风湿病实验室检查.ppt

风湿性疾病常用实验室检查 高高 薇薇一、一般检查（一）血、尿常规一）血、尿常规（二）血沉（二）血沉（三）（三）C-反应蛋白（反应蛋白（CRP）（四）心肌酶谱（四）心肌酶谱（五）抗链球菌溶血素（五）抗链球菌溶血素“O”（ASO）（六）免疫球蛋白（六）免疫球蛋白（七）补体（七）补体二、自身抗体定义：是指能与机体正常组织成份或改变了的组定义：是指能与机体正常组织成份或改变了的组织成份起反应的抗体织成份起反应的抗体分类分类 器官特异性的器官特异性的 非器官特异性的非器官特异性的p检测方法：间接免疫荧光、免疫双扩散、对流免检测方法：间接免疫荧光、免疫双扩散、对流免疫电泳、免疫印迹及疫电泳、免疫印迹及ELISA法等法等（一）抗核抗体（ANA）ANA是抗细胞核抗原成份的自身抗体的总称。是抗细胞核抗原成份的自身抗体的总称。ANA是针对细胞核内是针对细胞核内DNA、RNA、蛋白质、脂类、蛋白质、脂类、酶类或这些物质的分子复合物的抗体。上述这酶类或这些物质的分子复合物的抗体。上述这些物质不仅存在细胞核内，也可存在于细胞浆些物质不仅存在细胞核内，也可存在于细胞浆和其他细胞器中。因此，和其他细胞器中。因此，ANA的概念已不再局的概念已不再局限于抗核成份。限于抗核成份。ANA是指抗核酸与核蛋白抗体的总称。是指抗核酸与核蛋白抗体的总称。用间接免疫荧光法（用间接免疫荧光法（IIF）检测，大于）检测，大于1：40为为ANA阳性。阳性。抗核抗体谱 目前已发现具有不同临床意义的目前已发现具有不同临床意义的ANA约约20余种余种,这些这些ANA组成了组成了“抗核抗体谱抗核抗体谱”。抗核抗体谱分为四类抗核抗体谱分为四类：类：抗类：抗DNA抗体：抗双链抗体：抗双链DNA抗体抗体 抗单链抗单链DNA抗体抗体 类：抗组蛋白抗体（类：抗组蛋白抗体（AHA）类：抗非组蛋白抗体：抗类：抗非组蛋白抗体：抗ENA抗体抗体 抗着丝点抗体（抗着丝点抗体（ACA）类：抗核仁抗体类：抗核仁抗体ANA阳性时常见的荧光染色核型均质型（均质型（H型）：与抗型）：与抗DNA抗体及抗组蛋抗体及抗组蛋白抗体相关。白抗体相关。斑点型（斑点型（S型）：与抗型）：与抗ENA抗体相关。抗体相关。核膜型（核膜型（M型）：与抗双链型）：与抗双链DNA抗体相抗体相关。关。核仁型（核仁型（N型）：多见于硬皮病。型）：多见于硬皮病。ANA阳性的临床意义1、是结缔组织病（、是结缔组织病（CTD）的筛选试验）的筛选试验 见于见于 SLE、SS、SSc、MCTD等。等。2、肝脏病、肝脏病 如如PBC、AIH等。等。3、肺疾患、肺疾患 原发性肺纤维化（原发性肺纤维化（IPF）、原发性）、原发性 肺动脉高压、石棉肺等。肺动脉高压、石棉肺等。4、血液病、血液病 淋巴瘤、骨髓瘤、淋巴瘤、骨髓瘤、ITP等。等。5、慢性感染、慢性感染 如肺结核、麻风、血吸虫病等。如肺结核、麻风、血吸虫病等。1、抗双链DNA抗体（抗ds-DNA抗体）以马疫锥虫为底物，用以马疫锥虫为底物，用IIF检测，在检测，在SLE的阳的阳性率为性率为40%是是SLE的标记性抗体的标记性抗体抗体滴度的高低与抗体滴度的高低与SLE病情活动正相关病情活动正相关此抗体阳性时，易罹患狼疮性肾炎此抗体阳性时，易罹患狼疮性肾炎2、抗组蛋白抗体（AHA）组蛋白是一组与组蛋白是一组与DNA结合的富含赖氨酸和精结合的富含赖氨酸和精氨酸的碱性蛋白。