肿瘤的基因诊断.pptx

肿瘤的分子诊断肿瘤的分子诊断Moleculardiagnosisoftumors 多基因疾病多基因疾病是指疾病的发生涉及是指疾病的发生涉及两个以上基因两个以上基因的结构或的结构或表达调控的改变。分子诊断是指利用分子生物学和分子表达调控的改变。分子诊断是指利用分子生物学和分子遗传学的方法，通过检测遗传学的方法，通过检测基因的存在、结构变异和表达基因的存在、结构变异和表达的异常的异常，对人类状态和疾病做出诊断的方法。，对人类状态和疾病做出诊断的方法。肿瘤的分子诊断肿瘤的分子诊断是指用分子生物学手段，通过是指用分子生物学手段，通过检测肿瘤检测肿瘤相关基因的存在，分析肿瘤相关基因的缺陷、表达及其相关基因的存在，分析肿瘤相关基因的缺陷、表达及其功能功能，以达到肿瘤诊断的目的。，以达到肿瘤诊断的目的。概概 念念一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制 肿瘤自身原因肿瘤自身原因 外因外因内因内因无限增殖无限增殖转移转移空间空间资源资源 免疫监控免疫监控 攘外攘外 安内安内同流和污同流和污视而不见视而不见 肿瘤免疫监控失活肿瘤免疫监控失活功能丧失功能丧失一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身Limitless replicativepotentialTissue invasion&metastasisSustainedangiogenesisInsensitivity toanti-growth signalsSelf-sufficiency ingrowth signalsEvadingapoptosis一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身Self-sufficiency in growth signalsAutocrineloopsOver-expressionofreceptorReceptorisalwaysonDownstreamsignals一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身nExternal triggersnIntracellular triggersnDeath receptorsnCaspasesnSensors(8,9)nExecutioners(3)Evading apoptosis一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身Insensitivity to antigrowth signals一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身Sustained angiogenesisnVEGF(血管内皮生长因子)nFGF1/2（成纤维细胞生长因子）nThrombospondinnThalidomidenAvastin一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身Tissue invasion and metastases一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制1、肿瘤自身肿瘤自身Limitless reproductive potentialnHayflick hypothesisnLimited number of doublingsnTelomere maintenancenTelomerasenNot all tumor cells have this potentialnTumor stem cells(1)免疫监视系统免疫监视系统要素要素 识别力识别力攻击力攻击力组成组成分工分工快速反应快速反应特异反应特异反应 