艾滋病及HIV的检测培训.ppt
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1、艾滋病及艾滋病及HIV的检测的检测 (北京市疾北京市疾病预防控制中病预防控制中心心)田桂英田桂英一、一、HIV的基本生物学特性的基本生物学特性属于逆转录病毒科慢病毒属。属于逆转录病毒科慢病毒属。HIV在病毒分类中的定位是慢病毒属中的人类免疫在病毒分类中的定位是慢病毒属中的人类免疫缺陷病毒组缺陷病毒组HIV分为分为HIV-1和和HIV-2二个型别。二个型别。HIV-1共有共有M组(主要亚型组)、组(主要亚型组)、O亚型组和亚型组和N亚型亚型组。组。M组又分为组又分为A、B、C、D、F1、F2、G、H、J、K共共11个非重组亚型,另外近年来发现多个流行重组个非重组亚型,另外近年来发现多个流行重组型
2、(型(circulating recombinant form,CRFs),包括,包括CRF01-CRF14。HIV 的的 分分 群和亚型群和亚型A(A1 A 2)BCDF1F2GHJKCRFCRF01-AECRF02-AGCRF03-ABCRF04-CPXCRF05-DFCRF06-CPXCRF07-BCCRF08-BCCRF09-CPXCRF10-CDCRF11-CPXCRF12-BFCRF13-CPXCRF14-BGABCDEFGHIV-1M组组N组组O组(组(O1-O3)HIV-2HIV病毒体呈球形,直径约病毒体呈球形,直径约100120nm。电镜下成熟的电镜下成熟的HIV-1呈现一致
3、密的圆柱状核心和呈现一致密的圆柱状核心和一个病毒包膜。一个病毒包膜。病毒核心由病毒病毒核心由病毒RNA、核心结构蛋白和病毒复核心结构蛋白和病毒复制所必须的酶类组成。制所必须的酶类组成。HIV的的RNA为两条相同拷贝(完全同源)的正股为两条相同拷贝(完全同源)的正股RNA链。链。HIV对对环环境境中中物物理理因因素素和和化化学学因因素素抵抵抗抗力力均均较较弱弱,比比HBV的抵抗力低得多。的抵抗力低得多。对对HBV有效的消毒和灭活方法均适用于有效的消毒和灭活方法均适用于HIV。HIV对对热热很很敏敏感感,对对低低温温耐耐受受性性强强于于高高温温。因因此此,可以用高温灭活病毒,在低温条件下保存病毒。
4、可以用高温灭活病毒,在低温条件下保存病毒。在在室室温温(2227)液液体体环环境境下下HIV可可存存活活15天天以以上上;经经56处处理理30min可可使使HIV在在体体外外对对人人的的T淋淋巴巴细细胞胞失失去去感感染染性性,但但不不能能完完全全灭灭活活血血清清中中的的HIV;经经过过60 3小小时时或或80 30min作作用用后后不不能能检出感染性病毒。检出感染性病毒。HIV耐碱不耐酸耐碱不耐酸HIV对化学因素很敏感对化学因素很敏感室室温温中中0.5%次次氯氯酸酸钠钠或或75%酒酒精精只只需需1min即不能检出即不能检出RT酶活性;酶活性;0.2%次次氯氯酸酸钠钠、0.1%家家用用漂漂白白粉
5、粉、0.1%戊二醛等戊二醛等5min即可灭活即可灭活HIV;30%酒酒精精溶溶液液5min、20%酒酒精精溶溶液液10min可灭活可灭活HIV。对对紫紫外外线线不不敏敏感感,离离开开人人体体可可存存活活数数小小时至数天。时至数天。二、艾滋病的传播途径二、艾滋病的传播途径 艾滋病毒存在于艾滋病感染者和艾滋病人的血液、艾滋病毒存在于艾滋病感染者和艾滋病人的血液、精液、阴道宫颈分泌物、乳汁、唾液、泪液、尿精液、阴道宫颈分泌物、乳汁、唾液、泪液、尿液、脑脊液、汗液、粪便、耳分泌液、支气管分泌液、脑脊液、汗液、粪便、耳分泌液、支气管分泌液等人体的分泌液中,其中以液等人体的分泌液中,其中以血液、精液、阴道
