苦瓜耐低钾性生理生化指标评估体系的构建.pdf
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1、4期1207苦瓜耐低钾性生理生化指标评估体系的构建李婉豫1,2,田丽波1,3*,商桑1,4,李许真1,3,廖道龙5,陈虹容1(1海南大学三亚南繁研究院,海南三亚572000;2辽宁省沙地治理与利用研究所,辽宁阜新123000;3海南大学热带农林学院/海南省热带园艺作物品质调控重点实验室,海南海口570228;4海南大学生命科学学院,海南海口570228;5海南省农业科学院蔬菜研究所,海南海口571199)摘要:【目的】探讨苦瓜种质资源耐低钾胁迫的鉴定方法,为培育耐低钾丰产优质苦瓜品种提供种质资源。【方法】以11份苦瓜种质为材料,设置低钾(K+浓度0.2 mmol/L)和正常钾(K+浓度4.0
2、mmol/L)处理,采用多元统计的方法综合分析低钾胁迫下的苦瓜种质的各项生长及生理指标。【结果】苦瓜种质的株高、茎粗、节间长、叶面积、地下部干重、地上部干重、根长、根表面积、根体积、叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素、总叶绿素、丙二醛和钾累积量等15个鉴定指标的变异幅度较大,变异系数均超过10.0%。利用主成分分析将15个鉴定指标的胁迫系数经过标准化(Z-score法)后进行降维处理,从所有的因子中聚焦为4个主成分,共解释总变异的83.690%。根据4个主成分得分计算隶属函数值最终确定综合指标(D值),采用聚类分析方法将11份种质分为4类,第类的04-25、1717、KG01-2和03-8为耐低钾
3、种质,第类的1721、11-8、DD14-1、04-17-4和26-2为中等耐低钾种质,第类的06-16为低钾弱敏感种质,第类的25-15为低钾敏感种质。通过多元回归分析法建立最优的综合评价数学模型:Y=0.768株高+0.443钾累积量+0.390根表面积+0.595叶绿素a-0.415。【结论】11份苦瓜种质中04-25为最耐低钾种质,株高、钾累积量、根表面积和叶绿素a可作为苦瓜种质耐低钾性评价指标,该评价体系可用于苦瓜种质耐低钾性的快速筛选。关键词:苦瓜;耐低钾性;主成分分析;隶属函数;生理生化指标中图分类号:S642.5文献标志码:A文章编号:2095-1191(2023)04-120
4、7-09收稿日期:2022-11-03基金项目:海南省重大科技计划项目(ZDKJ2021010);海南省基础与应用基础研究计划(自然科学领域)高层次人才项目(2019RC150,2019RC045)通讯作者:田丽波(1976-),https:/orcid.org/0000-0001-5995-1685,博士,教授,主要从事园艺植物分子育种研究工作,E-mail:第一作者:李婉豫(1995-),https:/orcid.org/0009-0006-5316-0333,研究方向为园艺植物逆境生理,E-mail:南方农业学报Journal of Southern Agriculture2023,54
5、(4):1207-1215ISSN 2095-1191;CODEN NNXAABhttp:/DOI:10.3969/j.issn.2095-1191.2023.04.025Evaluation system construction of physiological andbiochemical indexes of low potassium tolerance of balsam pearLI Wan-yu1,2,TIAN Li-bo1,3*,SHANG Sang1,4,LI Xu-zhen1,3,LIAO Dao-long5,CHEN Hong-rong1(1Sanya Nanfan R
6、esearch Institute,Hainan University,Sanya,Hainan 572000,China;2Liaoning Institute of SandManagement and Utilization,Fuxin,Liaoning 123000,China;3College of TropicalAgriculture and Forestry,HainanUniversity/Hainan Provincial Key Laboratory of Tropical Horticultural Crops Quality Control,Haikou,Hainan
7、 570228,China;4College of Life Sciences,Hainan University,Haikou,Hainan 570228,China;5Institute of Vegetables,HainanAcademy ofAgricultural Sciences,Haikou,Hainan 571199,China)Abstract:【Objective】The purpose of the study was to explore the identification of balsam pear germplasm resourcesthat were re
8、sistant to low potassium stress,and to provide germplasm resources for cultivating high-yield and high-qualitybalsam pear varieties with low potassium tolerance.【Method】Eleven balsam pear germplasms were used as materials,and two treatments of low potassium(K+concentration of 0.2 mmol/L)and normal p
9、otassium(K+concentration of 4.0mmol/L)were set up.The growth and physiological indexes of balsam pear germplasms under low potassium stress werecomprehensively analyzed by multivariate statistical method.【Result】The variation of 15 identification indexesof balsampear germplasm,including plant height
