提取方法对茭白多糖结构及生物学活性的影响.pdf
《提取方法对茭白多糖结构及生物学活性的影响.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《提取方法对茭白多糖结构及生物学活性的影响.pdf(6页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、2023年第36 卷第8 期功能与营养摘要:以艾白多糖为研究对象,采用热水提法、超声波酶法、微波法及低共熔溶剂法制备荧白多糖JB-1、JB-2、JB-3和JB-4,研究其结构及生物学活性。结果表明:JB-1 JB-4均含有糠醛酸和蛋白质,不含硫酸根,其中JB-4多糖得率、糠醛酸含量最高,蛋白质含量最低;JB-1 JB4均由半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖和木糖组成;JB-2JB-4具有三螺旋结构,JB-1没有此结构。4种多糖均有一定的抗氧化能力,但均不如维生素C。在降血脂上,JB4 比其他多糖具有更好的降血脂能力。综上所述,茭白多糖最优提取方法为低共熔溶剂法。关键词:艾白;
2、多糖;提取方法;抗氧化能力;降血脂能力Effect of extraction methods on the structure andbiological activity of Zizania latifolia Turcz.polysaccharidesJIA Shan-shan,PENG Yuan,WANG Lu,REN Chen-chen,LIU Li-ying2,LI Chang-zheng(1.Sanquan College,Xinxiang Medical University,Xinxiang 453003,Henan,China;2.Xiangya School of Me
3、dicine,Central South University,Changsha 410008,Hunan,China)Abstract:Taking Zizania latifolia Turcz.polysaccharides as the research object,Zizania latifoliaTurcz.polysaccharides JB-1,JB-2,JB-3 and JB-4 were prepared by high temperature water extraction,ultrasonic enzymatic method,microwave method an
4、d low eutectic solvent method,and their structuresand biological activities were studied.The results showed that JB-1-JB-4 contained furfural acid andprotein,but no sulfate.JB4 had the highest polysaccharides yield and furfural acid content,while thelowest protein content.JB-1-JB-4 were composed of
5、galacturonic acid,glucose,galactose,arabinose,mannose,rhamnose and xylose.JB-2-JB-4 had a triple helix structure,while JB-1 had not.Four poly-saccharides had certain antioxidant abilities,but none were as good as vitamin C.JB4 had better hypo-lipidemic ability than other polysaccharides.In summary,t
6、he best extraction method of Zizania latifoliaTurcz.polysaccharides was the low eutectic solvent method.Key words:Zizania latifolia Turcz.;polysaccharide;extraction method;antioxidant ability;hypolipi-demic ability中图分类号:TS201.1菱白含有多种营养物质,如氨基酸、维生素、多酚和黄酮等,具有抗氧化、抗癌、保鲜、调节免疫力收稿日期:2 0 2 3-0 5-2 8基金项目:河南省科