6、血液、精液、阴道宫颈分泌液宫颈分泌液艾滋病毒的含量最高,筑成了艾滋病传艾滋病毒的含量最高,筑成了艾滋病传染性很强的物质基础。染性很强的物质基础。艾滋病流行至今二十多年的科学研究证明,艾滋病艾滋病流行至今二十多年的科学研究证明,艾滋病在人群中的传播只有三条在人群中的传播只有三条路路:性途径、血液途:性途径、血液途径和母婴传播。径和母婴传播。母亲是怎样将艾滋病病毒传给自己的母亲是怎样将艾滋病病毒传给自己的孩子的?孩子的?母婴传播一般指感染艾滋病毒的母亲传给其胎儿或母婴传播一般指感染艾滋病毒的母亲传给其胎儿或婴儿的传播方式。这种传播可能发生在怀孕、分娩婴儿的传播方式。这种传播可能发生在怀孕、分娩和哺
7、乳期。和哺乳期。研究报告指出,研究报告指出,HIV感染母亲所产的新生儿有感染母亲所产的新生儿有1160可能发生感染。可能发生感染。母婴传播有以下几个阶段:母婴传播有以下几个阶段:(1)宫内感染:是胎儿生前在母亲子宫中通过损)宫内感染:是胎儿生前在母亲子宫中通过损伤胎盘进入胎儿体内,母亲的胎盘、羊水中存在大伤胎盘进入胎儿体内,母亲的胎盘、羊水中存在大量的艾滋病病毒,可直接从胎儿娇嫩的、未发育完量的艾滋病病毒,可直接从胎儿娇嫩的、未发育完全的皮肤中进入胎儿体内。全的皮肤中进入胎儿体内。(2)生产过程中感染)生产过程中感染 生产过程中由于胎儿通过产道受到反复撞击和挤压,生产过程中由于胎儿通过产道受到
8、反复撞击和挤压,血液和羊水等分泌物可被胎儿吸入体内,也可通过皮血液和羊水等分泌物可被胎儿吸入体内,也可通过皮肤损伤进入体内。研究发现,可在刚出生胎儿胃引流肤损伤进入体内。研究发现,可在刚出生胎儿胃引流物中查出艾滋病病毒。物中查出艾滋病病毒。所有这些发现表明,母婴传播可能有高达所有这些发现表明,母婴传播可能有高达50的新生的新生儿在出生时通过与母亲生殖器官分泌液或血液接触而儿在出生时通过与母亲生殖器官分泌液或血液接触而发生感染。发生感染。(3)哺乳期感染:)哺乳期感染:科学家研究了科学家研究了100多例非洲感染多例非洲感染HIV的哺乳女性,发的哺乳女性,发现有现有58的乳汁样品中可检测的乳汁样品
9、中可检测HIV,有时乳汁中感染,有时乳汁中感染性病毒数量很高,乳汁中病毒可通过婴儿免疫不健全性病毒数量很高,乳汁中病毒可通过婴儿免疫不健全或损伤的口腔粘膜、消化道进入体内。或损伤的口腔粘膜、消化道进入体内。母婴传播中有母婴传播中有30是在哺乳期感染的。是在哺乳期感染的。对感染对感染HIV怀孕母亲用抗艾滋病毒预防服药治疗能怀孕母亲用抗艾滋病毒预防服药治疗能降低母婴传播的感染率已得到肯定。降低母婴传播的感染率已得到肯定。三、三、HIV感染在体内的动态分期感染在体内的动态分期病毒进入体内在病毒进入体内在2天内到达局部淋巴结,天内到达局部淋巴结,5天内进入血液天内进入血液循环。其结果是导致全身性播散,
10、到达脑部和淋巴组织。循环。其结果是导致全身性播散,到达脑部和淋巴组织。从暴露于从暴露于HIV到出现症状的时间一般是到出现症状的时间一般是2-4周在急性感染周在急性感染的数天内,出现高水平的病毒复制,血浆中可检出的数天内,出现高水平的病毒复制,血浆中可检出107/ml个病毒个病毒RNA分子。分子。CD8+细胞数上升,伴有短暂的细胞数上升,伴有短暂的CD4+细胞计数下降。细胞计数下降。HIV抗体出现后,病毒血症减轻,血浆中抗体出现后,病毒血症减轻,血浆中HIV RNA 的滴的滴度下降度下降,急性急性HIV感染的症状消失感染的症状消失.1 1、原发原发HIV感染期感染期通常通常4-124-12周发生
11、周发生HIV抗体阳转。从抗体阳转。从HIV感染到产生感染到产生抗体(或血请抗体阳转)称为抗体(或血请抗体阳转)称为“窗口期窗口期”,95%的的HIV感染都发生在感染后的感染都发生在感染后的 5.8 个月内,故一般个月内,故一般认为窗口期为认为窗口期为3 3个月;高度怀疑者可追踪至个月;高度怀疑者可追踪至6个月。个月。“HIV感染早期感染早期”定义:血清抗体阳转和定义:血清抗体阳转和HIV感感染染6个月之间的阶段。个月之间的阶段。6个月时病毒载量达到一个个月时病毒载量达到一个“固定值固定值”,早期抗病毒治疗可降至很低,如果不早期抗病毒治疗可降至很低,如果不进行抗病毒治疗,几年内不会有很大变化。此
