医院消毒灭菌的效果监测-PPT课件.ppt

医院消毒灭菌的效果监测医院消毒灭菌的效果监测 一、前言一、前言：1.1.医医院院消消毒毒是是预预防防医医院院内内感感染的重要措施之一染的重要措施之一 2.2.消毒效果的监测是评价消毒效果的监测是评价 3.3.消毒设备运转是否正常消毒设备运转是否正常 4.4.消毒药剂是否有效消毒药剂是否有效 5.5.消毒方法是否合理消毒方法是否合理 6.6.消消毒毒效效果果是是否否达达标标的的唯唯一一手段手段医院消毒效果监测时需遵循以下原则医院消毒效果监测时需遵循以下原则 监监测测人人员员需需经经过过专专业业培培训，掌握一定的消毒知识；训，掌握一定的消毒知识；熟熟悉悉消消毒毒设设备备和和药药剂剂性性能能;具备熟练的检验技能具备熟练的检验技能;选选择择合合理理的的采采样样时时间间(消毒后、使用前消毒后、使用前););遵循严格的无菌操作。遵循严格的无菌操作。二、热力灭菌效果的监测方法二、热力灭菌效果的监测方法（一（一）压力蒸汽灭菌效果监测方法压力蒸汽灭菌效果监测方法 1 1、化学监测法、化学监测法:化学指示卡化学指示卡(管管)监测方法监测方法 既既能能指指示示蒸蒸汽汽温温度度，又又能能指指示示温度持续时间温度持续时间 化化学学指指示示管管(卡卡)放放入入大大包包和和难难以以消毒部位消毒部位的的物品包中央物品包中央 （旧旧版版消消毒毒技技术术规规范范是是放放入入每每一一待灭菌的物品包中央）待灭菌的物品包中央）化学指示胶带监测法：化学指示胶带监测法：将将化化学学指指示示胶胶带带粘粘贴贴于每一待灭菌物品包外于每一待灭菌物品包外BD试验试验 对预真空和脉动真空压力蒸汽灭对预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌，每日进行一次菌，每日进行一次B-D试验。试验。设计原理设计原理 a.使实验包成为灭菌器内残留空气使实验包成为灭菌器内残留空气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气布料易吸附、布料易吸附、“捕捉捕捉”残留空气。残留空气。b.真空测试图上的化学试剂对残留真空测试图上的化学试剂对残留空气具有敏感性。空气具有敏感性。BD试验方法试验方法 将测试图置于实验包中将测试图置于实验包中间位置；间位置；然后，将实验包放于灭然后，将实验包放于灭菌器室内排气口处，关闭柜门；菌器室内排气口处，关闭柜门；进行进行13451345分钟灭菌分钟灭菌处理完毕，打开柜门，观察测试处理完毕，打开柜门，观察测试结果。结果。BD实验包的制备实验包的制备 实验包由实验包由46504650cm8090cm纯棉布巾组成，布巾先横折为三层，再纯棉布巾组成，布巾先横折为三层，再纵折成六层。将折好的布巾一条摞一条纵折成六层。将折好的布巾一条摞一条至至2525cm高度。摞放时，各层布巾按折叠高度。摞放时，各层布巾按折叠侧左右交替摆好，以使两侧厚度相等。侧左右交替摆好，以使两侧厚度相等。布巾摆好后，将真空测试图夹放于中央布巾摆好后，将真空测试图夹放于中央布巾之间，然后用布包巾包好，外面用布巾之间，然后用布包巾包好，外面用化学指示胶带固定好，成为一个实验包。化学指示胶带固定好，成为一个实验包。整个实验包的大小高约整个实验包的大小高约2525cm，宽约宽约2323cm，长约长约2727cm，重约重约5 5kg。BD实验条件 实验规定在实验规定在134134蒸汽条蒸汽条件下，使用件下，使用3.53.5分钟观察结果，最长分钟观察结果，最长不超不超4 4分钟。分钟。测试图必须夹放于布包测试图必须夹放于布包的中央层位置。的中央层位置。实验包放在灭菌器底层，实验包放在灭菌器底层，靠近柜门与排气口处。靠近柜门与排气口处。实验在每天第一次灭菌实验在每天第一次灭菌前空锅进行。前空锅进行。结果判断结果判断结果判断结果判断合格：合格：测试图变黑且均匀，即中央部测试图变黑且均匀，即中央部分和边缘部分颜色一致，表示灭菌分和边缘部分颜色一致，表示灭菌器抽真空系统良好。器抽真空系统良好。