7、技攻关项目(2 2 2 1 0 2 31 0 37 4);河南省科技攻关项目(1 2 91);新乡医学院三全学院骨干教师培养计划(SQ 2 0 2 3G G JS0 5);校级教改课题(2 0 2 1 XJJG23)作者简介:贾闪闪(1 98 9一)女,硕士,讲师,研究方向为药物提取和活性成分及作用机制研究。通信作者:李长正(1 957 一)男,博士,教授,研究方向为肿瘤分子生物学及药物干预机制。粮食与油脂提取方法对菱白多糖结构及生物学活性的影响贾闪闪,彭媛,王璐,任晨晨,刘立英,李长正(1.新乡医学院三全学院,河南新乡4530 0 3;2.中南大学湘雅医学院,湖南长沙41 0 0 0 8)文
8、献标志码:A文章编号:1 0 0 8-9 57 8(2 0 2 3)0 8-0 1 33-0 6等活性1-2 。植物多糖是1 种天然生物活性物质,主要由半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖等组成3,具有133134抗氧化、抗癌等活性,在医药食品中有广泛应用4-5。多糖的生物活性与其分子质量和结构相关,分子质量越小,抗氧化能力越强。但也有研究6-7 表明,多糖的分子质量越小并不是对自由基清除能力就越强,而是与其结构相关。多糖的提取工艺直接影响多糖化学组成和分子质量,也会影响其生物学活性。目前多糖的提取工艺主要有热水提法、超声波法、酶法、微波法及低共熔溶剂法等。本试验以菱白为原料,采用热水提法、超声波酶法、
9、微波法及低共熔溶剂法制备菱白多糖,研究其化学组成和结构差异及其抗氧化和降血脂活性差异,筛选出高活性菱白多糖的提取工艺,以期为菱白多糖的研究和菱白深加工提供参考。1材料与方法1.1 材料与试剂白,市售;半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖、木糖标准品,北京索莱宝科技有限公司;胰脂肪酶(50 0 U/g)、纤维素酶(1 0 U/m g)、维生素C、A BT S,上海阿拉丁生化科技股份有限公司;甘氨胆酸钠、牛黄胆酸钠,上海麦克林生物科技有限公司;SPF级雄性昆明小鼠(体质量182 2 g),购自河南省实验动物中心(许可证号为SCXK(豫)2 0 2 1-0 0 0 9);氯化胆碱、二
10、甲基亚矾、三氯乙酸、无水乙醇、铁氰化钾、苯酚、浓硫酸,分析纯。1.2仪器与设备LC-WB-6智能恒温水浴锅,上海市力辰科技有限公司;MST-3506全自动多功能酶标仪,山东恒美科技有限公司;YM-008多功能超声波清洗机,深圳市方奥微电子有限公司;MDS-6G微波萃取仪,上海新仪微波化学科技有限公司;FTIR-650S傅里叶变换红外光谱仪,天津港东科技股份有限公司;APS-8026PLUS高效液相色谱仪,德国奥普斯仪器设备有限公司;RE-5003(EX)防爆旋转蒸发仪,郑州凯瑞仪器设备有限公司。1.3试验方法1.3.1艾白多糖的制备热水提法:称取1 0 g菱白粉(菱白清水洗净后,切片,以6 0
11、 烘干,粉碎过0.42 5mm筛)置于400mL100水中煮沸提取4h后,过滤取上清液,旋蒸至原体积的0.1 倍后,用无水乙醇调至乙醇体积分数9 5%,以4静置过夜,然后以50 0 0 r/min离心1 0 min,沉淀以50 烘干,用水复溶至10mg/mL,采用纤维素-琼脂糖凝胶柱纯化(先用去粮食与油脂离子水洗涤后,再用0.5mol/L氯化钠溶液洗脱收集),透析脱盐后浓缩烘干,即为热水提法菱白多糖(JB-1)3。超声酶法:称取1 0 g菱白粉置于40 0 mL60水中,添加质量分数2%纤维素酶后,以40 0 W超声提取30 min后,过滤取上清液,后续纯化方法同热水提法,制得超声酶法菱白多糖
12、(JB-2)。微波法:称取1 0 g菱白粉置于40 0 mL50水中,以40 0 W微波提取1 0 min后,过滤取上清液,后续纯化方法同热水提法,制得微波法菱白多糖(JB-3)4。低共熔溶剂法:以尿素-氯化胆碱摩尔比1:1 9作为提取溶液,将1 0 g菱白粉置于2 0 0 mL70提取溶液中,浸泡提取42 min后,过滤取上清液,后续纯化方法同热水提法,制得低共熔溶剂法菱白多糖(JB-4)。1.3.2小鼠肝脏匀浆液制备取小鼠肝脏,清洗干净后,添加1 0 倍肝脏质量的生理盐水后匀浆,以50 0 0 r/min离心1 0 min,取上清液即为小鼠肝脏匀浆液。1.3.3艾白多糖结构测定JB-1JB
