提取方法对核桃油理化性质、化学组成及抗氧化活性的影响.pdf
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1、第 卷第期陕西科技大学学报V o l N o 年月J o u r n a l o fS h a a n x iU n i v e r s i t yo fS c i e n c e&T e c h n o l o g y A u g 文章编号:X()提取方法对核桃油理化性质、化学组成及抗氧化活性的影响冯莉,刘璇璇,武莹敏,韩玉婷,李道明,朱振宝,曹云刚(陕西科技大学 食品科学与工程学院,陕西 西安 )摘要:为了考察冷榨法、索氏法、水酶法种提取方法对核桃油品质的影响,并挖掘影响核桃油抗氧化活性的关键化学组分,测定种提取方法所提核桃油的理化性质、化学组成及抗氧化活性,并通过多元线性回归分析,建立核
2、桃油抗氧化评价模型,分析影响核桃油抗氧化活性的关键化学组分结果表明,种提取方法对核桃油中脂肪酸及甘油酯的含量和组成影响不大,但是对总酚和黄酮含量以及油脂的理化性质和抗氧化活性影响较大经核桃油抗氧化评价模型初步判断,亚油酸和总酚是影响核桃油抗氧化活性的关键化学组分 种提取方法中,冷榨法所提核桃油的品质最好,水酶法次之,但是水酶法对应的核桃油得率较高,更重要的是其在提油过程中可同时制备生物活性肽,因而是一种极具应用潜力的油脂提取方法关键词:提取方法;核桃油品质;理化性质;化学组成;抗氧化活性中图分类号:T S ;T S 文献标志码:AE f f e c t so f e x t r a c t i
3、 o nm e t h o d so np h y s i c a l a n dc h e m i c a lp r o p e r t i e s,c h e m i c a l c o m p o s i t i o n sa n da n t i o x i d a n t a c t i v i t yo fw a l n u t o i lF E NGL i,L I UX u a n x u a n,WUY i n g m i n,HANY u t i n g,L ID a o m i n g,Z HUZ h e n b a o,C AOY u n g a n g(S c h o
4、o l o fF o o dS c i e n c e a n dE n g i n e e r i n g,S h a a n x iU n i v e r s i t yo f S c i e n c e&T e c h n o l o g y,X i a n ,C h i n a)A b s t r a c t:I no r d e rt oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to fe x t r a c t i o n m e t h o d s,i n c l u d i n gc o l dp r e s s i n gm e t h o d,
5、s o x h l e tm e t h o da n da q u e o u se n z y m a t i cm e t h o d,o nt h eq u a l i t yo fw a l n u to i l,a n de x p l o r et h ek e yc h e m i c a l c o m p o n e n t s a f f e c t i n g t h e a n t i o x i d a n t a c t i v i t yo fw a l n u t o i l T h ep h y s i c o c h e m i c a l p r o p
6、 e r t i e s,c h e m i c a l c o m p o s i t i o n sa n da n t i o x i d a n t a c t i v i t i e so f t h ew a l n u to i l se x t r a c t e db yt h ee x t r a c t i o nm e t h o d sm e n t i o n e da b o v ew e r ed e t e r m i n e d I na d d i t i o n,t h ea n t i o x i d a n t e v a l u a t i o n
