溶剂萃取-高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法快速提取检测干燥恰特草中5种生物碱成分.pdf
《溶剂萃取-高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法快速提取检测干燥恰特草中5种生物碱成分.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《溶剂萃取-高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法快速提取检测干燥恰特草中5种生物碱成分.pdf(10页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、 年 月 研究论文:收稿日期:通讯联系人:(),:基金项目:刑事检验四川省高校重点实验室开放课题();年国家级大学生创新重点项目();江苏省“十四五”重点学科(公安技术)资助(苏教研函 号);江苏省高校“青蓝工程”资助(苏教师函 号):();();()();()溶剂萃取高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速提取检测干燥恰特草中 种生物碱成分史洪飞,徐伯芃,徐成鑫,周修齐,许宏福(南京警察学院刑事科学技术学院,江苏 南京;南宁市公安局特警支队,广西 南宁)摘要:恰特草是一种常见的毒品原植物,卡西酮、去甲伪麻黄碱、去甲麻黄碱是其主要的精神活性成分。筛查发现恰特草中还存在具有较强精神活性作用的甲卡西酮
2、和乙卡西酮成分。国内关于恰特草中生物碱成分的提取检测研究较少,国外也未见恰特草中甲卡西酮和乙卡西酮成分的研究。本研究通过优选提取溶剂种类、优化净化条件和色谱质谱条件,利用 的盐酸水溶液提取,二氯甲烷和 的 水溶液净化,再利用乙腈萃取,采用 色谱柱(,)分离,以 甲酸水溶液乙腈为流动相梯度洗脱,电喷雾双喷离子源()正离子模式下电离,四极杆飞行时间质谱仪目标离子采集模式()检测,外标法定量,建立了溶剂萃取高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法提取检测干燥恰特草中 种生物碱成分的方法。结果表明,种生物碱成分在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数(),检出限为 ,定量限为 。份生物碱含量差异较大的恰特草中
3、 种生物碱成分的加标回收率为 ,实验仪器精密度为 ,日内方法精密度为 ,日间方法精密度为 。该方法净化效果好,定量准确,灵敏度高,重复性好。利用该方法对国家林业局森林公安司法鉴定中心受理的 份恰特草相关案件中的检材进行检验,均检出 种生物碱成分,能够满足恰特草的理化检验鉴定要求,为恰特草中未知精神活性成分的发现和研究提供参考和指引。关键词:高效液相色谱;四极杆飞行时间质谱法;甲卡西酮;乙卡西酮;精神活性成分;恰特草中图分类号:文献标识码:,(,;,):,色谱第 卷 :,(),:(),(),(,)(),引用本文:史洪飞,徐伯芃,徐成鑫,周修齐,许宏福 溶剂萃取高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速