氨酸的碱性蛋白。AHA用用ELISA方法检测，其阳性的临床方法检测，其阳性的临床 意义：意义：SLE患者患者50%为阳性为阳性 药物性狼疮（药物性狼疮（DIL）95%100%呈阳性呈阳性 AHA阳性对诊断阳性对诊断DIL有帮助，但不能确诊有帮助，但不能确诊3、抗非组蛋白抗体抗非组蛋白抗体中最重要的是抗抗非组蛋白抗体中最重要的是抗ENA抗体。抗体。可提取性核抗原（可提取性核抗原（ENA）是用生理盐水从）是用生理盐水从动物胸腺、肝脾等细胞核中提取的酸性糖动物胸腺、肝脾等细胞核中提取的酸性糖蛋白。抗可提取性核抗原抗体称为抗蛋白。抗可提取性核抗原抗体称为抗ENA抗体。抗体。抗抗ENA抗体也是一组抗体，目前用免疫印抗体也是一组抗体，目前用免疫印迹法（迹法（IBT）检测的有）检测的有7种，分述如下种，分述如下抗Sm抗体在名为在名为Smith的的SLE患者血清中发现该抗患者血清中发现该抗 体体,简称为抗简称为抗Sm抗体。抗体。该抗体在该抗体在SLE患者的阳性率为患者的阳性率为2530%。是是SLE的标记抗体，但与病情活动无关。的标记抗体，但与病情活动无关。此抗体阳性的此抗体阳性的SLE患者易患狼疮性脑病。患者易患狼疮性脑病。抗U1RNP抗体核糖核蛋白（核糖核蛋白（RNP）富含尿嘧啶（）富含尿嘧啶（Uridine),且主要存在于且主要存在于U族小分子族小分子RNP的第一组分中，故的第一组分中，故称为称为U1RNP，其抗体简称抗，其抗体简称抗U1RNP抗体。抗体。高滴度的抗高滴度的抗U1RNP抗体是抗体是MCTD的必备指标。的必备指标。低滴度的抗低滴度的抗U1RNP抗体尚可见于抗体尚可见于SLE和和SSc。此抗体阳性时，肾炎的发生率低。此抗体阳性时，肾炎的发生率低。值得注意的是：抗抗Sm抗体阳性时，抗抗体阳性时，抗U1RNP抗体肯定阳性；抗体肯定阳性；抗抗U1RNP抗体阳性时，抗抗体阳性时，抗Sm抗体可阴性；抗体可阴性；即即SLE时，抗时，抗Sm抗体阳性时，抗抗体阳性时，抗U1RNP抗体肯抗体肯定是阳性。而定是阳性。而MCTD时，抗时，抗U1RNP抗体阳性而抗体阳性而抗抗Sm抗体却阴性。抗体却阴性。抗SSA/Ro抗体 50年代末首先在干燥综合征（年代末首先在干燥综合征（Sjgren syndrome,SS)患者血清中发现这种抗体，称患者血清中发现这种抗体，称为抗为抗SSA抗体。抗体。60年代中期又在名为年代中期又在名为Ro的的SLE患者血清中也发现了抗患者血清中也发现了抗SSA抗体。曾称名抗体。曾称名抗抗Ro抗体。现已证实抗体。现已证实SSA和和Ro抗原是同一物抗原是同一物质，故称为抗质，故称为抗SSA抗体（或抗抗体（或抗SSA/Ro抗体）抗体）抗SSA抗体的临床意义在原发性干燥综合征时，此抗体阳性率为在原发性干燥综合征时，此抗体阳性率为60%。约约40%SLE患者此抗体为阳性。患者此抗体为阳性。RA及及SSc等继发干燥综合征时此抗体为阳性。等继发干燥综合征时此抗体为阳性。在亚急性皮肤型红斑狼疮（在亚急性皮肤型红斑狼疮（SCLE）时，此抗）时，此抗体阳性率可高达体阳性率可高达75%而而ANA可阴性。可阴性。抗SSB/La抗体 现已证实现已证实1975年命名抗年命名抗SSB抗体与抗体与1974年年发现的抗发现的抗La抗体为同一抗体，简称抗抗体为同一抗体，简称抗SSB抗体。抗体。其临床意义如下其临床意义如下：原发性干燥综合征，此抗体阳性率为原发性干燥综合征，此抗体阳性率为40%。