茶叶中三氯杀螨醇残留量GC测定的方法验证分析.pdf

Analysis and Testingdoi:10.16736/41-1434/ts.2023.16.062分析检测茶叶中三氯杀螨醇残留量GC测定的方法验证分析Validation Analysis of GC Method for Determination of Dicofol Residues in Tea肖伟1，符秋玉（1.湖南中益食品化工检测院，湖南2.湖南口味王实业有限公司，湖南益阳XIAO Wei,FU Qiuyu?(1.Hunan Zhongyi Food and Chemical Testing Institute,Yiyang413000,China;2.Hunan Kow Wei Wang Industrial Co.,Ltd.,Yiyang413000,China)益阳413000;413000)摘要：本研究依据GB/T5009.176一2 0 0 3茶叶、水果、食用植物油中三氯杀螨醇残留量的测定，采用GC-ECD来测定茶叶中三氯杀螨醇残留量的适用性，从方法系统适用性、标准曲线线性、精密度、回收率、检出限和定量限进行实验分析1-2，以验证本实验室的检测条件及检测能力符合相关要求3。关键词：方法验证；气相色谱仪电子捕获检测器；三氯杀螨醇；标准曲线线性；精密度Abstract:This study based on GB/T 5009.1762003“Determination of dicofol residues in tea,fruits and ediblevegetable oils and uses GC-ECD to determine the applicability of dicofol residues in tea.From the aspects of method systemapplicability standard curve linearity and precision experimental analysis was conducted on the degee,recovery rateldetection limit and quantitation limit to verify that the detection conditions and detection capabilities of this laboratory meetthe relevant requirement e.Keywords:method validation;gas chromatograph electron capture detector;dicofol;standard curve linearity;precision中图分类号：S571.1本研究依据GB/T5009.1762003标准要求及GB/T324652015化学分析方法验证确认和内部质量控制要求，旨在验证该分析方法的系统适用性、标准曲线线性、精密度、回收率、检出限和定量限。可接受的参考标准如下：系统适用性，各组分之间分离度不低于1.5，溶剂无干扰。线性R0.995。加标回收率在8 0%110%内。精密度，在重复性条件下获得的2 次独立测定结果的绝对差值算术平均值10%或RSD10%。定量限与检测限LOD 0.016 mg/kg,L0Q 0.092 mg/kg。1试验部分1.1仪器与试剂仪器：Agilent气相色谱仪（CN1933A029，配作者简介：肖伟（198 9一），男，本科，工程师，研究方向为化学分析与检验检测。XIANDAISHIPIN现代食品/2 0 3分析检测Analysis and TestingECD检测器）；OHAUS电子天平（AR224CN）。标准品信息：正已烷中三氯杀螨醇（10 0 g/mL，批号A1905311）；苯；石油醚：沸程30 6 0；丙酮、硫酸、无水硫酸钠，以上试剂均为分析纯。1.2原理试样中的三氯杀螨醇经提取，其提取液与标准系列同时用酸净化后，用配有电子捕获检测器的气相色谱仪测定，根据色谱峰的保留时间定性，与标准比较定量。1.3试验方法1.3.1气相色谱条件毛细管柱AgilentHP-5，30 m0.32 mm（内径）0.25m；柱温2 40；进样口温度2 8 0；检测器温度30 0；流速1.0 mL/min；分流比10：1；进样量1.0 L。1.3.2标准溶液配置三氯杀螨醇标准使用液：量取正已烷中三氯杀螨醇溶液（10 0 g/mL）标准溶液1.0 mL至2 0 mL容量瓶中，以石油醚稀释至刻度，浓度为5.0 g/mL。再按照上述标准使用液用石油醚稀释成0.0 5 1.0 g/mL的系列溶液，配制三氯杀螨醇标准系列0.0 5、0.10、0.2 0、0.50、1.0 g/mL分别各取5mL，加0.5mL浓硫酸酸化，振摇1min，于16 0 0 r/min离心15min，用吸管把上清液分别移人进样瓶中，供气相色谱法测定。1.3.3样品检测预处理：取具有代表性的茶叶试样10 0 g，粉碎后混匀称取约5g的试样（精确至0.0 1g），置于12 5mL具塞锥形瓶中，加2 0 mL石油醚，于超声波清洗器上振荡30 min，滤入50 mL具有刻度比色管中，以15mL石油醚分3次洗涤残渣，洗液并人比色管中，将石油醚浓缩，最后以石油醚定容至10.0 mL。净化：吸取试样提取液5.0 mL至10 mL离心管中，加0.5mL浓硫酸，盖上盖子。振摇数次后，打开盖子放气，然后振摇1min，于16 0 0 r/min离心15min，用吸管把上清液分别移入干净具塞试管中（油试样需将上清液浓缩至1.00mL）。