不合格：不合格：测试图变色不均匀，通常中测试图变色不均匀，通常中央比边缘部分颜色浅，表示空气排央比边缘部分颜色浅，表示空气排除不彻底，须检查、修理后使用除不彻底，须检查、修理后使用.B-D测试失败原因分析测试失败原因分析真空泵效果下降真空泵效果下降自控系统失灵自控系统失灵,抽气时间缩短抽气时间缩短柜室密封性能下降柜室密封性能下降,不能维持规定的负压不能维持规定的负压空气起始温度低空气起始温度低,重力作用明显重力作用明显送入蒸汽动能偏高送入蒸汽动能偏高,将过多的空气挤入试验包将过多的空气挤入试验包试验包与柜室容量相比过小试验包与柜室容量相比过小,产生小装量效应产生小装量效应B-D试验未按规定进行试验未按规定进行 2 2、生物监测法、生物监测法 指指示示菌菌株株：指指示示菌菌株株为为耐耐热热的的嗜嗜热热脂脂肪肪杆杆菌菌芽芽孢孢(ATCC ATCC 79537953或或SSIK SSIK 3131株株)，菌菌 片片 含含 菌菌 量量 为为 5.5.O Ol0l05 5cfu/cfu/片片5.5.O Ol0l06 6cfucfu片片，在在121121O.5O.5条条件件下下，D D值值（杀杀灭灭90%90%微微生生物物所所需需时时间间）为为 1.31.3min1.9minmin1.9min，杀杀 灭灭 时时 间间(KTKT值值)19)19minmin，存存活活时时间间(STST值值)为为3.93.9minmin。培培养养基基：试试验验用用培培养养基基为为溴溴甲甲酚酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基。紫葡萄糖蛋白胨水培养基。检测方法检测方法 将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。心部位。在下排气压力蒸汽灭菌柜室内，排在下排气压力蒸汽灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包气口上方放置一个标准试验包(由由3 3件平件平纹长袖手术衣，纹长袖手术衣，4 4块小手术巾，块小手术巾，2 2块中手块中手术巾，术巾，1 1块大毛巾，块大毛巾，3030块块lOcmlOcmlOcm 8lOcm 8层纱布敷料包裹成层纱布敷料包裹成(25(25cmcm30cm30cm30cm30cm大小大小)。预真空和脉动真空压力蒸汽预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌器 预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气门上方放置一器灭菌柜室内，排气门上方放置一个标准测试包个标准测试包(由由16条全棉手术巾条全棉手术巾4lcm66cm，将每条手术巾的长边先将每条手术巾的长边先折成折成3层，短边折成层，短边折成2层然后叠放，层然后叠放，作成作成23cm23cml5cm大小的测试包大小的测试包)。手提压力蒸汽灭菌器手提压力蒸汽灭菌器 手手提提压压力力蒸蒸汽汽灭灭菌菌器器用用通通气气贮贮物物盒盒(22(22cml3cm6cm)代代替替标标准准试试验验包包，盒盒内内盛盛满满中中试试管管，指指示示菌菌片片放放于于中中心心部部位位的的两两只只灭灭菌菌试试管管内内(试试管管口口用用灭灭菌菌牛牛皮皮纸纸包包封封)，将将贮贮物物盒盒平平放放于于手手提提压压力力蒸蒸汽汽灭灭菌器底部。菌器底部。检测方法检测方法 经经一一个个灭灭菌菌周周期期后后，在在无无菌菌条条件件下下，取取出出标标准准试试验验包包或或通通气气贮贮物物盒盒中中的的指指示示菌菌片片，投投入入溴溴甲甲酚酚紫紫葡葡萄萄糖糖蛋蛋白白胨胨水水培培养养基基中中，经经565611培培养养7 7d(d(自自含含式式生生物物指指示示物物按按说说明明书书执执行行)，观观察察培培养养基基颜颜色色变变化化。检检测测时时设设阴阴性性对对照照和阳性对照。和阳性对照。快速快速检测(24小小时出出结果果)结果判定结果判定 每每个个指指示示菌菌片片接接种种的的溴溴甲甲酚酚紫紫蛋蛋白白胨胨水水培培养养基基都都不不变变色色，判判定定为为灭灭菌菌合合格格：指指示示菌菌片片之之一一接接种种的的溴溴甲甲酚酚紫紫蛋蛋白白胨胨水水培培养养基基，由由紫紫色色变变为黄色时，则灭菌过程不合格。为黄色时，则灭菌过程不合格。注注意意事事项项：监监测测所所用用菌菌片片须须经经卫卫生生部部认认可可，并并在在有有效效期期内内使使用用，生物指示物监测应生物指示物监测应1 1月月1 1次。