动物实验室的生物安全防护要求PPT课件.ppt
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1、动物物实验室的生物室的生物 安全防安全防护病毒学国家重点病毒学国家重点实验室室武武汉大学医学病毒学研究所大学医学病毒学研究所 1主要内容主要内容o实验动物的物的护理和使用原理和使用原则o实验过程的行程的行为规范范o实验动物的使用程序和要求物的使用程序和要求o动物生物安全物生物安全实验室室设施与防施与防护要求要求2一、实验动物的护理和使用原则一、实验动物的护理和使用原则 实验动物物是是经过科科学学的的育育种种,遗传背背景景清清楚楚,携携带的的微微生生物物状状况况明明确确,并并对其其生生态学学、生生物物学学、生生物物化化学学、形形态结构构了了解解的的特特殊殊动物物,因因此此,对其其护理理和和使使用
2、用也也有有严格格的的要求。要求。3实验动物物饲养和使用养和使用应遵守国家有关法律和遵守国家有关法律和规定。定。应明确使用明确使用实验动物的理由和目的。物的理由和目的。明确明确实验所使用所使用动物的种物的种类和数量,和数量,动物的数量物的数量应满足足统计学的要求。学的要求。完完善善操操作作规程程,避避免免或或减减轻因因实验对动物物造造成成的的不不适适和和痛痛苦苦。包包括括使使用用适当的适当的镇静、静、镇痛或麻醉方法;禁止不必要的重复。痛或麻醉方法;禁止不必要的重复。严格格按按程程序序实施施实验后后动物物的的处理理,包包括括麻麻醉醉、止止痛痛、实验后后的的护理理或或用麻醉方法用麻醉方法处死。死。实
3、验过程程中中要要求求保保证实验动物物的的良良好好生生活活条条件件,包包括括饲养养环境境、符符合合需需求的求的饲料及料及细心的心的护理等。理等。研研究究人人员和和实验动物物操操作作人人员应接接受受实验动物物的的基基本本知知识和和操操作作技技能能等等方面的培方面的培训。使用使用过程中要求保程中要求保证周周围环境和境和实验人人员的安全。的安全。实验动物的护理和使用原则实验动物的护理和使用原则4二、动物实验过程的行为规范二、动物实验过程的行为规范o物理限制物理限制物理限制物理限制o手术操作手术操作手术操作手术操作o饮食的限制饮食的限制饮食的限制饮食的限制o废弃物和尸体处理废弃物和尸体处理废弃物和尸体处
4、理废弃物和尸体处理51.物理限制物理限制 指在指在指在指在实验过实验过程中包括程中包括程中包括程中包括检查检查、收集、收集、收集、收集标标本、本、本、本、给药给药、治、治、治、治疗疗或或或或实验实验操作等,用手或工具限制操作等,用手或工具限制操作等,用手或工具限制操作等,用手或工具限制动动物活物活物活物活动动的的的的过过程。程。程。程。根据根据根据根据实验实验内容不同,限制内容不同,限制内容不同,限制内容不同,限制时间时间有差异,但要求尽有差异,但要求尽有差异,但要求尽有差异,但要求尽量量量量缩缩短限制短限制短限制短限制时间时间。有些有些有些有些动动物,如狗和灵物,如狗和灵物,如狗和灵物,如狗
5、和灵长类动长类动物可以通物可以通物可以通物可以通过简单过简单的的的的训训练练达到目的。达到目的。达到目的。达到目的。678oo限制的工具不能作为常规的饲养工具。限制的工具不能作为常规的饲养工具。限制的工具不能作为常规的饲养工具。限制的工具不能作为常规的饲养工具。oo工工工工具具具具的的的的设设设设计计计计应应应应合合合合理理理理,不不不不要要要要仅仅仅仅考考考考虑虑虑虑实实实实验验验验的的的的便便便便利利利利,主主主主要要要要考考考考虑尽量减少动物的不适,避免伤害。虑尽量减少动物的不适,避免伤害。虑尽量减少动物的不适,避免伤害。虑尽量减少动物的不适,避免伤害。oo尽量减少限制的时间,以达到实验
