血液检测误差分析PPT课件.pptx

1.误差的来源：差的来源：分析前分析中分析后1.患者本身：患者本身：饮饮食、食、情情绪绪、运、运动动2.2.样样本采集：本采集：样样本是本是否需特殊否需特殊处处理、抗理、抗凝凝剂剂的使用等的使用等3.3.样样本的运送是否及本的运送是否及时时等。等。1.1.小小红细红细胞干胞干扰扰2.2.巨大血小板巨大血小板综综合症合症3.3.某些血液病患者某些血液病患者4.4.细细胞碎片胞碎片5.5.冷球蛋白干冷球蛋白干扰扰6.6.新生儿新生儿1.1.检验结检验结果的果的审审核核与与发发出出2.2.检验样检验样本的保存本的保存与与标标本的本的处处理理3.3.咨咨询询服服务务：加：加强强与与临临床的沟通床的沟通2.4白白细细胞假性增高胞假性增高1235红细红细胞凝集胞凝集细细胞碎片胞碎片常常见误差因素：差因素：血小板聚集血小板聚集巨大血小板巨大血小板3.Q1:DMC含含义是什么？是什么？4.5报警原理警原理提高了异常提高了异常标本本的的筛选效率效率 完善完善实验室的室的镜检规则数数数数值值数据数据数据数据散点散点散点散点图图直方直方直方直方图图仪仪器状器状器状器状态态IPUIPU综综合分析合分析合分析合分析SuspectSuspectAbnormalAbnormalERRORERRORNEGATIVENEGATIVEPOSITIVEPOSITIVEIP信息信息NEGATIVE/NEGATIVE/阴性阴性结结果正常果正常结结果可直接果可直接报报告告POSITIVE/POSITIVE/阳性阳性DD（DIFFDIFF）WBCWBC分分类类出出现现了异常情了异常情况况 MM（MorphMorph）细细胞胞形形态态出出现现了异常。了异常。C C（CountCount）血血细细胞胞计计数数出出现现了异常。了异常。ERROR/ERROR/错误错误Func.Func.仪仪器故障或操作器故障或操作错误错误ResultResult标标本有本有问题问题 例如：凝集例如：凝集5.Q2：仪器的器的怀疑疑类报警含警含义分分别是什么？是什么？6.WBC7.Q3：思考白：思考白细胞胞计数受哪些影响？数受哪些影响？8.9.10.Q4:什么情况下外周血会出什么情况下外周血会出现有核有核红？新生儿、溶贫、呼吸衰竭新生儿、溶贫、呼吸衰竭 骨髓纤维化、骨髓纤维化、MDSMDS、再障、再障缺氧缺氧 造血系统恶性疾病造血系统恶性疾病髓外造血髓外造血髓血屏障受损髓血屏障受损11.血常血常规特点：特点：1.WBC显示低可信度2.显示NRBC？可疑报警（XN仪器除外）对策：策：1.手工计数100个WBC并记录见到的NRBC2.对于XE机型，加做NRBC3.选用XN机型，NRBC自动修正病例病例-外周外周血出血出现有核有核红12.镜检图片：片：13.Q5：思考：思考为何两个通道何两个通道WBC总数相差数相差较大？大？该如何如何处理理？14.MenuRBC溶血不良溶血不良15.RBC溶血不良的原因：溶血不良的原因：肝功能低下肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期肝硬化、肝癌晚期、胆道堵塞、胆道堵塞)异常血异常血红红蛋白症蛋白症(Hgb-S(Hgb-S症、症、Hgb-CHgb-C症症)高脂血症高脂血症高胆固醇制高胆固醇制剂输剂输液治液治疗过疗过程中程中16.难溶红细胞电镜下正常RBC电镜下难溶RBC滴加溶血素后17.血常血常规特点：特点：1.DIFF通道与BASO通道WBC差值较大2.存在“难溶红细胞”报警对策：策：1.手工计数2.参考DIFF通道WBC总数病例病例-红细胞溶血不良胞溶血不良18.19WBC聚集聚集时新增新增WBC的切的切换功能功能TargetIn the case that the blood including Hyaluronic acid(metastatic tumor)is measured-because of WBC aggregation in WNRch WBC become falsely low.