt oE P S Cc e l l s，a I l dt h eA s l ua 1 1 dA s Vu p t a l【er a t ec o n s t a n ti n c r e a s e db y5 7 91 a n d4 0 2 7 T h ei n t r a c e l l u l a ra r s e n i cs p e c i a t i o na I l dc o n t e n ta td i f r e r e n tp HV a l u e sw a s 如r t h e ra l l a l y z e d，a n dr e s u l t ss h o w e dt h a ta r s e n i cu p t a k eb yE P S-Ca 1 1 dE P S Fc e l l sw e r eb o t hd e c r e a s e dw i t hp Hi n c r e a s i n gf o n n6 Ot o8 5，a I l dA s l l lo x i d a t i o n，A s r e d u c t i o na n dm e t h y l a t i o no fE P S Fc e l l sw e r es i 嘶f i c a n t l yl o w e rm a l lt h o s eo fE P S Cc e l l sa ts 眦ep Hl e V e l s，m e a I l w l l i l et h ea V e r a g ea r s e l l i ce m u xr a t eo fE P S Fc e U sw a sh i g h e rm a nt h a to fE P S-Fc e U s(3)T h eE P Sp r o d u c t i o no fa l g a lc e l l si n c r e a s e dw i t hi n c r e a s i n ge x p o s u r ec o n c e n t r a t i o n so fi 1 1 0 r g a l l i ca r s e l l i c，a l l ds f a c ef h n c t i o n a lg r o u p so fE P Sa I l ds u r f l a c ez e t ap o t e n t i a lo fa l g a lc e l l sw e r ed e t e c t e dt ob et h ek e yf a c t o r sf o re f r e c t so fE P So ni n o 曙a I l i ca r S e I l i cs o 印t i o nb y 铲e e I la l g a e A R e re x p o s u r et o5 3 0 0p m o lL 1A s l l l 锄dA s。f o r2 4h，t h eE P Sp m d u c t i o no fa l g a lc e l l si n c r e a s e dw i t ha r s e l l i ce x p o s u】旧c o n c e n 仃a t i o n s P e a r s o nc o l l r e l a t i o na n a l y s i sd e m o n s 仃a t e dt h a t l ea m o u n to fE P Sp r o d u c e dw a sp o s i t i v e l yc o l l r e l a t e dw i t ha d s o 印t i o no fA s l l la n dA s Vb ya l g a lc e l l s，a n dt h ep e a r s o nc o n e l a t i o nc o e m c i e n t sw e r e0 9 7 2a I l d0 919 ni n d i c a t e dt l l a ti n c r e a s i n ga r s e l l i ce x p o s u r ec o n c e n t r a t i o n sc a l lp r o m o tE P Sp r o d u c t i o n，b yw 1 1 i c ha l g a ec e l l sc a I li n c r e a s et 1 1 ea d s o 印t i o no fi n o 玛a 1 1 i ca r s 枷c T h es u m c e 劬c t i o n a lg r o u p so fE P Si n V 0 1 V e di ni n t e r a c t i n gw i t hi n o 玛a 1 1 i ca r s e n i cw e r ei d e n t m e du s i n g3 D E E M，F T 瓜a I l dX P S 3 D E E Ms p e c t r as h o w e dt h a