7、m o d e l o fw a l n u t o i lw a s e s t a b l i s h e d t h r o u g hm u l t i p l e l i n e a r r e g r e s s i o na n a l y s i s t oa n a l y z et h ek e yc h e m i c a l c o m p o n e n t s,a f f e c t i n gt h ea n t i o x i d a n ta c t i v i t yo fw a l n u to i l T h er e s u l t ss h o w
8、e dt h a tt h et h r e ee x t r a c t i o nm e t h o d sh a dl i t t l ee f f e c to nt h ec o n t e n ta n dc o m p o s i t i o n so f f a t t ya c i d sa n dg l y c e r i d e s i nw a l n u to i l,b u th a dg r e a t i n f l u e n c e so nt h ec o n t e n t so f t o t a l p h e n o l sa n df l a v
9、 o n o i d s,p h y s i c o c h e m i c a l p r o p e r t i e sa n da n t i o x i d a n t a c t i v i t i e so f收稿日期:基金项目:国家自然科学基金项目();陕西省科技厅重点研发计划项目(NY )作者简介:冯莉(),女,山西运城人,讲师,博士,研究方向:食品组分的营养与功能、果蔬精深加工通讯作者:曹云刚(),男,山西运城人,副教授,博士,研究方向:蛋白质结构与功能、农产品绿色加工,c a o y u n g a n g s u s t e d u c n陕西科技大学学报第 卷t h e
10、o i l s A c c o r d i n gt ot h ea n t i o x i d a n te v a l u a t i o nm o d e lo fw a l n u to i l,l i n o l e i ca c i da n dt o t a lp h e n o l sw e r e t h ek e yc h e m i c a l c o m p o n e n t sa f f e c t i n gt h ea n t i o x i d a n t a c t i v i t yo fw a l n u to i l I nc o n c l u s
11、i o n,a m o n gt h et h r e ee x t r a c t i o nm e t h o d s,t h eq u a l i t yo fw a l n u to i le x t r a c t e db yc o l dp r e s s i n gm e t h o d i s t h eb e s t,f o l l o w e db y t h a t o b t a i n e db ya q u e o u s e n z y m em e t h o d H o w e v e r,t h ey i e l do fw a l n u to i le
12、 x t r a c t e db ya q u e o u se n z y m em e t h o dw a sh i g h e rt h a nt h a tb yc o l dp r e s s i n gm e t h o d M o r e i m p o r t a n t l y,a q u e o u s e n z y m em e t h o dc a ns i m u l t a n e o u s l yp r o d u c eb i o a c t i v ep e p t i d e sd u r i n g t h ep r o c e s so f o
13、i l e x t r a c t i o n,s o i t i s a e x t r a c t i o nm e t h o dw i t hg r e a t p o t e n t i a l f o ra p p l i c a t i o n K e yw o r d s:e x t r a c t i o nm e t h o d s;q u a l i t yo fw a l n u to i l;p h y s i c o c h e m i c a lp r o p e r t i e s;c h e m i c a lc o m p o s i t i o n s;a
