临床检验免疫学重点名词解释(word文档良心出品).doc
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一、名词解释 1.ANA(抗核抗体):是一组将自身各种细胞核成分作为靶细胞的自身抗体总称。 2.BAS(生物素–亲合素系统):基于生物素和亲合素既能偶联抗原(或抗体)分子,又能偶联酶、荧光素等示踪物质,可桥联抗原抗体系统和示踪物质指示系统。 3.包被:将抗体或抗原结合在固体载相上的过程。 4.CH50试验:绵羊红细胞与溶血素结合形成的免疫复合物激活血清中的补体,引起红细胞溶血,以50%溶血为判断终点来测定血清总补体活性。 5.CD分子(簇分化抗原):有核细胞在不同发育阶段其在细胞膜表面均可表达不同的分化抗原,形成不同的细胞类群。 6.沉淀反应:是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。 7.多克隆抗体:在含有多种抗原表位的抗原刺激下,体内多个B细胞克隆被激活并产生针对多种不同表位的抗体,其混合物为多克隆抗体。 8.单克隆抗体:单个B细胞参与融合形成的单个杂交瘤细胞经分离克隆化,产生针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,具有性质纯、效价高、特异性强、少或无血清交叉反应等优点。 9.等价带:当抗体过量时,IC(免疫复合物)的形成随着抗原递增至抗原、抗体比例最适处达最高峰。 前带:高峰区域左侧,抗体浓度过高,沉淀反应不明显 后带:高峰区域右侧,抗原浓度过高,沉淀反应不明显 10.封闭:加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质部分地非特异性吸附于固相载体表面,加入1%~5%牛血清白蛋白或5%~20%小牛血清再包被一次,消除此干扰的过程。 11.HLA:是引起同种异体移植排斥反应最强的抗原,与HVGR或GVHR有关。 12.化学发光剂:在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物。 13.胶体金:是金盐被还原成金原子后形成的金颗粒悬液。 14.间接凝集反应:可溶性抗原/抗体先吸附于颗粒性载体表面,与相应抗体/抗原作用,在适宜的电解质存在条件下出现特异性凝集现象。 15.抗原抗体结合的可逆性:抗原与相应抗体结合形成复合物后,在一定条件下又可解离为游离的抗原与抗体的特性。 16.M蛋白:指B细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成和顺序上十分均一的异常单克隆Ig或Ig片段。 17.免疫磁珠:磁性微球(磁性材料颗粒表面进行处理,核心:金属颗粒Fe2O3、Fe3O4,核心外:高分子材料聚苯乙烯、聚氯乙烯等)表面包被有免疫物质者称免疫磁珠。 18.免疫佐剂:预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质。 19.PBMC(外周血单个核细胞):淋巴细胞和单核细胞。 20.亲和性:抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位之间的结合强度,抗原抗体的亲和性取决于两者空间构型互补的程度。 21.亲合力:是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度。 22.RF(类风湿因子):一种以变性IgG的Fc片段为靶抗原的自身抗体。 23.人源性抗体:是指抗体的可变区部分或抗体所有全部由人类抗体基因所编码。 24.双特异性抗体:是指具有两个不同特异性的抗原结合位点,可结合两种不同抗原分子的抗体。 25.时间分辨:利用时间分辨荧光分析仪延长测量时间,短寿命荧光完全衰变后再测定镧系元素特异荧光,所得信号完全是稀土元素螯合物发射的特异性荧光,可排除标本中(本底)非特异性荧光。 26.效价:抗体(或抗原)与一定量的对应物产生反应所需的最小量。一般以该抗体(或抗原)仍能与其对应物显现可见反应的最高稀释倍数来表示。 27.选择性蛋白尿指数:SPI=(尿IgG/血清IgG)/(尿TRF/血清TRF) 28.荧光寿命:荧光物质被激活后产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。 29.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素(如紫外线照射、高温、苯胺、硝基笨、酚、I–等)作用下,发射荧光减弱甚至消退的现象。 30.直接凝集反应:适当电解质参中,颗粒性抗原直接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象。 