次。、干热灭菌效果监测方法、干热灭菌效果监测方法 1 1、化学检测法、化学检测法 检测方法：检测方法：将既能指示温度又能将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂指示温度持续时间的化学指示剂3 3个个5 5个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一个灭菌菌器最难达到灭菌的部位。经一个灭菌周期后，取出化学指示剂，据其颜色及周期后，取出化学指示剂，据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。性状的改变判断是否达到灭菌条件。结果判定结果判定 检测时，所放置的指检测时，所放置的指示管的颜色及性状均变至规定的示管的颜色及性状均变至规定的条件，则判为达到灭菌条件；若条件，则判为达到灭菌条件；若其中之一未达到规定的条件，则其中之一未达到规定的条件，则判为未达到灭菌条件。判为未达到灭菌条件。2 2、物理检测法：、物理检测法：(热电偶检测法热电偶检测法)检检测测方方法法：检检测测时时，将将多多点点温温度度检检测测仪仪的的多多个个探探头头分分别别放放于于灭灭菌菌器器各各层层内内、中中、外外各各点点。关关好好柜柜门门，将将导导线线引引出出，由由记记录录仪仪中中观观察察温温度度上上升升与与持持续续时时间。间。结果判定：结果判定：若所示温度若所示温度(曲线曲线)达达到顶置温度，则灭菌温度合格。到顶置温度，则灭菌温度合格。生物生物检测法法 指指示示菌菌株株：枯枯草草杆杆菌菌黑黑色色变变种种芽芽孢孢(ATCC9372)ATCC9372)，菌菌 片片 含含 菌菌 量量 为为5.05.010105 5cfu/cfu/片片5.05.010106 6cfu/cfu/片片。其其抗抗力要求同上。力要求同上。检测方法：检测方法：将枯草杆菌芽孢菌片将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌中试管内分别装入灭菌中试管内(1(1片片/管管)。灭菌。灭菌器与每层门把手对角线内，外角处放置器与每层门把手对角线内，外角处放置2 2个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至降至8080时，加盖试管帽后取出试管。时，加盖试管帽后取出试管。在在无无菌菌条条件件下下 ，加加入入普普通通营营养养肉肉汤汤培培养养基基(5(5mlml管管)，以以363611培培养养4848h h，观观察察初初步步结果，无菌生长管继续培养至第七日。结果，无菌生长管继续培养至第七日。结结果果判判定定:若若每每个个指指示示菌菌片片接接种种的的肉肉汤汤管管均均澄澄清清，判判为为灭灭菌菌合合格格，若若指指示示菌菌片片之之一一接种的肉汤管混浊，判为不合格。接种的肉汤管混浊，判为不合格。对难以判定的肉汤管，取对难以判定的肉汤管，取o o1ml1ml接种于营养接种于营养琼脂甲板，用灭菌琼脂甲板，用灭菌L L棒涂匀，放棒涂匀，放363611培培养养4848h h，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭菌合格。菌合格。三、环氧乙烷三、环氧乙烷(EO)灭菌效果监测灭菌效果监测 灭菌效果监测灭菌效果监测 每次每次灭菌均应进行程序监测灭菌均应进行程序监测 每每个个灭灭菌菌物物品品的的外外包包装装应应粘粘贴贴包包外外化化学学指指示示胶胶带带，作作为为灭灭菌菌过过程程的的标标志志；包包内内放放置置化化学学指指示示卡卡，作作为为灭灭菌菌效效果的参考。果的参考。每月每月应做生物监测，移植物必应做生物监测，移植物必须等生物监测结果为阴性时方可使用。须等生物监测结果为阴性时方可使用。生物指示物监测法生物指示物监测法 一一般般每每月月用用生生物物指指示示物物监监测测一一次次。生生物物指指示示物物用用枯枯草草杆杆菌菌黑黑色色变变种种芽芽孢孢(ATCC9372)ATCC9372)，抗抗 力力 要要 求求 为为：菌菌 量量 在在 5 510105 5cfucfu 片片5510106 6cfucfu片片，在在环环氧氧乙乙烷烷剂剂量量为为600600mgmgL L30mg/L30mg/L，作作用用温温度度为为545422，相相对对湿湿度度为为60601010条条件件下下，其其杀杀灭灭9090该该微微生生物物 的的 D D值值 为为 2.62.6minmin 5.8min5.8min，存存 活活 时时 间间 应应7.87.8minmin，死亡时间应死亡时间应5858minmin。