4、提取检测干燥恰特草中 种生物碱成分 色谱,():,():();();第 期史洪飞,等:溶剂萃取高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速提取检测干燥恰特草中 种生物碱成分 恰特草(,)又名阿拉伯茶、巧茶,是无患子目、卫矛科、巧茶属常绿开花灌木,主要生长在非洲东部、阿拉伯半岛海拔 的地区,。埃塞俄比亚、也门等国家和地区吸食人数较多,国内常出现在海关走私案件中。长期服用恰特草会造成抑郁症、口腔黏膜黑棘皮病,并对心脏、神经等组织器官造成严重损伤。年,国家食品药品监管总局、公安部、卫生计生委联合发布的精神药品品种目录(年版)中明确规定,将恰特草及其主要精神活性成分卡西酮()列为第一类精神药品进行管制,去甲伪
5、麻黄碱()列为第二类精神药品进行管制,去甲麻黄碱()的精神活性较弱,未列入管制目录。恰特草的司法鉴定是打击恰特草走私犯罪的重要一环,新鲜恰特草可从形态、理化性质三方面进行检验,但目前恰特草走私主要采取伪装成茶叶或粉碎为粉末的方式,且干燥会使恰特草中的 发生降解,因此难以从形态和 角度认定。卡西酮和去甲伪麻黄碱的含量是恰特草理化检验的重要指标,但由于卡西酮稳定性较差,其在运输和干燥过程中会不同程度地部分降解为去甲伪麻黄碱和去甲麻黄碱,为理化检验增加了不确定性。由于实验材料获取困难,国内开展的恰特草理化检验研究较少,对于干燥恰特草中是否含有可检测含量的卡西酮成分,国内存在争议。国外对于恰特草中卡西
6、酮、去甲伪麻黄碱、去甲麻黄碱的研究则较为全面,研究内容包括植物体内不同部位、不同产地和品种的恰特草间,的含量差异情况,生 物 碱 含 量 随 干 燥 和 储 存 过 程 的 变 化 情况,在植物和人体内的代谢途径,及毒理学性质,提取检测方法等。相关研究中对于不同品种恰特草中生物碱成分的含量存在一定争议:埃塞俄比亚人对恰特草依照颜色分类,普遍认为红色恰特草药效更好,卡西酮含量更高,价格也更高,但 等的研究表明二者卡西酮含量相似,且绿色品种中去甲麻黄碱、去甲伪麻黄碱含量更高,由此推测恰特草中可能存在其他物质直接或间接地增强了红色品种恰特草的精神活性作用。目前对于恰特草中卡西酮、去甲麻黄碱、去甲伪麻
7、黄碱 种主要精神活性成分多采用气相色谱法、气相色谱红外光谱法、气相色谱质谱法,、薄层色谱法、毛细管电泳法、离子 交 换 高 效 液 相 色 谱 法、高 效 液 相 色 谱法,、高 效 液 相 色 谱核 磁 共 振 联 用法,、高效液相色谱串联质谱法,进行检测。高效液相色谱高分辨质谱法的研究较少,其能够通过质谱裂解规律和碎片离子精确质量数准确地对已知、未知,化合物成分进行结构解析和物质确证,相对于高效液相色谱低分辨质谱法,其对同分异构体和结构类似物有更强的分辨识别能力;同时,高分辨质谱法对前端色谱分离要求较低,拥有更高的检测通量,广泛应用于未知物分析、农药残留检测、代谢组学等领域。基于此,本研究
8、团队利用高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法对恰特草中卡西酮的同系物进行筛查,发现恰特草中存在甲卡西酮()和 乙 卡 西 酮()成分(相关确证内容将另文发表)。研究表明甲卡西酮和乙卡西酮均拥有较强的精神活性作用,目前,甲卡西酮被列入第一类精神药品,乙卡西酮被列入非药用类麻醉药品和精神药品管制品种增补目录管制。本文基于溶剂萃取高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法建立了恰特草中卡西酮、去甲麻黄碱、去甲伪麻黄碱、甲卡西酮、乙卡西酮等 种生物碱成分的提取检测方法,为恰特草的理化检验鉴定及精神活性成分的研究提供参考。实验部分 仪器、试剂与材料 高效液相色谱四极杆飞行时间质谱仪,配电喷雾双喷离子源(源)(美国 公
