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收稿日期:2023-03-29作者简介:戚世媛(1964),女,安徽寿县人,教授,主要从事体育科研和教学工作。基金项目:陕西省自然科学基金项目(2003C137);陕西省体育局常规项目(14041)女贞子提取物对运动训练大鼠血清及某些组织相关酶活性的影响戚世媛(西安石油大学 体育学院,陕西 西安 710065)摘 要:建立力竭跑台训练模型,检测大鼠血清 ALT、AST、LDH、CK 活性以及肝脏、心肌、股四头肌相关酶活性,研究女贞子提取物对大鼠运动能力和血清酶活性的影响。实验结果,与安静组比较,运动组血清 ALT、AST、LDH 和 CK 活性极显著升高(P0.01),肝脏、心肌、股四头肌相关酶活性极显著升高(P 0.01),与运动组比较,女贞子组血清 CK 活性有极显著下降(P 0.01),ALT、AST 和 LDH 活性呈显著下降(P 0.05),心肌 AST、肝脏 LDH 活性有极显著下降(P 0.01);肝脏 ALT、心肌 SDH 和股四头肌SDH 活性呈显著下降(P 0.05)。说明女贞子提取物可以调节大鼠血清酶和肝脏、心肌、股四头肌相关酶的活性,可能是延缓运动性疲劳的重要因素。关键词:女贞子;血清酶;运动能力;大鼠中图分类号:R285.5 文献标志码:A 文章编号:1008-3871(2023)05-0050-04DOI:10.16752/ki.jylu.2023.05.012 女贞子是木犀科,多年生木本植物,其干燥果实女贞子是重要的中药1。含有齐墩果酸、裂环环烯醚萜、对羟基苯乙醇、磷脂、多糖、挥发油、微量元素等多种化学成分,具有多种药理作用2。本实验旨在研究女贞子提取物对运动训练大鼠血清酶活性及肝脏、心肌及股四头肌相关酶的影响,研究女贞子提取物提高运动能力的机制,为其在运动训练实践中抗肌肉疲劳、内脏疲劳和神经疲劳的作用提供实验依据。1 研究对象及方法1.1 研究对象由西安交通大学医学院实验动物中心提供的二级雄性(SD)大鼠 24 只,鼠龄 42 天(体质量 180 220g/只),实验动物许可证批号为 SYXK(陕)2007-003。1.2 动物分组及训练方案训练方法:饲养、训练在陕西师范大学国家二级实验室内。室内温度(235)摄氏度,相对湿度 4070%,照明 12h:12h。将试验动物大鼠适应性饲养 7天后,将大鼠随机分为:安静组、运动组和女贞子组,每组 8 只。每天训练前做适应运动,5 分钟后正式训练,训练模型为坡度跑台试验,每天运动训练后记录力竭时间,为期 6 周(见表 1)。给药方法:安静组和运动组灌服剂量为 20mL/kg 的 Tween-80(3.82mmolL),女贞子组灌服20mLkg 用 3.82mmolLTween-80 对女贞子提取物的溶解液,药物浓度为 500mgL,灌服时间在每天 8 点10 点即跑台训练之前,灌服 3 小时后进行训练。表 1 实验动物的运动训练方案周次速度(m/min)坡度()运动时间(min)运动强度(VO2max)11502058.41.7215.252058.41.7315.253058.41.7426.852074.32.9526.853074.32.9626.8102081.03.51.3 实验仪器及测试方法仪器:电动跑台;台式高速冷冻离心机、分光光度计、紫外分光光度计。测试指标:血清 ALT、AST、LDH、CK、组织2023 年 9 月第 33 卷 第 5 期榆 林 学 院 学 报JOURNAL OF YULIN UNIVERSITYSep.2023Vol.33 No.5ALT、AST、LDH 和 SDH 等,所有指标测试与计算一律按照南京建成生物研究所提供的试剂盒说明书进行测定。1.4 取材及样品制备取材:将 3 组试验大鼠用 2.25mol/L 乌拉坦(0.5mL/kg)腹腔麻醉后,断髓迅速提取血液,置于预冷的生理盐水中洗净血污,再用滤纸吸干后,置于 20冰箱保存备用。血清的制备:取血后置 37 水浴中 30min 后,然后以 25003000r/min 离心 10min,提取上清即血清,并于 4冰箱保存备用。组织匀浆的制备:称取适量各组织(0.21 g)于研钵中,按 1 9 的比例(1 g 各组织加 9mL 匀浆介质)加入预冷的匀浆介质(8 g/L NaCl 溶液),在冰浴条件下制备匀浆后,3 000 r/min 低温(4)下离心1015 min,取上清液,4 冰箱冷藏或20 冰箱冰冻备用。1.5 统计学处理应用 SPSS12.0 统计软件进行试验数据处理。