肉苁蓉提取物及其在化妆品中的美白抗衰机制研究进展.pdf
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1、Technique express科技广场35第46卷2023年第8期肉苁蓉(Cistanche Hebra),又名甜大芸,为一种名贵中药材,在化妆品护肤方面具有美白保湿,抗衰老,防辐射,抗氧化,抗菌等作用1。其应用始载于神农本草经,在抗衰老,抗氧化类方剂中的出现率仅次于人参,居于第2位,素有“沙漠人参”的美誉2-4。在古代医药典籍中曾记载中药材肉苁蓉可起到美容养颜的功效,药性论和玉楸药解均提及其可益髓、悦颜色、延年。近年来,大部分研究集中在肉苁蓉活性成分的检测鉴定和提取方面,已经鉴定出70种苯乙醇苷类化合物和26种环烯醚萜及其苷类化合物,其中松果菊苷和毛蕊花糖苷属于苯乙醇苷类,松果菊苷具有抗
2、氧化抗衰作用,毛蕊花糖苷兼具有抑制酪氨酸酶活性和抗氧化作用,起到美白和延缓衰老的功效,二者为2015年版中国药典规定的指标成分,另外,肉苁蓉中还含有延缓衰老、抗辐射及抗氧化的天然多糖类。本文主要解析肉苁蓉的活性成分,综述检测方法和提取工艺,解释化妆品护肤方面的应用功效机制,以扩大肉苁蓉在化妆品中的应用。1 肉苁蓉的主要活性成分及检测方法尽管肉苁蓉的化学成分复杂多样,但是在化妆品护肤功效研究中,肉苁蓉的活性成分主要有苯乙醇苷类、多糖等。其中苯乙醇苷类化合物以松果菊苷、毛蕊花糖苷研究居多。而多糖主要作为抗衰成分,由果糖、半乳糖、阿拉伯糖、核糖、葡萄糖、鼠李糖、岩藻糖和木糖等,另外还有甘露醇、葡萄糖
3、醛酸、半乳糖醛酸等成分5通过糖苷键连接,形成直链或支链,广泛用在化妆品配方中。随着检测技术及检测设备的不断更新换代,肉苁蓉中越来越多的化合物被定性、定量检出。周晔等6采用傅里叶红外光谱(FTIR)结合HPLC-ESI-MS方法分析出中药肉苁蓉因产地不同的活性成分差异,检测到肉苁蓉中松果菊苷、毛蕊花糖苷等7种活性成分。根据5种肉苁蓉药材的红外指纹图谱,作者计算出了这些药材的共有峰和差异峰,进而清晰分析出5种中药肉苁蓉的差异,而HPLC-ESI-MS方法主要测定肉苁蓉某些化学成分的含量,灵敏度比较高,处理样品量大,分析速度快,二者结合分析,可以准确鉴定出不同产地肉苁蓉的质量差异。钱浩等7采用RP-
4、HPLC方法,将肉苁蓉中松果菊苷、毛蕊花糖苷和其他成分进行了良好的分离,研究结果表明,肉苁蓉中4种成分的含量因采收季节不同而有较大的差异,为保证高质量的肉苁蓉采购提供一定的科学依据。王雪媛等8分别采用HPLC-UV法、HPLC-ELSD法、UV-VIS法及醇溶性浸出物测定法依次检测了肉苁蓉中松果菊苷及毛蕊花糖苷量、半乳糖醇及甜菜碱量可溶性多糖量和浸出肉苁蓉提取物及其在化妆品中的美白抗衰机制研究进展武改红,王雪峰,王 军,王佳鑫,张 蕾,张 晗,王 鹏(天津尚美化妆品有限公司,天津 300385)摘 要:对肉苁蓉的主要功效成分及其检测技术、提取方法和皮肤美白抗衰机制等方面的最新研究进展进行综述,
5、为肉苁蓉在化妆品精准护肤中的广泛应用提供一定的理论参考。关键词:化妆品;肉苁蓉;苯乙醇苷;松果菊苷;抗衰老;美白中图分类号:TQ658 文献标识码:A 文章编号:1006-7264(2023)08-035-04DOI:10.3969/j.issn.1006-7264.2023.08.007收稿日期:2023-03-21作者简介:武改红(1978-),女,河南人,高级工程师,博士,电话:15122550459,E-mail:。通讯作者:张 蕾(1970-),女,天津人,教授级高级工程师,总监,电话:18522692372,E-mail:。Technique express科技广场36Vol.46
