lncRNA UNC5B-AS1和miR-381在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义.pdf

和 在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义 通讯作者，：湖北十堰 十堰市人民医院（湖北医药学院附属人民医院）病理科肖 婧，度长海，田 林【摘 要】目的 探讨长链非编码（）非协调性分子 同源蛋白 反义（）和 在非小细胞肺癌（）组织中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量（）检测 患者肿瘤组织（实验组）和肺良性肿瘤组织（对照组）和 的表达差异；分析 和 的表达与 临床病理特征之间的关系；采用受试者工作特征（）曲线评估 和 对 的诊断价值。采用多因素 回归模型分析影响 患者预后的独立因素。结果 实验组 的表达明显高于对照组（），而 的表达明显低于对照组（）。和 的表达呈明显负相关（，）。、及两者联合诊断 的曲线下面积（）分别为 、和 。与 患者的 分期、淋巴结转移及分化程度有关（）；与与 患者的肿瘤大小、淋巴结转移及分化程度有关（）。高表达组患者的中位 为 个月，明显低于低表达组的 个月（）；低表达组患者的中位 为 个月，明显低于高表达组的 个月（）。多因素回归分析显示，肿瘤大小、分期、淋巴结转移、表达及 表达是影响 患者预后的独立因素（）。结论在 组织中 表达升高，而 表达下降，两者对 有一定的诊断和预后预测价值。【关键词】非小细胞肺癌；非协调性分子 同源蛋白 反义（）；曲线中图分类号：文献标识码：文章编号：（），：，：【】（）（）（）（）（）（），（）（），（）（，），（），（）（）（，），临床肿瘤学杂志 年 月第 卷第 期 ，（，），（），【】；（）；肺癌是全世界范围癌症死亡的主要原因之一，且肺癌的发生率也在逐年递增。肺癌中最常见的类型是非小细胞肺癌（，），约占所有肺癌新发病例的 。由于治疗方案有限，肿瘤转移和复发率较高，患者的平均 年生存率仍然很低。的早期诊断有助于治疗方案的制定，所以筛选早期诊断相关的分子标志物尤为重要。非编码，包括长链非编码（，）和微小（，）是两类不编码蛋白质的，但 和 可在转录水平或转录后水平参与细胞增殖、细胞凋亡等生物学行为，进而调控各类疾病的发生发展。越来越多的证据表明，和 参与了 的进展，如 在 组织中的相对表达显著低于癌旁正常组织，并与 的 年生存率有关。通过调节肿瘤抑制因子 水平促进 细胞的增殖、迁移和侵袭。非协调性分子 同源蛋白 反义（，）和 在 组织中的表达及与临床病理特征的相关性报道仍较少，基于此，本研究探讨了 组织中 、的表达情况及与临床病理特征和预后的相关性。资料与方法 一般资料 选取 年 月至 年 月在我院胸外科进行根治性或姑息性切除术的 例 患者作为实验组，并选取同期来我院进行肺部良性肿瘤切除术的患者作为对照组。实验组纳入标准：（）患者均符合中华医学会肺癌临床诊疗指南（版）中 的诊断标准，并经病理组织学检查确诊为；（）所有患者术前均未接受过放化疗等抗肿瘤治疗及肺部手术治疗；（）患者临床资料完整。排除标准：（）合并其他恶性肿瘤者；（）严重心肝肾功能不全者；（）伴有重度支气管扩张或慢性阻塞性肺病者；（）合并严重免疫系统缺陷者或血液病者。本研究所有受试者或家属均签署知情同意书，且研究方案经医院伦理委员会批准。实验组共入组 例患者，其中男性 例，女性 例；年龄 岁，中位年龄为 岁；鳞癌 例，腺癌 例，其他类型 例。对照组 例，其中男性 例，女性 例；年龄 岁，中位年龄 岁。两组患者在年龄、性别组成方面无明显差异（），具有可比性。