6、目的为基准。尽量减少限制的时间,以达到实验目的为基准。尽量减少限制的时间,以达到实验目的为基准。尽量减少限制的时间,以达到实验目的为基准。oo在在在在限限限限制制制制过过过过程程程程中中中中,如如如如果果果果发发发发生生生生损损损损伤伤伤伤或或或或严严严严重重重重的的的的行行行行为为为为改改改改变变变变,应应应应暂停或禁止限制,并给予处理或治疗。暂停或禁止限制,并给予处理或治疗。暂停或禁止限制,并给予处理或治疗。暂停或禁止限制,并给予处理或治疗。oo保证实验人员和周围人员的安全。保证实验人员和周围人员的安全。保证实验人员和周围人员的安全。保证实验人员和周围人员的安全。物理限制的主要原则和要求物
7、理限制的主要原则和要求9 有有有有些些些些实实验验需需需需要要要要对对动动物物物物进进行行行行手手手手术术,即即即即打打打打开开开开或或或或刺刺刺刺穿穿穿穿动动物物物物的的的的身身身身体体体体,对对动动物物物物的的的的物理或生理机能物理或生理机能物理或生理机能物理或生理机能产产生生生生较较大的大的大的大的损损害。害。害。害。实实验验人人人人员员也也也也容容容容易易易易被被被被血血血血液液液液,体体体体液液液液污污染染染染或或或或被被被被器器器器械械械械、针针头头刺刺刺刺伤伤,存存存存在在在在潜潜潜潜在生物在生物在生物在生物污污染的威染的威染的威染的威胁胁。oo操作一定要使用适当的操作一定要使用
8、适当的操作一定要使用适当的操作一定要使用适当的镇镇静、静、静、静、镇镇痛或麻醉方法。痛或麻醉方法。痛或麻醉方法。痛或麻醉方法。oo不不不不提提提提倡倡倡倡利利利利用用用用一一一一个个个个动动物物物物进进行行行行多多多多个个个个手手手手术术实实验验,但但但但是是是是,为为充充充充分分分分利利利利用用用用动动物物物物资资源源源源,经动经动物物物物伦伦理委理委理委理委员员会会会会许许可,在可能的条件下可以可,在可能的条件下可以可,在可能的条件下可以可,在可能的条件下可以实实施。施。施。施。oo禁止不必要的重复操作。禁止不必要的重复操作。禁止不必要的重复操作。禁止不必要的重复操作。oo严严格格格格实实
9、验验操操操操作作作作规规程程程程,防防防防止止止止发发生生生生血血血血液液液液,体体体体液液液液外外外外溅溅和和和和针针刺刺刺刺伤伤,避避避避免免免免生生生生物物物物污污染。染。染。染。oo手手手手术术后的后的后的后的动动物、物、物、物、标标本以及所用器具材料等必本以及所用器具材料等必本以及所用器具材料等必本以及所用器具材料等必须须按按按按规规定程序妥善定程序妥善定程序妥善定程序妥善处处置。置。置。置。2.手手术操作操作1011 实实验验用用用用动动物物物物原原原原则则上上上上要要要要求求求求随随随随时时饮饮食食食食,如如如如果果果果一一一一些些些些实实验验需需需需要要要要动动物物物物限限限限
10、制制制制食食食食物物物物或或或或水的水的水的水的摄摄入量,入量,入量,入量,应应保保保保证动证动物存活所需要的最低需求量。物存活所需要的最低需求量。物存活所需要的最低需求量。物存活所需要的最低需求量。根根根根据据据据研研研研究究究究的的的的目目目目的的的的,食食食食物物物物的的的的限限限限量量量量应应经经过过科科科科学学学学的的的的论论证证,其其其其限限限限量量量量的的的的标标准准准准应应容易操作,如正常容易操作,如正常容易操作,如正常容易操作,如正常摄摄入量的百分比或入量的百分比或入量的百分比或入量的百分比或动动物体重的百分比。物体重的百分比。物体重的百分比。物体重的百分比。对对于于于于水水