10、,stem diameter,internode length,leaf area,underground dry weight,aboveground dry weight,root length,root surface area,root volume,chlorophyll a,chlorophyll b,carotenoid,total chloro-54卷南 方 农 业 学 报 12080引言【研究意义】苦瓜是我国种植历史悠久的药食兼用型蔬菜,对钾肥的吸收比例高于氮肥和磷肥(张白鸽等,2016)。钾素被称为品质元素,在植株正常生理活动中起着不可替代的作用,其不仅能促进植物的光合反应
11、速率,调节水分代谢,还能增强细胞对环境变化的调节作用,提高植物对低温、干旱等胁迫条件耐受性。钾在植物体内以离子态存在,具有较强的流动性,易被转运。相关研究证实,植物根系对钾营养的摄取途径主要分为2种,一种为钾离子(K+)在根系表面快速移动;另一种为K+通过扩散作用从土层移动到根系表面,该种扩散作用是K+转移到根表面的重要途径(Ashley et al.,2006)。适量施用钾肥不仅可增强根系特性(根长、根体积、根平均直径),还可同时促进地上和地下部的干物质积累量(张舒涵等,2018;刘俊萍等,2019),当施钾量不足时,作物生长受到抑制,根系发育放缓,植株的抗逆性减弱,茎秆细弱常见倒伏状(盛晋
12、华等,2003)。我国钾肥资源的短缺,无法满足国内需求,进口依赖度高达50%,施用成本的提高严重影响我国农作物增产增收等问题,成为制约我国农业发展的瓶颈(金城,2015)。因此,深入探讨钾素高效利用机制,筛选耐低钾基因型品种或种质是缓解我国钾资源匮乏问题的有效途径。【前人研究进展】国内外已经在多种作物上开展钾高效吸收利用和筛选耐低钾种质资源的研究。国外对芒麦草及甘薯等作物的耐低钾基因型筛选的研究较成熟(George et al.,2002;Zeng etal.,2015),国内虽起步晚,但在水稻、玉米、大豆和小麦等作物上已开展了大量研究(刘俊风等,2010;孙晶等,2011;李晓云等,2014
13、),主要通过沙培、水培和大田试验法筛选钾高效基因型。其中,大田试验虽是鉴定植物生长特性最直观的方法,但其工作量大、外界因素影响多,难以保证试验条件一致,易造成误差;耐低钾胁迫性状亦是数量性状,易受环境影响(易九红等,2010),目前多采用苗期盆栽或水培法筛选植物耐低钾基因型(张国新等,2009)。郭焕茹等(2009)研究发现,钾敏感自交系的总根长、根表面积、根体积、干物质量及植株钾积累量均显著低于耐低钾玉米自交系,根系具有较强的钾吸收能力。为筛选耐低钾和低钾敏感型甘薯材料,黄隆堂等(2016)在水培条件下,初步确立甜瓜苗期耐低钾基因型的筛选指标为茎粗和地下部干质量;刘明等(2022)采用水培试
14、验的方法,确定地上部干物质增加量、根系干物质增加量、总干物质增加量、地上部钾积累量、根钾积累量和总钾积累量6个指标可作为甘薯苗期耐低钾能力筛选的首选指标,并筛选出甘薯苗期耐低钾能力最强的6个品种;唐海浪等(2022)采用水培试验,设置不同K+浓度处理,筛选出优异的耐低钾型地方稻品种11份,并发现根长、株高、地上部鲜重和地上部干重4个性状指标在品种间差异显著。【本研究切入点】目前,相比农作物,国内对园艺作物耐低钾基因型的筛选和耐低钾品种的选育研究较少,针对苦瓜耐低钾种质的筛选与生理生化鉴定指标分析鲜有报道。【拟解决的关键问题】在水培条件下,采用多元统计方法对低钾胁迫下11份苦瓜种质的生长及生理生
15、化指标进行研究,确定对胁迫反应最为敏感的筛选指标,发掘耐低钾的种质资源,以期为生产推荐耐低钾品种或培育耐低钾丰产优质苦phyll,malondialdehyde and potassium accumulation was large,with the coefficients of variation exceeding 10.0%.Princi-pal component analysis was used to standardize the stress coefficients of 15 identification indexes(Z-score method)and re-du
16、ce the dimensionality of the coefficients.From all the factors,the stress coefficients were focused into 4 principal com-ponents,which accounted for 83.690%of the total variation.According to the scores of the four principal components,the membership function values were calculated and comprehensive
17、 index(D value)was finally determined.The 11 germ-plasms were divided into four categories by cluster analysis method.The germplasms 04-25,1717,KG01-2 and 03-8 inclass were low potassium tolerant,the germplasms 1721,11-8,DD14-1,04-17-4 and 26-2 in class II were mediumlow potassium tolerant,the germp
18、lasm 06-16 in class IIIwere low potassium weakly sensitive,and the germplasm 25-15in class III were low potassium sensitive.The optimal comprehensive evaluation mathematical model was established bymultiple regression analysis:Y=0.768plant height+0.443potassium accumulation+0.390root surface area+0.