抗抗SSB抗体阳性对诊断抗体阳性对诊断SS比抗比抗SSA抗体阳性更具抗体阳性更具特异性，故可认为抗特异性，故可认为抗SSB抗体是抗体是SS的标记性抗的标记性抗体。体。抗抗SSB抗体阳性时，抗抗体阳性时，抗SSA抗体肯定阳性，但抗抗体肯定阳性，但抗SSA抗体阳性时，抗抗体阳性时，抗SSB抗体可以阴性。抗体可以阴性。抗Scl-70抗体 Scl是硬皮病的英文简写，是硬皮病的英文简写，70是该抗体相是该抗体相对应的抗原的分子量对应的抗原的分子量70KD。抗。抗Scl-70抗体阳性抗体阳性临床意义如下临床意义如下：是硬皮病的标记性抗体（是硬皮病的标记性抗体（IBT阳性阳性2040%）硬皮病合并肿瘤时，该抗体阳性率可高达硬皮病合并肿瘤时，该抗体阳性率可高达80%以上。以上。此抗体阳性的硬皮病患者，易合并肺间质病此抗体阳性的硬皮病患者，易合并肺间质病变。变。此抗体与心肾受累无关。此抗体与心肾受累无关。抗Jo-1抗体抗抗Jo-1抗体是以抗体是以John患者的名字命名，患者的名字命名，1980年首次在多发性肌炎（年首次在多发性肌炎（PM）患者血清中发）患者血清中发现。现。Jo-1抗原是组氨酰抗原是组氨酰tRNA合成酶，分子量合成酶，分子量为为55KD。其抗体又称抗。其抗体又称抗PL-1抗体。抗体。抗抗Jo-1抗体是抗体是PM/DM的标记性抗体，阳性的标记性抗体，阳性率约为率约为25%。PM/DM合并肺间质病变时抗合并肺间质病变时抗Jo-1抗体阳性抗体阳性率可达率可达60%。抗Jo-1抗体综合征 抗抗Jo-1抗体阳性的抗体阳性的PM/DM患者，除患者，除肌无力外，尚有发热、白细胞增高、肌无力外，尚有发热、白细胞增高、间质性肺炎、关节炎、雷诺现象和间质性肺炎、关节炎、雷诺现象和“技械工人手技械工人手”（指双手外侧掌面皮肤（指双手外侧掌面皮肤出现角化、皲裂伴色素沉着）。出现角化、皲裂伴色素沉着）。抗核糖体抗体（抗Rib抗体）抗核糖体抗体全称为抗核糖体核糖核抗核糖体抗体全称为抗核糖体核糖核蛋白抗体，也简称为抗蛋白抗体，也简称为抗rRNP抗体。抗体。其临床意义如下其临床意义如下：约约10%SLE患者此抗体阳性，也是患者此抗体阳性，也是SLE的标记的标记性抗体。性抗体。此抗体阳性的此抗体阳性的SLE，易合并狼疮性脑病。，易合并狼疮性脑病。此抗体阳性而此抗体阳性而ANA阴性的患者，数年后终将阴性的患者，数年后终将发展成典型的发展成典型的SLE。抗核抗体（抗核抗体（ANA）CTD筛选试验筛选试验抗抗ds-DNA抗体抗体 SLE标记性抗体标记性抗体 抗抗ENA抗体，其中包括：抗体，其中包括：抗抗Sm抗体抗体 SLE标记性抗体标记性抗体抗抗U1RNP抗体抗体MCTD标记性抗体标记性抗体抗抗SSA抗体抗体SS的抗体的抗体抗抗SSB抗体抗体SS标记性抗体标记性抗体抗抗Scl-70抗体抗体硬皮病标记性抗体硬皮病标记性抗体抗抗Jo-1抗体抗体PM/DM标记性抗体标记性抗体抗抗Rib抗体抗体SLE标记性抗体标记性抗体（二）抗核小体抗体（AnuA）核小体（核小体（nucleosome)是细胞凋亡过程中染是细胞凋亡过程中染色体裂解后释放的染色质成份，由色体裂解后释放的染色质成份，由8个带正个带正电荷的组蛋白分子（电荷的组蛋白分子（H2A、H2B、H3和和H4各各2个分子）组成。个分子）组成。