miRNA-375在脑胶质瘤患者血清中的变化情况及价值分析.pdf

新疆医学第 53 卷第 53 卷第 7 期2023 年 7 月新疆医学XINJIANG MEDICAL JOURNALVol.53No.7July.2023Analysis about the changes and value of miRNA-375 in the serum of patients with gliomaLIUQiang（Peoples Hospital,Mengjin District,Luoyang,471100,Henan,China）Abstract：ObjectiveTo investigate the the expression level and clinical significance of micro（RNA-375）miRNA-375 in theserum of patients with glioma.MethodsEighty cases of glioma patients treated in our hospital from January 2019 to January 2020 wereselected as the research subjectsand divided into the observation group,and 80 cases of normal brain tissues obtained by internaldecompression surgeryfor brain injury in our hospital during the same period were selected as the control group.The miRNA-375 contentin the two groups were objectively detected,respectively.The relative expression level of miRNA-375 in glioma patients with differentfactors was analyzed.ResultsThe serum miRNA-35 content in 2 groups had statistically significant（P 0.05）.There were statistically significantdifferences in serum miRNA-375 content among patients with WHO classification,preoperative KPS score and postoperative prognosis 1year after surgery（P 0.05）.Logistics regression analysis showed that preoperative KPS score80,WHO grade and,and postoperative 1-year deathwere all influencing factors for changes in serum miRNA-375 content in patientswith glioma.ConclusionSerum miRNA-375 levels in glioma patients weredecreased,which was correlated with the preoperative KPSscore,WHO classification and prognosis of patients,and whichcan be used as an effective indicator for diagnosis and assessment ofpatients prognosis.Key words：Glioma；Small RNA-375；Influencing factors；Prognosis论著miRNA-375 在脑胶质瘤患者血清中的变化情况及价值分析刘强（洛阳市孟津区人民医院，河南洛阳 471100）摘要：目的探讨微小（RNA-375）miRNA-375 在脑胶质瘤患者血清中表达水平及临床意义。方法选取 2019 年 1月-2020 年 1 月期间在本院接受治疗的 80 例脑胶质瘤患者作为观察组的研究对象，并选取本院同期因颅脑损伤行内减压术获取的 80 例正常脑组织作为对照组，分别对两组患者的 miRNA-375 含量进行客观检测，并分析不同因素脑胶质瘤患者的 miRNA-375 相对表达量。结果两组患者血清中 miRNA-35 含量存在统计学意义（P 0.05）；WHO 分级、术前 KPS 评分以及术后 1 年预后患者血清 miRNA-375 含量比较差异有统计学意义（P 0.05）；Logistics 回归分析显示，术前 KPS 评分80 分、WHO 分级为、级以及术后 1 年死亡均为脑胶质瘤患者血清 miRNA-375 含量变化的影响因素。结论脑胶质瘤患者血清中 miRNA-375 含量下降，并与患者的术前 KPS 评分、WHO 分级以及预后情况相关，可作为诊断和评估患者预后的有效指标。