病毒的传分析.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,病毒的传分析,病毒的传分析,第1页,病毒,(virus),既不一样于原核生物，也不居于真核生物，因为它们没有普通细胞结构。在病毒中没有合成蛋白质外壳所必需核糖体，所以只能寄生在动物、植物和细菌细胞内繁殖，它能使宿主细胞机构转而合成它本身新病毒物质。尽管病毒能形成晶体，本身不能进行代谢等，但仍将病毒视为生物，因为它们能够繁殖。,病毒离开宿主细胞即使不能繁殖，但仍能够存活。依据宿主细胞不一样而将病毒分为动物病毒、植物病毒和细菌茵病毒,3,种。细菌病毒又称噬茵体,(phage),。,病毒的传分析,第2页,Tail,Tail Fibers,Base Plate,Head/Capsid,Contractile Sheath,依据宿主不一样，能够分为：,动物病毒,植物病毒,细菌病毒,-,噬菌体,（,bacteriophage,phage),病毒的传分析,第3页,病毒的传分析,第4页,SARS,病毒颗粒电镜照片,冠状病毒,病毒的传分析,第5页,SARS,病毒为单链（,+,）,RNA,病毒，全长,29.725kb,含有,11,个,ORF,（,Open Reading Frames,），分别编码：依赖于,RNA,RNA,聚合酶、,4,种结构蛋白（,S,，,E,，,M,，,N,蛋白）、,5,种未知蛋白（图,5,）。与其它宿主起源冠状病毒序列比较，进化分析，呈一单独分支。病毒在增殖过程中虽没有逆转录过程，但,RNA,聚合酶没有矫正机制，变异较大，,SARS,变种,很多,。,病毒的传分析,第6页,Phage T4,研究最为广泛是,T,噬菌体：,病毒的传分析,第7页,Viruses-non-living particles-reproduce only within a host,Virus has protein coat+nucleic acid core,-ssDNA,dsDNA,ssRNA,dsRNA,-may be linear or circular molecule,Viral genome integrated into host genome or separate,病毒普通特征：,病毒的传分析,第8页,病毒在遗传学研究中优越性,:,1,、,繁殖快,世代短,。病毒一小时可繁殖百个。,2,、,易于培养化学分析,。一个试管可装很多,;,易于取得大数量用于分析。,3,、,遗传物质简单,只含裸露,DNA,或,RNA,。适用基因结构和功效研究。,4,、,便于研究基因突变,。,5,、,便于研究基因作用,。,6,、,可用作研究高等生物简单模型,。,病毒的传分析,第9页,第一节 噬菌体繁殖和突变型,一、,噬菌体形态结构,1.,噬菌体形态,（,1,）,20,面体，无尾,PM-2,（,2,）,20,面体，有尾,SPO1,（,3,）丝状,M13,病毒的传分析,第10页,2.,几个噬菌体染色体特点,噬菌体,宿主,核酸,染色体,染色体长度（,m,）,T-even,E.coli,双链,DNA,线环,60,T7,E.coli,双链,DNA,线状,12,E.coli,双链,DNA,线状,16,p22,沙门氏菌,双链,DNA,线状,14,x174,E.coli,单链,DNA,环状,1.8,Q,E.coli,单链,DNA,线状,1.4,病毒的传分析,第11页,病毒的传分析,第12页,3.T4,噬菌体结构,病毒的传分析,第13页,病毒的传分析,第14页,二、噬菌体生活周期,1.,噬菌体吸附到宿主细胞上,2.,尾丝鞘收缩，中轴刺穿宿主细胞,3.,头部,DNA,被送入宿主细胞,4.,在数分钟内，全部细菌核酸和蛋白质合成都被抑制。,病毒的传分析,第15页,5.,噬菌体大分子合成，细菌核酸被降解。