生物：3.2《月季的花药培养》教案(新人教版选修1).doc

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课题2 月季的花药培养
★课题目标
（一）知识与技能
1、识记被子植物花粉发育的过程
2、通过学习花药培养的基本技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力
   （二）过程与方法
1、列表比较花药培养与组织培养
2、选择适宜的培养材料和培养基
★课题重点
选取适宜的培养材料和培养基
★课题难点
　选取适宜的培养材料和培养基
★教学方法
启发式教学
★教学工具
多媒体课件
★教学过程
（一）引入新课
利用植物的茎可以经过组织培养得到新植株，但这种方法同时也存在着一定的缺陷，繁殖出来的新植株往往无法获得一些新的性状。本节我们将学习花药离体培养技术，这是一种信的育种技术。
（二）进行新课
1．基础知识
活动2：阅读“被子植物的花粉发育”，回答下列问题：
1．被子植物的花粉是在 中由 经过 分裂形成的。
2．结合教材内容填下列示意图：
小孢子母细胞（2n）
（ ）时期（n）
单核（ ）期（n）
双核期
（ ）细胞核（n）
（ ）细胞核（n）
（ ）细胞（n）
（ ）细胞（n）
（ ）个精子(n)
（ ）分裂
（ ）分裂
单核（ ）期（n）
（ ）分裂

〖思考2〗由此可见，被子植物的花粉的发育要经历 四分体 时期， 单核 期和 双核 期等阶段。
〖思考3〗在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生 4 个精子；在一枚花药中可以产生
很多 个花粉。
〖思考4〗营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么？控制花粉的萌发并提供营养。
活动3：阅读“产生花粉植株的两条途径”，讨论并回答下列问题：
1．产生花粉植株（即单倍体植株）的两种途径：一是花粉通过 胚状体 阶段发育为植株，二是通过 愈伤组织 阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度 的配比。
2．填写培育花粉植株的途径图解：
（ ）
花药中
的花粉
（ ）
（ ）
（ 胚状体 ）
（ 愈伤组织 ）
（ ）
丛
芽
生
根
移栽

3．胚状体的结构及其发育过程与种子相似，所以把胚状体到从芽的过程称为 分化 ，而把从愈伤组织到从芽的过程称为 再分化 。
活动4：阅读“影响花药培养的因素”，回答下列问题：
1．影响花粉植株的主要因素： 材料的选择 和 培养基的组成 等。
2．材料的选择：
①从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；
②从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉；
③从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。
〖思考5〗除此之外，你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？
植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。
〖思考6〗为什么不选择使用单核期之前或之后的花粉？
单核期之前，花药质地幼嫩，容易破碎；单核期之后，花瓣开始松动，消毒困难。
〖思考7〗花瓣松动会给材料消毒带来困难的原因是 外界环境中的微生物容易侵入到花药中 。
2．实验设计
活动5：阅读“材料的选择”，回答下列问题：
1．选择花药时一般通过 镜检 确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是 醋酸洋红溶液 和 焙花青－铬钒溶液 ，它们分别可以将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。
2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用 卡诺氏固定液 处理20min。该试剂的配制方法是将 无水酒精和冰醋酸 按体积比为 3：1 的比例混合均匀。
活动6：阅读“材料的消毒”，填写下列流程图：
花蕾
（70％酒精）
大约30s
（无菌水）
清洗
（无菌吸水纸）
吸干水分
（1％氯化汞溶液）
2～4min
（无菌水）
冲洗

〖思考8〗月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？
在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。
活动7：阅读“接种和培养”，回答下列问题：
1．剥取花药：消毒后的花蕾，要在 无菌 条件下除去花萼、花瓣。
〖思考9〗剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是 容易从受伤部位产生愈伤组织 ；二是要彻底除去花丝，原因是 花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成 。
2．接种花药：剥取的花药要立刻接种到 培养基 上。每个培养瓶接种 7～10 个花药。
3．培养：花药培养利用的培养基是 MS 培养基，pH为 5.8 ，温度为 25 ℃，幼苗形成之前（需要、不需要）光照。
〖思考10〗在花药培养基中，用量最高的激素是 IAA ；在诱导丛芽或胚状体培养基中，用量最高的激素是 BA ；在诱导生根的培养基中，用量最高的激素是 IAA 。
4．培养20－30d后，花药开裂，长出 愈伤组织 或释放出 胚状体 。前者还要转移到 分化
培养基 上进行分化培养成再生植株；后者要尽快 分开 并转移到新的培养基上。
5．通过愈伤组织形成的植株，常常会出现 染色体倍性 的变化，因而需要鉴定和筛选。
〖思考11〗为什么通过愈伤组织形成的植株会发生染色体倍性的变化？（05全国理综III）
有些是由花粉发育形成的单倍体花粉植株，有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体花药壁植株。
（三）课堂总结、点评
本课题有一定难度，成功率较低。全部完成课题不仅耗时较长，又有季节限制。最好课前做好时间规划，以提高工作效率。建议教师提前做好相关环节的准备，如花蕾的选择、培养基配方等。同时对于兴趣较高的同学可以安排在课外动手尝试，教师提供相关的技术指导。

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