生物指示剂的要求生物指示剂的要求 菌菌量量为为5 510103 3cfucfu片片5510104 4cfucfu片片。通常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜：通常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜：灭灭菌菌器器柜柜室室可可用用体体积积小小于于5 5m3时时，至至少放置少放置1010个菌片；个菌片；灭灭菌菌器器柜柜室室可可用用体体积积为为5 5m3至至1010m3时时，每增加每增加1 1m3，增加增加1 1个菌片；个菌片；灭灭菌菌器器柜柜室室可可用用体体积积大大于于1010m3时时，每增加每增加2 2m3，增加增加1 1个菌片。个菌片。生生物物指指示示物物应应放放在在那那些些在在性性能能鉴鉴定定时时发发现现是是最最难灭菌的部位，并均匀分布于整个灭菌物品中。难灭菌的部位，并均匀分布于整个灭菌物品中。要求：要求：每每次次灭灭菌菌都都应应进进行行灭灭菌菌过过程程监监测。测。检检测测所所用用化化学学和和微微生生物物指指示示物物必必须须经经卫卫生生部部批批准准，并并在在有有效效期期内内使用。使用。四、紫外线消毒效果的监测四、紫外线消毒效果的监测 紫紫外外线线灯灯管管辐辐照照度度值值的的测测定定 1 1、紫外线辐照计测定法：、紫外线辐照计测定法：开灯开灯5 5min后，将测定波长为后，将测定波长为253.7253.7nm的紫外线辐照计探头置于的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下，待仪表稳定后，被检紫外线灯下，待仪表稳定后，读数。读数。2 2、紫外线强度照射指示卡监测法、紫外线强度照射指示卡监测法 开开启启紫紫外外线线灯灯5 5min后后，将将指指示示卡卡置置紫紫外外灯灯下下垂垂直直距距离离lm处处，有有图图案案一一面面朝朝上上，照照射射lmin(紫紫外外线线照照射射后后，图图案案正正中中光光敏敏色色块块由由乳乳白白色色变变成成不不同同程程度度的的淡淡紫紫色色)，观观察察指指示示卡卡色色块块的的颜颜色色，将将其其与与标标准准色色块块比较，读出照射强度。比较，读出照射强度。3 3、结果判定、结果判定 普普通通3030w直直管管型型紫紫外外线线灯灯，新新灯灯辐辐照照强强度度9090W/cm2为为合合格格；使使用用中中紫紫外外线线灯灯辐辐照照强强度度7070W/cm2为为合合格格；3030W高高 强强 度度 紫紫 外外 线线 新新 灯灯 的的 辐辐 照照 强强 度度180180W/cm2为合格。为合格。注注意意：测测定定时时电电压压220220V5V，温温度度20202525，相相对对湿湿度度60%60%，紫紫外外线线辐辐照照计计必须检定。指示卡应获得卫生许可批件。必须检定。指示卡应获得卫生许可批件。五、医疗器械灭菌效果的监测五、医疗器械灭菌效果的监测 无无菌菌检检验验是是检检查查无无菌菌物物品品是是否否无菌的一种方法。无菌的一种方法。注意：注意：1 1、无菌检验应在洁净度为无菌检验应在洁净度为100100级单向流空气区域内进行，应严格遵守级单向流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染；对单向流无菌操作，避免微生物污染；对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。验证。2 2、采样时间在灭菌后，保存采样时间在灭菌后，保存有效期内。有效期内。无菌检验前准备无菌检验前准备 洗洗脱脱液液与与培培养养基基无无菌菌性性试试验验：无无菌菌试试验验前前3 3d，于于需需-厌厌养养培培养养基基与与霉霉菌菌培培养养基基内内各各接接种种lml洗洗脱脱液液，分分别别置置30353035与与20202525培培养养7272h，应应无无菌菌生长。生长。