,病毒的传分析,第16页,（,1,）噬菌体,DNA,复制。,（,2,）噬菌体外壳蛋白合成。,病毒的传分析,第17页,(1)DNA,被包到头部,(2),组装尾部,(3),装上尾丝,6.,噬菌体组装,病毒的传分析,第18页,约,200,个噬菌体造成细菌被噬菌体基因编码溶菌酶（,lysozyme),溶解。,7.,宿主细胞破裂,病毒的传分析,第19页,二、噬菌体繁殖,1951,年，,J.Lederberg,妻子,Esther lederberg,证实了,Lederberg,和,Tatum,使用,K12,E.coli,中含有原噬菌体，并命名为,。,10,年后终于搞清了溶源化实质。,病毒的传分析,第20页,二、噬菌体繁殖,1,烈性噬菌体,（,virulent phages,）,概念：,感染细菌后马上在菌体内复制和合成蛋白质外壳，重新组装成噬菌体颗粒，并造成细菌细胞解体，释放出噬菌体。,繁殖：,吸附在特异受体上酶细胞壁形成微孔注入核酸停顿细菌代谢合成,phage,成份裂解，释放。,病毒的传分析,第21页,烈性噬菌体溶菌,病毒的传分析,第22页,2.,温和噬菌体（,temperate phage,）,温和噬菌体感染细菌后，将自己,DNA,整合到细菌染色体,DNA,中，形成原噬菌体（,prophage),，这一过程称为溶源化（,lysogenization),。,整合到细菌染色体噬菌体,DNA,随细菌染色体复制而复制。,经过若干世代后才从寄主染色体上脱离下来复制和合成噬菌体蛋白，组装成新噬菌体，并造成菌体细胞裂解。,病毒的传分析,第23页,温和型噬菌体,（,temperate phage,）：,含有裂解和溶源两种路径：,(1),裂解路径：,和烈性噬菌体相同,病毒的传分析,第24页,温和噬菌体溶源,病毒的传分析,第25页,(2),溶源路径：,溶源周期经诱导进入裂解周期。,病毒的传分析,第26页,噬菌体生活史,病毒的传分析,第27页,噬菌体：噬菌体侵入后，细菌不裂解,附在,E.coli,染色体上,gal,和,bio,位点间,att,座位上,经过交换整合到细菌染色体，并能阻止其它,噬菌体超数感染。,病毒的传分析,第28页,P1,噬菌体：不整合到细菌染色体上，而是独立存在于细胞质内。原噬菌体：整合到宿主基因组中噬菌体。仅少数基因活动，表示出妨碍物关闭其它基因。原噬菌体经诱导可转变为烈性噬菌体 裂解路径。,病毒的传分析,第29页,P1,和,噬菌体生活周期特征,病毒的传分析,第30页,3,、溶源性：,有些细菌带有某种噬菌体，但并不马上造成溶菌，这种现象称为,溶源性,，含有溶源性细菌称为,溶源性细菌,（,lysogenic bacteria,），受温和噬菌体感染细菌，几乎都成为溶源菌。在细菌中处于潜伏状态噬菌体称为,原噬菌体,（,prophage,）或,原病毒,（,provirus,），带有原噬菌体细菌称,溶源性细菌,（,lysogenic bacterium,），失去原噬菌体细菌和为,非溶源性细菌,（,non,lysogenic bacterium,）。,溶源性细菌有两个主要特征,:,(1),免疫性：,原噬菌体产生一个阴遏蛋白，抑制同类噬菌体,DNA,复制，因而能抵抗同类噬菌体超感染。,(2),可诱导性：,自发,万分之一；紫外线或丝裂霉素,90%,。,病毒的传分析,第31页,三、噬菌体突变型,噬菌斑,（,plaque,）：因为噬菌体侵染，使细菌细胞裂解，有菌落上出现一些园形而清亮小洞。,1,、快速溶菌突变体,(1),野生型,r,+,形成小噬菌斑,1mm,，周围有朦胧光环。,原因：,有两个以上噬菌体侵染一个细菌时，出现,溶菌妨碍现象,，混有裂解和未裂解细胞。,(2),快速溶菌突变体,r,（,rapid lysis,）形成大噬菌斑,2mm,，边缘清楚。