tt h en u o r e s c e n c ep e a k so f t y r o s i n ep r o t e i n l i k es u b s t a I l c e sa I l dt r y p t o p h a I lp m t e i I l-l i k es u b s t a n c e si nE P Sd e c r e a s e db y6 3 5 7 7 6 w h e n3 0 0p m o lL 1A s l na I l dA s Va d d e d，a I l dE P Ss l l r f a c e 如n c t i o n a l 毋D u p si I l c l u d i I l gC O o H，-o H，一N H 2w e r ef o u l l dt ob et h eb o u n d i n gs i t e sf o ri m m o b i l i z m gi n o r g a I l i ca r s e n j c 恤o u g l l 缸t h e ra 1 1 2 L 1 y S i so fF T 瓜a n d)(P S T h eZ e t ap o t e n t i a lo fa l g a lc e l l sa td i f f e r e n tp He x l l i b i t e da sm eo r d e ro fp H6 O p H7 O p H8 5，w l l i c hs u g g e s t e dt h a tt h en e g a t i V ec h a r g eo fa l g a ls u r f a c e sw a si I l c r e a s e dw h e nt h ep Hv a r i e df r o m6 0t o8 5o w i n gt ot h ed 印r o t o n a t i o no fE P S，w 1 1 i c hf i n a l l yl e dt od e c r e a s e db i n d i n ga b i l i 够V万方数据浙江大学硕士毕业论文A B S T R A C Tb e t w e e nE P Sa n dA s l l la I l d A s V K e y w o r d：G r e e na l g a e；A r s e n i c；S o 印t i o n；E x t r a c e l l u l a rp o l y I n e r i cs u b s t a n c e s；C”o c h e m i s t 呵V I万方数据浙江大学硕士毕业论文目录目录致谢I摘要I IA B S T R A C T I V插图和附表清单。I x缩写、符号清单和术语表l 绪论11 1 藻类对无机砷的吸收作用研究进晨11 1+1藻类对砷的生物净化作用11 1 2藻类对无机砷的生物吸收作用31 1 3藻类对无机砷的生物转化作用71 2砷形态分析方法研究进晨1 31 2 1环境中无机砷的来源及形态分布1 01 2 2藻类样品前处理方法1 21 2 3砷形态的分离检测技术1 5胞外聚合物对金属和类金属的去除机棚及影响因素1 61 3 1E P S 的来源和分子特征1 61 3 2E P S 去除重金属和类金属的分子机制1 81 3 3E P S 去除重金属和类金属的影响因素一2 l1 4 本论文研究工作。2 21 4 1研究目标和意义2 21 4 2拟解决的科学问题2 31 4 3研究内容2 32 实验材料与方法2 52 1 实验材料2 52 1 1主要试剂2 52 1 2藻种培养与筛选一2 62 1 3脱除E P S 细胞的制备与染色一2 72 4实验设计。2 82 2 1A s 和A S v 对蛋白核小球藻的生长抑制实验2 82 2 2蛋白核小球藻的A s 和A S v 吸收实验2 82 2 3E P S 对藻细胞吸收A s m 和A S v 的影-向2 92 2 4藻细胞吸收A s l l l 和A S V 的E P S 影响特征一3 0测定方法3 l2 3 1叶绿素及光合活性测定3 12 3 2砷形态分析3 22 3 3E P S 的主要组分、分子量和微观形貌表征3 22 3 4细胞表面z e t a 电位测定3 42 3 5细胞形态学观察3 42 3 63 D E E M 测定3 52 3 7F T 瓜和S 测定3 5数据统计分析3 53 结果与讨论3 63 1绿藻对A s 和A s v 的生物吸收作用3 63 1 1E P S 高释放藻种的筛选3 63 1 2A s I 和A S v 对蛋白核小球藻生长的影响3 93 1 3蛋白核小球藻对A S I I I 和A S v 的吸收作用4 0V l l万方数据浙江大学硕士毕业论文目录3 1 4蛋白核小球藻的A s n l 和A s”吸收动力学一4 43 1 5J、结4 63 2E P s 对藻细胞吸收A s m 和A s v 的影响4 73 2 1E P S 对藻细胞A s 1 和A s”吸收作用的影响4 73 2 2E P S 对藻细胞A s 1 和A s”吸收动力学的影响4 93 2 3E P s 对A s 1 和A s 胞内转化的影响5 13 2 4E P S 对藻细胞A s 1 和A s v 外排的影响5 43 2 5小结5 73 3藻细胞吸收A s 和A s V 的E P s 影响特征5 93 3 1E P S 的释放特征5 93 3 2E P S 的表面活性官能团特征6 13 3 3细胞表面Z e t a 电位变化特征一6 73 3 4E P S 界面作用的细胞形态学证据6 83 3 5小结7 24 研究结论、创新点与展望7 44 1研究结论7 44 2创新点。