6、 No.8 Aug.2023物的含量,研究肉苁蓉的道地性,比较了不同季节各种成分的差异。覃文婷等9利用UPLC分析肉苁蓉中5种苯乙醇苷类化学成分的相对含量。根据检测数据结果得知这5种成分的含量因产地不同也有所差异。作者还采用MALLS和离子色谱测定肉苁蓉多糖的分子量大小、分布及单糖组成,为荒漠肉苁蓉的综合评价提供方法依据和数据参考。朱乃亮等10利用超高效液相色谱(UPLC)展示了不同类型的肉苁蓉药材的指纹图谱及其差异,结果说明了荒漠肉苁蓉中苯乙醇苷和环烯醚萜苷含量差别不大,而且苯乙醇苷的含量要显著低于管花肉苁蓉。南泽东等11对肉苁蓉药材的甲醇提取物中的活性成分采用HPLC-MS技术及特定的色谱
7、条件进行了准确鉴定,根据保留时间、相对分子量以及碎片离子与对照品的比较,鉴定出17种成分,为全面控制肉苁蓉质量提供一定的标准。研究表明,矿物质元素硒,铁,锌,铜,锰等具有抗氧化延缓衰老的作用,因此,朱艳霞等12利用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定了肉苁蓉不同提取液中的11种矿物质元素含量,为肉苁蓉美容护肤药理研究提供数据支持。2 肉苁蓉提取物任璐等13通过静态吸附和动态吸附以及动态洗脱实验建立了大孔吸附树脂分离管花肉苁蓉中苯乙醇苷的吸附和洗脱条件:选择AB-8吸附树脂,吸附量57.21 mg/g,试样溶液pH3.43,上样浓度3.66.0 mg/L,上样速度1.5 BV/h
8、,40%的乙醇水溶液进行洗脱。孟庆艳等14采用单因素实验考察了提取时间、料液比、提取温度、乙醇体积分数以及提取次数对提取工艺的影响,然后采用L9(34)正交设计表对料液比,提取次数以及乙醇提取分数进行正交实验。结果表明,提取次数影响最显著,80 加热回流2 h,1 20的料液比,再用40%乙醇提取1次,减压浓缩至乙醇味消失,真空干燥,以制得苯乙醇苷粗品。张凯15对肉苁蓉中苯乙醇苷类化合物进行了提取,索氏抽提,所用溶剂是乙醇;萃取:以乙酸乙酯脱脂、正丁醇作为溶剂;蒸馏至干。同时利用正交实验确定了乙醇索氏抽提工序的显著影响因子即提取时间,并优化了最佳提取工艺条件。王英姿等16采用3种方法提取了肉苁
9、蓉中松果菊苷、-谷甾醇、总糖物质,在肉苁蓉粉碎目数、用量、过滤、浓缩等同等工艺条件下,絮凝水提法优于其他2种方法,松果菊苷得率为25.46 mg/g,-谷甾醇得率0.38 mg/g,总糖得率12.84 mg/g。高磊等17发明了复合酶联合超声提取肉苁蓉多糖的工艺的专利,采用单因素实验及正交设计实验对提取工艺条件进行了优化,获得肉苁蓉多糖得率最高的工艺。该工艺可操作性强,步骤简单及绿色环保,为肉苁蓉多糖的护肤机制研究提供了有力的支撑。范倩文等18发明了利用肉苁蓉鳞茎提取包含寡糖混合物的专利。将肉苁蓉鳞茎经脱脂干燥后多次加入到沸水提取,合并滤液并进行浓缩,然后用三氯乙酸去除蛋白,加碱中和,流动水透
10、析3天,然后将内液进行浓缩离心以除去沉淀,用有机溶剂沉淀上清液,离心收集沉淀并依次采用无水乙醇和丙酮洗涤,进行真空干燥后得到干燥的肉苁蓉鳞茎水提多糖。将所得的多糖用强酸、高温条件下进行降解,剔除酸性物质,离心后取上清液,以制备含有寡糖混合物的肉苁蓉提取物。该提取物在化妆品中具有延缓皮肤衰老的功效。黄翔等19对肉苁蓉进行了提取,5种苯乙醇苷类成分即松果菊苷、毛蕊花糖苷、肉苁蓉苷A、异毛蕊花糖苷、2-乙酰基毛蕊花糖苷的含量为评价标准,并利用HPLC进行检测分析,通过单因素实验和响应面优化设计优化了各个参数对提取工艺的影响,建立最佳提取工艺:用55.14%的甲醇进行提取,固液比:146.39,提取3