测定：取上述标准系列溶液及样品浓缩序号3m(g)5.0123V(mL)浓度(g/mL)含量（mg/kg）RSD%204/现代食品XIANDAISHIPIN待测液，根据预先设定的方法及标准曲线，依据GB/T5009.1762003，采用ECD检测器进行GC测定5。2订试验结果与讨论2.1系统适用性选取空白试验（按照样品处理流程处理，不称样）及标准溶液进样，以保留时间定性、峰面积定量，通过色谱图分析计算。其中，空白试验应无干扰，三氯杀螨醇的理论塔板数应 8 0 0 0，结果见表1。表1三氯杀螨醇GC-ECD专属性试验结果表项目出峰时间（min）理论塔板数三氯杀螨醇标准溶液-18.102三氯杀螨醇标准溶液-28.100结果表明，空白试验对待测组分没有干扰，单组分分离度不要求，三氯杀螨醇的理论塔板数符合要求。2.2标准曲线线性移取1.3.2 标准系列溶液分别自动进样测定，记录三氯杀螨醇色谱峰面积，以峰面积为纵坐标，以标准溶液的浓度为横坐标，外标法峰面积定量绘制标准曲线，结果见表2。表2 三氯杀螨醇GC-ECD标准曲线线性结果表标准溶液浓度0.0500.1000.2000.500g/mL峰面积70.376159.570 293.689 676.456 1 157.713曲线方程Y=1 134.336 8X+44.468 2,R=0.996 19结果表明，三氯杀螨醇回归方程：Y=1134.3368X+44.4682，R=0.9962；三氯杀螨醇在0.0 5 1.0 g/mL范围内，呈良好的线性关系。2.3精密度试验对本试验室采用空白基底样品加标做待测样的方式测定以确定精密度，取同一批号样品，称取7 份，每份加人相同体积的标液进行提取测定，测得含量见表3。表3三氯杀螨醇GC-ECD精密度试验结果表125.005 40.090 10.093 80.179 80.187 466 253.770.959.71.00455.056 45.0839100.100 20.095 30.198 20.187 53.8165.025 45.01690.099 20.099 80.197 40.198 975.041 10.098 70.195 8Analysis and Testing分析检测以上数据表明，该条件下待测样品的测量精密度符合要求。2.4加标回收试验采用标准回收的试验来确定方法的回收率。准备序号1m(g)5.053 2加标量(g)0测得量（g)0回收率（%)平均回收率(%）以上数据表明，待测加标样品回收率为82.7%97.3%，符合要求。2.5检出限方法检出限：即某方法可检测的最小浓度，通常用外推法可以求得。本试验依据GB/T27417一2 0 17合格评定化学分析方法确认和验证指南，采用信噪比法评估LOD。一般来说，利用已知低浓度的分析物样品与空白样品的测量信号进行比较，确定可检出的最小浓度，典型的可接受的信噪比是2：1或3：1,即检出限（LOD）S/N=31,定量限（LOQ)S/N=101。在本试验中，依次稀释标准溶液，采用信噪比法来测定仪器的检出限。吸取三氯杀螨醇标准使用液0.10 mL到2 5mL作为检出限待测液1；吸取三氯杀螨醇标准使用液0.0 3mL到2 5mL，作为检出限待测液2；吸取三氯杀螨醇标准使用液0.12 5mL到2 5mL作为定量限待测液。经测量，结果见表5。表5三氯杀螨醇GC-ECD检出限和定量限表项目检出限溶液1检出限溶液2 定量限溶液S/N6.4仪器检出限(g/mL)仪器定量限(g/mL)由以上数据分析可知，方法检出限：当称样量为5g，稀释体积为10.0 mL，检出限为0.0 12 mg/kg，定8个50 mL离心管，编号1-12，其中，1-2 号不加标；3-4号加各标准使用液0.18 mL；5-6 号加标准使用液0.60mL；7-8 号加各标准使用液1.2 mL。照样品处理制备并测定，计算回收率，结果见表4。表4三氯杀螨醇GC-ECD回收率结果表235.01695.023300.900.80189.03.59.90.0060.02545.041 80.90.74482.791.0量限为0.0 5mg/kg，符合标准要求。3结语综上所述，本试验室依照GB/T5009.1762003，进行系统适用性、线性、精密度、回收率、检出限和定量限验证分析，由各指标结果可知，各项验证指标均符合GB/T324652015化学分析方法验证确认和内部质量控制要求及GB/T274172017合格评定化学分析方法确认和验证指南的要求，表明本试验室具备按照该标准检测茶叶中三氯杀螨醇残留量的能力。参考文献1冯秀梅，陈君.化学分析方法验证和确认的应用研究J.中国无机分析化学，2 0 18，8（5）：6 1-6 6.2李宏,鲍晓霞.化学检测试验室的方法验证与确认现代测量与试验室管理，2 0 13，2 1（6）：36-38+35.3洗土秀，欧志秀，周丽贤，等.食品中二氧化硫的测定方法验证J.食品安全导刊，2 0 2 2（35）：91-93.4宋家玉，李泽国，陈金东，等，毛细管气相色谱法测定蔬菜和水果中三氯杀螨醇残留J.预防医学论坛，2008（9):8 0 6-8 0 8.5中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.茶叶、水果、食用植物油中三氯杀螨醇残留量的测定：GB/T5009.176-2003S.北京：中国标准出版社，2003.55.038.73.02.79093.065.000 53.02.67089.075.02036.05.71495.285.01066.05.83797.3XIANDAISHIPIN现代食品/2 0 5