观察指标及随访记录所有患者的临床病理特征，包括性别、年龄、分期、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、随访数据等。采用门诊或电话的方式进行随访，随访截止时间为 年 月。总生存期（）定义为自患者确诊日期至随访截止日期或患者死亡日期。实时荧光定量 （）检测 和 表达（）肿瘤组织切除后立即储存于 冰箱中待用，采用 试剂（美国 公司产品）提取肿瘤组织总，并采用 的琼脂糖凝胶电泳或 检测 浓度和纯度，当 为 时可进行后续实验。（）总 反转录为，严格按照 和 的反转录试剂盒（中国天根生物科技有限公司产品）操作步骤进行；（）按照试剂盒说明书的反应步骤进行。内参为，内参为。扩增程序为：预变性 ，变性 ，退火 ，延伸，共进行 个循环。每个实验设置 个复孔，反应结束后以 和 为标准，按照 计算 和 的相对表达量。引物序列见表。统计学分析 采用 和 版软件进行统计学处理。符合正态分布的计量资料采用均数标准差表示，两组间比较采用独立样本 检验；非正态分布资料采用中位数及四分位间距（，）表示，组间比较采用秩和检验。相关性分 临床肿瘤学杂志 年 月第 卷第 期 ，析采用 相关检验；采用受试者工作特（）征曲线评估 和 对 的诊断价值；预后的多因素分析采用 比例风险回归模型。以 为差异有统计学意义。表 扩增引物序列引物名称引物序列 上游引物 下游引物 上游引物 下游引物 上游引物 下游引物 上游引物 下游引物 结 果 两组患者组织中 和 的表达对照组和实验组患者组织中 的 相 对 表 达 量 分 别 为 （，）、（，），实验组 的表达明显高于对照组（）。对照组和实验组患者组织中 的相对表达量分别为（，）、（，），实验组 的表达明显低于对照组（）。和 表达的相关性分析 相关性分析显示，和 的表达呈负相关（，）。见图。图 组织中 和 表达的相关性分析 曲线评估 和 对 的诊断价值 对 诊断的 曲线下面积（）为 ，灵敏度、特异度分别为 、；诊断 的 为 ，灵敏度、特异度分别为、。两者联合诊断 的 为，灵敏度、特异度分别为 、。见表、图。表 评估 和 对的诊断价值变量 灵敏度（）特异度（）图 评估 和 对 诊断价值的 曲线 组织中 和 表达与临床病理特征的相关性按照 和 表达量的中位数，将患者分为 高表达组（）、低表达组（）和 高表达组（）、低 表 达 组（）。表达与 患者的 分期、淋巴结转移及分化程度有关（）；表达与 患者的肿瘤大小、分化程度及淋巴结转移有关（）。见表。临床肿瘤学杂志 年 月第 卷第 期 ，表 组织 和 表达与临床病理特征的关系临床病理参数 高表达（）低表达（）高表达（）低表达（）性别 男 女年龄（岁）肿瘤大小（）病理类型 鳞癌 腺癌 其他 分期 分化程度 高、中 低淋巴结转移 有 无 和 表达与 患者预后的关系 患者随访 个月，中位随访时间为 个月。全组 患者的中位 为 个月。高表达组的中位 为 个月（：），低于低表达组的 个月（：），差异有统计学意义（）。高表达组患者的中位 为 个月（：），高于低表达组的 个月（：），差异有统计学意义（）。见图。：不同表达；：不同表达图 和 不同表达患者的 曲线 临床肿瘤学杂志 年 月第 卷第 期 ，影响预后的因素分析 单因素分析结果显示，肿瘤大小、分期、淋巴结转移及分化程度与 患者的 有关（）。将单因素分析中有统计学意义（）的因素纳入多因素 回归模型中，结果显示肿瘤大小、分期、淋巴结转移、表达及 表达是影响 预后的独立因素（）。见表、表。