计量资料以“均值标准差”表示;组间比较进行 t检验,P0.05 为差异有统计学意义。2 实验结果与分析2.1 女贞子提取物对运动训练大鼠血清 ALT、AST、LDH、CK 活性的影响表 2 结果显示,运动训练后大鼠血清酶活性明显升高。运动组与安静组比较,运动组血清 ALT、AST、LDH、CK 活性均极显著性升高(P 0.01);加入女贞子提取物干预后,女贞子组与安静组比较,女贞子组血清 CK 活性有极显著性升高(P 0.01),而 AST、LDH 活性呈显著性升高(P 0.05),ALT 有升高的趋势,但无显著性差异;女贞子组与运动组比较,女贞子组血清 CK 活性有极显著性下降(P 0.01);ALT、AST、LDH 活性均呈显著性下降(P 0.05)。表 2 女贞子提取物对运动训练大鼠血清 ALT、AST、LDH、CK 活性的影响(U/L)指标/组别安静组 运动组女贞子组变化率/%ALT(UL-1)38.186.6756.8810.1544.236.08+48.98-22.24AST(UL-1)138.2315.24212.6560.67198.6542.14+53.84-6.58LDH(IU/L)68.877.1289.212.6680.074.55+29.53-10.25CK(IU/ml)0.840.112.860.371.452.01+240.48-49.30注:与安静组相比,表示差异显著(P 0.05),表示差异极显著(P 0.01);与运动组相比,表示差异显著(P 0.05),表示差异极显著(P 0.01)。表示运动组与安静组变化率,女贞子组与运动组变化率。下表同。2.2 女贞子提取物对肝脏、心肌、股四头肌相关酶活性的影响表 3 结果显示,运动训练后大鼠肝脏 ALT、LDH心肌 AST、SDH 和股四头肌 SDH 活性明显升高。运动组与安静组比较,运动组肝脏 ALT、LDH 心肌AST、SDH 和股四头肌 SDH 活性均有极显著的升高(P 0.01);加入女贞子提取物干预后,女贞子组与安静组比较,女贞子组肝脏 LDH、心肌 AST 活性有极显著的升高(P 0.01);肝脏 ALT、心肌 SDH 活性呈显著的升高(P 0.05),股四头肌 SDH 活性无显著变化;女贞子组与运动组比较,女贞子组心肌AST、肝脏 LDH 活性有极显著的下降(P 0.01),肝脏 ALT、心肌 SDH 和股四头肌 SDH 活性呈显著的下降(P0.05)。表 3 女贞子提取物对大鼠肝脏、心肌、股四头肌相关酶活性的影响(U/mg prot)指标/组别安静组运动组女贞子组变化率/%肝脏 ALT52.288.8780.668.4662.1913.8854.28-22.90心肌 AST364.4517.32432.1812.45402.3614.2218.58-6.90肝脏 LDH82.222.31107.681.1292.442.2330.97-14.15心肌 SDH8.341.2211.560.889.782.2138.61-15.40股四头肌 SDH7.451.899.981.127.881.8633.96-21.042.3 女贞子提取物对大鼠运动至力竭时间的影响表4 结果显示,女贞子组与运动组比较,女贞子组力竭时间延长了 23.09%,有极显著性差异(P 0.01)。表 4 女贞子提取物对运动训练大鼠力竭时间的影响运动组女贞子组力竭时间/min105.3410.22129.6632.78延长率/%/23.0915戚世媛:女贞子提取物对运动训练大鼠血清及某些组织相关酶活性的影响3 分析与讨论3.1 女贞子提取物对大鼠血清 ALT、AST、LDH、CK活性的影响在正常状态下,血清中 ALT、AST、LDH、CK 的活性相对较低。运动员剧烈运动后,血清 CK 和 LDH 浓度明显升高3。不同的酶升高的程度和恢复到正常水平的速度和时间不同4。ALT 存在于各脏器中,血清酶活性最低,大强度运动时,因骨骼肌细胞通透性改变,使得血清中的ALT 活性增加。AST 主要分布在心肌等脏器。血清AST 活性是心肌细胞损伤较敏感而特异的酶学指标5。LDH 主要存在于各组织的细胞质中,血清LDH 的活性仅是各组织的 1/500,当细胞受损时,LDH 会释放到循环中,导致血清 LDH 的增高6。CK 主要存在于骨骼肌和心肌,是骨骼肌能量代谢的关键酶。CK 是与能量代谢密切相关的酶,其浓度可作为反映骨骼肌损伤及评定肌肉承受刺激的主要指标7。