急性脑梗死患者时间窗内行血管内介入治疗前后血清自噬相关蛋白的检测及临床价值.pdf
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1、分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7论著基金项目:上海市松江区技术攻关项目(15sjgg34)作者单位:上海市松江区中心医院神经外科,上海 201600通信作者:姜永亮,Email:急性脑梗死患者时间窗内行血管内介入治疗前后血清自噬相关蛋白的检测及临床价值李森姜永亮潘磊摘要 目的研究急性脑梗死(ACI)患者时间窗内行血管内介入治疗前后检测血清自噬相关蛋白 Beclin1 和轻链 3(LC3)的临床价值。方法选择 2019 年 4 月至 2021 年 6 月在上海市松江区中心医院接受时间窗内血管内介入治疗的 90
2、 例 ACI 患者作为 ACI 组,选取同期体检的 95 名健康志愿者作为对照组,检测 ACI 组患者入院时及治疗后 12 h、对照组体检时的血清 Beclin1、LC3 含量,采用入院时的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评价 ACI 患者的病情严重程度并分为轻度缺损患者和中重度缺损患者,采用出院后 90 d 时的改良 Rankin 量表(mRS)评分评价 ACI 患者的预后并分为预后良好患者和预后不良患者,对不同病情严重程度、不同预后患者进行 Beclin1、LC3 比较。结果Beclin1、LC3含量:治疗后 12 h入院时对照组,差异有统计学意义(P0.05);ACI 组中神
3、经功能中重度缺损患者入院时血清 Beclin1、LC3 含量高于轻度缺损患者,差异有统计学意义(P0.05);ACI 组中预后不良患者治疗后 12 h 的血清 Beclin1、LC3 含量低于预后良好患者,差异有统计学意义(P0.05);预后不良患者的发病至手术时间、入院时 NIHSS 评分、随机血糖、CRP、LDLC 水平高于预后良好患者,差异有统计学意义(P0.05)。logistic 回归模型分析结果显示:发病至手术时间、入院时 NIHSS 评分治疗后 12 h 时血清Beclin1、LC3 含量是 ACI 患者预后不良的影响因素(P0.05)。治疗后 12 h 时血清 Beclin1、
4、LC3 含量预测 ACI 患者预后的曲线下面积分别为 0.729(95%CI:0.6130.845)、0.761(95%CI:0.6430.879),根据约登指数最大值确定两项血清指标预测 ACI 患者预后的截断值分别为 3.51 ng/mL(灵敏度:71.43%、特异度:68.12%)、163.50 pg/mL(灵敏度:76.19%、特异度:72.46%)。结论ACI 患者 PCI 后 12 h 检测血清自噬相关蛋白 Beclin1 和 LC3 含量对预后具有评估价值。关键词 急性脑梗死;自噬;Beclin1;LC3Detection and clinical value of serum
5、autophagy related protein in patients with acutecerebral infarction before and after intravascular interventional therapy within the timewindowLI Sen,JIANG Yongliang,PAN Lei(Department of Neurosurgery,Shanghai Songjiang District Central Hospital,Shanghai,China,201600)ABSTRACTObjectiveTo study the cl
6、inical value of detecting serum autophagy related proteinsBeclin1 and LC3 of patients with acute cerebral infarction(ACI)before and after intravascular interventionaltherapy within the time window.Methods90 patients with ACI who received intravascular interventionaltherapy within the time window in
7、Shanghai Songjiang District Central Hospital from April 2019 to June 2021were selected as the ACI group,and 95 healthy volunteers who underwent physical examination in the sameperiod were selected as controls.The serum Beclin1 and LC3 contents of patients in the ACI group at admission and 12 hours a
8、fter treatment,of the control group at physical examination were measured.The disease severity degree of ACI patients was evaluated by the National Institutes of Health Stroke Scale(NIHSS)score at 1133分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7时间窗内行急诊血管内介入治疗是治疗急性脑梗死(acute cerebral i
9、nfarction,ACI)的首选方式,对提高生存率、降低致残率、改善预后具有重要意义1。尽管如此,受到 ACI 发病及治疗过程中缺血再灌注损害的影响,部分 ACI 患者获得缺血脑组织的血流再灌注后仍会发生预后不良23。因此,深入认识 ACI 血管介入治疗预后的相关生物学机制,有助于发现新的治疗靶点和评价标志物。细胞自噬是参与组织缺血缺氧损害及缺血再灌注损害的生物学环节,其特征是细胞通过降解自身细胞器及大分子来维持细胞内环境稳定,在脑组织缺血再灌注过程中激活自噬能够起到神经保护作用45。Beclin1 和轻链 3(lightchain3,LC3)是参与自噬启动的关键蛋白,对自噬具有促进作用。本
10、研究将血清自噬相关蛋白 Beclin1、LC3 作为标志物,分析自噬相关蛋白与 ACI 病情严重程度及预后的关系。报道如下。1对象与方法1.1研究对象选择 2019 年 4 月至 2021 年 6 月在上海市松江区中心医院接受血管内介入治疗的 90 例 ACI 患者作为研究的 ACI 组,纳入标准:符合指南中 ACI的诊断标准6;在时间窗内行血管内介入治疗;入院时及治疗后 12 h 均留取血清标本;临床资料和预后资料完整。排除标准:既往有脑梗死、脑出血、脑外伤等病史;既往有血管内介入治疗史;合并精神疾病、恶性肿瘤。选择同期体检的 95 名健康志愿者作为对照组。本研究取得入组对象或家属的知情同意