9、司);电子天平(瑞士 公司);涡旋振荡仪(德国 公司);微量高速离心机(美国 公司);纯水仪(美国 公司)。恰特草由国家林业局森林公安司法鉴定中心提供;卡西酮标准溶液(质量浓度为 ,纯度)购自美国 公司;去甲伪麻黄碱标准溶液(质量浓度为 ,纯度)和甲卡西酮、乙卡西酮、去甲麻黄碱标准溶液(质量浓度为 ,纯度)购自天津阿尔塔科技有限公司。浓盐酸、氢氧化钠、二氯甲烷、氯化钠(分析纯)购自南京化学试剂股份有限公司;甲醇、乙腈(色谱色谱第 卷纯)购自美国 公司。标准溶液配制 单一标准储备液的配制:精密移取卡西酮、去甲伪麻黄碱标准溶液 ,去甲麻黄碱、甲卡西酮、乙卡西酮标准溶液各 ,分别置于 容量瓶中,利用
10、乙腈定容至刻度,混匀,制成质量浓度为 的单一标准储备液,置于棕色试剂瓶,保存。混合标准中间液的配制:精密移取 种生物碱成分的单一标准储备液各 ,置于同一 容量瓶中,利用乙腈定容至刻度,混匀,制成质量浓度为 的混合标准中间液,置于棕色试剂瓶,保存。系列混合标准工作溶液的配制:利用 甲酸水溶液将混合标准中间液稀释成质量浓度为、的系列混合标准工作溶液。表 种生物碱的保留时间、母离子精确质量数、子离子精确质量数、碎裂电压、碰撞能 ,()()()实验条件 样品前处理条件 精确称取 粉碎后的干燥恰特草于 聚丙烯离心管中,加入 的盐酸水溶液,涡旋 ,以 离心 ;取上清液 于 离心管中,加入 二氯甲烷,涡旋
11、,以 离心 ;取上清液 于 微量离心管中,加入 的氢氧化钠水溶液,涡旋 ,加入 乙腈,涡旋振荡 ,加入 固体,涡旋 ,以 离心 ;取上清液,用 甲酸水溶液稀释 倍、倍、倍,分别对 种目标组分进行定量分析。色谱条件 色谱柱:(,);柱温:;流动相:为 甲酸水溶液,为乙腈;进样量为 ;流速:;梯度洗脱程序:,;,;,;,;,;,。质谱条件 离子源:源;扫描方式:正离子全扫描;毛细管电压:;鞘气温度:;鞘气流速:;干燥气温度:;干燥气流速:;单极质谱全扫描模式(),一级质谱 扫 描 范 围 ,采 集 速 率 为 。目标离子采集模式(),一级质谱扫描范围 ,采集速率为 ,二级质谱扫描范围 ,采集速率为
12、 。数 据 采 集 时 采 用 参 比 离 子(,嘌 呤,其 准 分 子 离 子 精 确 质 量 数 为 )和(,其准分子离子精确质量数为 )进行实时质量校准。种生物碱的保留时间、母离子精确质量数、子离子精确质量数、碎裂电压、碰撞能等见表。结果与讨论 样品稀释溶剂的优化 采用乙腈、不同比例的乙腈 甲酸水溶液(、,)、甲酸水溶液为稀释溶剂,将乙腈为溶剂的 混合标准中间液稀释为 的混合标准溶液后进样分析。当使用乙腈、乙腈 甲酸水溶液(、,)稀释混合标准中间液时,种生物碱成分均存在溶剂效应(出现峰展宽、峰分叉现象),采用乙腈 甲酸水溶液第 期史洪飞,等:溶剂萃取高效液相色谱四极杆飞行时间质谱法快速提
13、取检测干燥恰特草中 种生物碱成分(、,)、甲酸水溶液为稀释溶剂时,无明显溶剂效应产生,因此选择 甲酸水溶液为标准样品和实验样品的稀释溶剂。色谱柱的优化 本文对比了 种色谱柱 (,)、(,)、(,)对 种生物碱(质量浓度均为 )的分离效果,结果见图。色谱柱的固定相采用不封端型键合方式,硅胶表面裸漏的硅羟基对碱性化合物会产生额外的吸附作用,造成色谱峰展宽、拖尾,不利于定性定量检测;和 色谱柱的固定相采用封端型的键合方式,色谱峰峰形良好;色谱柱的 键合基团对 种生物碱成分的保留选择性小,无法将卡西酮和去甲伪麻黄碱完全分离;苯基键合色谱柱 通过 相互作用可以实现 种生物碱成分的基线分离,因此选择 色谱
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 溶剂萃取 高效 色谱 四极杆 飞行 时间 质谱法 快速 提取 检测 干燥 恰特草中 生物碱 成分
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。