电化学发光检验的原理ppt课件.ppt
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1、电化学发光原理及应用电化学发光原理及应用 2017.10.目录目录1免疫检测技术的发展2电化学发光系统及其原理3电化学发光技术的优势.一一.免疫检测技术的发展免疫检测技术的发展放免放免酶免酶免荧光免疫荧光免疫化学发光化学发光电化学发光电化学发光1959197080S2000S免疫检测技术三个重要的历程免疫检测技术三个重要的历程.放射免疫分析放射免疫分析放射免疫分析技术开创了体液微量物质定量分析的新领域,并为其他标记免疫分析奠定了基础。放射免疫技术是临床实验室l重要检测手段,已广泛应用于激素、维生素、药物、肿瘤标志物、病原微生物抗原(抗体)的定量分析。1959年Berson和Yalow建立了放射
2、免疫分析方法(RIA),大大提高了免疫测定的敏感度,这种标记免疫测定开拓了医学检验的新领域。缺点缺点 半衰期短,试剂货架期不长。标记物不断变化,试剂批间、批内变化大,标准曲线不能保存。反应时间长,操作步骤很难自动化。使用放射性核素,对人体有一定的危害性。分析的限度为 10 mol/ml 或 10 g/ml。.酶免疫测定法酶免疫测定法1971年Engvall和Perlman建立了固相酶免疫测定方法(ELISA),这种非放射标记免疫测定在临床检验,特别是感染性疾病的诊断中取得了广泛应用。缺点缺点 试剂制备困难。操作步骤复杂,耗时长。影响因素多,质量控制难以保证。最后测定的是颜色的光密度,其精密度和
3、敏感性不如发光免疫技术。.化学发光免疫测定法化学发光免疫测定法化学发光免疫测定法出现于20世纪90年代初。由于最后测定的是光子的量,不但对检测者无害,其敏感度和精密度均优于RIA,而且试剂较稳定,并可进行全自动分析。缺点缺点采用标记催化酶(如辣根过氧化物酶)或化学发光分子(如鲁米诺)的方法,其化学反应一般不稳定,为间断的、闪烁性发光,而且在反应过程中易发生裂变,导致反应结果不稳定。检测时需对结合相与游离相进行分离,操作步骤多。反应原理相对落后。(间接发光).电化学发光免疫技术电化学发光免疫技术电化学发光免疫测定法(电化学发光免疫测定法(ECLIA)发展于发展于 1996年,它在年,它在发光反应
4、中加入了电化学反应,是继放射免疫、酶免疫、发光反应中加入了电化学反应,是继放射免疫、酶免疫、化学发光免疫测定之后的新一代标记免疫测定技术,是化学发光免疫测定之后的新一代标记免疫测定技术,是电化学和免疫测定相结合的产物。电化学和免疫测定相结合的产物。世界公认的世界公认的 最先进最先进最先进最先进 的临床免疫检测技术的临床免疫检测技术.二二.电化学发光技术的发展史及其原理电化学发光技术的发展史及其原理1.1.发展历程发展历程19961996年德国宝灵曼公司推出年德国宝灵曼公司推出Elecsys 2010Elecsys 2010系统系统世界上第一台世界上第一台 应用电化学发光技术的全自动免疫分析仪应
5、用电化学发光技术的全自动免疫分析仪19981998年罗氏公司收购宝灵曼公司年罗氏公司收购宝灵曼公司20012001年罗氏推出电化学发光免疫模块年罗氏推出电化学发光免疫模块E 170 E 170 罗氏是全球唯一罗氏是全球唯一 应用电化学发光免疫技术制造仪器的厂商应用电化学发光免疫技术制造仪器的厂商20062006年罗氏推出电化学发光免疫模块年罗氏推出电化学发光免疫模块e601e60120072007年罗氏推出电化学发光免疫模块年罗氏推出电化学发光免疫模块e411e411.2.电化学发光反应原理电化学发光反应原理顾名思义,电化学发光(ECL)是电场参与化学发光所产生的结果,是指通过施加一定的电压进
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