,原因：,无溶菌妨碍现象。,(3),判别：噬菌斑大小。,病毒的传分析,第32页,2,、寄主范围突变体,(1),野生型,h,+,能感染野生型大肠杆菌,Tto,s,，但不能感染,Tto,r,(2),突变型,h,对,Tto,s,和,Tto,r,都能感染。,(3),判别：混合,Tto,r,和,Tto,s,，野生型,h,+,出现混浊噬菌斑，突变型出现清亮噬菌斑。,(4),噬菌体与细菌关系,侵染与抗性。,个别溶菌,病毒的传分析,第33页,3,、条件致死突变体,所谓,条件致死突变型,，就是在一些条件下，这些突变型是致死，那么这些条件就称为,限制条件,(restrictive condition),；而在另一些条件下仍可进行繁殖，从而得以扩促进行研究，所以这些条件称为,许可条件,(permissive condition),。,常见有两大类条件致死突变：,（,1,）,“,温度敏感,”,突变,(temperature sensitive mutation),（,2,）,“,抑制因子敏感,”,突变,(suppressor-sensitive mutation,sus),病毒的传分析,第34页,（,1,）,“,温度敏感,”,突变,(temperature sensitive mutation),：,野生型噬茵体能在很大温度范围内感染宿主并进行繁殖。,热敏感突变型,(heat sensitive mutants,，,ts),：通常在,30(,许可条件,),感染宿主进行繁殖，但在,40,一,42(,限制条件,),条件下就是致死，不能形成噬菌斑；,冷敏感突变型,(cold sensitive mutation,，,cs),：在较低温度下就是致死。,原因：温度敏感性几乎总是一个突变结果，基因突变后所编码蛋白质中有一个氨基酸替换，而这种蛋白质在,“,限制温度,”,下不稳定而丧失活性。,病毒的传分析,第35页,（,2,）,“抑制因子敏感”突变,(suppressor-sensitive mutation,sus),：,实质是原来正常密码子变成了终止密码子，因而翻译提前终止，不能形成完整肽链而产生有活性蛋白质，属于,无义突变,（,nonsence mautation,）。带有,sus,突变噬菌体在感染一个带有,抑制基因,(suppressor,su,)(,许可条件,),宿主菌时能产生子代，但在感染另一个没有抑制基因,(,su,)(,限制条件,),宿主菌时，不能产生子代。野生型噬菌体在这两种宿主中都能产生子代。,sus,突变不像“宿主范围突变”那样影响噬菌体对宿主吸附，这种突变噬菌体能正常地吸附、注入本身,DNA,，杀死宿主细胞，但不产生子代。,病毒的传分析,第36页,（,1,）抑制因子敏感突变概念：,比如：噬菌体,mRNA,基因 细菌,tRNA,基因反密码子,正常 突变 突变 正常,基因：,5TA,C,3,5TA,G,3 3,AT,C,5,3,AT,G,5,mRNA 5UA,C,3 5UA,G,3 3,AU,C,5 3,AU,G,5,表型：酪氨酸 终止,5UA,G,3,酪,氨酸,酪,氨酸,3,AU,C,5,酪,氨酸,病毒的传分析,第37页,表,5-2,携带不一样专一性抑制基因宿主中,sus,突变噬菌体表现,噬菌体基因型,宿主菌基因型,su,-,su,+,amb su,+,och su,+,op,野生型,sus amber,sus ochre,sus opal,+,-+,-,-+-,-+,（,2,）噬菌体抑制因子敏感突变型类型及表现,琥珀型（,amber,）,UAG,赭石型（,ocher,）,UAA,乳白型（,opal,）,UGA,病毒的传分析,第38页,sus,突变分为三类；,无义抑制基因,（,su,）,实质,：,tRNA,基因发生了突变，比如琥珀型抑制基因,su3,在,UAG,密码于上插入了一个酪氨酸，这是因为,tRNA,加基因反密码子一个突变，,tRNA,Try,，正常反密码于是,GUA,，它按摆动规则译读酪氨酸密码子,UAU(C),。