7 44 3晨望7 45 参考文献7 5个人简历及攻读硕士期间成果8 5V I U万方数据浙江大学硕士毕业论文插图和附表清单插图图1 1图1 2图1 3图1 4图1 5图1 6图2 1图3 1图3 2图3 3图3 4图3 5图3 6图3 7图3 8图3 9图3 1 0图3 1 1图3 1 2图3 1 3图3 1 4图3 1 5图3 1 6图3 1 7图3 1 8图3 1 9图3 2 0图3 2 1图3 2 2图3 2 3图3 2 4图3 2 5图3 2 6图3 2 7图3 2 8图3 2 9插图和附表清单砷的三种生物代谢途径阻J 9砷赋存形态的E h 图幽1 2砷赋存形态的p H 图幽1 2E P S 的结构示意图削1 7藻细胞表面的双电层结构示意图1 8技术路线2 4藻细胞的培养环境及蛋白核小球藻的光学显微镜照片2 7A s。暴露下蛋白核小球藻和莱茵衣藻E P S 释放量3 7A s 暴露下蛋白核小球藻和莱茵衣藻的砷吸收量3 7A s 暴露2 4h 蛋白核小球藻和莱茵衣藻的S E M 图3 8蛋白核小球藻E P S 的尺寸排阻色谱图和原子力扫描图3 9无机砷暴露下蛋白核小球藻的生长曲线一4 0无机砷暴露下蛋白核小球藻生长抑制率的剂量效应曲线4 0无机砷暴露2 4 h 藻细胞胞内砷形态分布情况4 1无机砷暴露2 4h 藻细胞的叶绿素含量及P SI I 光响应曲线4 33 0 0“m o lL 1A s l n 和A s V 暴露2 4h 藻细胞的T E M 图4 3无机砷暴露下藻细胞的砷吸收动力学曲线4 5阿尔新蓝8 G X 染色细胞图和藻细胞2 4h 生长情况4 8无机砷暴露2 4hE P S C 和E P S F 藻细胞对砷的吸收作用4 93 0 0u m o lL 1A s。和A s”暴露下E P S C 和E P S F 藻细胞的砷吸收动力学5 0不同p H 条件下1 0 m o lL _ 1A s 儿1 暴露0 2 4h 内E P s C 和E P S F 藻细胞内的砷形态及含量5 3不同p H 条件下1 0“m o lL 一1A s V 暴露o 2 4h 内E P S C 和E P S F 藻细胞内砷形态及含量5 4不同p H 条件下1 0 m o lL _ 1A s 1 和A s”暴露旷2 4h 内E P S C 和E P S F 藻细胞培养基中砷形态及含量一5 6不同p H 条件下E P S C 和E P S F 藻细胞的2 4h 无机砷平均外排速率5 7藻细胞1 2 0 h 培养过程E P S 及其主要成分释放情况6 0无机砷暴露2 4h 蛋白核小球藻E P S 释放情况一6 0蛋白核小球藻E P S 释放量与A s u l 和A s V 吸附量的相关性分析一6 1蛋白核小球藻E P S 与无机砷相互作用的3 D E E M 图6 3E P S 与1 0 0 0u m o lL 1A s 儿1 和A s V 相互作用的F T I R 图6 4E P s 与1 0 0 0 m o lL-1A s 儿1 和A s”相互作用的x P s 全谱图6 5E P S 与l 0 0 0u m o lL。1A s u l 和A s V 相互作用的S 分谱图6 6不同p H 条件下藻细胞表面Z e t a 电位6 8不同p H 条件下藻细胞E P s 的F r m 图一6 83 0 0u m o lL-1A s 1 和A s 暴露2 4 h 的藻细胞s E M 图像7 03 0 0u m o lL 一1A s。u 和A s V 暴露2 4 h 的藻细胞E D x 图像一7 13 0 0u m o lL JA s 1 和A s”暴露2 4 h 藻细胞的T E M 图7 2万方数据浙江大学硕士毕业论文插图和附表清单附表表1 1藻类样品中砷形态的提取方法1 4表2 1B G l l 培养基使用的化学试剂及其生产商2 5表2 2S E 培养基使用的化学试剂及其生产商2 6表3 1无机砷暴露2 4h 藻细胞P Sn 系统荧光参数4 4表3 2藻细胞A s 1 和A s V 吸收动力学的K 和尬值一4 5表3 3E P S C 和E P S F 藻细胞A s 1 和A s 吸收动力学的j 已和j 匕值5 0表3 4E P S C 和E P S F 藻细胞的最大砷生物吸收能力、B C F 和限5 1表3 5E P S 与无机砷相互作用的3 D E E M 荧光特征参数6 4表3 6E P S 与l O O Ou m o lL-1 心u 1 和A s V 相互作用后的结合能