信息传递信息传递一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制2、免疫监控失调、免疫监控失调（1）、）、免疫监视系统免疫监视系统识别识别特异反应特异反应抗原递呈细胞抗原递呈细胞一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制2、免疫监控失调、免疫监控失调（1）、）、免疫监视系统免疫监视系统攻击攻击效应细胞效应细胞一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制2、免疫监控失调、免疫监控失调（2）、）、免疫监视系统与肿瘤发生免疫监视系统与肿瘤发生证据证据体内细胞突变随时在发生，但肿瘤不是随时发生。体内细胞突变随时在发生，但肿瘤不是随时发生。免疫缺陷与肿瘤发生免疫缺陷与肿瘤发生免疫功能与肿瘤发展免疫功能与肿瘤发展一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制2、免疫监控失调、免疫监控失调（2）、）、免疫监视系统与肿瘤发生免疫监视系统与肿瘤发生肿瘤监控失常原因肿瘤监控失常原因识别问题识别问题肿瘤自身肿瘤自身免疫细胞免疫细胞隐蔽抗原隐蔽抗原来源与正常细胞相同来源与正常细胞相同抗原递呈功能缺失抗原递呈功能缺失无视无视一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制2、免疫监控失调、免疫监控失调（2）、）、免疫监视系统与肿瘤发生免疫监视系统与肿瘤发生肿瘤监控失常原因肿瘤监控失常原因杀伤问题杀伤问题肿瘤自身肿瘤自身免疫细胞免疫细胞杀伤免疫细胞杀伤免疫细胞抑制因子抑制因子功能异常功能异常抑制性免疫细胞抑制性免疫细胞一、肿瘤发生发展的分子机制一、肿瘤发生发展的分子机制2、免疫监控失调、免疫监控失调二、肿瘤的分子诊断内容二、肿瘤的分子诊断内容肿瘤标志物的检测肿瘤标志物的检测 1978年年Herberman在美国国立癌症研究所召开的人类肿瘤免在美国国立癌症研究所召开的人类肿瘤免疫诊断会上提出的。由肿瘤组织和细胞产生的与肿瘤的形成、发疫诊断会上提出的。由肿瘤组织和细胞产生的与肿瘤的形成、发生相关的物质生相关的物质,这些物质存在于肿瘤细胞的胞核、胞质、胞膜上这些物质存在于肿瘤细胞的胞核、胞质、胞膜上或体液中；不存在于正常成人组织而见于胚胎组织或体液中；不存在于正常成人组织而见于胚胎组织,或在肿瘤组或在肿瘤组织中含量超过正常含量。存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物织中含量超过正常含量。存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测。中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测。n原癌基因原癌基因n癌基因癌基因n病毒癌基因病毒癌基因n肿瘤抑制基因肿瘤抑制基因n肿瘤转移相关基因肿瘤转移相关基因n肿瘤耐药基因等肿瘤耐药基因等肿瘤相关基因肿瘤相关基因细胞基因组中调控细胞增殖和分化且具有能细胞基因组中调控细胞增殖和分化且具有能够使正常细胞发生恶性转化的基因，包括病够使正常细胞发生恶性转化的基因，包括病毒癌基因和细胞癌基因；毒癌基因和细胞癌基因；癌基因在正常细胞的基因组中癌基因在正常细胞的基因组中n存在存在n不表达状态不表达状态n表达水平不足以引起细胞的恶性转化表达水平不足以引起细胞的恶性转化癌基因：癌基因：定位定位功能功能癌基因，产物癌基因，产物分泌蛋白分泌蛋白生长因子生长因子sis PDGFsis PDGF链链跨膜蛋白跨膜蛋白受体型酪氨酸激酶受体型酪氨酸激酶erb B2,EGFerb B2,EGF样受体样受体erb B,EGFerb B,EGF受体受体 fms,CSF-1fms,CSF-1受体受体 膜结合蛋白膜结合蛋白G-G-蛋白蛋白 