睡莲酚对小鼠酒精性肝损伤的保护作用.pdf
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1、 基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(.)自治区天山英才计划第三期(.)作者简介:郭子雨女硕士生研究方向:食品科学与工程:.通信作者:李晨阳女博士生副研究员研究方向:中药民族药新药研究与开发:.睡莲酚对小鼠酒精性肝损伤的保护作用郭子雨赵军姚雨含李晨阳(.新疆大学生命科学与技术学院新疆 乌鲁木齐.新疆维吾尔自治区药物研究所维吾尔药重点实验室新疆 乌鲁木齐)摘要:目的 研究睡莲花中标识性成分睡莲酚对急性酒精性肝损伤()的保护作用 方法 只雄性昆明种小鼠随机分为:正常组、模型组、阳性药联苯双酯组()、睡莲酚低、中、高剂量组(、)每组 只 根据分组给药每天灌胃给药 次每次给药 后除正常组外其余
2、各组小鼠灌胃给予 白酒()连续 后取血并收集肝组织 染色观察小鼠肝脏病理情况检测小鼠血清、和 含量测定小鼠肝组织、及 水平 检测、的 表达水平 结果 与正常组相比模型组血清、活性、肝组织、水平增高(.)和 活性显著降低(.)、水平显著增加(.)、表达降低(.)肝组织出现明显的空泡和细胞坏死 与模型组相比睡莲酚给药组小鼠能有效改善血清中的、活性(.)、含量显著下降(.)水平明显降低(.)和 水平明显升高(.)、的水平明显降低(.)结果显示睡莲酚给药组中 的表达水平上调 的表达下调 信号通路显著激活 结论睡莲酚对 有较好的防治作用其机制与调控/抗氧化通路相关这可能为 治疗方法的发展提供新思路关键词
3、:雪白睡莲花睡莲酚酒精性肝损伤/信号通路中图分类号:.文献标志码:文章编号:():./.(.):().:()().().().()()()().()()()().、()()().(.)(.)(.)(.)(.).药学研究 .()(.)(.).()(.).:/酒精性肝损伤()是由于长期或大量饮酒所导致的肝脏细胞结构异常和功能障碍性疾病 若无有效的治疗方法 会进一步发展成为酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、肝纤维化和肝硬化 近年来 已成为肝脏损伤的第二大病因仅次于病毒性肝炎 睡莲花()为睡莲科睡莲属植物雪白睡莲的干燥花蕾具有清热补心、湿脑安神、降热养肝之功效临床用于心虚、肝虚以及热性感冒等疾病的治疗是维吾尔
4、抗肝炎复方制剂炎消迪娜尔糖浆的主要药味之一 研究显示睡莲酚()是该药材的主要特征性化合物对半乳糖胺、刀豆蛋白诱导的急性肝损伤以及四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化均显示了较好的防治作用 因此本文通过小鼠急性 模型研究睡莲酚对 的防治作用及其作用机制以期可为睡莲花的开发利用提供数据参考 材料与方法.材料.动物 级雄性昆明种小鼠 只体重 购自新疆医科大学实验动物中心:生产许可证号:(新)实验动物使用许可证号:(新)伦理审查编号:饲养条件:温度 湿度换气良好环境清洁无外来传染源自由饮食和饮水.主要试剂 睡莲酚(自制纯度.)二锅头白酒(北京红星股份有限公司)联苯双酯滴丸(北京协和药厂)总超氧化物歧化酶()、丙
5、二醛()、谷胱甘肽()、甘油三酯()试剂盒(、南京建成科技有限公司)小鼠白细胞介素()、和小鼠肿瘤 坏 死 因 子 ()试 剂 盒(、上海江来生物科技有限公司)油红 和 染色试剂盒(、北京索莱宝公司)其他试剂为国产分析纯.主要仪器 全自动化学发光免疫分析仪(厦门优迈科医学仪器)酶标仪(美国赛默飞世尔科技公司)全湿恒温培养摇床(上海一恒科学仪器有限公司)高速冷冻离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司)低速冷冻离心机(湖南凯达科学仪器有限公司).实验方法.动物分组及处理小鼠 造模参照文献方法 将健康雄性昆明小鼠 只适应性喂养 周后根据体重随机分为正常组、模型组、阳性对照联苯双酯组()和睡莲酚低中高剂
6、量组(、)每组 只 每天按设定剂量灌胃给药正常组和模型组灌胃给予等量蒸馏水 每次给药 后除正常组外其余各组小鼠灌胃给予 白酒()连续 末次给药并禁食 后摘眼球取血静置后 离心 分离血清冻存于 冰箱待检 颈椎脱臼处死小鼠摘取肝脏称重计算肝脏指数:肝脏指数()脏器质量()/体质量()将部分肝组织以预冷生理盐水冲洗置于多聚甲醛中固定用于病理学观察再以锡箔纸包裹剩余肝脏放入液氮中速冻后放入 冰箱待测.血清生化指标的测定采用全自动生化仪检测小鼠血清、和 含量.肝组织生化指标的测定精密称取小鼠肝组织按照重量体积比加入 倍体积的生理盐水剪碎组织冰水浴中制备匀浆 离心 取上清液按照试剂盒说明测定小鼠肝组织、及
7、 水平.病理组织学检查常规石蜡包埋切片进行 及油红 染色在光镜下观察肝组织病理学变化.检 测、的 表达以离心柱法抽提肝脏组织中的总 在冰上配制体系进行反转录实验以实时荧药学研究 .光定量 考察 的表达量.统计学分析 实验结果以 采用 软件进行数据分析多组间显著性比较采用单因素方差分析两组之间显著性比较采用 检验水准为.时有统计学差异 结果采用.软件作图表 引物序列组成基因引物 结果与分析.睡莲酚对 小鼠血清、水平及肝脏指数的影响 在试验过程中正常对照组小鼠生长状况良好食欲旺盛毛发光泽未发生死亡而模型组小鼠随着造模时间延长小鼠口唇发绀粪便干硬偏黄小鼠食量减少体形消瘦且死亡 只说明酒精对小鼠产生严
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