11、水水分分分分的的的的限限限限量量量量摄摄入入入入,一一一一定定定定要要要要防防防防止止止止动动物物物物发发生生生生脱脱脱脱水水水水现现象象象象,并并并并要要要要保保保保持持持持动动物的膳食平衡。物的膳食平衡。物的膳食平衡。物的膳食平衡。3.饮食的限制食的限制121.1.血液和体液血液和体液血液和体液血液和体液标标本的本的本的本的处处理理理理 用用用用于于于于抗抗抗抗体体体体、抗抗抗抗原原原原、病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物、生生生生化化化化指指指指标标等等等等检检查查的的的的血血血血液液液液和和和和体体体体液液液液,按按按按照照照照要要要要求求求求进进行行行行处处理理理理并并并并检检
12、测测,检检测测后后后后的的的的标标本本本本经经121121,30min30min高高高高压压消毒消毒消毒消毒处处理。理。理。理。2.2.动动物物物物脏脏器器器器组织组织的的的的处处理理理理 动动物物物物器器器器官官官官组组织织,尤尤尤尤其其其其是是是是用用用用于于于于病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物分分分分离离离离的的的的组组织织按按按按照照照照标标准准准准程程程程序序序序进进行行行行处处理理理理;用用用用于于于于病病病病理理理理切切切切片片片片的的的的组组织织,均均均均需需需需要要要要经经过过甲甲甲甲醛醛固固固固定定定定后后后后再再再再进进行行行行切切切切片片片片。剩剩剩剩余余余余的
13、的的的组组织织经经121121,30min30min高高高高压压消消消消毒毒毒毒处处理。理。理。理。4.废弃物和尸体弃物和尸体处理理133 3动物尸体的物尸体的处理理 安安乐处死死后后的的动物物尸尸体体,取取材材完完毕后后,经121 30min高高压灭菌菌处理理后后,集集中中送送环保保部部门处理理。动物物生生物物安安全全三三级实验室室及及以以上上级的的实验室的感染室的感染动物尸体需物尸体需经室内和双扉两道高室内和双扉两道高压灭菌,才能移出菌,才能移出实验室。室。4.动物咽拭子的物咽拭子的处理理 用用于于病病原原分分离离和和PCR检测的的咽咽拭拭子子,按按照照各各自自的的要要求求处理理后后,进行
14、行病毒分离和病毒分离和PCR检测,剩余的,剩余的标本本经121,30min高高压消毒消毒处理。理。5.病原分离培养物的病原分离培养物的处理理 病病原原分分离离的的培培养养物物,不不论是是阳阳性性还是是阴阴性性结果果,均均需需经121,30min高高压消毒消毒处理。理。4.废弃物和尸体弃物和尸体处理理14三、三、实验动物使用程序和要求物使用程序和要求151.实验动物的基本使用程序和要求实验动物的基本使用程序和要求o实验室如需要使用室如需要使用实验动物,物,应首先向生物安全和首先向生物安全和伦理委理委员会提会提出申出申请,填写申,填写申请表。表。见附件附件实验动物使用申物使用申请表表o使用使用实验
15、室得到室得到认可后,根据申可后,根据申请表中申表中申请的的动物种属和数量,物种属和数量,安排安排实验动物的物的饲养和使用。养和使用。o实验动物必物必须在指定的区域内在指定的区域内饲养和使用,禁止养和使用,禁止o在在实验室室饲养养动物。物。实验操作操作结束束时,动物物须返回指定的返回指定的饲养区养区域内,不能在域内,不能在实验室内室内过夜。夜。o动物物实验应在在实验室内指定的区域室内指定的区域进行。行。16 实验动物使用申请表实验动物使用申请表 批 准 号:_批准日期:_有效日期:_一、申一、申请请者基本情况者基本情况科室科室课题负责课题负责人人电话电话传传真真E-mail课题课题名称名称申申请