非受体型酪氨酸激酶非受体型酪氨酸激酶 ras p21ras ras p21ras src pp60src src pp60src 胞浆可溶性蛋白胞浆可溶性蛋白非受体型酪氨酸激酶非受体型酪氨酸激酶 丝氨酸丝氨酸/苏氨酸激酶苏氨酸激酶信号转导连接蛋白信号转导连接蛋白 RafRaf，ab1 ab1 crk,SH2/SH3crk,SH2/SH3调节蛋白调节蛋白vav,SH2vav,SH2调节蛋白调节蛋白 胞核蛋白胞核蛋白转录因子转录因子MybMyb，myc myc fosfosjunjunerb A,T3erb A,T3受体受体 表表1 1细胞癌基因按其产物定位和功能分类细胞癌基因按其产物定位和功能分类能能 够够 抑抑 制制 细细 胞胞 恶恶 性性 转转 化化 或或 抑抑 制制 细细 胞胞 异异 常常 增殖的基因增殖的基因 目前研究较多的有目前研究较多的有p53p53基因、基因、pRBpRB基因、基因、p16p16蛋白、蛋白、p15p15蛋白、蛋白、p21p21等。等。抑癌基因抑癌基因基因基因染色体定染色体定位位相关肿瘤相关肿瘤基因产物及功能基因产物及功能RBRB13q1413q14RBRB、成成骨骨肉肉瘤瘤、胃胃癌癌、SCLCSCLC、乳乳癌癌、结结肠肠癌癌p105p105，控制生长，控制生长WTWT11p1311p13WTWT、横横纹纹肌肌肉肉瘤瘤、肺肺癌癌、膀膀胱胱癌癌、乳乳癌癌、肝母细胞瘤肝母细胞瘤WT-ZFPWT-ZFP，负调控转录因子，负调控转录因子NF-1NF-117p1217p12神神经经纤纤维维瘤瘤、嗜嗜铬铬细细胞胞瘤瘤、雪雪旺旺氏氏细细胞胞瘤瘤、神经纤维肉瘤神经纤维肉瘤GAPGAP，拮抗，拮抗p21rasBp21rasBDCCDCC18q21.318q21.3结肠瘤结肠瘤P192,P192,细胞粘附分子细胞粘附分子p53p5317p1317p13星星状状细细胞胞瘤瘤、胶胶质质母母细细胞胞瘤瘤、结结肠肠癌癌、乳乳癌癌、成成骨骨肉肉瘤瘤、SCLCSCLC、胃胃癌癌、磷磷状状细细胞胞肺肺癌癌P53 P53 控制肿瘤生长控制肿瘤生长erb Aerb A17q2117q21ANLLANLLT3T3受受体体，含含锌锌指指结结构构的的转转录录因因表表2 2 已确定的几种抑癌基因已确定的几种抑癌基因 野生型野生型P53P53生物学活性生物学活性n当当DNADNA损伤的时候损伤的时候,P53,P53基因就明显表基因就明显表达使细胞在达使细胞在G1G1期生长阻滞，促使细胞期生长阻滞，促使细胞凋亡。凋亡。n抑制肿瘤细胞生长抑制肿瘤细胞生长n保持保持DNADNA完整性完整性包括肿瘤转移促进基因或肿瘤转移抑制包括肿瘤转移促进基因或肿瘤转移抑制 基因基因。肿瘤转移相关基因肿瘤转移相关基因肿瘤耐药基因肿瘤耐药基因其表达使肿瘤细胞对药物产生耐药的基因。其表达使肿瘤细胞对药物产生耐药的基因。n n 血小板衍生生长因子血小板衍生生长因子（PDGFPDGF）n 表皮生长因子（表皮生长因子（EGFEGF）n VGFVGF基因等基因等 肿瘤生长因子肿瘤生长因子 肿瘤的基因诊断肿瘤的基因诊断肿瘤的基因诊断目前主要集中在肿瘤的基因诊断目前主要集中在以下几个方面：以下几个方面：肿瘤转移标志物肿瘤转移标志物肿瘤抗药基因肿瘤抗药基因突变的癌基因突变的癌基因肿瘤相关的病毒基因肿瘤相关的病毒基因标志分类标志分类机制机制分子标志分子标志应用于癌症诊断应用于癌症诊断分子遗传性分子遗传性染色体易位染色体易位t(9t(9；22)22)，t t（1414；1818），t(11t(11；12)12)等等白血病、淋巴瘤等白血病、淋巴瘤等点突变点突变p53,ER rasp53,ER