小件医疗器械的采样小件医疗器械的采样 取缝合针、针头、刀取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械片等小件医疗器械5 5件直接浸入件直接浸入6 6管需管需厌氧培养管厌氧培养管(其中一管其中一管作阳性对照作阳性对照)与与4 4管霉菌培养管。管霉菌培养管。培养基用量为培养基用量为1515ml/管。管。注射器采样注射器采样 取取5 5付注射器，在付注射器，在5 5ml洗脱液中洗脱液中反复抽吸反复抽吸5 5次，洗下管内细菌，混和后接次，洗下管内细菌，混和后接种需种需-厌养菌培养管厌养菌培养管(共共6 6管，其中管，其中1 1管作管作阳性对照阳性对照)与霉菌培养管与霉菌培养管(共共4 4管管)。接种。接种量：量：lml注射器为注射器为0.50.5ml，2ml注射器为注射器为lml，5ml10ml注射器为注射器为2 2ml，20ml50ml注注射器为射器为5 5ml。培养基用量：培养基用量：接种量为接种量为2 2ml以下以下为为1515ml/管，接种量管，接种量5 5ml为为4040ml/管。管。大件医疗器械的采样大件医疗器械的采样 手手术术钳钳、镊镊子子等等大大件件医医疗疗器器械械取取2 2件件用用沾沾有有无无菌菌洗洗脱脱液液的的棉棉拭拭子子反反复复涂涂抹抹采采样样，将将棉棉拭拭子子投投入入5 5ml无无菌菌洗洗脱脱液液中中，将将采采样样液液混混匀匀，接接种种于于需需厌厌氧氧培培养养管管(共共6 6管管，其其中中1 1管管作作阳阳性性对对照照)与与霉霉菌菌培培养养基基(共共4 4管管)。接接种种量量为为1 1ml/管管，培培养养基基用用量量为为1515ml/管。管。培养时间培养时间 将需将需厌氧培养管以及阳性与厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于阴性对照管均于30303535培养培养5 5d，霉霉菌培养管与阴性对照管于菌培养管与阴性对照管于20202525培培养养7 7d，培养期间逐日检查是否有菌生长。培养期间逐日检查是否有菌生长。如加入供试品后培养基出现混如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观判断时，浊或沉淀，经培养后不能从外观判断时，可取培养液转种入另一支相同的培养基可取培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养中或斜面培养基上，培养4848h72h后观后观察。察。3 3、注意事项、注意事项 （1）送送检检时时间间不不得得超超过过6 6h，若若样样品品保保存存于于0044，则则不不得得超过超过2424h。（2）被被采采样样本本表表面面积积1003030m2，设设4 4角角及及中中央央5 5点点，4 4角角的的布布点点部部位位距距墙墙壁壁lm处。处。2 2、采采样样方方法法：将将普普通通营营养养琼琼脂脂平平板板（直直径径为为9 9cm）放放在在室室内内各各采采样样点点处处，采采样样高高度度为为距距地地面面1.51.5m采采样样时时将将平平板板盖盖打打开开，扣扣放放于于平平板板旁旁，暴暴露露5 5min，盖好立即送检。盖好立即送检。平板暴露法结果计算公式平板暴露法结果计算公式 细细菌菌总总数数(cfu/m3)=50000N/(AT)式中式中A为平板面积为平板面积(cm2);T为平板暴为平板暴露时间露时间(min)；N为平均菌落数为平均菌落数(cfu)。卫生学标准卫生学标准 I类类 区区 域域：细细 菌菌 总总 数数 1010cfu/m3(或或0.20.2cfu/平平板板)，未未检检出出金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、溶血性链球菌为消毒合格；溶血性链球菌为消毒合格；类类区区域域：细细菌菌总总数数200200cfu/m3(或或4 4cfu平平板板)，未未检检出出金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌、溶血性链球菌为消毒合格：菌、溶血性链球菌为消毒合格：类类区区域域：细细菌菌总总数数500500cfu/m3(或或l0cfu平平板板)，未未检检出出金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、溶血性链球菌为消毒合格。