,su3,菌株,tRNA,Try,含有反密码子,CUA,，它识读琥珀型密码子,UAG,，并插入酪氨酸而预防终止。,病毒的传分析,第39页,（二）无义突变与无义抑制突变,无义突变：,指一个为氨基酸编码密码变为终止密码突变。,无义抑制突变：,指能抑制无义突变表现突变。,表5-3 5种琥珀抑制基因性质,琥珀型抑 插入 合成蛋白质 赭石型抑,制基因 氨基酸 占野生型%制基因,su,1,+,丝氨酸,28,-,su,2,+,谷氨酰胺,14,-,su,3,+,酪氨酸,55,-,su,4,+,酪氨酸,16,+,su,5,+,赖氨酸,5,+,病毒的传分析,第40页,四、噬菌斑分析（,The plaque assay,）,1.,噬菌斑（,plaque,）,噬菌体感染固体培养基上菌苔（,lawn,），溶菌后形成圆形清亮斑。,病毒的传分析,第41页,Opaque lawn of bacteria,Clear areas of plaque,病毒的传分析,第42页,2.,噬菌体浓度测定方法,（,1,）逐步稀释原溶菌液（,10,-1,、,10,-3,、,10,-5,、,10,-7,）,（,2,）感染平板培养基上细菌菌苔（,lawn,）,（,3,）计数形成噬菌斑,（,4,）计算原溶菌液中噬菌体数目。,公式：,噬菌斑数,/mL,稀释倍数,原始噬菌体浓度,=,病毒的传分析,第43页,23,10,5,10ml,原始浓度：,p,hages/ml,病毒的传分析,第44页,噬菌体感染,E.coli,病毒的传分析,第45页,第二节,噬菌体突变型重组试验,一、,T2,突变型两点测交,但,10,年未引发重视！,（,1,）,1936,年,F.M.Burnet,发觉了噬菌体能产生突变体，形成噬菌斑外形与野生型噬菌体噬菌斑有显著区分。,病毒的传分析,第46页,（,2,）,Hershey,和,Luria,发觉,1946,年第,11,届冷泉港会议上,Hershey,和,Luria,宣告发觉噬菌体,r,、,h,突变，,Delbruck,和,Hershey,发表了噬菌体重组。,三人获,1969,年,Nobel prize,（生理或医学）,病毒的传分析,第47页,噬菌斑形态：,宿主范围：,h,：噬菌体能在,E.coli,B,和,B/2,品系上生长,h,+,：只能在,E.coli,B,品系上生长。,（,3,）,Hershey,使用两个表型特征,能在,B,和,B/2,混合菌苔上产生透明斑。,能在,B,和,B/2,混合菌苔上产生半透明斑。,r,：,快速溶菌，噬菌斑大，边缘清楚。,噬菌斑小，边缘含糊。,r,+,：,病毒的传分析,第48页,噬菌斑与基因型,B,和,B/2,混合菌苔,病毒的传分析,第49页,（,4,）、噬菌体杂交,.,亲本噬菌体（,T2,）基因型,hr,+,：透明，小斑，边缘含糊,h,+,r,：半透明，大斑，边缘清楚，,杂交过程,混合感染试验,两个亲本噬菌体,混合感染,E.coli,B,和,B/2,，观察菌苔上出现噬菌斑特征。推断噬菌体基因型。,mixed infection experiments,病毒的传分析,第50页,混合感染（,mixed infection,）,E.coli,B,或,B/2,T2 phage,病毒的传分析,第51页,（,5,）杂交结果,在,B,和,B/2,混合菌苔上出现了,4,种噬菌斑。