结果显示,运动组与安静组比较,运动组血清ALT、AST、LDH、CK 活性均有极显著性升高(P 0.01);女贞子组与运动组比较,女贞子组血清 CK活性呈极显著性下降(P 0.01),ALT、AST、LDH 活性都呈显著性下降(P 0.05)。说明女贞子提取物可显著降低运动训练后大鼠血清酶活性,可保护运动中机体重要脏器的功能,延缓运动疲劳的产生。3.2 女贞子提取物对肝脏、心肌、股四头肌相关酶活性的影响ALT 主要存在于肝细胞胞浆中,在肝脏活性最高。有百分之一的肝细胞发生坏死或细胞膜通透性增强,都可引起血清 ALT 活性即见升高8。结果显示,运动组与安静组比较,运动组肝脏 ALT 活性有极显著升高(P 0.01),说明大强度运动训练使大鼠肝细胞膜通透性破坏,导致 ALT 活性增高;女贞子组与运动组比较,女贞子组肝脏 ALT 呈显著下降(P 0.05),说明女贞子提取物有较好的保肝、护肝作用。AST 以心肌活性最高,当心脏和其它脏器发生病变与损伤时,血液中的 AST 活性才会显著升高9。结果显示,运动组与安静组比较,运动组心肌 AST 活性极显著性升高(P 0.01),说明大强度运动训练大鼠的心肌组织受损,导致心肌 AST 活性升高;女贞子组与运动组比较,女贞子组心肌 AST活性极显著下降(P 0.01),说明女贞子提取物具有保护心肌细胞正常结构与功能的作用。LDH 在肝组织中活性较高。结果显示,运动组与安静组比较,运动组肝脏 LDH 活性极显著升高(P 0.01),女贞子组与运动组比较,女贞子组肝脏LDH 活性极显著下降(P 0.01),说明女贞子提取物可降低大强度运动训练对肝脏的损伤,维持重要脏器的正常形态和功能10。SDH 含量随着运动强度的增加不断降低,导致能量供应的速率下降11。结果显示,运动组与安静组比较,运动组心肌 SDH 和骨骼肌 SDH 活性极显著升高(P 0.01);说明大强度运动训练导致细胞内线粒体膜受损,心肌细胞代谢功能异常12。女贞子组与运动组比较,女贞子组心肌和股四头肌 SDH活性呈显著性下降(P 0.05),说明女贞子提取物可明显改善心肌和骨骼肌由于大强度运动训练而导致的有氧氧化酶活性的升高,提高有氧代谢能力,有助于提高心肌、骨骼肌耐疲劳能力。3.3 女贞子提取物对大鼠运动至力竭时间的影响长时间剧烈运动会产生大量自由基,对机体生物大分子、亚细胞器(膜)、细胞、腺体、组织造成伤害,导致机能下降,从而引起机体健康水平和运动能力降低13。本试验的结果显示,女贞子组与运动组比较,女贞子组力竭时间延长了 23.09%,有极显著性差异(P 0.01)。其机制可能为:女贞子提取物中含有多种清除自由基的物质,能加速机体对多余自由基的清除。同时机体抗氧化能力提高,多不饱和脂肪酸氧化速度减慢。由于抗氧化水平的提高也促进血清酶和各组织相关酶活性下降,促进了各组织器官的血液供给;维持细胞膜组织与机能的完好,保持在长期活动时身体内较多的热量供应,从而缓解了运动疲劳的发生。4 结论女贞子提取物中富含齐墩果酸、女贞子酸和熊果酸等化学成分,显著降低大强度运动训练造成的大鼠血清 ALT、AST、LDH 和 CK 活性过度升高,促进了各组织相关酶活性下降,具有可保护运动中机体重要脏器的功能,提高有氧代谢能力,延缓运动疲劳的产生。提示女贞子提取物可以减轻大强度运动训练对大鼠肝脏、心脏和骨骼肌的损伤。女贞子药材可作为消除运动性疲劳、及时恢复体能天然野生药物。参考文献:1高赛,周欣,陈华国.女贞子化学成分及质量控制研究进展J.中国中医药信息杂志,2018,25(12):133-136.25榆林学院学报 2023 年第 5 期(总第 169 期)2刘美红,邹峥嵘.女贞子化学成分、药理作用及药动学研究进展J.热带亚热带植物学报,2022,30(3):446-460.3陈婷,李绪稳.运动对机体血清中乳酸脱氢酶活性的影响J.体育世界:学术版,2015(4):2.4熊正英,刘海波,池爱平,等.锁阳多糖对运动训练大鼠血清酶活性与尿蛋白含量的影响J.陕西师范大学学报:自然科学版,2012,40(1):100-103.5王转丁,杨晶晶,李留安.不同强度游泳应激对小鼠血清 ALT、AST 和 ALP 活性的影响J.黑龙江畜牧兽医科技版,2013,11(上):164-166.6FENG Y,XIONG Y,QIAO T,et al.Lactate dehydrogen-ase A:A key player in carcinogenesis and potentialtar-get in cancer therapyJ.Cancer Med,2018,7(12):6124-6136.7李丽,陈凤浩,赵玉华.8 周有氧运动对不同月龄 SD 大鼠血清中 CK 活性变化的影响J.