16、请目的目的初次申初次申请请,延延长长 或或 修改原申修改原申请请(原申(原申请请批准号批准号_)二、所需二、所需实验动实验动物物种种类类年年龄龄体重体重/大大/小小性性别别来源来源饲饲养养场场所所实验场实验场所所数量数量_+_+_=_(第一年)(第一年)(第一年)(第一年)(第一年)(第一年)(总计总计)三、三、动动物的运送(是否需要运送,如果需要,物的运送(是否需要运送,如果需要,说说明运送的路明运送的路线线和使用工具等)和使用工具等)17四、研究的目的(四、研究的目的(简单简单描述研究的目的,和描述研究的目的,和该该研究研究对对人人类类,或,或动动物,或科学研究的物,或科学研究的贡贡献)献
17、)五、使用五、使用实验动实验动物的原理(解物的原理(解释释使用使用动动物的原理;物的原理;阐阐述述选择动选择动物属种和数量的依据)物属种和数量的依据)六、描述六、描述动动物物实验实验的的设计设计和操作程序(具体包括:注射或接种的物和操作程序(具体包括:注射或接种的物质质、剂剂量、部位、体量、部位、体积积和和针针次等;血次等;血标标本的收集体本的收集体积积、部位、方法、部位、方法、时间时间;非手;非手术术的操作步的操作步骤骤(手(手术术操作操作见见第七第七项项);限制);限制动动物的方法;放射性同位素的使用物的方法;放射性同位素的使用剂剂量和量和时间时间;识别识别动动物的方法,如耳物的方法,如耳
18、朵标签朵标签、饲饲养养笼笼的卡片等;的卡片等;对动对动物的物的损损害,如疼痛、腹水等;害,如疼痛、腹水等;实验终结标实验终结标准,如准,如肿肿瘤的大小、体重降瘤的大小、体重降级级的百分比、行的百分比、行为为学的改学的改变变、中毒症状等,及何、中毒症状等,及何时执时执行安行安乐乐死。)死。)七、手七、手术术操作程序(如需要,操作程序(如需要,请请填写本目填写本目录录)具体操作步具体操作步骤骤手手术术操作人及培操作人及培训训情况情况手手术执术执行的地点行的地点实验实验后的后的护护理理18是否在同一是否在同一动动物上物上进进行多个手行多个手术术 否否 是,具体是,具体说说明:明:八、八、导导致疼痛的
19、分致疼痛的分类类 实验动实验动物的数量物的数量 第一年第一年 第二年第二年 第三年第三年 A 轻轻微,或一微,或一过过性,或无疼痛性,或无疼痛 _ _ _ B 有疼痛,但能有疼痛,但能够够解除解除 _ _ _ C 不能不能缓缓解的疼痛解的疼痛 _ _ _九、麻醉,九、麻醉,镇镇痛(痛(对对第八第八项项目中的目中的B或或C类动类动物,物,应说应说明使用麻醉或明使用麻醉或镇镇痛的方法,包括麻醉痛的方法,包括麻醉剂剂的名称、的名称、剂剂量、使用方式量、使用方式和和时间时间)十、十、实验终结实验终结后,如何后,如何终终止止动动物的生命(麻醉物的生命(麻醉剂剂的名称、的名称、剂剂量和使用方法)和如何量和
20、使用方法)和如何处处理理动动物尸体物尸体19o涉涉及及感感染染性性材材料料的的操操作作要要在在生生物物安安全全柜柜中中进进行行,并并防防止止泄泄露露在在安安全全柜柜底底面面。操操作作包包括括感感染染动动物物的的解解剖剖、组组织织的的取取材材、采采血及动物的病原接种。血及动物的病原接种。o动物笼具在清洗前先做消毒处理。动物笼具在清洗前先做消毒处理。o污污物物、一一次次性性物物品品需需放放入入医医疗疗废废物物专专用用垃垃圾圾袋袋中中,经经高高压压灭灭菌后方可拿出实验室。菌后方可拿出实验室。o动动物物尸尸体体用用双双层层医医疗疗废废物物专专用用垃垃圾圾袋袋包包裹裹后后,放放入入标标有有动动物物尸尸体