,噬菌斑表型,推测基因型,亲本型,透明,小,h r,+,半透明,大,h,+,r,重组型,半透明,小,h,+,r,+,透明,大,h r,病毒的传分析,第52页,半大,半小,透小,透大,病毒的传分析,第53页,（,6,）重组机理,h,+,r,h,+,r,h,+,r,h r,+,h r,+,h r,+,h,+,r,h,+,r,h,+,r,hr,+,hr,+,h r,+,噬菌体染色体在细菌体内复制,不一样噬菌体染色体在细菌体内交换重组,h,+,r,h,+,r,病毒的传分析,第54页,h,+,r,+,h,+,r,h,+,r,hr,+,hr,+,h r,h,+,r,h,+,r,+,h,+,r,h r,+,h r,h,+,r,释放出,4,种子代噬菌体,个别噬菌体,DNA,重组,病毒的传分析,第55页,（,7,）噬菌体重组值与基因作图,重组值计算,重组噬菌体噬菌斑数,总噬菌斑数,100%,基因图距,用两个基因重组值表示基因间遗传距离。,（,h,+,r,+,+hr,）,total plaques,100%,病毒的传分析,第56页,Hershey,和,Rotman1949,年,T2,杂交结果,基因型,噬菌斑,百分率,hr,+,42,76%,h,+,r,34,h,+,r,+,12,24%,hr,12,r,h,24,病毒的传分析,第57页,（,8,）、,T2,噬菌体遗传图,Hershey,迷惑,a.Hershey,以后分离出各种突变,T2,噬菌体：,r,1,、,r,7,、,r,13,b.,详细杂交分析,用,hr,不一样突变体杂交，计算,h,与不一样,r,之间重组值并绘制遗传图。,病毒的传分析,第58页,h,与不一样,r,之间重组值,杂交,子代各种基因型百分比,h,+,r,+,hr,+,h,+,r,hr,重祖率,%,hr,+,h,+,r,1,12,42,34,12,24,hr,+,h,+,r,7,5.9,56,32,6.4,13,hr,+,h,+,r,13,0.74,59,39,0.94,1.7,r,1,h,24,r,7,h,13,r,13,h,1.7,病毒的传分析,第59页,h,与不一样,r,之间位置关系,r,1,h,r,7,r,13,r,1,h,r,7,r,13,r,1,h,r,7,r,13,r,1,h,r,7,r,13,4,种可能,病毒的传分析,第60页,深入杂交确定各,r,之间位置,r,13,r,7,+,r,13,+,r,7,h r,13,r,7,排列结果,r,1,h,r,7,r,13,r,1,h,r,7,r,13,或？,到底是那种排列？,病毒的传分析,第61页,Streisinger,和,Edgar,判断,10,年后（,1964,），,G.Streisinger,和,Edgar,研究了噬菌体很多标识基因杂交重组，才判断出,T2,噬菌体遗传图是环形。,h,r,1,r,7,r,13,病毒的传分析,第62页,二、,T4,噬菌体突变型三点测交,噬菌体也能进行三点测交（,06A/9/4,）,突变型：小噬菌斑,(m),、快速溶菌,、浑浊溶菌班,(tu),往往,M 12.9 R 20.8 tu,病毒的传分析,第63页,三,X174,突变型两点和三点测交,P127,(,一,),X,174,两点测交,两个琥珀突变型间杂交,amA x amB,su+,su+:amA,、,amB su-,基因型：,amA,-,amB,+,amA,+,amB,-,amA,+,amB,+,amA,+,amB,+,amA,-,amB,-,A,+,B,+,X 2,amA-amB,间重组值：,X 100%,su+:amA,、,amB,总数,许可条件,:,只有在这种均中才能产生子代,重组类型,病毒的传分析,第64页,两个不一样抑制因子敏感突变型间杂交,sus amber x sus opal,限制条件：,su+amber,、,opal