ras等等胃胃癌癌、膀膀胱胱癌癌、乳乳腺腺癌癌、前前列列腺腺癌癌、结结肠肠癌癌、胰胰腺腺癌、肺癌等癌、肺癌等缺失缺失BRCA1BRCA1，BRCA2BRCA2，DCCDCC等等乳腺癌、结肠癌乳腺癌、结肠癌改变拼接改变拼接CD44CD44，muc-1,VLA-4muc-1,VLA-4等等结结肠肠癌癌、肾肾癌癌、乳乳腺腺癌癌、脑瘤等脑瘤等扩增扩增erb-B2,EGFR,N-myc,raserb-B2,EGFR,N-myc,ras乳乳腺腺癌癌、脑脑瘤瘤、神神经经母母细细胞瘤胞瘤比例改变比例改变明胶酶明胶酶A/TIMP2A/TIMP2乳腺癌转移等乳腺癌转移等病毒性病毒性病毒转化病毒转化HPV,HCV,HBVHPV,HCV,HBV，EBVEBV宫颈癌、肝癌、鼻咽癌等宫颈癌、肝癌、鼻咽癌等组织性组织性组织分化组织分化PSA,PSMAPSA,PSMA前列腺癌前列腺癌muc-18,muc-18,酪氨酸酸酶，酪氨酸酸酶，Mage-3Mage-3黑素瘤黑素瘤AFP,AFP,白蛋白白蛋白肝癌肝癌甲状腺球蛋白甲状腺球蛋白甲状腺癌甲状腺癌NPGP9.5NPGP9.5，酪酪氨氨酸酸羟羟化化酶酶表表面面活活性性物物质等质等神经母细胞瘤神经母细胞瘤肿瘤性肿瘤性肿瘤细胞特征肿瘤细胞特征CEACEA肺肺癌癌、结结肠肠癌癌、胃胃癌癌、乳乳腺癌腺癌-HCG-HCG黑素瘤等黑素瘤等CK-19CK-19肺鳞癌肺鳞癌端粒酶端粒酶结结肠肠癌癌、乳乳腺腺癌癌、头头颈颈部部癌等癌等微卫星体等微卫星体等结结肠肠癌癌、乳乳腺腺癌癌、头头颈颈部部癌等癌等表表3 3 肿瘤基因诊断的分子标志及其应肿瘤基因诊断的分子标志及其应用用 可分为四大类可分为四大类 I.I.组织特异性基因标志组织特异性基因标志 II.II.肿瘤特异性基因标志肿瘤特异性基因标志 III.III.血管生成因子血管生成因子 IV.IV.其它与肿瘤转移相关的分子及基质蛋白酶其它与肿瘤转移相关的分子及基质蛋白酶及其抑制剂及其抑制剂 肿瘤转移基因标志物肿瘤转移基因标志物组织特异性基因标志物组织特异性基因标志物指肿瘤组织和指肿瘤组织和/或起源正常组织所特有，在淋巴或起源正常组织所特有，在淋巴组织和血细胞中不存在的。如角质蛋白家族组织和血细胞中不存在的。如角质蛋白家族（CKCK）mRNAmRNA、粘蛋白基因、表皮生长因子受体、粘蛋白基因、表皮生长因子受体（EGFREGFR）mRNAmRNA等。等。存在于肿瘤及其起源的正常细胞中，不存在于其存在于肿瘤及其起源的正常细胞中，不存在于其他细胞。他细胞。如如CEA mRNACEA mRNA、AFP mRNAAFP mRNA、PSA mRNAPSA mRNA等等血管生成因子血管生成因子如血管内皮细胞生长因子（如血管内皮细胞生长因子（VEGFVEGF）等。）等。突变的癌基因突变的癌基因癌癌基基因因的的突突变变是是癌癌基基因因激激活活的的重重要要方方式式和和途途径径。除除了了见见到到较较大大范范围围片片段段的的缺缺失失或或插插人人以以及及染染色色体体转转位位之之外外，大大多多数数情情况况下下，都都是是少少数数核核苷苷酸酸或或单单个个碱碱基基的的突突变变。.癌基因点突变的检测癌基因点突变的检测 单单链链构构象象多多态态性性（S SS SC CP P）检检测测技技术术等等 .肿瘤相关的病毒基因肿瘤相关的病毒基因EBEB病毒（病毒（EBVEBV）人乳头瘤病毒（人乳头瘤病毒（HPVHPV）乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（HBVHBV）、丙型肝炎病毒（）、丙型肝炎病毒（HCVHCV）感染）感染对于这些肿瘤组织细胞中相关病毒基因及其编对于这些肿瘤组织细胞中相关病毒基因及其编 码产物的检测，可以作为这些类型的肿瘤诊断的码产物的检测，可以作为这些类型的肿瘤诊断的标志。标志。致瘤病毒引起的恶性转化作用引起了人们致瘤病毒引起的恶性转化作用引起了人们致瘤病毒引起的恶性转化作用引起了人们致瘤病毒引起的恶性转化作用引起了人们极大的关注极大的关注极大的关注极大的关注肿瘤基因诊断的常用方法PCRPCR、RT-PCRRT-PCRSouthern blotSouthern blot杂交技术、杂交技术、Northern Northern blotblot杂交技术杂交技术基因芯片基因芯片基因测序。