微生物标本的采集和运送基本原则.doc

一、盂县中医医院院微生物标本的采集和运 送基本原则
1．发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，我院总的医院微生物标本送检率应不低于70％。
2．尽量在抗菌药物使用前采集标本。
3．标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。
4．标本采集后立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。
5．以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭子或伤口拭子等，应标明标本种类，并立即送检。
6．盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。中段尿培养的标本应用专用的无菌尿标留取（在仓库领取）。静脉导管、胸腹水，脑脊液等到细菌室取无菌试管留取。
7．送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。
二、常见医院微生物标本采集送检方法
1．血液与骨髓
① 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
② 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养基前，应更换针头或过火消毒针头。血培养瓶应在避光室温中保存，不必置冰箱保存。
③ 每次采血量成人5一10ml，婴幼儿l一5ml，培养基与血液之比以 10：1-5：1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。
④ 怀疑菌血症应尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。对已用抗菌药物而又不能停药者，可在下次用药前采血。
⑤ 每例病人至少采血两次，间隔0.5-lh，以利于提高阳性率和区分感染菌与皮肤污染菌。多次多部位采血可提高阳性率。
⑥ 对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶部位或髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓lml作增菌培养。
2．尿液
① 中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0．1％高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口；男性须翻转包皮冲洗，用0.1％新洁尔灭消毒尿道口．灭菌纱布擦干后收集标本10ml，0.5小时内送检。
② 导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用空针细针头斜穿管壁抽吸尿液。或消毒后解开接口，弃去导尿管前段尿液、留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。
③ 尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难，或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液。
④ 送检标本以早晨第一次尿液为佳。
⑤ 室温下尿标本耽搁稍久，可致尿内细菌浓度明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。不能立即送检者，可暂存4℃冰箱。
3．痰液
① 咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少者可用45℃的l0％氯化钠溶液雾化吸入导痰。
② 对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。
③ 双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经人工气道插至肺支气管水平吸引痰液。
④ 对重症、难治、或伴免疫抑制、或疑似厌氧菌引起的医院内肺部感染，可采用环甲膜穿刺经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)、经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)采集无口咽部菌群污染的痰液，进行感染病原学诊断。
⑤ 痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。如果室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病菌可呈过度生长，而肺炎球菌、葡萄球菌和流感杆菌检出率则明显下降。
4．伤口、烧伤创面与脓液
① 用无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用无菌棉拭取病灶深部的脓液和分泌物，立即置无菌试管内送检。
② 对未破损的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检：也可于切开排脓时用无菌棉拭子采样。
5．粪便