su-,基因型：,amb-opal+amb+opal-amber,+,opal,+,amb+opal+amb-opal-,su+amber,；,su+opal,10,-6,10,-2,P128,表,5-6,174,突变型之间杂交观察到双因子重组率,病毒的传分析,第65页,(,二,),X174,三点测交,1,确定三个基因次序前提条件,只有两种可能次序条件下进行；,比如：要确定,amA,、,amB,、,tsC,三基因次序,已知：,amA,与,amB,较近，,amA,和,amB,离,tsC,都较远；,三个基因次序有：,或：,amA amB tsC,或：,tsC amA amB,不存在：,amA tsC amB,病毒的传分析,第66页,2,确定三个基因次序,原理,:,杂交：,amA+tsC X+amB+,amA+tsC,+amB +,P127,图,5-4,病毒的传分析,第67页,假如基因次序是,:,amA amB tsC,试验结果应是,:+tsC,为大类，,+,为小类,图,5-4(,正交次序,I,或反交次序,I),病毒的传分析,第68页,假如基因次序是,:,tsC amA amB,试验结果应是,:+,为大类，,tsC+,为小类,图,5-4(,正交次序,II,或反交次序,II),四 噬菌体基因重组特点,P130,病毒的传分析,第69页,病毒的传分析,第70页,四、烈性噬菌体遗传体制,噬菌体在杂交中，每个亲代对子代所提供遗传贡献取决于感染细菌时每种亲代噬萄体相对数量；,噬菌体基因重组是发生在噬菌体,DNA,复制以后，重组型和亲本型一起复制；,噬菌体不一样基因型之间能够发生屡次交换；,在噬菌体中基因重组频率能够伴随宿主细胞裂解时间延长而增加，直到,DNA,与外完蛋白装配成为完整噬菌体时，重组才停顿。,所以噬菌体杂交时，应该注意：,控制每种亲代噬菌体基因型投放量：,控制允许发生复制和重组时间。只有控制这两个原因并在标准条件下进行杂交所得重组频率才能用于绘制近似遗传图。,病毒的传分析,第71页,第三节 噬菌体突变型互补试验,一,X,174,条件致死突变型互补测验,(,一,),X,174 DNA,结构复制,图,5-1,(,二,),X,174,突变型与互补测验,1,互补测验原理,在限制条件下，能长出噬菌斑：,说明：,两个突变型能发生功效互补，是两个基因。,在限制条件下，不能长出噬菌斑：,说明：,两个突变型不能发生功效互补，是同一基因。,病毒的传分析,第72页,病毒的传分析,第73页,2,互补测验及结果,P124,表,5-4,X174,突变互补测验结果,顺反子 突 变 型,A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28,B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8,och11,C och6,D am10,amH81,E am3,am6,am27,F am87,am88,am89,amH57,op6,op9,tsh6,ts41D,G am9,am32,ts,ts79,H amN1,am23,am80,am90,ts4,病毒的传分析,第74页,二,T4,突变型互补试验,病毒的传分析,第75页,病毒的传分析,第76页,第四节,噬菌体基因组与原噬菌体,一,噬菌体基因组：,由,49000bp,组成,1,基因分类,头部基因：,7,个（必需基因：相邻）,尾部基因：,11,个（必需基因：相邻）,噬菌斑形成必需基因 复制所需基因：,O,、,P,裂解、释放所需基因：,S,、,R,基因 正调控基因：,N,、,Q,附着区：,att,；,专一性重组所必需：,int,、,xis,噬菌斑形成非必需基因 溶源化所需：,CI,、,CII,、,CIII,重组所必需：,exo,、,red,病毒的传分析,第77页,P133,图,5-6,病毒的传分析,第78页,噬菌体包装过程,病毒的传分析,第79页,噬菌体基因组,病毒的传分析,第80页,2,噬菌体基因组结构特点,:,二,原噬菌体与合子诱导,1,原噬菌体,：,2,合子诱导：,Hfr()X F,-,受体菌裂解,(,进入,F-,后,),b+,原点,d+c+,a+,3,合子诱导与整合部位确实定,病毒的传分析,第81页,Jacob,和,Wollman,（,1956,年）发觉了合子诱导（,zygotic induction,）现象，并利用合子诱导确定了几个,E.coli,染色体上原噬菌体整合位点。