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DB62∕T 4485-2021 葡萄抗寒性评价规范(甘肃省).pdf
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1、ICS65.020.20CCSB15DB62DB62/T44852021葡萄抗寒性评价规范2021-12-30发布实施2022-02-01甘肃省市场监督管理局发布DB62/T44852021刖本文件按照GB/T1.12020标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由甘肃省农业农村厅提出并监督实施。本文件由甘肃省果树果品标准化技术委员会归口。本文件起草单位:甘肃农业大学、甘肃夏博岚葡萄种植有限公司、武威市林业科学研究院、甘肃武威国家农业科技园区管委会、甘肃莫高实业发展股份有限公司、甘肃紫轩酒业有限公司。本文件主要起草人:毛娟、马宗桓、陈胜、牟德生、高静涛、陈佰鸿、赵彦
2、红、郭锐。本文件为首次发布。各单位或个人在执行本文件过程中如发现需要修改和补充之处,请随时将意见和建议反馈至葡萄抗寒性评价规范地方标准编写组(地址:甘肃省兰州市安宁区营门村1号,邮编:7370,联系人:毛娟,E-mail:,联系方式:13659425539),以供今后修订时参考。IDB62/T44852021葡萄抗寒性评价规范1范围本文件规定了葡萄抗寒性评价方法、评价指标及分级标准。本文件适用于甘肃省河西走廊葡萄产区及其他同类葡萄产区。2规 范 性 引 用 文 件本文件没有规范性引用文件。3术 语 和 定 义F列术语和定义适用于本文件。3.1抗 寒 性植物对低温胁迫的抵抗和忍耐能力。3 . 2
3、低温半致死温度在该温度时,植物达到半致死状态,当温度继续低于该温度时,植物所受的伤害将不可恢复甚至死亡。3.3自由水与细胞组分之间吸附力较弱,可以自由移动的水。3.4束缚水与细胞组分紧密结合而不能自由移动的水。4样 品 采 集 与 处 理4 . 1枝 条 采 集葡萄落叶后,采集发育成熟、无病虫害为害、粗度基本一致的1年生枝。将枝条剪成20cm的枝段,并用石蜡封闭其两端。采用流水冲洗枝条表面灰尘和附着物,再用蒸馏水冲洗35次。用滤纸吸干表面水分,装入塑料自封袋中,置于0C4C冰箱中保存备用。4 . 2材 料 处 理采用_40C低温对枝条进行低温处理,设0C-15C-18C-21C-24C-27C
4、-30C-33C共8个梯度,升温和降温幅度为4.0C/h5.0C/h,达到设定温度保持12h温度回升至室温(25C),从冰箱取出并室温静置2h再进行电导率测定。每个处理重复3次,每次重复随机抽取810个枝段。DB62/T448520215抗寒相关指标测定5.1相对电导率测定3mm薄片,并混合均勾,准确称取0.50g放入10mL刻度离心管中,每个处理重复3次。力P8mL去离子水,抽气40min后摇勾,用电导仪测定其初始电导值R1,再将试管置于水浴锅中,沸水浴lh(封口),于室温下静置8h测其终电导值R2,按公式1)计算电解质渗出率()。将低温处理后枝条,去除表皮,避开芽眼,剪成2R1yIX100
5、%式中:相对电导率,用百分比表示R1初始电导值;R2终电导值。y5.2Logistic方程及半致死温度测定用SPSS统计软件对不同处理温度与相对电导率之间的关系进行非线性回归分析,用Logistic方程拟合,按公式2)计算。Ky=l+ae-式中:处理温度;相对电导率饱和值,用百分比表示;方程参数。为了确定ab的值,将logistic方程转换为ln(k-y)/y=nabx=ln(k-y)/y,则原方程转变为,可在实际测定值中选择2点,求得aMI将logistic方程求二阶导数,d2y/d2x=kabe_bx(abebxb)/(l+则abe_bx-b=0,x=lna/b,此时x值为曲线的拐点,即为
6、低温半致死温度(LT50)。Kabbxy=lnabx)3,当d2y/d2x=0时,ae5 . 3丙二醛MDA)含量测定采用硫代巴比妥酸TBA)法测定MDA含量。取低温处理后枝条,去除表皮,避开芽眼,剪碎,混匀备用。在冰浴研钵中加入低温处理并剪碎的枝段0.2g1.0g石英砂和10%三氯乙酸TCA)2mL,研磨成匀浆,再力D3mL10%的TCA同转入离心管中,在40rpm下离心10mm,取上清液2mL(对照加2mL蒸馏水),加入2mL0.6%TBA摇匀。将试管放入沸水浴中煮沸10mm(自试管中溶液出现小气泡幵始计时),取出试管以冷水浴迅速将试管内溶液冷却,在3000rpm下离心10定上清液在450
7、nm532nm和6nm波长的光度值(对照为2mL0.6%TBA溶液加2mL蒸馏水),依据公式3)计算MDA的含量jimol/g)。MDA(umol/g)=6.45x(A532-A600)-0.56xA450 xV1/(V2xFW),使用分光光度计分别测丄mm(3)式中:提取液总体,单位为毫升mL);-样品鲜重,单位为克g),VIFW2DB62/T44852021测定用提取液体积,单位为毫升(mL)。V25.4游离脯氨酸含量测定5.4.1标准曲线的绘制在分析天平上精确称取25.0mg脯氨酸,倒入小烧杯中,用少量蒸馏水溶解,然后倒入250mL容量取6个50mL容量瓶,分别盛入脯瓶中,加蒸馏水定容至
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