甲胎蛋白阴性肝癌患者血清外泌体circ RNA100338和CRNDE表达水平及预后预测价值研究.pdf
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1、63现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Sept.2023甲胎蛋白阴性肝癌患者血清外泌体 circ RNA100338 和CRNDE 表达水平及预后预测价值研究段世举(联勤保障部队第九四二医院检验病理科,银川 750001)摘要:目的研究甲胎蛋白阴性肝细胞癌(AFP-NHCC)患者血清外泌体环状 RNA(circ RNA)100338,长链非编码 RNA 结直肠肿瘤差别表达(colorectal neoplasia differentially expressed,CRNDE)基因表达及临床预后价值。方法选取自 2018
2、 年 1 月 2019 年 7 月期间联勤保障部队第九四二医院诊治的 AFP-NHCC 患者 98 例为研究对象,以同期健康体检的 70 例健康人作为对照组。实时荧光定量 PCR 检测血清外泌体 circ RNA 100338 和 CRNDE 水平。比较不同临床病理特征 AFP-NHCC 患者血清外泌体 circ RNA 100338 和 CRNDE 水平。受试者工作特征曲线(ROC)分析外泌体circ RNA 100338,CRNDE 评估 BCLC 分期 B C 期、低分化程度及肝内淋巴结转移的临界值。Kaplan-Meier 生存分析(Log-Rank 检验)分析血清外泌体 circ R
3、NA 100338,CRNDE 对 AFP-NHCC 患者生存预后的影响。单因素及多因素COX 回归分析影响 AFP-NHCC 患者预后的因素。结果AFP-NHCC 组患者血清外泌体 circ RNA100338(2.780.67),CRNDE 的相对表达量(3.050.70)高于对照组(0.920.31,1.060.29),差异具有统计学意义(t=21.619,22.435,均 P 0.05)。AFP-NHCC 组患者血清外泌体 circ RNA100338 与 CRNDE 表达呈显著正相关性(r=0.657,P 0.05)。BCLC 分期 B C 期(3.430.69,3.710.75)、
4、低分化程度(3.640.73,4.270.74)及并发肝内淋巴结转移(3.960.79,4.390.76)AFP-NHCC 患者血清外泌体 circ RNA100338,CRNDE 表达分别高于 BCLC 分期0 A 期(1.870.60,2.130.61)、高中分化程度(2.020.64,1.970.61)及无肝内淋巴结转移(2.030.60,2.200.65)患者,差异均有统计学意义(t=11.648,11.707,13.699;11.100,16.857,15.211,均 P 0.05)。外泌体circ RNA100338 评估 BCLC 分期 B C 期、低分化程度及肝内淋巴结转移的临
5、界值分别为 3.51,3.69 和 4.06,外泌体CRNDE 评估 BCLC 分期 B C 期、低分化程度及肝内淋巴结转移的临界值分别为 3.79,4.31 和 4.45。circ RNA100338高表达组和低表达组患者三年总体生存率分别为 52.08%(25/48)和 86.00%(43/50)。circ RNA 100338 高表达组患者累积生存率低于低表达组患者,差异有统计学意义(Log-Rank 2=12.490,P 0.05)。CRNDE 高表达组和低表达组患者三年总体生存率分别为 51.06%(24/47)和 86.27%(44/51)。CRNDE 高表达组患者累积生存率低于低
6、表达组患者,差异有统计学意义(Log-Rank 2=15.050,P0.05)。肿瘤BCLC分期BC(OR=1.405,P0.05)、低分化程度(OR=1.921,P 0.05)、有肝内淋巴结转移(OR=1.508,P 0.05),circ RNA100338 高表达(OR=1.906,P 0.05)及 CRNDE高表达(OR=1.733,P 0.05)是影响 AFP-NHCC 患者预后的独立危险因素。结论AFP-NHCC 患者血清外泌体 circ RNA 100338,CRNDE 表达升高,两者表达与肿瘤 BCLC 分期、病理分化程度及肝内淋巴结转移有关,是影响 AFP-NHCC 患者生存预
7、后的独立危险因素。关键词:血清外泌体;环状核糖核酸 100338;结直肠肿瘤差别表达;甲胎蛋白阴性肝细胞癌中图分类号:R735.7;730.43文献标识码:A文章编号:1671-7414(2023)05-063-07doi:10.3969/j.issn.1671-7414.2023.05.012Study on the Expression Level and Prognostic Value of Serum Exosomes Circ RNA100338 and CRNDE in Patients with Alpha-fetoprotein Negative Hepatocellular
8、 CarcinomaDUAN Shiju(Department of Clinical Laboratory and Pathology,Joint Service Support Force 942 Hospital,Yinchuan 750001,China)Abstract:ObjectiveTo study the expression of serum exosomes circ RNA(circ RNA)100338 and long chain non-coding RNA colorectal neoplasia differentially expressed(CRNDE)i
9、n alpha fetoprotein negative hepatocellular carcinoma(AFP-NHCC)and their clinical prognostic value.Methods98 patients with AFP-NHCC diagnosed and treated in the Joint Service Support Force 942 Hospital from January 2018 to July 2019 were selected as the study object,and 70 healthy people in the same
