年轻卵巢储备功能减退患者囊胚非整倍体率及妊娠结局的分析.pdf
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1、.1236生殖医学杂志2 0 2 3年8 月第32 卷第8 期DO1:10.3969/j.issn.1004-3845.2023.08.015年轻卵巢储备功能减退患者囊胚非整倍体率及妊娠结局的分析宋雪梅,邓星,袁振亚,严为巧,黄晓洁1,袁牧1*(1.徐州市妇幼保健院生殖医学中心,徐州2 2 10 0 9;2.宜春市妇幼保健院生殖医学中心,宜春336 0 0 0)【摘要】目的探讨年轻(0.05);D O R组的基础窦卵泡数(AFC)和抗苗勒管激素(AMH)显著低于对照组(P0.01),而基础FSH(bFSH)水平显著高于对照组(P0.05)。两组患者整倍体囊胚移植周期的临床妊娠率、流产率和活产率
2、亦无显著性差异(P0.05。结论年轻DOR女性卵巢储备的降低并不影响其囊胚的整倍体率和整倍体胚胎移植后的活产率。【关键词】卵巢储备功能减退;染色体非整倍体率;活产率【中图分类号】R711.6卵母细胞质量是辅助生殖技术(ART)助孕治疗中能否成功妊娠的关键因素之一。目前在实施ART前一般会对患者的卵巢储备功能进行评估,包括患者年龄、基础窦卵泡数(AFC)、基础卵泡刺激素(bFSH)和抗苗勒管激素(AMH)等1-2 。随着女性年龄增加,卵巢储备功能逐步下降。近年来关于卵巢储备功能减退(DOR)的研究主要集中在不同促排卵方案在DOR患者中的应用效果3-41,以及雄激素、辅酶Q10、生长激素等预处理方
3、法对于DOR患者的辅助治疗5。之前有文献报道,ART治疗中35岁以下妇女每周期的活产率为32.2%,35至37岁妇女为2 6.2%,38 至40 岁妇女则进一步下降,仅为18.5%6,故本研究中将年轻女性特指为 38 岁的女性。Morin等7 研究报道年龄 38 岁DOR女性活产率低于卵巢储备功能正常患者的原因是其每个周期获得的卵母细胞数量少而非其卵母细胞的发育潜能差。但对于年轻(38 岁)DOR女性,其卵巢储备功能的过早减退是否会引起卵母细胞质量下降及增加胚胎染色体非整倍体率风险的研究报道仍较少。胚胎植人前非整倍体遗传学检测(PGT-A)是在胚胎植入宫腔前进行染色体数目的检测,以筛查非整倍体
4、胚胎,挑选染色体正常的胚胎植人子宫,从而降低早期流产的风险 。本研究通过对因反复【文献标识码】A自然流产、反复种植失败和严重畸精子症行PGT-A的年轻DOR患者进行研究,探讨年轻女性DOR是否会影响胚胎的染色体非整倍体率,并进一步观察整倍体囊胚移植后胚胎的继续发育潜能。一、资料与方法1.研究对象:回顾性分析2 0 2 0 年1月至2 0 2 2年9月在徐州市妇幼保健院生殖医学中心行PGT-A患者的临床资料,共计18 0 例患者(2 43个周期),共收集达活检标准的囊胚7 37 枚。将纳人患者按照是否存在DOR分为对照组(155例,196 个周期)和DOR组(2 5例,47 个周期)。纳入标准:
5、(1)临床诊断为DOR(b FSH 10 U/L,A FC 57 个,AMH1.1ng/ml);(2)女方年龄 38 岁;(3)反复种植失败(移植次数3次或累计移植46 个优质胚胎或3个高评分囊胚仍未种植);(4)反复自然流产(2 次自然流产);(5)严重畸精子症。其中DOR组纳人标准满足(1)(2)的同时需满足(3)或(4)或(5),对照组纳入标准满足(2)的同时需满足(3)或(4)或(5)。排除标准:(1)卵巢手术史;(2)单【收稿日期】2023-01-07;【修回日期】2 0 2 3-0 3-2 8【基金项目】江苏省妇幼健康科研项目(F202162)【作者简介】宋雪梅,女,山东莱西人,博
