小吞噬细胞吞噬功能测定实验中兔血的应用.pdf
《小吞噬细胞吞噬功能测定实验中兔血的应用.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《小吞噬细胞吞噬功能测定实验中兔血的应用.pdf(3页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、 ISSN1672-4305CN12-1352/N实 验 室 科 学LABORATORY SCIENCE第 26 卷 第 3 期 2023 年 6 月Vol.26 No.3 Jun.2023 小吞噬细胞吞噬功能测定实验中兔血的应用杨 文,牛宗亮,张 阳,李定国,刘 君,王丽欣,魏晓丽,崔秀吉(海南医学院 基础医学与生命科学学院,海南 海口 571199)摘 要:目的是探索兔血替代人血进行中性粒细胞吞噬功能测定的最佳实验条件。向新鲜的兔枸橼酸钠抗凝血中加入等量的一定浓度灭活的表皮葡萄球菌,在 37恒温箱中孵育不同的时间段,离心/不离心方法处理,取细胞悬液推片染色镜检。结果,不同孵育时间,离心和不
2、离心方法对中性粒细胞吞噬效果不同。因此,孵育时间 20 分钟,离心方法可见中性粒细胞吞噬现象明显,实验教学效果理想。关键词:中性粒细胞;吞噬功能;实验教学中图分类号:R392 文献标识码:A doi:10.3969/j.issn.1672-4305.2023.03.007Application of rabbit blood in the experiment of determination of phagocytic function of small phagocytesYANG Wen,NIU Zongliang,ZHANG Yang,LI Dingguo,LIU Jun,WANG L
3、ixin,WEI Xiaoli,CUI Xiuji(College of Basic Medicine and Biotechnology,Hainan Medical University,Haikou 571199,China)Abstract:To explore the best experimental conditions for the determination of neutrophil phagocytic function with rabbit blood instead of human blood.Method:Add an equal amount of inac
4、tivated Staph-ylococcus epidermidis at a certain concentration(6108/mL)to fresh rabbit sodium citrate anticoagu-lant blood,and incubate in a 37 incubator for different periods of time(15,20,25,30 minutes),with or without centrifugation method,then cell suspension was applied onto the slide.The phago
5、cyto-sis was observed under light microscopy after staining.Results:Different incubation times,centrifuga-tion and non-centrifugation methods showed different effects on phagocytosis of neutrophils.Conclu-sion:Centrifugation method followed by 20 minutes showed the optimal experimental condition for
6、 the phagocytosis of neutrophils.Key words:neutrophils;phagocytosis;experimental teaching 收稿日期:2021-06-01 修改日期:2022-07-27作者简介:杨文,硕士,高级实验师,研究方向为抗感染免疫。E-mail:513108069 通讯作者:崔秀吉,博士,研究员,研究方向为病原生物学。E-mail:cuixj26 吞噬细胞可以通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤,吞噬和消化衰老、损伤细胞及病原微生物等异物,是机体固有免疫的重要组成部分。中性粒细胞来源于骨髓造血干细胞,是数量最多的白细胞,占白细胞中
7、50%70%,属小吞噬细胞,具有重要的外周巡逻监控作用,是局部组织抗感染免疫应答的第一个外周血参战细胞,这在机体的固有免疫中具有重要的意义 1。为了让学生更清晰、直观地理解固有免疫功能测定的全过程,开设了“中性粒细胞吞噬功能测定”的实验教学内容,而血液标本是实验开展的根本材料2。以往的标本来源是通过学生(包括留学生)采集自己的血液进行实验。血液标本是病毒、细菌等多种病原体的传播载体3。但在课堂上进行采血,由于人数众多,防护措施不完善,且目前仍有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、人类获得性免疫缺陷病毒等(human immunodeficiency vi-rus,HIV
8、)等传染性病原体在校园内流行,不能保证血液标本的安全性4-6。因此,迫切需要在不影响杨文,等:小吞噬细胞吞噬功能测定实验中兔血的应用实验结果的前提下寻找恰当的非人血液标本替代原有的采血来源 7-8。同时教育学生应严肃看待生物安全问题,规范操作流程,学会规避生物危害,提高安全防范意识,为师生的安全和健康提供保证,也为以后学生能更好地从事临床和科研工作奠定一定的基础 9-10。在此,介绍了本实验室采用兔血替代课堂中采集人血,并应用于“中性粒细胞吞噬功能测定”的医学免疫学实验教学方法和心得。1 实验材料(1)待测标本新鲜兔抗凝血(选取清洁级的兔子进行采血,加入适量的枸橼酸钠抗凝)。(2)被吞噬物表皮
9、葡萄球菌液(CMCC(B)26069)。(3)主要试剂营养琼脂培养基、生理盐水、无水乙醇、瑞氏-姬姆萨染液。(4)主要器材恒温培养箱、微量移液器、显微镜、迷你型低速离心机、载玻片、移液枪头、Eppendorf(EP)管等。2 实验方法2.1 表皮葡萄球菌液的制备将表皮葡萄球菌复苏传代 12 次后,将其接种于营养琼脂培养基中,置 37培养 18 小时后,用无菌生理盐水洗涤 2 次,然后 100 水浴 30min,做无菌实验后说明细菌已灭活。采用比浊法调整细菌的浓度,将其调节至 6108/mL,以备后续使用。2.2 孵育准备好 16 支 EP 管,做好标记,分别需要不同的孵育时间(15min、20
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 吞噬 细胞 功能 测定 实验 中兔血 应用
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。