2000年国外学者用年国外学者用ELISA方法检测抗核小体方法检测抗核小体抗体（抗体（AnuA），本抗体识别的抗原表位是），本抗体识别的抗原表位是（H2A-H2B）-DNA复合物，该复合物可能是复合物，该复合物可能是引起狼疮性肾炎的原因之一。引起狼疮性肾炎的原因之一。AnuA的临床意义1、对、对SLE诊断的敏感性高（诊断的敏感性高（56%），特异性强），特异性强（97%）。）。2、出现在、出现在SLE早期，是病情活动的指标之一。早期，是病情活动的指标之一。3、与狼疮性肾炎密切相关。、与狼疮性肾炎密切相关。4、对抗、对抗ds-DNA、抗、抗Sm抗体阴性的抗体阴性的SLE的诊断具的诊断具有重要意义。有重要意义。5、在、在SSc和和MCTD等也可阳性。等也可阳性。（三）类风湿因子（RF）类风湿因子是抗人或动物免疫球蛋白类风湿因子是抗人或动物免疫球蛋白IgG分分子子Fc片段的特异性抗原决定簇的免疫球蛋白。片段的特异性抗原决定簇的免疫球蛋白。常用乳胶凝集法检测常用乳胶凝集法检测IgM型类风湿因子型类风湿因子（IgM-RF)。RF在类风湿关节炎的阳性率为在类风湿关节炎的阳性率为70%。RF在在SLE、SS、SSc等风湿病也可阳性。等风湿病也可阳性。RF在慢性肝病、结核等某些感染性疾病也在慢性肝病、结核等某些感染性疾病也可阳性。可阳性。RF在正常老年人约在正常老年人约5%阳性。阳性。（四）抗角蛋白抗体谱这是与早期类风湿关节炎相关的一组这是与早期类风湿关节炎相关的一组自身抗体，包括自身抗体，包括:抗核周因子（抗核周因子（APF）抗角蛋白抗体（抗角蛋白抗体（AKA）、）、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）抗环瓜氨酸肽抗体（抗抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）抗体）1、抗角蛋白抗体（AKA）用用IIF检查大鼠食道中检查大鼠食道中1/3的角质层，若出现板的角质层，若出现板层状和线状沉积的荧光时，为层状和线状沉积的荧光时，为AKA阳性。阳性。AKA是早期是早期RA的诊断指标之一。的诊断指标之一。AKA在在RA的阳性率为的阳性率为4060%，特异性为，特异性为96%。AKA与与RA的病情严重程度正相关。的病情严重程度正相关。AKA阳性的阳性的RA患者，预后较差。患者，预后较差。2、抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）目前用目前用ELISA方法检测。方法检测。是诊断早期是诊断早期RA的指标之一。的指标之一。在在RA阳性率为阳性率为46.6%，特异性为，特异性为96.6%。此抗体阳性的此抗体阳性的RA患者骨质破坏较重。患者骨质破坏较重。是国内目前最常用的诊断早期是国内目前最常用的诊断早期RA的指标。的指标。（五）抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）ANCA是第一个被证实与血管炎相关的自身是第一个被证实与血管炎相关的自身抗体。抗体。胞浆型胞浆型ANCA（c-ANCA）核周型核周型ANCA（p-ANCA）c-ANCA的靶抗原主要是丝氨酸蛋白酶的靶抗原主要是丝氨酸蛋白酶3（PR3）。）。c-ANCA阳性常见于阳性常见于Wegener肉芽肿，且肉芽肿，且其滴度与该病的活动性正相关，故对诊断其滴度与该病的活动性正相关，故对诊断Wegener肉芽肿有高度的敏感性和特异性。