基因测序。肿瘤基因的分子诊断意义肿瘤基因的分子诊断意义 1.1.肿瘤的早期诊断和筛选肿瘤的早期诊断和筛选2.2.肿瘤疗效监测肿瘤疗效监测 3.3.肿瘤的预后判断肿瘤的预后判断 4.4.肿瘤微转移检测肿瘤微转移检测 肿瘤基因检测在肿瘤微转移检测中肿瘤基因检测在肿瘤微转移检测中应用举例应用举例前列腺癌特异性基因前列腺癌特异性基因DD3DD3PCA3PCA3 nDD3DD3PCA3PCA3是一种非编码是一种非编码RNARNA的基因，定位于的基因，定位于9q219q212222染色体。它为前列腺癌特异性基染色体。它为前列腺癌特异性基因之一，因之一，DD3DD3PCA3PCA3 mRNA mRNA仅在前列腺癌细胞仅在前列腺癌细胞中表达，而在其它正常组织和癌组织以及中表达，而在其它正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达。细胞系中均不表达。DD3 mRNA 14DD3 mRNA 14外显子扩增结果外显子扩增结果M M：50bp 50bp DNA DNA LadderLadder；1 1：LNCaPLNCaP阳阳性性对对照照；2 2 3 3：PCaPCa；4 4：PIN(PIN(前前列列腺腺上上皮皮内内瘤瘤变变)；5 5 6 6：BPH(BPH(前前列列腺腺增增生生)；7 7：直直肠肠癌癌；8 8：直直肠肠癌癌癌癌旁旁；9 9：结结肠肠癌癌；1010：结结肠肠癌癌癌癌旁旁；1111：乳乳腺腺癌癌；1212：甲甲状状腺腺癌癌；1313：胃胃癌癌；1414：胃胃癌癌癌癌旁旁；1515：膀膀胱胱癌癌；1616：软软组组织织纤纤维维肉肉瘤瘤；1717：转转移移性性腺腺癌癌；1818：淋淋巴巴结转移性黑色素瘤；结转移性黑色素瘤；1919：卵巢成熟性畸胎瘤；：卵巢成熟性畸胎瘤；2020：正常肝脏；：正常肝脏；2121：胆囊；：胆囊；2222：胎盘；：胎盘；2323：试剂空白。：试剂空白。DD3 mRNA 13DD3 mRNA 13外显子扩增结果外显子扩增结果M M：50bp 50bp DNA DNA LadderLadder；1 1：LNCaPLNCaP阳阳性性对对照照；2 2 3 3：PCaPCa；4 4：PINPIN；5 5 6 6：BPHBPH；7 7：直直肠肠癌癌；8 8：直直肠肠癌癌癌癌旁旁；9 9：结结肠肠癌癌；1010：结结肠肠癌癌癌癌旁旁；1111：乳乳腺腺癌癌；1212：甲甲状状腺腺癌癌；1313：胃胃癌癌；1414：胃胃癌癌癌癌旁旁；1515：膀膀胱胱癌癌；1616：软软组组织织纤纤维维肉肉瘤瘤；1717：转转移移性性腺腺癌癌；1818：淋淋巴巴结结转转移移性性黑黑色色素素瘤瘤；1919：卵卵巢巢成成熟熟性性畸胎瘤；畸胎瘤；2020：正常肝脏；：正常肝脏；2121：胆囊；：胆囊；2222：胎盘；：胎盘；2323：试剂空白。：试剂空白。DD3 mRNA 34DD3 mRNA 34外显子扩增结果外显子扩增结果M M：50bp 50bp DNA DNA LadderLadder；1 1：LNCaPLNCaP阳阳性性对对照照；2 2 3 3：PCaPCa；4 4：PINPIN；5 5 6 6：BPHBPH；7 7：直直肠肠癌癌；8 8：直直肠肠癌癌癌癌旁旁；9 9：结结肠肠癌癌；1010：结结肠肠癌癌癌癌旁旁；1111：乳乳腺腺癌癌；1212：甲甲状状腺腺癌癌；1313：胃胃癌癌；1414：胃胃癌癌癌癌旁旁；1515：膀膀胱胱癌癌；1616：软软组组织织纤纤维维肉肉瘤瘤；1717：转转移移性性腺腺癌癌；1818：淋淋巴巴结结转转移移性性黑黑色色素素瘤瘤；1919：卵卵巢巢成成熟熟性性畸胎瘤；畸胎瘤；2020：正常肝脏；：正常肝脏；2121：胆囊；：胆囊；2222：胎盘；：胎盘；2323：试剂空白。：试剂空白。