(WBC in WDFch has not been affected.)Modificationq1.Flagging of“WBC Abnormal Scattergram”,2.masking of WBC-will be executed when such phenomena are detected.WNRchWDFchRef(eye)复复习：Ver.00-15（WBC Abn Scg报警和警和WBC结果不果不显示示-）Detection Area of WBC aggregation19.20新分析演算新分析演算软件件：Ver.00-16SoftwareVersionDiscreteFlagWBC(主主页)WBC-NWBC-D00-15DIFF无WBC Abn Scg-（空白）DIFF有WBC Abn Scg-有数值显示00-16DIFF无WBC Abn Scg-（空白）DIFF有WBC Abn Scg有数值显示WBC&D-有数值显示有WDF通道测定时，从WBC-N（WNR通道）的结果切换为WBC-D（WDF通道）uVer.00-15推荐的规则设定uVer.00-16推荐的规则设定条件式动作ItemMask(WBC)Refex(LW_DIFF)条件式动作ItemMask(WBC)Refex(DIFF)相关资料XN flagging algorithm有更新。WBC聚集聚集时WBC的切的切换功能功能20.总结WBC误差：差：白细胞聚集导致白细胞减少红细胞溶血不良导致白细胞假性增高有核红存在导致白细胞假性增高21.RBC22.Q6:血象血象有何特点？下一步如何有何特点？下一步如何处理？理？23.24.血常血常规特点：特点：1.RBC数减少；HCT假性减低2.MCH、MCHC增高；对策：策：1.37C水浴15min后2.对于严重凝集，采用血浆置换病例病例-红细胞凝集胞凝集25.该标本本镜检图像像该标本镜检：高倍视野下可见大量RBC聚集26.讨论讨论：对对于于冷凝集素效价冷凝集素效价较较的的标标本，可以采用本，可以采用热热水浴水浴，的的方法方法进进行行纠纠正；正；对对于冷于冷凝集素凝集素效价效价较较高的高的标标本本，可先可先进进行行热热水浴水浴，然后上机，然后上机测测定定标标本，可本，可获获得得和和值值；再；再进进行置行置换换血血浆浆，可，可获获得得、红细红细胞比容胞比容、血血红红蛋白蛋白、和各和各值值27.总结RBC干干扰：1.红细胞凝集导致红细胞假性减少2.巨大血小板导致红细胞假性增多28.PLT29.Q7:为什么什么血小板血小板计数差异数差异这么大？么大？某病人某病人，男性，男性，药药物物过过敏，体表有敏，体表有出血点出血点查查血血常常规规：嗜酸嗜酸细细胞胞30%30%，PLT 26310 PLT 263109 9/L/L（阻抗（阻抗法）。法）。镜镜下核下核查查嗜酸嗜酸细细胞胞时发现时发现：有大量：有大量细细胞碎片，血小板胞碎片，血小板不多不多见见重新重新用用计计数板数板计计数血小板数血小板为为：351035109 9/L/L30.细胞碎片干胞碎片干扰 细细胞碎片或大量小胞碎片或大量小红细红细胞胞 (MCV 60 fl)(MCV 60 fl)与血小板体与血小板体积积接近接近 PLT PLT 假性增高，与假性增高，与临临床不符床不符 影响影响 RBC RBC 结结果，与果，与临临床不符床不符 异常异常 RBC RBC 直方直方图图和异常和异常 PLT PLT 直方直方图图31.细胞碎片和大量小胞碎片和大量小红细胞胞“异常异常 PLT PLT 直方直方图图”和和“异常异常 RBC RBC 直方直方图图”PLT PLT 计计数通数通过过以下方式以下方式纠纠正正!计计数池数池计计数数 显显微微镜浏览评镜浏览评估估 光学法光学法测测定定PLTPLT计计数数150250 fl60RLRUPLPU10 fl20 fl30 fl40 flRBC 直方直方图PLT 直方直方图注注:当PLT 和 RBC 不能被清晰分离时就会发生!PLT 计数可能有偏差(高或低)32.