肉芽肿有高度的敏感性和特异性。p-ANCA的靶抗原主要是髓过氧化酶（的靶抗原主要是髓过氧化酶（MPO）P-ANCA阳性除见于显微镜下多血管炎、变应性阳性除见于显微镜下多血管炎、变应性肉芽肿血管炎（肉芽肿血管炎（Churg-Strauss)、系统性红斑狼、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎和坏死性新月体肾小球肾炎疮、类风湿关节炎和坏死性新月体肾小球肾炎外，还可见于自身免疫性肝病、溃疡性结肠炎、外，还可见于自身免疫性肝病、溃疡性结肠炎、克隆病等。可见，克隆病等。可见，p-ANCA与疾病的相关性较与疾病的相关性较c-ANCA特异性差。特异性差。（六）抗磷脂抗体抗磷脂抗体包括抗心磷脂（抗磷脂抗体包括抗心磷脂（ACL）抗体和狼疮抗凝）抗体和狼疮抗凝物等针对自身不同磷脂成份的自身抗体。目前临物等针对自身不同磷脂成份的自身抗体。目前临床上常用的是用床上常用的是用ELISA方法检测的抗心磷脂方法检测的抗心磷脂（ACL）抗体。中高滴度阳性的）抗体。中高滴度阳性的IgG型型ACL抗体最具抗体最具特异性，用于诊断抗磷脂综合征。特异性，用于诊断抗磷脂综合征。抗磷脂综合征（抗磷脂综合征（APS）是一组与抗磷脂抗体（主要）是一组与抗磷脂抗体（主要是是ACL）有关的临床征侯群。除）有关的临床征侯群。除ACL抗体阳性外，抗体阳性外，还有反复动脉、静脉血栓形成，习惯性流产和血还有反复动脉、静脉血栓形成，习惯性流产和血小板减少等临床表现。小板减少等临床表现。（七）抗线粒体抗体（AMA）AMA是以线粒体为靶抗原的自身抗体。是以线粒体为靶抗原的自身抗体。AMA阳性是诊断原发性胆汗性肝硬化（阳性是诊断原发性胆汗性肝硬化（PBC）的实验）的实验室指标。室指标。AMA阳性除阳性除PBC外，尚可见于系统性红斑狼外，尚可见于系统性红斑狼疮、干燥综合征、硬皮病等。疮、干燥综合征、硬皮病等。近来研究发现近来研究发现AMA共有九个亚型（共有九个亚型（M 19），其中），其中M2靶抗原的主要成份是丙酮酸脱氢酶复合物，其抗体称靶抗原的主要成份是丙酮酸脱氢酶复合物，其抗体称为为AMA-M2。AMA-M2在在PBC的阳性率为的阳性率为96%，是，是PBC的特异性抗体。的特异性抗体。（八）抗平滑肌抗体（SMA）SMA是一种抗肌动蛋白抗体。由于在平滑肌是一种抗肌动蛋白抗体。由于在平滑肌胞浆中富含肌动蛋白，因此血清中胞浆中富含肌动蛋白，因此血清中SMA与肌与肌动蛋白结合，用动蛋白结合，用IIF观察到平滑肌呈蓝绿色观察到平滑肌呈蓝绿色荧光，为荧光，为SMA阳性。阳性。SMA阳性最常见于自身免疫性肝炎阳性最常见于自身免疫性肝炎I型。型。还可见于自身免疫性疾病如还可见于自身免疫性疾病如 系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合征。系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合征。思考题ANA阳性常见于什么疾病？阳性常见于什么疾病？哪些疾病可出现哪些疾病可出现RF阳性？阳性？系统系红斑狼疮的筛选抗体及标志性抗体是什么系统系红斑狼疮的筛选抗体及标志性抗体是什么？与？与SLE活动相关的抗体是什么？活动相关的抗体是什么？