他们发觉,Hfr,（,）,F,所得到重组子频率要比,HfrF,（,）或,Hfr,（,）,F,（,）要低得多。这是因为在,Hfr,（,）,F,杂交中，原噬菌体进入无阻遏物受体细胞质中，进行大量复制使受体细胞裂解，所以不易得到重组子，此现象就称为合子诱导。现在咱们再回过头来查阅一下传递等级作图，中止杂交试验以及重组作图都是采取,HfrF,（,）就是不致产生合子诱导缘故。,病毒的传分析,第82页,第四节,噬菌体基因组与原噬菌体,噬菌体整个基因组如图所表示，可分为三个个别，,左臂：从,A,到,J,长约,20kb,，其中基因编码组成头部、尾部、尾丝对组装完整噬菌体所需要蛋白质。中段：长约,20kb,，是,DNA,整合和切出，溶原生长所需序列。右臂：长约,10kb,，是调控区，控制溶菌和溶原生长最主要调控基因和序列、以及,DNA,复制起始均在这区域内。左右臂包含,DNA,复制、噬菌体结构蛋白合成、组装成熟噬菌体、溶菌生长所需全部序列；对溶菌生长来说，中段是非必需。,病毒的传分析,第83页,三 原噬菌体插入与切除,1,原噬菌体插入与正常切除,P135,图,5-7,2,原噬菌体异常切除,P135,图,5-8,（,1,）,转导噬菌体：指带有细菌基因噬菌体。,（,2,）,d,转导噬菌体特点：,3,温和性性噬菌体互补试验与作图,(1),与众多已知位点点突变作互补试验，确定缺失区域,P136,(2),用众多已知缺失区域缺失品系对点突变进行缺失作图,病毒的传分析,第84页,病毒的传分析,第85页,整合态,病毒的传分析,第86页,一些d gal品系与图谱左臂顺反子中经典sus突变之间重组,dgal,1,dgal,2,dgal,3,dgal,4,dgal,5,susA -+,susB -+,susE -+,susG -+,susH -,susM -,attP,dgal,1,dgal,2,dgal,3,dgal,4,dgal,5,A,B,E,G,H,M,病毒的传分析,第87页,第五节 环状排列与末端重复,一,线状,DNA,含有环状遗传图,1,噬菌体,DNA,结构特点：具末端重复（末端冗余）,末端冗余,:,指,DNA,分子两端核苷酸次序相同现象,.,致环交换：指基因在遗传图上呈环状排列。,2,末端重复试验证据 图,5-11,3,基因呈环状排列试验证据,P138,图,5-12,二 环状排列与末端重复形成,1,基因环状排列 图,5-13,（,A,）,2,末端重复杂合子形成 图,5-13,（,B,）,病毒的传分析,第88页,病毒的传分析,第89页,病毒的传分析,第90页,病毒的传分析,第91页,病毒的传分析,第92页,环状排列与末端冗余,环状排列：,T2,或,T4 DNA,分子核苷酸排列即使是不变，但从哪一个核苷酸开始则有种种可能。,末端冗余：,T2,或,T4 DNA,分子两端含有相同碱基次序。,病毒的传分析,第93页,线状,T4 DNA,环状遗传图,经过核酸外切酶,III,消化后发生环化反应来证实基因组中存在末端重复示意图,病毒的传分析,第94页,环状排列,证实基因组群体中环状排列次序示意图,T2 DNA,病毒的传分析,第95页,环状排列和末端重复是怎样形成？,复制,重组,串联复制不定点、定长切割,切割,病毒的传分析,第96页,病毒的传分析,第97页,