红细胞碎片胞碎片对血小板血小板计数的干数的干扰结果果报告告XN 以PLT-F结果为最终报告结果33.Q8：某血小板减少症患者，药物治疗后复查血小板为19109/L（阻抗法），临床医生疑惑为什么一直治疗无效果？34.巨大血小板巨大血小板 血小板板血小板板龄龄越小，体越小，体积积越大越大 巨大血小板与巨大血小板与红细红细胞体胞体积积接近接近 单纯单纯的体的体积测积测定定 (阻抗法阻抗法)使使PLT PLT 计计数偏低数偏低 PL100%20%PU10 fl20 fl30 fl35.巨大血小板巨大血小板分析：分析：1、在、在WNR和和WDF通道上，由于大血小板形成出通道上，由于大血小板形成出现的异常散点的异常散点图（）。）。2、PLT-I 比比PLT-F低，同低，同时报警出警出现血小板直方血小板直方图异常。异常。3、在、在IPF散点散点图绿色区域出色区域出现大量散点，同大量散点，同时IPF升高到升高到22.2%，推，推测有大血小板。有大血小板。镜下下见到多个体到多个体积大小大小为2个个红细胞的巨大血小板。胞的巨大血小板。门诊病例，血小板减少病例，血小板减少IPF36.巨大血小板解决方法：巨大血小板解决方法：RET RET 通道通道:光学法光学法检测检测血小板就可避免干血小板就可避免干扰扰（PLT-O PLT-O）PLT-FPLT-F通道：通道：针对针对血小板血小板线线粒体粒体DNADNA染色，特异性更高染色，特异性更高网网织血小板）血小板）PLT-FIPF SFLPLT-OIPFSFLF FS SC CF FS SC C37.Q9：思考：思考为何何会出会出现此此现象？象？某医院做血常某医院做血常规时发现规时发现一例一例PLTPLT仅仅471047109 9/L/L，半，半小小时时后后仪仪器再次复器再次复查查PLTPLT，为为18010180109 9/L/L因使用流水因使用流水线线，前一份，前一份样样本符合推片本符合推片规则规则已推片，已推片，镜镜下下观观察察该该血片，可血片，可见较见较多成簇的血小板。多成簇的血小板。38.血小板聚集解离现象39.Q10：某：某标本，本，XNA1机型机型检测，首次，首次结果，果，PLT 23*109/L，思考下一步如何，思考下一步如何处理？理？40.41.42.EDTA-K2依依赖血小板聚集血小板聚集分析：分析：1、PLT减低；减低；报警信息提示警信息提示PLT Clumps?(血小板聚集血小板聚集)，报警更灵敏；警更灵敏；2、在、在WNR,WDF、PLT直方直方图有聚集有聚集报警（警（）；）；3、PLT-F通道，散点通道，散点图增加了增加了FSCW（前向散色光分布（前向散色光分布宽度），度），FSCW()扩展是血小板聚展是血小板聚集的明集的明显特征。特征。正常凝集43.EDTA-K2依依赖血小板聚集血小板聚集对策：策：用其他的抗凝用其他的抗凝剂（枸掾酸（枸掾酸钠）采血）采血来来鉴别是否由于抗凝不良造成的。是否由于抗凝不良造成的。同同时比比较EDTA抗凝和枸掾酸抗凝和枸掾酸盐抗抗凝凝结果是果是证明明EDTA依依赖性假性血性假性血小板减少症病例的重要方法，可以小板减少症病例的重要方法，可以排除采血排除采血错误的原因。的原因。放置放置30min后，后，检测推荐抗凝方法：推荐抗凝方法：用用10倍倍浓度的度的EDTA(10mg/ml以以上上)采血采血 EDTA+桔桔橼酸酸(10:1)桔桔橼酸酸钠(3.13%、3.8%)肝素肝素(65IU)MgSO4(14%)预稀稀释模式模式进行行检测44.血常血常规特点：特点：1.PLT计数假性偏低2.有怀疑类报警血小板聚集对策：策：1.更换枸缘酸盐抗凝剂，若凝集现象消除，证明原抗凝不良。2.用干试管采血并且推片病例病例-EDTA-K2依依赖血小板聚集血小板聚集45.更更换枸枸缘酸酸盐抗凝抗凝剂后后结果果为220*109/L46.讨论讨论：在在EDTA EDTA 依依赖赖性假性血小板性假性血小板减少患者抽取后减少患者抽取后 1 h 1 h 的抗的抗凝血凝血样样本中加入本中加入 6.5 m g/6.5 m g/m l m l 丁胺卡那霉素能有效地丁胺卡那霉素能有效地解离凝集的血小板解离凝集的血小板,并可并可进进行行准确准确计计数数,同同时时不不影响其他影响其他主主要血常要血常规规参数的参数的测测定。