EB病毒检测技术进展及临床应用课件.ppt
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1、文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。概述概述Epstein-BarrEpstein-Barr病毒(病毒(EBVEBV)疱疹病毒科,疱疹病毒科,亚科,嗜淋巴细胞病毒属,亚科,嗜淋巴细胞病毒属,19641964年由年由EpsteinEpstein、BarrBarr等人首次在非洲儿童的恶性淋巴瘤组织培等人首次在非洲儿童的恶性淋巴瘤组织培养中发现。养中发现。EBVEBV是是传染性单核细胞增多症的病原体,也是一种重要的肿瘤相是是传染性单核细胞增多症的病原体,也是一种重要的肿瘤相关病毒,与鼻咽癌、淋巴瘤、胃癌、移植后淋巴增殖症等多种肿关病毒,与鼻咽癌、淋巴瘤、胃癌
2、、移植后淋巴增殖症等多种肿瘤的发生密切相关,被列为致癌性病毒之一。瘤的发生密切相关,被列为致癌性病毒之一。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。概述概述传播途径:传播途径:EBVEBV感染感染主要主要通过唾液接触传播通过唾液接触传播,也可通过,也可通过血液传播;血液传播;人感染人感染EBVEBV后建立终身潜伏感染,人群感染率超过后建立终身潜伏感染,人群感染率超过90%90%。1-61-6岁岁儿儿童童、14-2014-20岁岁青青少少年年及及年年轻轻成成年年人人高高度度易易感感,发发展中国家展中国家EBVEBV感染多发生在儿童早期感染多发生在儿童早期。文档
3、仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。病原学病原学p疱疹病毒科,疱疹病毒科,疱疹病毒亚科,淋疱疹病毒亚科,淋巴隐病毒属,人疱疹病毒巴隐病毒属,人疱疹病毒4 4型型p球形双链球形双链DNADNA病毒,基因组平均大病毒,基因组平均大小约为小约为172 kb172 kb文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBV致病机制致病机制原发原发EBV感染时,感染时,EBV先是在先
4、是在口咽部上皮细胞内增殖口咽部上皮细胞内增殖,然后感染附近的然后感染附近的B淋巴细胞淋巴细胞,受到感染的,受到感染的B淋巴细胞进淋巴细胞进入血液循环可以造成全身性感染。入血液循环可以造成全身性感染。EBV原发感染后,大多数无临床症状,尤其是原发感染后,大多数无临床症状,尤其是6岁以岁以下幼儿大多表现为隐性或轻型发病,但在儿童期、青下幼儿大多表现为隐性或轻型发病,但在儿童期、青春期和青年期春期和青年期,约,约50%的原发性感染均表现为的原发性感染均表现为IM。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBV在人体在人体B细胞建立潜伏感染,细胞建立潜伏感染,EB
5、V只表达潜伏抗原只表达潜伏抗原(包括(包括EBNA-1、EBNA-2、EBNA-3A、EBNA-3B、EBNA-3C、EBNA-LP、LMP-1、LMP-2及及EBER),受),受感染者将成为终身带毒者。感染者将成为终身带毒者。在机体免疫功能下降和某些因素触发下,潜伏的在机体免疫功能下降和某些因素触发下,潜伏的EBV可以可以被再激活,引起病毒复制及临床疾病。被再激活,引起病毒复制及临床疾病。EBV致病机制致病机制文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBV常见相关疾病常见相关疾病传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症 (Infectious Infec
6、tious mononucleosis,IMmononucleosis,IM)慢性活动性慢性活动性EBEB病毒感染病毒感染 (Chronic active Chronic active EBVinfectionEBVinfection,CAEBVCAEBV)EBEB病毒相关性嗜血细胞综合征病毒相关性嗜血细胞综合征 (EBV-associated EBV-associated hemophagocytichemophagocytic syndrome,EBVAHS)syndrome,EBVAHS)BurkittsBurkitts淋巴瘤淋巴瘤 何奇金淋巴瘤何奇金淋巴瘤文档仅供参考,不能作为科学依据