6、士,副研究员,组织胚胎学专业:(*通讯作者)生殖医学杂志2 0 2 3年8 月第32 卷第8 期基因病;(3)夫妇一方染色体数目或结构异常;(4)手术取精者;(5)存在其它影响妊娠及流产因素者。所有行PGT-A的患者均签署知情同意书。本研究将非整倍体及嵌合体胚胎的移植排除在研究范围之外。2.研究方法:(1)体外受精及囊胚培养:常规促排卵后B超引导下穿刺取卵,在培养箱中培养4 h后拆除卵母细胞周围的颗粒细胞,MI期卵母细胞行ICSI授精,使用G-TLTM一步式培养液(Vitrolife,瑞典)进行胚胎培养,在时差成像培养箱(EmbryoScope十,Vitrolife,瑞典)内培养至囊胚。(2)
7、囊胚活检和PGT-A:采用Gardner评分标准10 o1对囊胚进行分级,评分3BC或3CB的囊胚用活检针取35个囊胚滋养外胚层细胞后按照玻璃化冷冻试剂盒(加藤,日本)操作说明进行玻璃化冷冻。活检细胞全基因组扩增采用胚胎植人前染色体非整倍体检测试剂盒,二代测序采用Illumina测序平台(北京嘉宝仁和),其中整条染色体异常、4Mb及以上的拷贝数变异和染色体异常比例大于8 0%的囊胚为非整倍体囊胚,异常比例2 0%8 0%的囊胚为嵌合体囊胚。(3)解冻周期移植及妊娠结果判定:采用人工激素替代周期准备子宫内膜,所有患者均进行单囊胚移植,于移植日给予黄体支持,移植术后5周行B超检查,宫内见孕囊及原始
8、心管搏动者判定为临床组别周期数对照组196DOR组47注:与对照组比较,*P0.05,#P 0.0 1。2.患者胚胎实验室指标比较:DOR组与对照组相比,2 PN率、囊胚形成率、可用囊胚形成率和活组别周期数对照组196DOR组47组别周期数对照组196DOR组47:1237妊娠,孕2 8 周后的活胎分娩视为活产。(4)观察指标:患者的基本资料(年龄、不孕年限、AFC、b FSH、AMH、b E,等)、胚胎实验室指标(2 PN率、囊胚形成率、活检囊胚整倍体率等)及妊娠结局(临床妊娠率、流产率、活产率等)。2 PN率=正常受精胚胎数/获卵数10 0%,囊胚形成率=总囊胚数/正常受精胚胎数10 0%
9、,可用囊胚形成率=活检囊胚数/正常受精胚胎数10 0%,整倍体率=整倍体囊胚数/活检囊胚数10 0%,非整倍体率=非整倍体囊胚数/活检囊胚数10 0%,嵌合体率=嵌合体囊胚数/活检囊胚数10 0%,临床妊娠率=临床妊娠周期数/移植周期数X100%,流产率=流产周期数/移植周期数10 0%,活产率=活产分娩周期数/移植周期数X100%。3.统计学分析:采用SPSS17.0软件对数据进行统计分析。计量资料用均数士标准差(士s)表示,组间比较采用t检验;计数资料以率(%)表示,组间比较采用检验。P0.05为差异有统计学意义,P0.05);D O R组的AFC和AMH显著低于对照组(P0.01),而b
10、FSH水平显著高于对照组(P0.05)(表 2)。囊胚形成率54.15(913/1686)54.81(74/135)非整倍体率28.63(195/681)35.71(20/56)bE2/(pmol/L)184.42118.58bFSH/(U/L)6.692.2110.752.56*可用囊胚形成率40.39(681/1686)41.48(56/135)嵌合体率13.51(92/681)14.29(8/56)AMH/(ng/ml)3.792.490.720.33#.12383.患者移植整倍体囊胚后的妊娠结局比较:对照组有12 5个周期进行了单囊胚移植,DOR组有2 0个周期进行了单囊胚移植。移植周
11、期的患者年龄、不孕年限、子宫内膜厚度及优质囊胚移植周期比例(移植D5/D6优质囊胚周期占移植周期比例)均无显著性差异(P0.05);临床妊娠率、流产率和活产率亦无显著性差异(P0.05)表3)。至撰稿时对照组随访表3两组患者整倍体囊胚移植周期的一般资料及妊娠结局比较(元士s),%子宫内膜优质囊胚移植组别周期数年龄对照组12531.573.5663.202.75DOR组2032.452.724.053.33讨论生理状态下女性卵巢内原始卵泡随着年龄的增长而逐渐闭锁、退化1。本研究结果显示,虽然年轻38岁)DOR患者其AMH和AFC均显著低于对照组、bFSH显著高于对照组(P均 0.0 5),但两组
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