12、固进行抗病毒治疗,几年内不会有很大变化。此固定值和预后有很大关系。定值和预后有很大关系。早期治疗的目标之一是重新设定固定值,使固定早期治疗的目标之一是重新设定固定值,使固定值保持较低水平。值保持较低水平。病人无临床症状,体检时无异常,少数可查到病人无临床症状,体检时无异常,少数可查到“持续性全身性淋巴腺病持续性全身性淋巴腺病”(PGL),),肿大的淋巴肿大的淋巴结至少发生在两处结至少发生在两处,且不是腹股沟淋巴结。且不是腹股沟淋巴结。细胞内的病毒大部分处于潜伏状态,所以淋巴结细胞内的病毒大部分处于潜伏状态,所以淋巴结中病毒浓度很高。中病毒浓度很高。淋巴组织是病毒的主要藏身处,外周血中的病毒淋巴
13、组织是病毒的主要藏身处,外周血中的病毒载量相对不高。载量相对不高。2 2、无症状感染期无症状感染期(潜伏期潜伏期)3、艾滋病前期(、艾滋病前期(“ARC”或或“B期期”)艾滋病前期症状包括被艾滋病前期症状包括被HIV感染后更常见更严重的感染后更常见更严重的症状(包括鹅口疮、口腔毛状黏膜白斑病、发热、体症状(包括鹅口疮、口腔毛状黏膜白斑病、发热、体重减轻等),但还不是艾滋病的典型症状。重减轻等),但还不是艾滋病的典型症状。4、艾滋病期、艾滋病期 当患者出现典型症状时,当患者出现典型症状时,CD4+细胞计数通常降至细胞计数通常降至200/ul以下,血和淋巴结中的以下,血和淋巴结中的HIV又上升到相
14、当高的又上升到相当高的水平,同时抗病毒水平,同时抗病毒CD8+细胞反应减弱。在艾滋病期细胞反应减弱。在艾滋病期病人血液中的病人血液中的HIV群体又一次变得相当均一,通常是群体又一次变得相当均一,通常是细胞融合(细胞融合(S1)表型为主,与)表型为主,与T细胞嗜性有关。细胞嗜性有关。四四、HIV感感染染的的三三种种临临床床结结局局和和长长期期存存活活 的的相相关关因素:因素:1.典型进展者典型进展者在在感感染染早早期期,其其免免疫疫功功能能未未受受损损害害,但但在在810年年内内免免疫疫控控制制能能力力逐逐渐渐下下降降,最最后后发发展展成成艾艾滋滋病。病。2.2.快速进展者快速进展者病病程程快快
15、速速进进展展,CDCD4+细细胞胞计计数数在在2-52-5年年内内迅迅速速下下降降,抗抗HIVHIV的的抗抗体体水水平平很很低低,而而且且该该抗抗体体中中和和HIV的能力也较差。的能力也较差。快快速速进进展展者者最最显显著著的的特特征征:HIV感感染染后后一一直直维维持持较高的病毒载量,而且分离的较高的病毒载量,而且分离的HIV有均一性。有均一性。3.长期存活者(又称长期不进展者)长期存活者(又称长期不进展者)这些感染者能维持健康状态这些感染者能维持健康状态12年以上,年以上,并且并且CD4+细胞计数维持正常。细胞计数维持正常。长期存活者在感染者中的比例一般在长期存活者在感染者中的比例一般在8
16、10%,目前最长已达,目前最长已达2020多年。多年。3 3、尿液、尿液HIV抗体检测抗体检测标本:除血液外还可用标本:除血液外还可用唾液检测唾液检测HIV(Orasure,如如Salivacard),),尿液检测尿液检测HIV 。1996年美国年美国FDA首次批准首次批准HIV-1尿检尿检EIA试剂,我国也正在研制。试剂,我国也正在研制。主要适用于静脉注射毒品(主要适用于静脉注射毒品(IDUs)人群和其人群和其它高危人群的大面积流行病学调查。它高危人群的大面积流行病学调查。阳性标本仍需采血做确认试验才能确定阳性标本仍需采血做确认试验才能确定HIV抗体阳性。抗体阳性。另外还有家庭用另外还有家庭
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