7、,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBVEBV感染的抗原表达感染的抗原表达ppEBVEBVEBVEBV溶解性感染期,溶解性感染期,溶解性感染期,溶解性感染期,可表达:可表达:可表达:可表达:n n早期抗原(早期抗原(早期抗原(早期抗原(EAEAEAEA):):):):EA/REA/REA/REA/R和和和和EA/DEA/DEA/DEA/D(具(具(具(具DNADNADNADNA多聚酶活性);多聚酶活性);多聚酶活性);多聚酶活性);EAEAEAEA出现表明出现表明出现表明出现表明EBVEBVEBVEBV活跃增殖,活跃增殖,活跃增殖,活跃增殖,EAEAEAEA抗体出现在感染早期抗体
8、出现在感染早期抗体出现在感染早期抗体出现在感染早期;n n衣壳蛋白(衣壳蛋白(衣壳蛋白(衣壳蛋白(VCAVCAVCAVCA)晚期表达的结构蛋白晚期表达的结构蛋白晚期表达的结构蛋白晚期表达的结构蛋白 VCA-IgMVCA-IgMVCA-IgMVCA-IgM出现在急性感染早期,出现在急性感染早期,出现在急性感染早期,出现在急性感染早期,VCA-IgGVCA-IgGVCA-IgGVCA-IgG出现在急性感染期并持出现在急性感染期并持出现在急性感染期并持出现在急性感染期并持续存在续存在续存在续存在n n膜抗原(膜抗原(膜抗原(膜抗原(MAMAMAMA):):):):细胞表面包膜糖蛋白(细胞表面包膜糖蛋
9、白(细胞表面包膜糖蛋白(细胞表面包膜糖蛋白(MA gp350/220,gp85)MA gp350/220,gp85)MA gp350/220,gp85)MA gp350/220,gp85),是是EBVEBV的中和性的中和性抗原抗原 抗抗抗抗MA-IgMMA-IgMMA-IgMMA-IgM可用于早期诊断可用于早期诊断可用于早期诊断可用于早期诊断文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。ppEBVEBVEBVEBV潜伏感染期,潜伏感染期,潜伏感染期,潜伏感染期,选择性表达早期抗原以及选择性表达早期抗原以及选择性表达早期抗原以及选择性表达早期抗原以及:n n 核抗
10、原(核抗原(核抗原(核抗原(EBNA-1,-2,-LP,-3A,-3B,-3CEBNA-1,-2,-LP,-3A,-3B,-3CEBNA-1,-2,-LP,-3A,-3B,-3CEBNA-1,-2,-LP,-3A,-3B,-3C):):):):为为为为DNADNADNADNA结合蛋白,在感染的结合蛋白,在感染的结合蛋白,在感染的结合蛋白,在感染的B B B B细胞核内;细胞核内;细胞核内;细胞核内;EBNA-1EBNA-1EBNA-1EBNA-1与感染有关,与感染有关,与感染有关,与感染有关,EBNA-2EBNA-2EBNA-2EBNA-2与细胞转化和永生化有关;与细胞转化和永生化有关;与细胞
11、转化和永生化有关;与细胞转化和永生化有关;EBNAEBNAEBNAEBNA抗体出现在感染晚期。抗体出现在感染晚期。抗体出现在感染晚期。抗体出现在感染晚期。n n 潜伏膜蛋白潜伏膜蛋白潜伏膜蛋白潜伏膜蛋白(LMP-1,-2A,-2BLMP-1,-2A,-2BLMP-1,-2A,-2BLMP-1,-2A,-2B):):):):在感染在感染在感染在感染B B B B细胞表面,与细胞恶化有关,细胞表面,与细胞恶化有关,细胞表面,与细胞恶化有关,细胞表面,与细胞恶化有关,n n 未翻译的转录物未翻译的转录物未翻译的转录物未翻译的转录物BARF0BARF0BARF0BARF0和和和和EBEREBEREBE