定。47.影响影响PLT检测的常的常见因素因素1.小小红细红细胞及胞及红细红细胞碎片胞碎片对对PLTPLT检测检测的干的干扰扰：仪仪器在器在35-235-250fl50fl的范的范围围内分析内分析红细红细胞胞,正常正常红细红细胞主要分布在胞主要分布在5050150fl150fl范范围围内，当内，当RBCRBC体体积积小于小于35fL 35fL 会干会干扰扰PLTPLT计计数；数；RBCRBC碎片会碎片会使使计计数假性增高。数假性增高。2.2.EDTAEDTA诱导诱导假性血小板减少假性血小板减少：由：由标标本内特殊蛋白本内特殊蛋白质质与与EDTAEDTA抗凝抗凝剂发剂发生反生反应应，产产生血小板生血小板聚聚3.3.大血小板增多至大血小板增多至计计数减少：数减少：PLTPLT正常直径正常直径约约2 24m4m，在病，在病理情况下，特理情况下，特别别是巨核系是巨核系统统病病态态造血造血(如如MDSMDS)，会出，会出现现大量大量的大血小板、甚至巨大血小板的大血小板、甚至巨大血小板。48.影响影响PLT检测的常的常见因素因素4.采采样样技技术术的的影响影响5.5.PLTPLT卫卫星星现现象所致假性血小板减少：象所致假性血小板减少：PLTPLT在体外在体外黏附与黏附与成熟成熟中性分叶核粒中性分叶核粒细细胞周胞周围围的的现现象。可能与象。可能与自身免疫自身免疫、血小板反、血小板反应应素等有关。素等有关。6.6.冷球蛋白血症冷球蛋白血症:冷球蛋白是免疫球蛋白，在温度冷球蛋白是免疫球蛋白，在温度低于低于37C37C时时会会产产生沉淀生沉淀49.解决方案解决方案血小板特殊血小板特殊血小板特殊血小板特殊颗颗粒粒粒粒(颗颗粒粒粒粒-特异性蛋白特异性蛋白特异性蛋白特异性蛋白质质)线线粒体粒体粒体粒体(DNA)(DNA)颗粒大小颗粒大小PLT-I 颗粒（特异性蛋颗粒（特异性蛋白质）白质）PLT-O 线粒体（线粒体（DNADNA）PLT-FPLTRBC 利用利用PLT-F专用用试剂明明显染色染色的的细胞与血小板特异抗原胞与血小板特异抗原（CD41）阳性）阳性细胞一致胞一致,下下层的的红细胞碎片只有胞碎片只有细胞膜被胞膜被轻度染度染色色.同同时再根据前向散射光所代再根据前向散射光所代表的表的细胞大小信息，能胞大小信息，能够清晰地清晰地区区别血小板和血小板和红细胞碎片胞碎片50.异常异常值-最容易出最容易出临床差床差错的的临检项目之一目之一 PLT低值计数重复性差：无法连续观测结果，指导临床用药 假性增高：受小RBC、碎片干扰，误导临床手术，出血风险 假性降低：大PLT误计为RBC 误导临床输血，增加不必要的 经济负担和输血风险。低低低低值值PLTPLT5倍颗粒计数特异标记线粒体PLT（低（低（低（低值值PLTPLT通道通道通道通道PLT-FPLT-F）51.Keio University HospitalAll sample（n=100)Low PLT samples(380设置为另一台仪器重新检测MCV 105HGB 180 OR (HGB,50%,3,)MCHC=80PLT=300 and (PLT,50%,3,)改变计数方式复检（Reflex)复检规则动作WBC 1 LWBlasts/Abn Lympho?WPCPLT 50 and Fragments?PLT Abn DistributionAbn ScattergramPLT-FPLT=80,初诊PLT-F计数复数复检规则：60.小小结：1.1.哪些因素可能哪些因素可能导导致白致白细细胞胞计计数数误误差？差？2.RBC2.RBC凝集血常凝集血常规规参数有那些参数有那些变变化？化？该该如何如何处处理？理？3.3.对对于于EDTA-K2EDTA-K2依依赖赖血小板聚集如何血小板聚集如何处处理？理？4.3R4.3R分分别别代表什么？代表什么？3R3R的的优势优势？5.5.如何理解如何理解PLT-IPLT-I、PLT-OPLT-O、PLT-FPLT-F？61.62.