哈尔滨师范大学自然科学学报,2015(6):3.8王思涵,陈俊吉,莫伟彬.铁皮石斛黄酮干预力竭运动模型大鼠肝脏氧化应激及自噬水平的变化J.中国组织工程研究,2022,26(20):8.9熊勃,刘风君,熊正英.有氧运动对焦虑模型大鼠不同组织和血清中自由基代谢及酶活性的影响J.西安体育学院学报,2015(6):9.10陈婷,李绪稳.运动对机体血清中乳酸脱氢酶活性的影响J.体育世界:学术版,2015(4):2.11龙泳君,廖艳萍,孙麟.一次力竭运动对雌性大鼠琥珀酸脱氢酶的影响J.当代畜禽养殖业,2021(4):3.12张静,张丽娜,阳仁均,等.不同强度有氧运动周期训练疲劳模型大鼠心肌形态变化及超量恢复规律J.中国组织工程研究,2016,20(49):7364-7371.13熊正英.自由基生物学在运动医学中的应用研究J.陕西师范大学学报:自然科学版,2014,42(6):9 100-107.(责任编辑:杨 飞)Effects of Ligustrum Lucidum Extract on Serum and Some Tissue Related Enzyme Activities in Exercise Trained RatsQI Shi-yuan(School of Physical Education,Xian Petroleum University,Xian 710065,China)Abstract:This study establishes an exhaustive treadmill training model,detect the activities of serum ALT,AST,LDH,CK,and the activities of liver,myocardium,and quadriceps femoris muscle related enzymes in rats,as well as the effects of Ligustrum lucidum extract on the exercise ability and serum enzyme activities of rats.The experi-mental results show that compared with the quiet group,the activities of serum ALT,AST,LDH and CK in the ex-ercise group are significantly higher(P 0.01),and the activities of liver,myocardium and quadriceps femoris muscle related enzymes are significantly higher(P 0.01).Compared with the exercise group,the activities of se-rum CK in the Ligustrum lucidum group are significantly lower(P 0.01),and the activities of ALT,AST and LDH are significantly lower(P 0.05),and the activities of myocardial AST and liver LDH are significantly lower(P 0.01).The activity of ALT in liver,SDH in myocardium and SDH in quadriceps femoris muscle decrease significantly(P 0.05).It shows that the extract of Ligustrum lucidum can regulate the activities of serum en-zymes and enzymes related to liver,myocardium and quadriceps femoris muscle in rats,which may be an important factor in delaying exercise-induced fatigue.Key words:Ligustrum lucidum;serum enzyme;athletic ability;rat35戚世媛:女贞子提取物对运动训练大鼠血清及某些组织相关酶活性的影响