表 影响 患者 的单因素分析因素中位（月，）性别 男（）女（）年龄（岁）（）（）肿瘤大小（）（）（）病理类型 鳞癌（）腺癌（）其他（）分期 、（）、（）分化程度 高、中（）低（）淋巴结转移 有（）无（）表 影响 患者 的 多因素分析变量（）肿瘤大小（）（）分期（）（）淋巴结转移（是 否）（）分化程度（高、中 低）（）（高表达 低表达）（）（低表达 高表达）（）讨 论 是一类保守的非编码，长度大约为，通过形成 诱导沉默复合物（），能够 识 别 靶 基 因 的，导 致 靶 基 因 降解或翻译抑制，参与细胞增殖、凋亡、分化及信号传导等过程。异常表达与自身免疫性疾病、肿瘤的发生密切相关。是在肿瘤发生中的最重要 之一，其在大多数癌症中表达下调，作为抑癌基因抑制肿瘤进展。有研究证实 在乳腺癌肿瘤组织中的表达显著低于相邻的非肿瘤组织，并且 表达水平与乳腺癌细胞增殖、上皮间质转化存在负相关。等也表明 在肺癌组织和细胞中表达下调，且可以作为 的靶标，共同调控肺癌的进展。在 中，一项涉及 例患者的研究显示，表达与 分期和淋巴结转移显著相关。该结果与本研究结果类似，在本研究中，在 患者肿瘤组织中低表达，诊断 的 为 ，其灵敏感度和特异度分别为 、，且 表达与肿瘤大小、淋巴结转移及分化程度有关。低表达可促进癌症的发生发展，可通过竞争性结合其分子靶标，靶向切割，或抑制靶基因 的翻译，从而在转录水平及转录后水平影响其靶基因的表达。如在 细胞中，与 具有靶向结合位点，过表达可抑制 的表达，进而抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，并诱导细胞凋亡。作为 的“分子海绵”，与 的分子靶标形成 的 网络从而影响癌症的发生和转移。有研究发现肺癌组织和细胞中 的表达明显高于癌旁组织和支气管上皮细胞（），且 表达的下调抑制了 细胞的粘附、侵袭和迁移。另外郑中显等通过双荧光素酶报告实验发现 与 有结合位点，可以负调控 的表达，敲低 后可抑制胃癌细胞增殖，并促进其凋亡。张健等通过临床试验发现，与癌旁组织相比，在肺癌组织中表达显著上调，干扰 表达后，通过靶向 表达以抑制肺腺癌细胞增殖、促进细胞凋亡，从而延缓肿瘤进展。由此 临床肿瘤学杂志 年 月第 卷第 期 ，可见，过表达可通过靶向 抑制 表达，促进肿瘤细胞增殖和转移，抑制细胞凋亡，促进肿瘤进展。我们进一步探究 在 患者肿瘤组织中的表达，结果显示 在 中高表达，诊断 的 为 ，其灵敏度、特异度分别为、，且与 分期、淋巴结转移及分化程度有明显的相关性。与 联合诊断的 为 ，其灵敏度、特异度分别为 、，该结果表明 与 联合分析后对 的诊断效能最佳。细胞实验均表明过表达 和敲低 通过促进肿瘤细胞增殖和迁移及抑制细胞凋亡，进而影响 的发生发展过程。该结果在本研究中得到验证，我们通过 相关性分析发现 与 呈显著负相关，另外 高表达组的中位 明显低于低表达组，且 高表达组的中位 明显高于低表达组，该结果表明 和 均可显著影响 患者的预后，经 多因素回归分析发现，肿瘤大小、分期、淋巴结转移、表达及 表达是影响 患者预后的独立因素。综上所述，在 肿瘤组织中表达上调，在 肿瘤组织中表达下调，两者与 患者的临床病理特征及预后具有相关性，且对 有一定的诊断价值。本研究样本量较少，在后期临床中可扩大样本量，并通过细胞实验探究两者对 发生发展的调控机制。参考文献 ，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：中华医学会，中华医学会肿瘤学分会，中华医学会杂志社中华医学会肺癌临床诊疗指南（版）中华肿瘤杂志，（）：，：，：，：，（）：，：，：，：，（）：，（）：，：谭建军，隆姝孜，张涛 对肺癌细胞黏附、侵袭及迁移的影响及其机制 中国应用生理学杂志，（）：郑中显，顾康生，侍伟伟，等 靶向 调控胃癌细胞的增殖与凋亡 中华肿瘤防治杂志，（）：张 健，张吉炯 靶向 调控人肺腺癌细胞系 增殖和凋亡 基础医学与临床，（）：收稿日期：；修回日期：临床肿瘤学杂志 年 月第 卷第 期 ，