关键词：脑胶质瘤；微小 RNA-375；影响因素；预后中图分类号：R605.974文献标识码：A文章编号：10015183（2023）0780803脑胶质瘤属于原发性颅内肿瘤之一，多发于成人中。研究表明，脑胶质瘤的发病机制较为复杂，主要是抑癌基因失活和原癌基因激活引起一系列动态演变和基因异常后所致发生1-2。临床尚缺乏早期客观的临床诊断指标，研究和探讨相关诊断指标对证实脑胶质的发生发展具有重要意义3-4。miRNA属内源性小分子非编码形 RNA，具备了一定的稳定性，其中 miRNA-375 已被证实在多项肿瘤中表达异常5-6。目前的研究中主要集中于血清 miRNA-375含量检测在肝癌、胃癌和前列腺的诊断中，而相对较少研究 miRNA-375 在脑胶质瘤中的表达，基于此，现通过对收治脑胶质瘤的 miRNA-375 含量进作者简介：刘强，男，主治医师，研究方向：肿瘤学。第 7 期行检测，并分析了其与患者预后的关系，拟为提高患者的诊断治疗以及预后提供更多参考。1 资料与方法1.1 一般资料选取本院 2019 年 1 月-2020 年 1 月期间在本院接受治疗的 80 例脑胶质瘤患者作为观察组的研究对象，纳入标准：（1）经相关诊断明确确诊；（2）具有手术治疗的适应证；（3）以往未接受放化疗等。排除标准：（1）合并其他心肝肾等严重疾病；（2）患其他恶性肿瘤；（3）失访者。其中符合纳入标准的患者包括男性 54 例，女性 26 例，平均年龄为（61.99 7.30）岁，胶质瘤世界卫生组织（WHO）分级：级19 例，级 22 例，级 39 例。并选取本院同期因颅脑损伤行内减压术获取的 80 例正常脑组织作为对照组，包括男性 48 例，女性 32 例，平均年龄为（59.50 7.23）岁，经比较，两组患者的性别和年龄比较差异无统计学意义（P 0.05）。1.2 研究方法入院即询问和记录受试者的临床资料，包括年龄、性别、病程和有无基础病等，并收集患者的身高、体质量和血压等。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测 miRNA-375。检测前收集患者空腹 8h的静脉血 5ml，将收集的标本液置于离心机离心，条件为 3000r/min，半径为 11cm，共 10min，分离血清，加入 RNA 酶混匀，采用酚氯仿法进行裂解，提取总 RNA：95变性 20s，95变性 10s，60退火 20s，70延伸 10s，共 40 次循环。以 U6 为内参，用 2-Ct 法计算 miRNA-375。1.3 术后随访通过电话、微信和上门随访，死亡时间或随访结束时间为随访结束时间（2021 年 1 月 1 日）。1.4 统计学方法采用 SPSS18.0 统计软件包处理。计数资料采用2检验，计量资料采用 t 检验，多因素筛选采取 Lo-gistic 回归分析；P 0.05 表示组间具有统计学意义。2 结果2.1 两组患者体内的 miRNA 表达情况对比两组患者血清中 miRNA-375 含量存在统计学意义（P 0.05）。见表 1。2.2 脑胶质瘤患者不同因素患者血清 miRNA-375含量的比较WHO 分级、术前 KPS 评分以及术后 1 年预后患者血清 miRNA-375 含量比较差异有统计学意义（P 0.05）。见表 2。2.3 脑胶质瘤不同临床特征与 miRNA-375 含量的Logistics 回归分析Logistics 回归分析参数显示，术前 KPS 评分80 分、WHO 分级为、级以及术后 1 年死亡均为脑胶质瘤患者血清 miRNA-375 含量变化的影响因素。见表 3。3 讨论脑胶质瘤是常见的颅内原发肿瘤，临床中对其表 1 两组患者体内的 miRNA 表达情况对比组别Pn观察组80t 值对照组80miRNA-1050.7741.790.601.0031.690.55miRNA-138miRNA-3751.770.610.600.261.700.591.400.330.3853.3210.4120.035表 2 脑胶质瘤患者不同因素患者血清 miRNA-375 含量比较（xs）因素存活n69性别男54miRNA-3750.510.060.450.04t 值P0.1150.335-340.610.10-460.400.0480 分470.520.07WHO 分级5.2060.002术前 KPS 评分3.6860.02080 分330.400.03脑叶300.460.05脑干和小脑500.420.043cm430.430.03肿瘤位置0.1350.302肿瘤直径0.1240.3073cm370.450.0360 岁390.460.0560 岁410.430.04女260.460.04年龄0.1700.248术后 1 年预后3.5000.022死亡110.400.04刘强；miRNA-375 在脑胶质瘤患者血清中的变化情况及价值分析809新疆医学第 53 卷的治疗方法主要包括了手术、放射和化学治疗，其中，以手术治疗为主的综合治疗虽然在一定程度上改善了患者的临床症状7-9。但值得注意的是，在多数脑胶质瘤患者中，尤以高级别脑胶质瘤患者的死亡率居高10-11。有多项研究认为12-14，针对脑胶质瘤患者，需要结合有效的早期诊断再制定针对性的治疗方法。