11、8.5 min,80 烘干。3 美白抗衰作用机制皮肤老化是一个复杂的生物细胞演化过程,与皮肤超微结构和生物化学变化相关的。生活方式的因素(如生活习惯、饮食和抽烟等),疾病(如糖尿病)和重力作用对皮肤老化都有影响。在皮肤老化的过程中,内源性老化和外源性老化是同时起作用的。内源性老化是人体内在的自然渐进衰老进程。从某种程度上说,内源性衰老是由细胞内在生物钟所参与调控的程序性衰老,该生物钟决定了细胞在老化过程中所经历的细胞复制代数和每一次复制所需要的周期。外源性因素也引起皮肤衰老。外源性衰老主要是指环境因素的影响,如活性氧(ROS)、UV照射、自由基,这些因素对皮肤有积累作用并导致胶原及细胞基质降解
12、。UV辐射引起光老化加深内源性老化过程。各种外在因素使皮肤组织的胶原蛋白和弹性蛋白变性,使皮肤弹性降低,皮肤皱纹生成,促进皮肤老化。3.1 抗衰老皮肤抗衰老的作用机理主要是保护皮肤内部细胞免受Technique express科技广场37第46卷2023年第8期外界环境和自身老化的损害,增强免疫细胞的活性,提高抗氧化作用,修复皮肤屏障,从而达到防止皮肤衰老和维持皮肤健康的状态。肉苁蓉的抗衰老作用主要由D-甘露醇、多糖(CDPS)、苯乙醇苷类化合物引起的,能显著延长皮肤衰老,增加胶原纤维含量的皮肤弹性20,21。数据显示,1%的D-甘露醇和1%肉苁蓉多糖均能够增加动物皮肤细胞内的羟脯氨酸含量,胶
13、原纤维含量增加,改善皮肤弹性,从而延缓皮肤衰老21。另外,通过RT-PCR实验分析,4 mg/mL的肉苁蓉提取物处理过的黑色素瘤细胞内胶原酶和弹性蛋白酶mRNA的表达量急剧减少,进而引起胶原酶、弹性蛋白酶及透明质酸酶的活性降低,减缓皮肤的老化22。刘园园等23研究了肉苁蓉多糖对皮肤衰老的影响,2050 mg/mL的肉苁蓉多糖能够保护UVB照射HaCaT细胞损伤,使氧自由基的连续反应得到抑制,皮肤组织的自愈能力也得到提高,特别是UVB照射后的皮肤细胞将得以保护,免受UVB损伤,进而延缓皮肤的衰老。研究表明CDPs对巨噬细胞淋巴细胞和成纤维细胞有增殖作用24-27,并能促进细胞增殖和分化巨核细胞和
14、红系造血祖细胞28。其多糖提取物促进脾细胞增殖,激活树突细胞和免疫反应29。肉苁蓉水提物可以通过激活树状细胞诱导强大和持久的抗原特异性免疫应答,树突细胞通过TLR4相关的NF-B通路参与调控成熟标志物和细胞因子的表达。研究发现,肉苁蓉的活性成分苯乙醇苷对皮肤衰老也有一定的延缓效果。肉苁蓉苯乙醇苷乳剂能够有效吸收日光中的紫外线辐射30,可较好地防止和缓解紫外辐照对皮肤的损害及光老化作用31。此外,肉苁蓉中的苯乙醇苷提取物对超氧岐化酶氧化酶(SOD)有增强作用32,可以清除体内的自由基,达到抗氧化与抗衰老的作用。3.2 美白人体肤色最重要的决定因素是黑素,其由表皮基底层中黑素细胞在应激条件下产生的
15、。皮肤黑素的生物合成是将机体内酪氨酸进行羟化反应,由关键酶酪氨酸酶催化,以合成L-多巴,然后再氧化多巴生成多巴醌,多巴醌经过一系列的代谢转化过程,重排,并列组合,最后与蛋白质结合,生成黑素蛋白,引起皮肤褐化。因此,通过抑制酪氨酸酶的活性,以酪氨酸酶为靶向是美白化妆品研发的主要方向33-36。具有潜在的美白功效主要是含苯环或酚羟基结构的化合物,如目前常用的美白剂熊果苷和曲酸。据文献报道,有125个以上不同的基因调控着黑色素沉着。黑素细胞一些重要的生物学功能,如细胞分化以及色素沉着或黑素生成跟这些基因相关。黑素细胞发育转录因子中有一个重要的成员,即小眼转录基因(Microphthamia tran