14、 n t i o x i d a n t a c t i v i t y引言我国核桃产量居全球之首,约占全球核桃总产量的,而核桃消费量远低于其产量生产具有更高营养价值的核桃油有利于激发消费兴趣,提高核桃消费量目前国内外关于核桃油提取方法的研究仍然更注重提高油脂得率,关于不同提取方法对核桃油品质影响的关注度相对较低因此,考察提取方法对核桃油品质的影响,对指导核桃油生产、促进核桃消费具有重要意义现有的核桃油提取方法主要有冷榨法、索氏法和水酶法等冷榨法是提取核桃油最为传统的一种方法,具有绿色、无污染、操作简单、营养价值保留度高的特点,但同时有饼粕残油多、出油率低、能耗高的缺点索氏法具有出油率高、操作
15、简单、成本低的特点,但可能存在有机溶剂残留,导致油脂风味变差陈惠卿等以温宿薄皮核桃为研究对象,优化了索氏法提取核桃油的工艺条件,使得核桃油提取率达到了 水酶法则是近年来发展起来的一种新型油脂提取方法,具有油脂出油率和品质高、操作简单、安全环保等优点,并且该方法在提油过程中可同时制备生物活性肽,符合绿色加工概念核桃油营养品质与其脂肪酸组成以及黄酮、总酚等活性成分密切相关,而这些营养成分的含量很大程度上依赖于其提取方法,适当的提取方法有利于保留更多的营养成分 核桃油在加工过程中易被氧化,产生含氧三酰基甘油、游离脂肪酸等物质,影响核桃油的品质因此,抗氧化活性也是评价核桃油品质的重要指标水酶法是一种极
16、具应用前景的新型油脂提取方法,课题组前期对其同步提取核桃油和多肽的工艺条件进行了优化,而在最优联产工艺条件下水酶法对核桃油品质的影响尚缺乏系统研究本研究系统比较水酶法与常用的两种提取方法冷榨法和索氏法对所提核桃油品质的影响,基于核桃油的抗氧化活性及相关化学组分(油酸、亚油酸、亚麻酸、总酚以及黄酮),采用多元校正分析手段,构建核桃油抗氧化评价模型,探究影响核桃油抗氧化活性的关键化学组分,为实现品质导向的优质核桃油生产提供理论依据材料与方法 主要材料与试剂市场购买无霉变、无蛀虫、新鲜优质的新疆薄皮核桃;G L C M i x t u r eG L C (上海安谱实验科技股份有限公司);正己烷(上海
17、麦克林生化科技有限公司);异丙醇(天津市科密欧化学试剂有限公司);甲酸(天津市科密欧化学试剂有限公司);菲啰嗪、T B HQ、D P P H、A B T S、芦丁标准品(上海麦克林生化科技有限公司);B 没食子酸标准品(上海源叶生物科技有限公司);其他试剂均为国产分析纯 主要仪器与设备HR/T MM立式高速冷冻离心机(湖南赫西仪器装备有限公司);D K D电热恒温水槽(上海精宏实验设备有限公司,太仓精宏仪器设备有限公司);p H S Ep H计(上海仪电科学仪器股份有限公司);G E N I U S K台式低速离心机(长沙市鑫奥仪器仪表有限公司);UV /UV S双光束紫外可见分光光度计(上海
18、舜宇恒平科学仪器有限公司);ME E/电子分析天平(梅特勒托利多仪器(上海)有限公司);S E A 全自动脂肪测定仪(阿尔瓦仪器有限公司);VO R T E X旋涡混合器(艾卡(广州)仪器设备有限公司);d e 电动搅碎机(佛山市顺德区顺之然电器实业有限公司);YY 型自动快速液压榨油机(郑州企鹅粮油机械有限公司);G C p r o气相色谱仪(岛津企第期冯莉等:提取方法对核桃油理化性质、化学组成及抗氧化活性的影响业管理(中国)有限公司);S I L 高效液相色谱仪自动进样器(岛津仪器(苏州)有限公司)实验方法 核桃油的提取方法采用不同的提取方法(冷榨法、索氏法、水酶法)提取核桃油,其步骤如下
19、:()冷榨法核桃破碎去壳,于液压机中进行压榨处理,经沉淀和过滤之后,将其放置于深色玻璃容器中并以锡纸包裹避光,储藏备用,核桃油得率计算公式如下:X()mM ()式()中:X为核桃油得率,;m为核桃油质量,g;M为核桃仁质量,g()索氏法参照G B 食品安全国家标准 食品中脂肪的测定,借助S E A 全自动脂肪测定仪提取核桃油,核桃破碎去壳磨浆,准确称量定量核桃浆料,滤纸包好装入索氏提取器中,加入石油醚(沸程 ),于 加热提取,抽提时间为 m i n,抽提循环为,淋洗时间为 m i n,预干燥时间为 m i n,经抽提、淋洗、预干燥后,即得核桃油,核桃油得率计算公式如下:X()mM ()式()中