组织病理学检测是目前为止诊断脑胶质瘤最准确的诊断方法，但其需手术标本才能进行诊断，加之其为有创性操作，具备了一定的局限性15-17。故而，选择敏感性、准确性以及特异性高的诊断指标显得尤为重要。miRNA 是非编码 RNA 成员之一，其不仅不会被 RNA 酶降解，且具有一定的稳定性，即不会受到不同 PH 值、温度及反复冻融情况的影响18-19。多项研究认为20-23，miRNA 可以有效调控机体发育，并有效参与了器官形成和细胞增殖，甚至在肿瘤的发生发展中发挥了重要调节作用。以往有研究发现，miRNA-27a、miRNA-138 和 miRNA-490 等与胃癌、肝癌以及乳腺癌等疾病有着较强的关联度。还有研究发现，miRNA-105 在神经干细胞分化过程中发挥了重要的作用，其与脑胶质瘤的发生发展存了一定的关系。但在本研究中，笔者发现，脑胶质瘤患者体内的 miRNA-105 和 miRNA-138 的表达含量与其他组比较不具有统计学意义，这可能是由于上述研究纳入的脑胶质瘤患者与正常体检者的血清含量进行比较所致，而本研究对照组所选取的研究对象为因颅脑损伤行内减压术获取的正常脑组织，故而两组患者的部分结果存在一定的偏差。但本研究中两组患者的 miRNA-375 表达含量差异有统计学意义，亦可以说明 miRNA-375 参与了脑胶质瘤的发生发展。其中 miRNA-375 可调控基因转录，在多种恶性肿瘤中表达异常。有研究发现24，miRNA-375 在食管癌中呈低表达，与疾病的淋巴结转移和病理分期等存在一定的相关性。另外，还有研究25miRNA-375 在肝癌患者的血清中表达含量增加，其可以有效诊断肝癌，为患者的治疗和预后提供一定的辅助作用。本研究通过对收治脑胶质瘤患者的血清 miRNA-375 含量进行检测，发现其明显更低于因颅脑损伤行内减压术获取的正常脑组织，这在一定程度上说明了 miRNA-375 脑胶质瘤中表达异常，可能影响到患者的预后，其机制可能是因为脑胶质瘤细胞增殖和侵袭作用加强。笔者还通过 Logistics 回归分析发现，术前 KPS 评分80分、WHO 分级为、级以及术后 1 年死亡均为脑胶质瘤患者血清 miRNA-375 含量变化的影响因素，提示应该血清 miRNA-375 含量变化与脑胶质瘤患者的疾病进展及预后存在了密切关系。综上所述，脑胶质瘤患者血清中 miRNA-375含量下降，并与患者的术前 KPS 评分、WHO 分级以及预后情况相关，可作为诊断和评估患者预后的有效指标。参考文献1王宁，印弘，康晓伟，等.DCE-MRI 定量参数与脑胶质瘤 Ki-67 标记指数的相关性分析J.放射学实践，2019，34（4）：417-421.2Qian M,Wang S,Guo X,et al.Hypoxic glioma-derived exosomes deliver mi-croRNA-1246 to induce M2 macrophage polarization by targeting TERF2IP viathe STAT3 and NF-B pathwaysJ.Oncogene，2020，39（2）：428-442.3姚灵生，董艳霞.彩色多普勒超声联合 CT 诊断结节性甲状腺肿合并甲状腺癌的临床价值J.医学影像学杂志，2019，29（2）：323-326.4Lucero R,Zappulli V,Sammarco A,et al.Glioma-Derived miRNA-ContainingExtracellular Vesicles Induce Angiogenesis by Reprogramming Brain EndothelialCellsJ.Cell Reports，2020，30（7）：2065-2074.5申松波，刘强，胡胜.miRNA-150 在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤 U87细胞增殖和侵袭能力的影响J.山西医科大学学报，2018，49（12）：41-45.6李传芬，荆文，向冬生，等.MicroRNA-613 在人胶质瘤中的表达及其对增殖与转移的影响J.解剖学报，2018，49（5）：579-583.7白雪菲，高阳，牛广明，等.mTI-ASL 技术在鉴别脑胶质瘤术后复发与放射性损伤中的应用价值J.磁共振成像，2020，11（5）：332-335.8周建华，胡涛，陈宇，等.lncRNA NEAT1 在人脑胶质瘤的表达变化及其与病人预后的关系J.中国临床神经外科杂志，2019，24（3）：148-150.9王引言，方晟宇，李连旺，等.重复经颅磁刺激治疗脑胶质瘤术后运动功能障碍的临床分析（附五例报告）J.中华神经外科杂志，2020，36（5）：458-462.10李凯，李志强，赵宇航，等.脑胶质瘤病人血清 _2 微球蛋白含量的变化J.中国临床神经外科杂志，2019，24（3）：36-38.11吴俊，王潞，李俊.不同入路显微外科手术治疗脑胶质瘤的疗效观察研究J.中国全科医学，2020，23（1）：184-185.12龙亚丽，何巧，张冰，等.13N-NH3，11C-MET 及 18F-FDG PET/CT 显像在脑胶质瘤诊断与评估中的对比研究J.