13、-4中的多糖含量、蛋白质含量、糖醛酸含量和硫酸根含量分别根据苯酚硫酸法3、考马斯亮蓝法 、硫酸咔唑法8 和硫酸钡比浊法 测定;单糖组成采用盐酸高温水解后,根据1-苯基-3-甲基-吡唑啉酮柱前衍生-高效液相色谱法测定7 ;三螺旋结构、分子质量和官能团分析分别根据刚果红染色法、高效液相凝胶色谱法和傅里叶变换红外光谱仪进行测定1 0 1.3.4茭白多糖抗氧化能力评价以铁离子还原率7 、羟基自由基清除率7 ABTS自由基清除率1 及抗脂质氧化率1 2 为评价指标,对不同质量浓度的 JB-1 JB-4 多糖进行测定,以同质量浓度的维生素C作为对照。1.3.5艾白多糖降血脂能力评价以胰脂肪酶活性的抑制作用
14、1 3、甘氨胆酸钠结合率1 4 和牛黄胆酸钠结合率1 4 为评价指标,对不同质量浓度的 JB-1JB-4多糖进行测定。2结果与分析2.1不同提取方式对艾白多糖结构的影响2.1.1提取方式对茭白多糖化学组成的影响由表1 可知:JB-1多糖得率、糖醛酸含量最低,蛋白质含量最高,而JB-4多糖得率、糖醛酸含量最2023年第36 卷第8 期/%02023年第36 卷第8 期高,蛋白质含量最低。不同提取方法对细胞壁造成的破坏程度不同,也影响其多糖得率,并且辅助提取法具有一定的修饰作用,如降解等,可以使多糖不表1 提取方式对菱白多糖化学组成的影响/%多糖多糖得率JB-16.71 0.09cJB-29.74
15、 0.18aJB-38.90 0.14bJB-410.45 0.28a注:同列不同字母表示差异显著;“-”表示未检出,下同。多糖半乳糖醛酸JB-122.03 0.05dJB-223.00 0.07cJB-323.64 0.09 bJB-424.56 0.06a2.1.3提取方式对白多糖三螺旋结构的影响由图1 可知:JB-1刚果红溶液与空白刚果红溶液相比,最大紫外吸收波长呈现下降趋势,说明没有三螺旋结构;而JB-2JB-4与空白刚果红溶液相比,最大紫外吸收波长未呈现下降趋势,说明具有三螺旋结构。多糖的构象不仅与糖苷键连接、支化程度及取代基团的静电排斥作用有关,还与提取溶液的性质和方式有关,JB-
16、2JB-4具有三螺旋结构,可能是受提取方式和溶剂性质的影响1 6 。510rJB-1-JB-4空白-JB-3505u/斗500495490F4854804750图1 提取方式对白多糖三螺旋结构的影响2.1.4提取方式对艾白多糖红外光谱的影响由图2 可知:不同提取方式得到的菱白多糖在4004000cm-红外下形成的光谱图差异很小,仅在出峰强度上稍有差异,在出峰位置上几乎没有差异,说明提取方式对多糖的一级结构没有造成影响。粮食与油脂稳定的键断开,从而提高多糖得率或活性。2.1.2提取方式对艾白多糖单糖组成的影响由表2 可知:JB-1JB-4均由半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖和
17、木糖组成,其中半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖含量较蛋白质含量糖醛酸含量 硫酸根含量1.24 0.09 a16.86 0.35b0.51 0.03b18.74 0.41a0.52 0.03b18.05 0.46a0.42 0.02c19.01 0.48 a表2 提取方式对白多糖单糖组成的影响葡萄糖半乳糖24.00 0.06b21.36 0.08b24.36 0.05a20.43 0.09c22.59 0.08d21.68 0.07a23.14 0.07c20.26 0.06dO0.1NaOH浓度/(mol/L)135高。4种提取方式的菱白多糖单糖各组成均有差一别,表明不同提取方式对茭白多糖
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 提取 方法 茭白 多糖 结构 生物学 活性 影响
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【自信****多点】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【自信****多点】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。