19、595chlo-rophyll a-0.415.【Conclusion】Among the 11 balsam pear germplasms,04-25 is the most lowpotassium tolerant germ-plasm.Plant height,potassium accumulation,root surface area and chlorophyll a can be used as the evaluation indexesfor the low potassium tolerance of balsam pear germplasm.The evaluat
20、ion system can be used for the rapid screening ofthe low potassium tolerance of balsam pear germplasm.Key words:balsam pear;low potassium tolerance;principal component analysis;membership function;physiolo-gica land biochemical indexesFoundation items:Hainan Major Science and Technology Plan Project
21、(ZDKJ2021010);Hainan Basic and AppliedBasic Research Project(Natural Science Field)High Level Talent Project(2019RC150,2019RC045)4期1209瓜品种提供种质资源。1材料与方法1.1试验材料试验材料为11份苦瓜种质,其中,1721、04-25、11-8、1717、06-16、25-15、26-2、03-8和04-17-4来源于中国热带农业科学院作物品种资源研究所蔬菜研究中心,KG01-2来源于海南省农业科学院蔬菜研究所,DD14-1来源于海南大学。1721和1717为杂
22、交种,其余均为多代自交的纯合自交系。1.2试验方法试验时间为2020年12月2021年2月。挑选籽粒饱满的苦瓜种子,浸种催芽后播于穴盘中沙培生根,待幼苗长至4叶1心期,筛选出长势整齐一致的11份苦瓜种质幼苗,将根系清洗干净,移栽至水培箱中,每处理15株,重复3次。试验共设2个处理:低钾营养处理(简称低钾处理),K+浓度为0.2 mmol/L(徐顺莉等,2013;娄腾雪,2016);正常营养液处理(对照,CK),K+浓度为4.0 mmol/L。营养液采用日本园试配方配制,钾源以KNO3提供,低钾营养液用NH4NO3调整NO3-的差异。水培箱为长80 cm、宽60 cm、高23 cm,内装营养液6
23、0 L,箱上覆盖泡沫板,板上按等距离(10 cm10 cm)打孔,用定植棉固定幼苗。营养液每5 d更换一次,氧气泵通气24 h/d。幼苗置于(251)/12 h光照、(181)/12 h黑暗环境中培养,20 d后取样进行指标测定。1.3测定项目及方法1.3.1生物量将植株从水培箱完整取出,用蒸馏水小心冲洗地上和地下部,用吸水纸吸干植株表面水分,分别用分析天平称量地上和地下部鲜重。将苦瓜苗分成地上部和根系,分别经105 杀青30 min后,80 烘干至恒重,用于测定地下部干重(Dry weight of root,RDW)、地上部干重(Dry weightof plant,PDW)。每个处理分别
24、取样5株,3次重复(以下指标测定均采用此规格)。1.3.2生长发育指标用卷尺测定苦瓜的株高(Plant height,PH)、节间长(Internode length,IL),游标卡尺测定茎粗(Stem diameter,SD),叶面积仪测定第一对真叶的叶面积(Leaf area,LA)。1.3.3幼苗根系形态指标用根系扫描仪(Win-RHIZO)测定苦瓜的根系总长(Root length,RL)、根表面积(Root surface area,RS)、根体积(Root volume,RV)等指标。1.3.4生物含钾量样品烘干称重后,磨碎过60目筛,称取0.0700 g,采用H2SO4-H2O2
25、法进行消煮,用火焰光度计测定钾的含量。钾累积量(K accumulation,KA)为植株生物量和植株含钾量的乘积。1.3.5叶绿素含量取生长点以下第34片真叶。参照李合生(1999)的方法测定叶绿素a(Chlorophylla,Chla)、叶绿素b(Chlorophyll b,Chlb)、总叶绿素(Total chlorophyll content,CT)和类胡萝卜素(Caro-tenoids,Car)的含量。1.3.6丙二醛(MDA)浓度及含量参照李合生(2000)硫代巴比妥酸显色法,计算MDA的浓度(C)及含量(Y):C(mol/L)=6.45(D532D600)0.56D450Y(mo
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