① 排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便约2—3g(液状粪便则取絮状物)，盛于灭菌广口瓶或蜡纸盒送检。用棉拭子挑取粪便插入Cnry—BLair运送培养基或PH7.0的磷酸盐甘油中送检，可提高病原菌检出率．
② 对不易获取粪便者或婴幼儿，可用直肠拭于(又称肛拭)采集。将拭子前端用无菌甘油水湿润，然后插入肛门约4—5cm(幼儿约2—3cm)处，轻轻旋转擦取直肠表面粘液后退出置运送培养基内送检。
6．咽拭、口腔拭子
① 病人清水嗽口后．由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引，棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，反复擦拭数次，插入运送培养基。棉拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液。
② 对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，用棉拭子在病灶部位擦拭数次即可。

7．浆膜腔积液、脑脊液
① 浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液和鞘膜液等．以严格无菌操作抽取数毫升液体置无菌试管或小瓶送检。对易自凝的标本可添加抗凝剂（抗凝剂需无菌）。
② 严格无菌操作下采取脑脊液数毫升置于无菌试管。标本采集后应立即送检，以防细菌死亡。疑似有脑膜炎奈瑟菌时，应注意保暖，不可置冰箱保存。
8．生殖道标本
① 根据不同感染种类和病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时，应先用生理盐水局部清洗，以无菌棉拭子插入尿道口 l一2cm停留十余秒钟。轻轻旋转拭子后退出．
② 对外阴部糜烂、溃疡者，经生理盐水清洗后用棉拭子擦取病灶边缘的分泌物。
③ 阴道和官颈口分泌物须在窥阴器下用长棉拭子采集。
④ 子宫内分泌物需用无菌导管抽取．导管外套一层保护膜，插入子宫后再刺穿该膜予负压吸引，可减少阴道菌群污染。
⑤ 女性盆腔脓肿，应在阴道局部消毒后，由直肠子宫凹陷处进针抽取。
⑥ 前列腺液需进行前列腺按摩获取。
9．组织标本
① 表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除。对窦道和痰管应深部刮取管壁组织。
② 深部组织标本可经皮肤穿刺采集或手术切取。标本置无菌容器并加少量无菌生理盐水以保湿度，或置肉汤增菌液，或置血平皿送检。
③ 尸检标本应于死后20h内采取，以防肠道等菌群侵入引起污染。
④ 作病原体分离的组织标本，不可用福尔马林固定。疑有污染的较大组织块，可用烧红的烙铁烧灼其表面或置沸水中5—10秒钟使表面变白消除污染后，再用无菌器械切开组织，取中央部位组织送检。
10.静脉导管
从病人体内拔出静脉插管，用无菌技术剪取5cm长导管尖端。。不能作床旁接种者，导管置含有少量生理盐水的无菌试管内立即送检。实验室接到标本后马上把导管置于血平皿上作滚动涂布接种，也可将剪下的导管置肉汤增菌液或置于血培养液内，但不能区分导管感染菌与少量的定植菌。
三．内毒素检查
1、标本采集
【标本采集前注意事项】
不需特殊准备，最好空腹采血。周一至周五上午10点半之前送检。节假日不检测。
【标本类型】
血浆（肝素抗凝）、脑脊液、胸水、腹水
【标本容器】
无热源试管（血液和胸、腹水需肝素抗凝），用时到检验科四楼细菌室领取，原则上不备管。
【样本条码粘贴要求】
打印清晰的条码纵向粘贴在试管上，上下均应留有空间，具体以覆盖住原标签为准。病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码帖上涂写，保持条码的完整和清晰。
【标本采集方法】
血液标本：以无菌方法采取患者空腹静脉血液约2ml，注入肝素抗凝无热源试管，充分混匀，避免凝集。
脑脊液、胸水、腹水：以无菌方法留取相应标本，于无热源试管中。胸、腹水置于肝素抗凝管。
尿液：因尿液标本在留取时易污染，暂不做尿液标本，除非为穿刺尿标本。
【标本的送检地点】
检验科微生物室（裙楼4楼）。
三、临床意义
健康人群生物参考区间: 10 pg/ml以下。
1 革兰氏阴性菌败血症的诊断。
2 能引起细菌和毒素入血的局部感染，如呼吸道感染，脑膜炎、髓膜炎、消化道、肾脏及腹腔感染等疾病时，血中内毒素水平也与临床具有较好的一致性。
3 尿道感染：尿道感染大部分由革兰氏阴性菌引起，因此检测尿液中的内毒素水平可快速准确的对病人作出诊断，及时治疗。
4 肠源性内毒素血症:肝脏疾病和急性坏死性胰腺炎时可引起肠源性内毒素血症。
四、1-3-β-D-葡聚糖检查
【标本采集前注意事项】
不需特殊准备，最好空腹采血。周一至周五上午10点半之前送检。节假日不检测。
【标本类型】
血浆（肝素抗凝）、脑脊液、胸水、腹水
【标本容器】
真空采血管（血液和胸、腹水需肝素抗凝）
【样本条码粘贴要求】
打印清晰的条码纵向粘贴在试管上，上下均应留有空间，具体以覆盖住原标签为准。病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码帖上涂写，保持条码的完整和清晰。
【标本采集】
血液标本：以无菌方法采取患者空腹静脉血液约2ml，注入肝素抗凝试管（黑盖或绿盖），充分混匀，避免凝集。
脑脊液、胸水、腹水：以无菌方法留取相应标本于无菌试管中。胸、腹水应用肝素抗凝。
尿液：无菌方法留取中段尿标本，避免阴道分泌物的污染。
【血液标本的送检地点】
检验科微生物室（裙楼4楼）。
三、临床意义
健康人群生物参考区间: 10 pg/ml以下。