16、scription factor,MITF),它通过启动TYR、TRP-1、TYR-2的3种基因表达,从而实现其转录过程37。苯乙醇苷是一类天然糖苷类化合物,通过酯键和糖苷键连接母核糖基、苯丙烯酸和部分苯乙醇而形成。杨建华等38研究发现1.53.0 mg/mL的苯乙醇总苷能够抑制酪氨酸酶的活性,其效应表现为竞争型可逆性抑制,美白作用优于熊果苷,通过抑制人表皮黑素细胞黑色素生成起到美白作用。吴珊珊的研究报告39发现,400 g/mL的肉苁蓉苯乙醇总苷能够有效抑制UVB辐射致黑素沉着人皮黑色素细胞模型中酪氨酸酶抑制活性,促进人皮黑色素细胞的凋亡,减少黑素颗粒含量,显著下调黑素合成相关基因TYR,T
17、PR-1和MITF mRNA转录的水平,并可降低TYR,TRP-1,TRP-2和MITF的蛋白表达。这些结果均表明,肉苁蓉苯乙醇苷能够显著抑制酪氨酸酶的活性,为肉苁蓉苯乙醇苷在天然美白化妆品领域的开发奠定了理论基础;肉苁蓉总苷具有抑制皮肤色素沉着、增白美容的功效,可预防和治疗色素增加性皮肤病,或用于增白祛斑的化妆品研制。4 结语随着外界环境的不断恶化,雀斑,色痣,日晒斑等皮肤色调的变化,对美白抗衰的化妆品需求量也日益增加。但是关于肉苁蓉提取物的功效研究方面,大部分开展的体外功效测试,小鼠皮肤模型以及线虫模型等来推理美白、抗衰的作用机理,缺乏实际的人体护肤功效研究,因此,肉苁蓉提取物的美白抗衰护
18、肤功效仍需要进行人体功效数据的检测,使肉苁蓉提取物在皮肤修复,延缓皮肤衰老,美白等方面的功效进一步为人们所知,以使肉苁蓉类化妆品在市场上得以畅销。参考文献:1 郝姗姗,陈素梅,闫东海,等.肉苁蓉在化妆品中的应用研究进展J.日用化学品科学,2021,44(9):36-41.2 国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版一部M.北京:中国医药科技出版社,2010:12.3 李文兰,白晶,臧宝珊,等.HPLC-ESI-Q-TOFMS/MS分析肉苁蓉拟雌激素活性部位入血成分J.质谱学报,2015,36(3):1.4 赵新杰,夏华玲,王苏静.肉苁蓉的药理作用研究进展J.中国药业,2009,18(17
19、):77-79.Technique express科技广场38Vol.46 No.8 Aug.20235 HUGS,HUYJ,JIAJM,et al.Effect of 2-aminoindan-2-phosphonic acid treatment on the accumulation of salidroside and four pheylethanoid Glycosides in suspension cell culture of Cistanche deserticola.J.Plant Cell Reports,2011,30(4):665-6746 周晔,李薇,韩立峰,等.
20、HPLC-ESI-MS和FTIR方法鉴别不同产地中药肉苁蓉的研究J.光谱学与光谱分析,2015,35(4):1056-1061.7 钱浩,喻芳君,耿宗成,等.不同季节采收的肉苁蓉中4种苯乙醇苷的含量比较研究J.药物分析杂志,2016,36(11):1971.8 王雪媛,肖波,张治峰,等.不同采收期肉苁蓉中松果菊苷、毛蕊花糖苷、半乳糖醇、甜菜碱及可溶性多糖量的测定及其道地性研究J.中草药,2017,48(18):3841-3844.9 覃文婷,宿美凤,雒晓梅,等.定性分析不同产地荒漠肉苁蓉苯乙醇苷类及多糖类成分J.辽宁中医药大学学报,2018(7):77-81.10 朱乃亮,徐荣,吴海峰,等.荒
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