10、 period were selected as the control group.The levels of circ RNA100338 and CRNDE in serum exosomes were detected by real-time fluorescent quantitative PCR,and the serum exocrine circ RNA100338 and CRNDE levels in AFP-NHCC patients 基金项目:宁夏回族自治区科技支撑计划项目(XT201817):多个血清指标联合对于甲胎蛋白阴性肝癌患者术后预后价值分析。作者简介:段世举
11、(1988-),男,本科,主管技师,主要从事分子生物与微生物研究,E-mail:。64现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Spet.2023with different clinical features were compared.The receiver operating curve(ROC)was used to analyze the cutoff value of exosomes circ RNA100338,CRNDE in evaluating the BCLC stage B to C,the deg
12、ree of poor differentiation,and the critical value of intrahepatic lymph node metastasis.Kaplan Meier survival analysis(Log Rank test)was used to analyze the effect of serum exosome circ RNA100338 and CRNDE expression on the prognosis of AFP NHCC patients.Univariate and multivariate COX regression a
13、nalysis was used to analyze factors affecting the prognosis of patients with AFP-NHCC.ResultsThe relative expression of serum exosomes circ RNA100338 and CRNDE in patients with AFP-NHCC group(2.78 0.67,3.05 0.70)was significantly higher than that in the control group(0.920.31,1.060.29),and the diffe
14、rences were statistically significant (t=21.619,22.435,all P0.05).There was a significant positive correlation between circ RNA100338 and CRNDE expression in serum exosomes of AFP-NHCC group(r=0.657,P0.05).The expression of serum exosomes circ RNA100338 and CRNDE in AFP-NHCC patients with BCLC stage
15、 B C(3.430.69,3.710.75),low differentiation(3.640.73,4.270.74)and intrahepatic lymph node metastasis(3.960.79,4.390.76)were significantly higher than those in patients with BCLC stage 0 A(1.870.60,2.130.61),high and middle differentiation(2.020.64,1.970.61)and no intrahepatic lymph node metastasis(2
16、.030.60,2.200.65),and the differences were statistically significant(t=11.648,11.707,13.699;11.100,16.857,15.211,all P 0.05).The cut-off values for evaluating BCLC stage B C,poorly differentiated degree,and intrahepatic lymph node metastasis were 3.51,3.69,and 4.06 for exosomes circ RNA 100338.The c
17、ut-off values for evaluating BCLC stage B C,poorly differentiated degree,and intrahepatic lymph node metastasis for exosomes CRNDE were 3.79,4.31,and 4.45,respectively.The 3-year overall survival rates of patients with high and low expression of circ RNA100338 were 52.08%(25/48)and 86.00%(43/50),res
18、pectively.The cumulative survival of patients with high expression of circ RNA100338 was lower than that of patients with low expression,with a statistically significant difference(Log rank 2=12.490,P0.05).The 3-year overall survival rates of patients with high and low CRNDE expression were 51.06%(2
19、4/47)and 86.27%(44/51),respectively.The cumulative survival of patients with high CRNDE expression was lower than that of patients with low CRNDE expression(Log rank 2=15.050,P0.05).BCLC staging of tumor B C(OR=1.405,P0.05),low differentiation(OR=1.921,P0.05),intrahepatic lymph node metastasis(OR=1.