溶血性链球菌为消毒合格。注意事项注意事项 1 1、在消毒处理后、操作前进在消毒处理后、操作前进行采样。行采样。2 2、采样前，关好门、窗，在采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止无人走动的情况下，静止1010min进行采样。进行采样。九、消毒液的监测九、消毒液的监测 有效氯含量测定有效氯含量测定,可以用试纸法测定。可以用试纸法测定。使用方法：使用方法：1 1、消毒剂溶液有效成分浓度消毒剂溶液有效成分浓度在测定范围内时，取试纸浸于消毒液中，在测定范围内时，取试纸浸于消毒液中，即刻取出，半分钟内在自然光下与标准即刻取出，半分钟内在自然光下与标准色块比较，读值。色块比较，读值。2 2、消毒液浓度高于试纸测定消毒液浓度高于试纸测定范围时，可先稀释消毒剂，再测定。范围时，可先稀释消毒剂，再测定。注意：试纸浸湿后时间超过注意：试纸浸湿后时间超过1 1分钟，颜分钟，颜色逐渐消退，结果不准确。色逐渐消退，结果不准确。戊二醛浓度测定戊二醛浓度测定 试纸法：试纸法：1 1、从小瓶中取出一条；从小瓶中取出一条；2 2、将指示色将指示色块完全浸没于戊二完全浸没于戊二醛溶液，溶液，一秒内取出；一秒内取出；3 3、沾下瓶盖上的沾下瓶盖上的纸垫，去除多余的液体；，去除多余的液体；4 4、横置于瓶盖上，注意不要将色横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝面朝下以免受到下以免受到污染；染；5 5、等候等候5858分分钟判判读结果。果。使用中消毒液染菌量测定使用中消毒液染菌量测定 1 1、涂涂抹抹法法：用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取消消毒毒液液1.01.0ml，加加入入9.09.0ml含含有有相相应应中中和和剂剂的的采采样样管管内内混混匀匀，用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取上上述述溶溶液液0.20.2ml，滴滴于于干干燥燥普普通通琼琼脂脂平平板板，每每份份样样品品同同时时做做2 2个个平平行行样样，一一平平板板置置2020培培养养7 7d，观观察察霉霉菌菌生生长长情情况况，另另一一个个平平板板置置3535温温箱箱培培养养7272h记记数数菌菌落落数数，同时按十五的原则检测致病菌。同时按十五的原则检测致病菌。消消毒毒液液染染菌菌量量(cfu/ml)=每每个个平平板板上的菌落数上的菌落数5050 2 2、倾注法、倾注法 用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取消消毒毒液液1.1.Oml，加加入入到到9.09.0ml含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水采采样样管管中中混混匀匀，分分别别取取0.50.5ml放放入入2 2只只灭灭菌菌平平皿皿内内，加加入入已已熔熔化化的的45484548的的营营养养琼琼脂脂1515ml18ml，边边倾倾注注边边摇摇匀匀，待待琼琼脂脂凝凝固固，一一平平板板置置2020培培养养7 7d，观观察察霉霉菌菌生生长长情情况况；另另一一个个平平板板置置361361培培养养7272h，计计数数菌菌落落数数，同同时时按按十十五五的的原原则则检测致病菌。检测致病菌。消消毒毒液液染染菌菌量量(cfu/ml)=每每个个平平板上的菌落数板上的菌落数2020注意事项注意事项 消消 毒毒 液液 染染 菌菌 量量100100cfu/ml，并并未未检检出出致致病病菌菌为合格。为合格。采样后采样后1 1h内检测。内检测。十、餐具消毒效果监测十、餐具消毒效果监测 采采样样时时间间：在在消消毒毒后后、使用前进行采样。使用前进行采样。采样方法：采样方法：将将2.02.0cm2.5cm无菌滤纸片于无菌洗无菌滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均匀，贴在食具表面，脱液中浸湿均匀，贴在食具表面，经经5 5min取下，每取下，每1010张滤纸合为一份张滤纸合为一份样本样本(相当于相当于5050cm2采样面积采样面积)，投入，投入含含5050m1生理盐水的生理盐水的lOOml三角烧瓶三角烧瓶中，于中，于4 4h内送检。