21、体专专用用的的容容器器中中,用用消消毒毒液液喷喷雾雾容容器器表表面面后后,运运至至解解剖剖区区域剖检。域剖检。o生物安全柜使用后应用消毒液擦拭、揩干。生物安全柜使用后应用消毒液擦拭、揩干。2.含有感染性材料的含有感染性材料的动物物实验要求要求202.含有感染性材料的含有感染性材料的动物物实验要求要求o废废液液需需按按比比例例倒倒入入有有消消毒毒液液的的桶桶中中,倒倒入入时时需需沿沿容容器器壁壁轻轻倒倒并戴眼罩,防止溅入眼中。并戴眼罩,防止溅入眼中。o如如果果有有感感染染性性物物质质溅溅到到生生物物安安全全柜柜上上、地地上上以以及及其其他他地地方方,应按菌,毒外溢在台面、地面和其他表面处理。应按
22、菌,毒外溢在台面、地面和其他表面处理。o每天工作结束时,应用消毒液擦拭门把手和地面等表面区域。每天工作结束时,应用消毒液擦拭门把手和地面等表面区域。o废废物物放放入入高高压压灭灭菌菌器器内内时时需需粘粘贴贴指指示示条条,物物品品移移出出前前观观察察指指示条是否达到灭菌要求。颜色不符时需重复高压灭菌。示条是否达到灭菌要求。颜色不符时需重复高压灭菌。o高压灭菌器需每月做灭菌测试一次,并作记录。高压灭菌器需每月做灭菌测试一次,并作记录。213.小小动物的物的饲养养 小小动动物物主主要要指指小小鼠鼠、大大鼠鼠、豚豚鼠鼠等等啮啮齿齿类类动动物物,其其饲饲养养应遵循下列原则应遵循下列原则使使用用动动物物必
23、必须须按按国国家家标标准准或或实实验验特特殊殊要要求求检检验验合合格格,充充分分准准备备后后进进入入动动物物实实验验室室,饲饲养养人人员员应应按按实实验验设设施施规规定定程序要求进入实验室。程序要求进入实验室。及及时时观观察察动动物物饮饮食食、精精神神状状况况,有有无无异异常常表表现现,患患病病或或死亡。死亡。动动物物应应可可自自由由进进食食、饮饮水水。定定期期检检查查水水、料料是是否否充充足足并并及时补给。同时保证其他饲养条件完备。及时补给。同时保证其他饲养条件完备。224.大大动物物饲养养 大动物主要指狗、猪及非人类灵长类动物等,饲养原则大动物主要指狗、猪及非人类灵长类动物等,饲养原则o使
24、使用用动动物物必必须须按按国国家家标标准准或或实实验验特特殊殊要要求求,检检验验合合格格,充充分分准备后方可进入动物实验室。准备后方可进入动物实验室。o应应将将每每只只动动物物日日摄摄取取总总量量分分批批次次喂喂给给,以以保保证证动动物物的的进进食食量量和减少浪费。和减少浪费。o应经常检查饮水装置,及时补充不足。应经常检查饮水装置,及时补充不足。o动物饲养区域应每天打扫,保持清洁,每周将地面消毒三次。动物饲养区域应每天打扫,保持清洁,每周将地面消毒三次。o喂喂给给瓜瓜果果、蔬蔬菜菜等等须须洗洗净净消消毒毒。禁禁止止喂喂给给腐腐烂烂发发霉霉不不洁洁的的食食物,饮水要清洁。物,饮水要清洁。o对对饲
25、饲喂喂动动物物所所用用的的小小推推车车、食食物物、水水容容器器等等用用品品每每周周进进行行两两次消毒。次消毒。o室内光照,要求明暗各室内光照,要求明暗各12h自动交替。自动交替。235.动物的物的检疫疫 o实实验验动动物物进进入入检检疫疫室室 在在检检疫疫室室的的缓缓冲冲间间内内,用用75%酒酒精精喷喷洒洒动动物物的的外外包包装装进进行行消消毒毒,打打开开紫紫外外灯灯照照射射1015min。o将经上述处理的动物移入检疫室,根据要求进行检疫。将经上述处理的动物移入检疫室,根据要求进行检疫。o各动物的检疫期不同,大动物为各动物的检疫期不同,大动物为2周,小动物为周,小动物为1周。周。o在在检检疫疫
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