前列腺组织和其他肿瘤组织及癌旁组织前列腺组织和其他肿瘤组织及癌旁组织DD3 mRNADD3 mRNA检测结果检测结果 M M：50bp DNA50bp DNA标准；标准；1 1：LNCaPLNCaP阳性对照；阳性对照；2 2：BPHBPH；3 3：健康男性志愿者；：健康男性志愿者；4 41010为为PCaPCa；1111为试剂空白。为试剂空白。外周血外周血DD3 mRNADD3 mRNA的的RT-PCRRT-PCR扩增电泳图扩增电泳图RT-PCRRT-PCR检测结果检测结果 v4444例例PCaPCa组中组中1313例可见例可见DD3 mRNADD3 mRNA阳性结果阳性结果(其中其中B B期、期、C C期及期及D D期分别有为期分别有为0 0例、例、2 2例，例，1111例例)。v3030例例BPHBPH患者和患者和1818名健康男性志愿者标本中均未名健康男性志愿者标本中均未检出检出DD3 mRNADD3 mRNA。外周血外周血DD3 mRNADD3 mRNA的巢式的巢式RT-PCRRT-PCR扩增电泳图扩增电泳图 M M：50bp DNA50bp DNA分子量标准；分子量标准；1 1：LNCaPLNCaP阳性对照；阳性对照；2 2：阴性对照：阴性对照(女性女性)；3 3：BPHBPH患者；患者；4 4：健康男性志愿者；：健康男性志愿者；5 58 8：未治疗的：未治疗的PCaPCa；9 9：试剂空白：试剂空白 巢式巢式RT-PCRRT-PCR检测结果检测结果v4444例例PCaPCa组中组中2121例可见例可见DD3 mRNADD3 mRNA阳性结果阳性结果(其中其中B B期、期、C C期、期、D D期分别有期分别有1 1例、例、5 5例、例、1515例例)v3030例例BPHBPH患者和患者和1818名健康男性志愿者均未见阳性名健康男性志愿者均未见阳性结果结果 两种方法对两种方法对PCaPCa患者外周血患者外周血DD3 mRNADD3 mRNA检出率比较检出率比较RT-PCR巢式巢式RT-PCR+-+130-823注：注：2 2=20.2=20.2，P P0.0010.001；KappaKappa0.6290.629，P P0.0010.001 外周血外周血DD3 mRNADD3 mRNA巢式巢式RT-PCRRT-PCR方法的灵敏度方法的灵敏度M:50bp DNAM:50bp DNA分子量标准；分子量标准；1 16:6:依次为依次为10105 5、10104 4、10103 3、10102 2、10101 1、1 1个个LNCaPLNCaP细胞细胞/ml/ml全血；全血；7:7:阴性对照；阴性对照；8:8:试剂空白试剂空白 组别组别 DD3 mRNADD3 mRNA检出率检出率(%(%，例数，例数)PCaPCa（未治疗）（未治疗）100%100%（11/1111/11）BPHBPH 0%0%（0/300/30）健康男性志愿者健康男性志愿者（对照）（对照）0%0%（0/180/18）注：经卡方检验，注：经卡方检验，2 259.0 59.0 P P0.010.01不同前列腺疾病患者其外周血不同前列腺疾病患者其外周血DD3 mRNADD3 mRNA检出率比较检出率比较巢式巢式RT-PCRRT-PCRPCaPCa不同临床分期未治疗组和治疗组不同临床分期未治疗组和治疗组DD3 mRNADD3 mRNA阳性率比较阳性率比较(%,(%,例数例数)临床分期临床分期 DD3 mRNADD3 mRNA未治疗组未治疗组 内分泌治疗组内分泌治疗组 B B期期 100.0(1/1)100.0(1/1)0.00.0（0/20/2）C C期期 100.0(3/3)100.0(3/3)25.025.0（2/82/8）*D D期期 100.0(7/7)100.0(7/7)34.8(8/23)*34.8(8/23)*合计合计 100.0(11/11)100.0(11/11)30.3(10/33)*30.3(10/33)*注：内分泌治疗组与未治疗组比较，注：内分泌治疗组与未治疗组比较，*P P0.050.05，*P P0.010.01巢式巢式RT-PCRRT-PCR谢谢 谢谢!