12、REBERn n EBNA-3EBNA-3EBNA-3EBNA-3、EBNA-2EBNA-2EBNA-2EBNA-2、LMP-1LMP-1LMP-1LMP-1是是是是EBV-CTL CD8+EBV-CTL CD8+EBV-CTL CD8+EBV-CTL CD8+的主要目标的主要目标的主要目标的主要目标EBVEBV感染的抗原表达感染的抗原表达文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。原发性原发性EBVEBV感染过程中首先产生针对感染过程中首先产生针对衣壳抗原(衣壳抗原(capsid antigen,capsid antigen,VCAVCA)IgGIgG和和I
13、gMIgM,在急性感染的晚,在急性感染的晚期,抗早期抗原(期,抗早期抗原(early antigen,early antigen,EAEA)抗体出现在恢复期晚期,抗核)抗体出现在恢复期晚期,抗核抗原(抗原(nuclear antigen,NAnuclear antigen,NA)抗体产)抗体产生,生,抗抗VCA-IgGVCA-IgG和抗和抗NA-IgGNA-IgG可持续终身可持续终身文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBV感染的血清学诊断文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。传统检测策略的问题5%新近新近EBV
14、感染不出现感染不出现CA-IgM抗体抗体在罕见的病例中抗CA-IgM会持续存在约20-30%的新近感染不出现EA-IgG抗体抗EBNA-IgG抗体可能呈现阴性,由于:-慢性活动性EBV感染-细胞免疫被抑制文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBVEBV感染的血清学诊断感染的血清学诊断p抗抗VCA-IgMVCA-IgM和和IgGIgG可以同时出现,通可以同时出现,通常常IgGIgG出现较出现较IgMIgM晚,但偶尔较晚,但偶尔较IgMIgM出出现早现早1 12 2周,抗周,抗VCA-IgMVCA-IgM几周后检测几周后检测不到不到p抗抗EA-IgGEA-
15、IgG在发病后在发病后3-43-4周后升高,周后升高,3 34 4月后检测不到月后检测不到p抗抗EBNA-1-IgGEBNA-1-IgG在发病后在发病后3 34 4周被检测周被检测到,持续终身,部分慢性到,持续终身,部分慢性EBVEBV感染者感染者检测不到检测不到p抗抗VCA-IgGVCA-IgG和抗和抗EBNA-1-IgGEBNA-1-IgG终生持续终生持续阳性阳性文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBV常见相关疾病常见相关疾病文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症(I
16、M)(IM)infectious mononucleosis特指由特指由EBV感染引起的发热、咽炎和淋巴结肿大的综合征感染引起的发热、咽炎和淋巴结肿大的综合征1889年被首次描述为年被首次描述为“glandular fever”1920年正式定义为年正式定义为IM1932年发现嗜异性凝集实验年发现嗜异性凝集实验1968年实验室工作人员感染年实验室工作人员感染EBV,出现,出现IM临床症状和嗜临床症状和嗜异性凝集抗体,明确异性凝集抗体,明确EBV是是IM的病原的病原文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。IMIM临床表现临床表现p25-30%25-30%的青
17、少年和的青少年和3010102.52.5copies/g copies/g n原位杂交原位杂交:检测出:检测出EBER-1EBER-1阳性细胞阳性细胞nSouthernSouthern杂交杂交:受累组织或外周血中检测出:受累组织或外周血中检测出EBV DNAEBV DNAn免疫荧光免疫荧光:检测到抗原(:检测到抗原(EBNAEBNA、LMPLMP)n感染的感染的B B、T T、NKNK细胞、单核细胞、单核/巨噬巨噬/组织细胞组织细胞检测到检测到EBNAEBNA、EBEREBER、EBV-DNAEBV-DNA文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。EBVEB
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