内送检。注意事项注意事项 纺纺 织织 品品：细细 菌菌 总总 数数55cfu/cm2，大肠菌群末检出。大肠菌群末检出。餐具若用化学消毒剂餐具若用化学消毒剂消毒，采样液中应加入相应中消毒，采样液中应加入相应中和剂。和剂。十一、卫生洁具消毒效果监测十一、卫生洁具消毒效果监测 采采样样时时间间：在在消消毒毒后后、使使用用前进行采样。前进行采样。采采样样方方法法：便便器器、尿尿壶壶等等容容器器可可用用沾沾有有含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水的的棉棉拭拭子子，反反复复涂涂擦擦容容器器的的内内表表面面及及内内口口处处，剪剪占占手手接接触触部部位位后后，将将棉棉拭拭子子投投入入5 5ml无菌生理盐水试管中，立即送检。无菌生理盐水试管中，立即送检。拖把、抹布等物品可用无菌的方法拖把、抹布等物品可用无菌的方法剪取剪取lcm3cm，直接投入直接投入5 5ml含相应中和含相应中和剂的无菌生理盐水中，立即送检。剂的无菌生理盐水中，立即送检。结果判定结果判定 未检出致病菌为消毒合格。未检出致病菌为消毒合格。十二、内镜消毒灭菌效果的监测十二、内镜消毒灭菌效果的监测 采采样样时时间间：在在消消毒毒灭灭菌菌后、使用前进行采样。后、使用前进行采样。采采样样方方法法：用用沾沾有有含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水的的棉棉拭拭子子，在在被被检检内内镜镜上上从从镜镜头头至至镜镜身身反反复复涂涂檫檫，剪剪去去手手接接触触部部位位，将将棉棉拭拭子子投投入入到到5 5ml含含相相应应中中和和剂剂的的生生理理盐盐水采样管中，立即送检。水采样管中，立即送检。结果判定结果判定 灭灭菌菌后后内内镜镜，未未检检出出任何微生物为合格。任何微生物为合格。消毒后的内镜，细菌消毒后的内镜，细菌总数总数2020cfu件，并未检出致病件，并未检出致病菌为合格。菌为合格。十三、医用污物消毒效果监测十三、医用污物消毒效果监测 采采样样时时间间：在在消消毒毒后后、清清运运前前进进行行采样。采样。焚焚化化消消毒毒效效果果监监测测：可可焚焚化化物物品品的的消消毒毒效效果果监监测测，以以污污物物燃燃烧烧充充分分、彻彻底底为为标标准准进行直接检查。进行直接检查。碱碱化化消消毒毒效效果果监监测测：以以熟熟石石灰灰为为消消毒毒剂剂的的碱碱化化消消毒毒，日日常常监监测测以以pH为为指指标标。消消毒毒后后3030min检检查查pH值值，若若pH=12，继继续续作作用用2424h为为消毒合格。消毒合格。氯化消毒效果监测：氯化消毒效果监测：氯化消毒效果氯化消毒效果的日常监测，以余氯量为指标，在消毒接触时的日常监测，以余氯量为指标，在消毒接触时间间2 2h后测定余氯量，余氯量后测定余氯量，余氯量200200mg/L，为消毒为消毒合格。合格。（五）其它消毒因子消毒效果监测（五）其它消毒因子消毒效果监测 1 1、采采样样方方法法：取取1 1ml消消毒毒后后待待检检污污物物(固固体体称称取取2 2g)，置置于于5 5ml含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水的的采采样样管管中中，立即送立即送2 2、检检测测方方法法：将将采采样样管管在在混混匀匀器器上上振振荡荡2020s或或用用力力振振打打8080次次，取取采采样样液液按十五原则检测致病菌。按十五原则检测致病菌。十四、织物消毒效果监测十四、织物消毒效果监测 采样时间：采样时间：在消毒烘干后进行采样。在消毒烘干后进行采样。采样方法：采样方法：按七的原则执行。按七的原则执行。检测方法：检测方法：按十五的原则检测致病菌。按十五的原则检测致病菌。结果判定：结果判定：末检出致病菌为消毒合格。末检出致病菌为消毒合格。十五、致病菌的检测 检测原则检测原则:致病菌的检测依据污染致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。情况进行相应指标的检测。谢 谢 再见