11、,获得医院伦理委员会的批准。1.2血清自噬相关蛋白含量的检测ACI 组患者入院时采集外周静脉血 35 mL 作为治疗前数据,血管内介入治疗后 12 h 采集外周静脉血 35 mL;对照组体检时采集外周静脉血35 mL。静脉血室温静置 30 min 后 3 000 r/m、半径 5 cm 离心 10 min,分离得到血清后采用酶联免疫吸附法试剂盒(上海西唐生物科技公司,中国)检测 Beclin1 和 LC3 的含量。1.3ACI 病情严重程度及预后的评价入院时,参照指南6采用美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health stroke scale,NIHS
12、S)评价 ACI 患者的病情严重程度,评分5 分为中重度缺损、5 分为轻度缺损,将 ACI 患者分为中重度缺损患者和轻度缺损患者。出院后 90 d时,参照指南6采用改良 Rankin 量表评分(modified Rankin scale score,mRS)评价 ACI 患者的预后,评分4 分为预后不良、admission control group,the difference was statistically significant(P0.05).In the ACI group,the levels of serum Beclin1 and LC3 at admission of pa
13、tients with moderate and severe defects were higher than those of patients with mild defects,the difference was statistically significant(P0.05).The levels of serum Beclin1 andLC3 at 12 hours after treatment of patients with poor prognosis were lower than those of patients with good prognosis,the di
14、fference was statistically significant(P0.05).The time from onset to operation,NIHSS score at admission,random blood glucose,CRP and LDLC levels of patients with poor prognosis were higher than thoseof patients with good prognosis,the difference was statistically significant(P0.05).The results of lo
15、gistic regression model analysis showed that the time from onset to operation and the contents of serum Beclin1 and LC3at 12 hours after the treatment,NIHSS score at admission were the influencing factors of poor prognosis of ACIpatients(P0.05).The area under curve of serum Beclin1 and LC3 contents
16、at 12 h after treatment in predictingthe prognosis of ACI patients were 0.729(95%CI:0.6130.845),0.761(95%CI:0.6430.879),according to themaximum value of the Yoden index,the cutoff values of two serum indicators for predicting the prognosis of patients with ACI were 3.51 ng/mL(sensitivity:71.43%,spec
17、ificity:68.12%)and 163.50 pg/mL(sensitivity:76.19%,specificity:72.46%),respectively.ConclusionDetection of serum autophagy associated protein Beclin1 and LC3 levels 12 hours after PCI in patients with ACI has predictive value for prognosis.KEY WORDS Acute cerebral infarction;Autophagy;Beclin1;LC3 11
18、34分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7ACI 患者分为预后不良患者和预后良好患者。1.4临床资料的收集收集 ACI 患者的临床资料,包括性别、年龄、糖尿病史、高血压史、吸烟史、发病至手术时间、入院时 NIHSS 评分,入院时的总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋 白 胆 固 醇(low density lipoprotein cholesterol,LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(highdensity lipoprotein chole
19、sterol,HDLC)、随机血糖、C 反应蛋白(Creactive protein,CRP)水平。1.5统计学处理采用 SPSS 21.0 软件和 Prism6.0 软件进行统计学分析和制图,计量资料以(x s)表示,两组间比较采用独立样本 t 检验、组内治疗前后比较采用配对样本 t 检验;计数资料以 n(%)表示、组间比较采用卡方检验;ACI 预后的影响因素采用logistic 回归分析,血清自噬相关蛋白预测 ACI 预后的价值采用 ROC 曲线分析。P入院时对照组,差异有统计学意义(P0.05)。见表 1。2.2ACI 组中入院时不同病情严重程度患者血清自噬相关蛋白含量的比较根据 NIH
20、SS 评分将 ACI 组分为神经功能中重度缺损患者(n=38)和轻度损伤患者(n=52),ACI组中神经功能中重度缺损患者入院时血清 Beclin1、LC3 含量高于轻度缺损患者,差异有统计学意义(P0.05);预后不良患者治疗后12 h的血清Beclin1、LC3含量低于预后良好患者,差异有统计学意义(P0.05);预后不良患者的发病至手术时间、入院时 NIHSS 评分、随机血糖、CRP、LDLC 水平高于预后良好患者,差异有统计学意义(P0.05)。见表 4。2.5ACI组患者预后影响因素的logistic回归分析以 ACI 组患者的预后作为因变量(预后良好=0、预后不良=1),发病至手术
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