20、508,P0.05),high expression of circ RNA100338(OR=1.906,P0.05)and high expression of CRNDE(OR=1.733,P0.05)were independent risk factors affecting the prognosis of AFP-NHCC patients.ConclusionThe expression of circ RNA100338 and CRNDE in serum exosome of patients with AFP-NHCC were increased,which were
21、 related to the BCLC stage,pathological differentiation and intrahepatic lymph node metastasis of tumor,and are independent risk factors for survival and prognosis of patients with AFP-NHCC.Keywords:serum exosomes;circ RNA100338;colorectal neoplasia differentially expressed;fetoprotein negative hepa
22、tocellular carcinoma肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的肝癌类型,占所有肝癌的 75%1。甲胎蛋白(fetoprotein,AFP)是临床常用的 HCC 筛查和预后评估指标,但仍有 30%40%的 HCC 患者血清 AFP 处于正常水平,即 AFP 阴性的肝细胞癌(AFP-negative hepatocellular carcinoma,AFP-NHCC)2。因此,有必要寻找能够评估 AFP-NHCC 患者临床预后的血清标志物。外泌体是直径在 30 150nm的细胞外分泌双层囊泡,能在细胞间传递蛋白质、DNA 和 RNA 分子等
23、,参与炎症、免疫及肿瘤等生理和病理过程3。环状核糖核酸(circular RNA,circ RNA)100338 是一种非编码 RNA,能够激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路,促进胃癌等肿瘤的增殖及转移4。ZHOU 等5对 HCC 癌组织和癌旁组织中差异性表达的 circ RNA 进行分析,发现circ RNA 100338 表达显著上调,可能是新的 HCC肿瘤标志物。长链非编码 RNA 结直肠肿瘤差别表 达(colorectal neoplasia differentially expressed,CRNDE)基 因 位 于 16 号 染 色 体,其 能 够 结 合miRNA-338-3p,调控
24、肺癌等恶性肿瘤的增殖和侵袭能力6。研究表明,在 HCC 组织和肿瘤细胞中CRNDE 表达上调,其通过促进 HCC 肿瘤细胞的增殖和转移,促进 HCC 的肿瘤进展7。但目前 AFP-NHCC 患者血清外泌体 circ RNA 100338,CRNDE的表达及临床预后价值尚不清楚。本研究通过检测 AFP-NHCC 患者血清外泌体 circ RNA100338 和CRNDE 的表达,探讨两者与临床病理特征的关系及临床预后价值。1材料与方法1.1研究对象选取 2018 年 1 月 2019 年 7 月期间联勤保障部队第九四二医院接受手术治疗的AFP-NHCC 患者 98 例为 AFP-NHCC 组。纳
25、入标准:经过术后病理检查确诊为HCC;AFP20 g/L;首次诊治,术前无放化疗、靶向治疗及中药治疗等;临床和病理随访资料完整。排除标准:并发其他器官恶性肿瘤;其他病理类型的65现代检验医学杂志第 38 卷第 5 期2023 年 9 月J Mod Lab Med,Vol.38,No.5,Sept.2023肝癌,如胆管细胞癌、混合型肝癌等;并发急性感染性疾病;妊娠哺乳期妇女。AFP-NHCC 组中,男性66例,女性32例;年龄3878(62.588.81)岁;肿瘤分化程度:高中分化 52 例,低分化 46 例;肿瘤直径:5cm 57 例,5 cm 41 例;肿瘤结节数目:2 个 76 例,2 个
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