31.肿瘤特异性抗原:是指仅表达于肿瘤细胞而不存在于正常细胞的抗原。 32.肿瘤相关抗原:是指非肿瘤细胞所特有的,正常组织或细胞也可表达的抗原物质。 二、简答题 1.标准品和质控品的不同点:⑴标准品即含量确定的处于一定基质中的特性明确的物质,通常为纯品,分为第一、第二、第三个等级。⑵质量控制品是含量已知的处于与实际标本相同的基质中的特性明确的物质,这种物质与其他杂质混在一起,质控物必须按患者标本一样对待进行检测,根据用途分为室内质量控制品、室间质量评价样本和质量控制血清。 2.免疫浊度法的原理及影响因素:⑴原理:可溶性抗原+相应抗体=大小一定的免疫复合物(比例合适,增浊剂)⑵影响因素:①抗原抗体比例合适②抗体质量:要求特异性强、效价高、亲和力强、使用R型抗体③反应环境:PH6.5~8.5,离子强度大④增浊剂 3.速率散射比浊法的基本原理及优点⑴原理:抗原抗体结合反应的动力学监测。速率:单位时间内抗原抗体结合形成免疫复合物的速度。连续监测速率与散射光信号关系,找到速率峰(某一单位时间内抗原抗体反应速度最快、免疫复合物形成量最多、散射光强度最大),其峰值大小与抗原浓度呈正相关。⑵优点:快速、灵敏、可检测微量样本,不受本底散射信号干扰,检测精密度大 4.ELISA检测过程中对结果产生影响的因素:①试剂在使用前未平衡至室温;②加样的准确性;③温育的温度/方式/时间;④洗板 5.吖啶酯化学发光特点: 19.时间分辨荧光免疫测定原理:通常标本自发荧光寿命较短,而镧系元素螯合物的荧光寿命较长,因此,在检测时可在短寿命本底自发荧光完全衰变后,再测定镧系元素螯合物的特异性荧光信号,可有效降低本底荧光干扰。 20.荧光偏振免疫测定原理:利用抗原抗体竞争反应的原理,根据荧光素标记抗原与荧光素抗原抗体复合物之间荧光偏振程度的差异,测定体液中小分子抗原物质的含量。 16.抗原抗体反应有哪些特点各有何意义? ①特异性:是指抗原分子与抗体结合的专一性,由抗原表位与抗体分子超变区之间空间构型的互补性所决定; ②可逆性:是指抗原抗体结合形成的复合物并不牢固,在一定条件下解离为游离的抗原和抗体的特征; ③比例性:是指抗原与抗体发生可见反应需遵过循一定的量比关系。抗原抗体浓度比例当才出现可见反应,称为抗原抗体的的等价带,抗体过量时称为前带,抗原过量时称为后带; ④阶段性:是指抗原抗体反应氛围特异性结合阶段和可见阶段 一、CsCl-EB法是一种沉降平衡离心法,经超速离心,离心介质CsCl形成一连续的密度梯度,在过量EB存在的条件下,各种不同密度的物质经离心平衡后得以分开。 二、蛋白质分离纯化的一般步骤:1、首先根据所需蛋白质的性质选取生物体组织细胞作为材料,对所选材料进行细胞破碎、离心等前期处理,获得粗提蛋白质溶液,称为蛋白质的粗分离2其次利用蛋白质溶解度的差异对蛋白质进行盐析,使其与杂蛋白质分离开来。3、再次根据蛋白质的分子大小及形状、电离性质、生物学功能的差异选用凝胶过滤层析、离子交换层析、电泳法、亲和层析等方法进行细分离,可得到较纯的蛋白质,此为蛋白质分离纯化的一般程序2、其次利用蛋白质溶解度的差异对蛋白质进行盐析,使其与杂蛋白质分离开来。 三、酚抽提法:1、EDTA:抑制DNA酶活性,降低细胞膜稳定性;2、SDS:降解细胞膜,乳化脂化和蛋白质并沉淀,抑制DNA/RNA酶3、无DNA酶的RNA酶:水解RNA,避免DNA消化4、蛋白酶K:水解蛋白质,消化DNA酶和细胞中的蛋白质5、酚:使蛋白质变性沉淀,抑制DNA酶活性6、PH8.0Tris溶解:保证提后DNA进入水相,避免滞留于蛋白质层 四、PCR原理:1、变性:95°C将被复制的DNA片段→(Tm熔点温度)DNA双螺旋分键断裂→形成单链DNA。2、退火:55°C引物(寡核苷酸)与模板(单链DNA)互补结合,形成杂交链;3、72°C按照模板链的序列以互补的方法将dNTP加至Taq DNA聚合酶使杂交双链不断延伸形成DNA 五、三种探针标记方法选择:1、DNA探针:克隆在质粒载体中;DNA探针不易降解;DNA探针的标记方法较成熟;标记方法较成熟;易探X(不认识)2、RNA探针:杂交效率高;稳定性高;非特异性杂交较少较少本底干扰。3、寡核苷酸探针:可以区分仅仅一个bp,可根据需要合成相应(后面没拍到);可大量合成。 六、原癌基因激活机制:①~点突变②~获得外源启动子而激活③~甲基化程度降低④~ 的扩增⑤染色体易位或基因重排⑥基因耦联 七、载体的构建和选择条件:1、在宿主细胞中具有自主复制能力;2、限制性酶切位点供外源DNA片段插入;3、分子量不宜过大;4、筛选标记;5、匹配与宿主相适应的调控元件。- 配套讲稿:
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