血液样品的处置和组织样品的制备.pptx
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1、目标要求目标要求了解血液生化样品制备原理;掌握血液生了解血液生化样品制备原理;掌握血液生化样品制备方法。化样品制备方法。掌握离心机使用方法和注意事项掌握离心机使用方法和注意事项血液样品的处置和组织样品的制备第1页一、血液生化样品制备一、血液生化样品制备采血采血测定用血液,多由静脉采集。普测定用血液,多由静脉采集。普通在饲喂前空腹采取,所以时血液中化学通在饲喂前空腹采取,所以时血液中化学成份含量比较稳定。采血时所用针头、注成份含量比较稳定。采血时所用针头、注射器、盛血容器要清洁干燥;接血时应让射器、盛血容器要清洁干燥;接血时应让血液沿着容器壁慢慢注入,以防溶血和产血液沿着容器壁慢慢注入,以防溶血
2、和产生泡沫。生泡沫。血液样品的处置和组织样品的制备第2页血清制备血清制备血清:全血不加抗凝剂自然凝固后析出淡黄色液血清:全血不加抗凝剂自然凝固后析出淡黄色液体。体。血清制备:由静脉采集血液,注入清洁干燥试管血清制备:由静脉采集血液,注入清洁干燥试管或离心管中。将试管放成斜面,让其自然凝固,或离心管中。将试管放成斜面,让其自然凝固,普通经普通经3h血块自然收缩而析出血清;也可将血样血块自然收缩而析出血清;也可将血样放入放入37恒温箱内,促使血块收缩,能较快析出恒温箱内,促使血块收缩,能较快析出血清。为了缩短时间,也可用离心机分离血清。为了缩短时间,也可用离心机分离(未凝或未凝或凝固后均可离心凝固
3、后均可离心),分离出血清,用滴管移人另一,分离出血清,用滴管移人另一试管中供测定用,如不及时使用,应贮于冰箱中。试管中供测定用,如不及时使用,应贮于冰箱中。分离出血清不应溶血。分离出血清不应溶血。血液样品的处置和组织样品的制备第3页全血及血浆制备全血及血浆制备全血:采血前加入抗凝剂,包含了血浆和全血:采血前加入抗凝剂,包含了血浆和 血纤蛋白。血纤蛋白。血浆:全血离心后除去血纤蛋白液体。血浆:全血离心后除去血纤蛋白液体。抗凝剂:凡是能抑制血液凝固反应化合抗凝剂:凡是能抑制血液凝固反应化合 物称为抗凝剂。物称为抗凝剂。血液样品的处置和组织样品的制备第4页惯用抗凝剂使用方法惯用抗凝剂使用方法1、草酸
4、钾、草酸钾(钠钠)。其优点是溶解度大,与血液混合后,快速与血中钙离其优点是溶解度大,与血液混合后,快速与血中钙离子结合,形成不溶草酸钙,使血液不再凝固。子结合,形成不溶草酸钙,使血液不再凝固。配制方法:通常先配成配制方法:通常先配成10草酸钾或草酸钠溶液,然后草酸钾或草酸钠溶液,然后吸收此液吸收此液0.1ml于试管中,转动试管,使其铺散在试管壁于试管中,转动试管,使其铺散在试管壁上,置上,置80干燥箱内烘干,管壁呈白色粉末状,加塞备用。干燥箱内烘干,管壁呈白色粉末状,加塞备用。每管含草酸钾或草酸钠每管含草酸钾或草酸钠10mg,可抗凝血液,可抗凝血液5ml。应用范围:适合用于非蛋白氮、血糖等各种
5、测定项目,但应用范围:适合用于非蛋白氮、血糖等各种测定项目,但不适合用于钾、钠和钙测定;另外草酸盐能抑制乳酸脱氢不适合用于钾、钠和钙测定;另外草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶,故使用时给予注意。酶、酸性磷酸酶和淀粉酶,故使用时给予注意。血液样品的处置和组织样品的制备第5页草酸钾一氟化钠混合剂。草酸钾一氟化钠混合剂。血液内一些化学成份血液内一些化学成份(如血糖如血糖)离开机体后仍易被离开机体后仍易被酶作用而影响测定结果。如用混合剂可抑制酶作酶作用而影响测定结果。如用混合剂可抑制酶作用用(氟化钠有抑制糖酵解作用氟化钠有抑制糖酵解作用),因而能预防血糖,因而能预防血糖等化学物质分解。等化学
6、物质分解。配制方法:称取草酸钾配制方法:称取草酸钾6g,氟化钠,氟化钠3g,加蒸馏水,加蒸馏水至至lOOml,分装在试管内,每管,分装在试管内,每管0.25ml。80烘烘干后加塞备用。每管含混合剂干后加塞备用。每管含混合剂22.5mg,可抗凝血,可抗凝血液液5ml。应用范围:最适合用于血糖测定,而不适合用于应用范围:最适合用于血糖测定,而不适合用于脲酶法尿素氮测定脲酶法尿素氮测定(因氟化钠能抑制脲酶活性因氟化钠能抑制脲酶活性)。血液样品的处置和组织样品的制备第6页肝素肝素是一个很好抗凝剂,因它对血中有机成份和无机是一个很好抗凝剂,因它对血中有机成份和无机成份测定均无影响,其主要作用是抑制凝血酶
7、原成份测定均无影响,其主要作用是抑制凝血酶原转变为凝血酶,使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋转变为凝血酶,使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白而凝血。白而凝血。配制方法:常将肝素配成配制方法:常将肝素配成lmgml水溶液,每管水溶液,每管装装01ml,再横放蒸干,再横放蒸干(不宜超出不宜超出50)备用。每备用。每管可抗凝血液管可抗凝血液5lOml。市售肝素大多数为钠盐,可按市售肝素大多数为钠盐,可按10mgml配制成配制成水溶液。每管装水溶液。每管装0.1ml,按上法烘干,可使,按上法烘干,可使5lOml血液不凝固。血液不凝固。应用范围:适合用于血液有机物测定;不适合用应用范围:适合用于血液有机物测定;不
8、适合用于凝血酶原测定。于凝血酶原测定。血液样品的处置和组织样品的制备第7页乙二胺四乙酸二钠盐乙二胺四乙酸二钠盐(简称简称EDTANa2)EDTANa2对血液中钙离子有很大亲和力,对血液中钙离子有很大亲和力,能使钙离子络合而使血液不凝固。能使钙离子络合而使血液不凝固。配制方法:常配成配制方法:常配成40mgmlEDTANa2水水溶液,每管分装溶液,每管分装0.1ml,在,在80干燥箱内烘干燥箱内烘干备用。每管可抗凝血液干备用。每管可抗凝血液5ml。应用范围:适合用于各种生化分析,但不应用范围:适合用于各种生化分析,但不适合用于血浆中含氮物质、钙及钠测定。适合用于血浆中含氮物质、钙及钠测定。血液样
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