中华核医学与分子影像杂志，2020，40（3）：159-165.13马鹏举，李祥生，汲乾坤，等.柴胡皂甙 d 上调 CDKN1B 抑制脑胶质瘤细表 3 脑胶质瘤不同临床特征与 miRNA-375 含量的 Logistics 回归分析因素术后 1 年预后（参照组：存活）回归系数1.052术前 KPS 评分（参照组：80 分）1.550WHO 分级（参照组：-级）2.142OR95%CI4.7111.542-14.3998.5161.778-40.7742.8631.737-4.721标准误0.5010.5700.799WaldP4.6980.0016.1120.0013.3010.005（下转第 831 页）810第 7 期水平与 OSAS 患者的病情可能存在一定相关性，这与其他学者的研究结果类似10。为进一步探索该结果的真实性，文中选择了 HIF-1 和 VEGF 这两个已被证实同 OASA 病情密切相关的指标进行了求证，结果显示并发组患者 HIF-1 和 VEGF 水平显著高于 OSAS 患者，OSAS 患者明显高于对照组，这与其他学者的研究结果相一致11，文中为探究将氨基酸用于 OSAS 诊断治疗的价值，通过 Spearsman相关性分析的方式论证了氨基酸与 HIF-1、VEGF的相关性，结果显示苏氨酸同 HIF-1、VEGF 浓度均呈现正相关联系（r=0.781、0.449，P 0.05），色氨酸同 HIF-1、VEGF 浓度均呈现正相关联系（r=0.671、0.723，P 0.05），谷氨酸同 HIF-1、VEGF 浓度均呈现负相关联系（r=-0.443、-0.525，P0.05）。已有的国内外研究证实，OSAS 患者会出现VEGF 水平升高现象，其原因可能与 OSAS 会导致机体缺氧，进而使机体出现缺氧再氧合损伤，以及氧化应激失调等有关12。而 HIF-1 是调节氧稳态的重要转录调控因子，已被证实在缺血缺氧组织中会出现异常高表达态，该因子在机体内的积聚还会诱导VEGF 的表达，进一步加重机体血管损伤程度13。文中的相关性分析结果验证了氨基酸水平对OSAS 诊断预测的可行性，通过对入组患者开展临床干预及随访则发现，入组患者病情的转归也体现在了其血样氨基酸水平的变化上。本研究分析认为，氨基酸是各类疾病患者中变化较为明显的指标，也是人体内必不可少的元素，广泛参与了机体多种物质的合成，本研究的结果提示游离氨基酸水平与 OSAS 患者病情及转归都具有一定的关联，同时还与 OSAS 特异性诊断指标 HIF-1、VEGF 相关，其原因分析可能与氨基酸广泛参与了各类炎症因子合成有关。综上所述，外周血氨基酸水平同 OSAS 患者的病情呈现一定的相关性，可以考虑将其作为 OSAS诊断治疗的重要依据之一。参考文献1魏妍荣.影响 OSA 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页）于增洁，等；外周血氨基酸水平在阻塞性睡眠呼吸暂停患者中的表达及意义分析胞增殖的机制研究J.中医药信息，2019，36（1）：5-10.14董发达，马晓虎.MicroRNA 相关基因 Dicer rs1057035 多态性与脑胶质瘤的相关性研究J.国际神经病学神经外科学杂志，2018，45（2）：151-154.15涂勤，罗才奎，余小祥，等.MicroRNA-664 对人脑胶质瘤细胞增殖，迁移和侵袭能力的影响J.临床和实验医学杂志，2019，18（17）：1827-1830.16单新平，宋丽影，李玲.夏枯草颗粒联合左甲状腺素治疗结节性甲状腺肿的临床研究J.现代药物与临床，2019，34（12）：215-218.17周梦茹，车振勇，高重阳，等.miRNA-128，miRNA-101 在脑胶质瘤中的表达及意义J.癌症进展，2020，18（19）：84-87.18刘健羽，王维平，李昂.miRNA-143-3p 与 Ki-67 在人脑胶质瘤中表达及相关性J.临床军医杂志，2019，47（11）：68-70.19徐阳，袁凡恩，孙前，等.miRNA 在胶质母细胞瘤血管生成和侵袭的作用J.中国微侵袭神经外科杂志，2019，24（7）：334-336.20韩晓涛，周琦，郑洪波，等.血清 miRNA-105 与脑胶质瘤患者临床特征及预后的关系J.癌症进展，2019，17（24）：2925-2926.21段军伟，唐晓平，张涛，等.上调 microRNA-34a 抑制胶质瘤细胞的增殖及侵袭J.安徽医学，2018，5（1）：6-9.22曾昭穆，温稀超，张雨豪，等.外泌体介导 miRNAs 在脑胶质瘤治疗中的作用与应用J.中国组织工程研究，2020，24（25）：143-150.23张力强，张田，刘艳，等.丙泊酚通过上调 microRNA-218 的表达抑制人胶质瘤细胞 U251 的增殖，侵袭，迁移和凋亡J.临床和实验医学杂志，2019，18（23）：2518-2521.24姜波，文进，刘全新，等.血清 miRNA let-7e 和 miRNA-375 表达在食管腺癌早期诊断中的临床意义J.慢性病学杂志，2018，19（3）：20-24.25郭云泉，岳娜，姬文莉，等.肝细胞癌中连接蛋白 43 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