20、:X为核桃得率,;m为核桃油质量,g;M为核桃浆质量,g()水酶法核桃破碎去壳磨浆,料液比为(g/m L),加料液比后于 预热h,取出调节p H至,加酶量为(木瓜蛋白酶/纤维素酶),于 水浴酶解 h,灭酶 m i n,冷却到室温后 r/m i n离心分离 m i n,即得核桃油,核桃油得率计算公式如下:X()mMC ()式()中:X为核桃得率,;m为核桃油质量,g;M为核桃仁质量,g;C为核桃仁中油脂质量分数,核桃油理化性质的测定方法过氧化值测定:参照G B 食品安全国家标准 食品中过氧化值的测定;酸值测定:参照G B 食品安全国家标准食品 中 酸 价 的 测 定 ;碘 值 测 定:参 照G
21、B/T 动植物油脂 碘值的测定;皂化值测定:参照G B/T 动植物油脂 皂化值的测定 核桃油化学组成的分析方法()核桃油脂肪酸组成分析 核桃油脂肪酸的含量采用面积归一化法进行定量,在气相中达到峰的化合物的峰面积之和被认为是,每个组分的峰面积百分比代表组分含量核桃油的甲酯化取 L核桃油于 m L离心管中,加入m L正己烷,震荡混匀,再加入 m Lm o l/L的氢氧化钾甲醇溶液,室温甲酯化m i n后,按照 g/m L向混合溶液中加入无水硫酸钠,震荡脱水,r/m i n离心m i n,取上清液过 m有机滤膜,待测气相色谱条件 F B X 色谱柱(m mm m),气化室温度 ,进样口温度 ,进样量
22、L,分流比 以N为载气,N流量 m L/m i n,H流量 m L/m i n,空气流量 m L/m i n()核桃油甘油酯组成分析 核桃油甘油酯的含量采用面积归一化法进行定量,在液相中达到峰的化合物的峰面积之和被认为是,每个组分的峰面积百分比代表组分含量核 桃 油 的 甲 酯 化取 L核 桃 油 置 于 m L棕色容量瓶,用流动相稀释至 m L,涡旋混匀,r/m i n离心 m i n,取上清液加入无水硫酸钠进行干燥后,再取上清液过 m有机滤膜,待测液相色谱条件色谱柱,P h e n o m e n e xL u n aS i l i c a()A(mm mm,m);柱温:;流动相为正己烷异
23、丙醇甲酸 (均需过 m有机滤膜):流动相流速:m L/m i n;进样量:L()核桃油中总酚含量的测定采用福林酚法测定核桃油中的总酚含量,吸取 m L核桃油于 m L离心管中,先加入 乙醇溶液 m L,再加入甲醇溶液 m L,震荡混匀后,r/m i n离心 m i n,收集上清液,最后再用 乙醇溶液定容至 m L,即为核桃油总酚提取液,待测用 乙醇溶液将一定量的没食子酸标准品配制成浓度为 g/m L的标准品储备液,继而再用 乙醇溶液将标准品储备液稀释成浓度为 g/m L、g/m L、g/m L、g/m L、g/m L、g/m L、g/m L、g/m L的没食子酸溶液,待测取核桃油总酚提取液或没
24、食子酸溶液 m L于玻璃试管中,依次加入 m L福林酚试剂(m o l/L)、m LN aC O溶液(),混匀后避光反应h,在波长 n m处测定反应体系的陕西科技大学学报第 卷吸光度值,根据没食子酸溶液浓度与吸光度值之间的线性关系计算核桃油中的总酚含量()核桃油中黄酮含量的测定参照余旭亚等 的方法测定核桃油中的黄酮含量用无水乙醇溶液将一定量的芦丁标准品配制成浓度为 g/m L的标准品 溶液备用吸取 m L核桃油样品于 m L容量瓶中,用无水乙醇溶液定容,即为核桃油稀释液分别取、m L标准品溶液或m L核桃油稀释液于 m L容量瓶中,先分别加入N a NO溶液 m L,混匀,静 置 m i n后
25、再 加入 硝酸铝溶液m L,混匀,静置m i n后再加入 N a OH溶液 m L,最后用无水乙醇溶液定容,颠倒混匀,静置 m i n后于波长 n m处测定反应体系的吸光度值,根据芦丁溶液浓度与吸光度值之间的线性关系计算核桃油中的黄酮含量()核桃油抗氧化活性的测定用无水乙醇溶液将核桃油和叔丁基对苯二酚(T e r t B u t y l h y d r o q u i n o n e,T B HQ)分别配制成 m g/m L的母液备用,现配现用,以T B HQ为阳性对照 二苯基 苦肼基(,D i p h e n y l p i c r y l h y d r a z y lF r e eR a
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- 提取 方法 核桃 理化 性质 化学 组成 氧化 活性 影响
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