辅导生物选修三复习导学提纲.doc
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1、生物选修三复习:专题一 基因工程一、基因工程的原理:按照人们的愿望,通过体外和,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在水平上进行设计和施工的,因此又叫做。二、限制性核酸内切酶1、切割DNA的工具是,又称。切割产生的DNA片段末端通常有两种形式,即 和。2、这类酶在生物体内能将外来的DNA切断,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用,这样可以保持细胞原有的遗传信息。三、DNA连接酶“分子缝合针”根据DNA连接酶的来源不同,可以将它分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为 。只能连接 。另一类是从分离出来的,称为
2、。既可以“缝合”双链DNA片段互补的,又可以“缝合”双链DNA片段的,但连接之间的效率比较低。四、基因进入受体细胞的载体“分子运输车”1、基因操作过程中使用载体两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。2、现在通常使用的载体是,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状DNA,有的细菌中有一个,有的细菌中有多个。其他载体还有和等。3、作为载体必须具备以下条件?12 基因工程的基本操作程序一、目的基因的获取:1、目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的。2获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因 基因文库:将含有
3、某种生物不同基因的许多,导人受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。基因组文库:含有一种生物的 基因基因文库种类 cDNA文库:含有一种生物的基因 目的基因的获取:根据基因的有关信息:基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因。 PCR:是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。 条件:已知目的基因的序列。 过程:目的基因DNA受热形成,与结合,然后在_的作用下进行延伸形成DNA。 方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。二
4、、基因表达载体的构建1、表达载体的组成:目的基因+标记基因等。2、启动子:位于基因的,它是 结合的部位,驱动基因转录产生mRNA。3、终止子:位于基因的,终止。4、表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且 给下一代;使目的基因_和发挥作用。5、标记基因:受体细胞是否含有目的基因。三、将目的基因导入受体细胞(一)转化:目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和的过程。(二)方法 1、将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法 农杆菌特点:易感染植物和裸子植物,对_植物没有感染力;Ti质粒的可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。 转化:目的基因插人农杆菌导入植物细胞目的基因
5、整合到植物细胞染色体上目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2)基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。(3)花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种十分简便经济的方法。(我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)2将目的基因导入动物细胞 (1)方法:注射技术。(2)操作程序:目的基因表达载体取卵(受精卵) 显微注射注射了目的基因的受精卵移植到_性动物的_内发育新性状动物。3将目的基因导人微生物细胞(1)原核生物特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。(2)转化:处理细胞细胞表达载体与感受态细胞混合 _细胞吸收DNA分子。四、目的基因的检测与鉴定1检测 (1)方法:标
6、记了的、抗原抗体杂交。 (2)内容 检测转基因生物染色体的DNA是否插入。 检测目的基因是否转录。 检测目的基因是否翻译成。 2鉴定:鉴定、抗病鉴定等。例题1(多选题)右图为DNA分子结构示意图,对该图的正确描述是A的名称是胞嘧啶脱氧核苷酸B解旋酶作用的部位是C某限制性核酸内切酶可选择处作为切点DDNA连接酶可连接处断裂的化学键 反馈1 如图所示,两个核酸片段在适宜条件下,经X酶的催化作用,发生下述变化。则X酶是 ADNA连接酶 BRNA聚合酶 CDNA聚合酶 D限制酶反馈2 天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类,用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀
7、粉酶基因并转入酿酒酵母菌,获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题: (1)将淀粉酶基因切割下来所用的工具是_,用_将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子,下一步将该DNA分子_,以完成工程菌的构建。 (2)若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌,可采用的检测方法是_;若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶,可采用_检测,将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上,培养一定时间后,加入碘液,工程菌周围出现透明圈,请解释该现象发生的原因。_。(3)如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小?_。(4)微生物在基因工程领域中有哪些重要作用?_。练一练1、下列关于限制酶的说法正
8、确的是 ( )A、限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少 B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键2、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是 ( ) 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 反转录法 通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A、 B、 C、 D、3、采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法正确的是 ( )将毒素蛋白注射到棉受精卵中 将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养将编
9、码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵 A、 B、 C、 D、4、已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶切割后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 A、3 B、4 C、9 D、125、质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示,通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插
10、入的位置不同,细菌在培养基上的生长情况也不同,下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c),请根据表中提供的细菌生长情况,推测三种重组后细菌的外源基因插入点,正确的一组是 A、是c;是b;是aB、是a和b;是a;是bC、是a和b;C参是b;是aD、是c;是a;是b6、下图为DNA分子的切割和连接过程。(1)EcoRI是一种酶,其识别序列是 ,切割位点是 与 之间的键。切割结果产生的DNA片段末端形式为。(2)不同来源DNA片段结合,在这里需要的酶应是连接酶,此酶的作用是在 与 之间形成键,而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是。7、治疗糖尿病用的胰岛素,在过去主要是从动物(如猪、牛)
11、体获得的。自20世纪70年代基因工程发展起来以后,人们开始采用高新技术生产胰岛素,其操作过程如图15所示:(1)图中的质粒存在于细菌细胞中,从其分子结构看,可确定它是一种。(2)请根据碱基互补配对的原则判断,在连接酶的作用下,甲与乙能否拼接起来,并说明理由。(3)细菌丙进行分裂后,其中被拼接的质粒也由一个变成两个,两个变成四个质粒的这种增加方式在遗传学上称为。目的基因通过表达后,能使细菌产生胰岛素,这是因为基因具有控制合成的功能。8、下图是将人的生长激素基因导人细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导人细菌B后,其上的基因
12、能得到表达。请回答下列问题:(1)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高,导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有少数导入的是重组质粒。以下步骤可鉴别得到的细菌是否导人了质粒A或重组质粒:将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就导人了质粒A或重组质粒,反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是_。 _ (2)若把通过鉴定证明导人了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,会发生的现象是 。原因是:_(3)导人细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?反馈2 限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是一GGATCC一,限制性核酸内切
13、酶的识别序列和切点是一GATC一。在质粒上有酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有一个酶的切点。 (1)请画出质粒被限制性核酸内切酶I切割后所形成的黏性末端。_。 (2)请画出目的基因两侧被限制性核酸内切酶切割后所形成的黏性末端。_。(3)在DNA连接酶作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接?为什么?_。(4)基因工程中,如果要把相应的黏性末端连起来,要用_酶。6、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段,分析回答问题。(1)其中和是由一种限制酶切割形成的末端,两者要重组成一个DNA分子,所用DNA连接酶通常是。(2)和是由另一种限制酶切割形成的末端,两者要形成重组DNA片段,所用
14、DNA连接酶通常是。 生物选修三复习导学提纲(一)参考答案【课前导学】DNA重组 转基因技术 DNA分子 DNA重组技术 限制性核酸内切酶 限制酶 黏性末端 平末端 双链DNA片段互补的黏性末端之间 T4噬菌体 黏性末端 平末端 平末端 质粒 自我 噬菌体的衍生物 动植物病毒 结构基因DNA片段 储存 所有 部分 核苷酸 染色体 转录 翻译 复制 核苷酸 单链 引物 DNA聚合酶 启动子 终止子 首端 RNA聚合酶识别尾端 转录 可以遗传 能够表达 鉴别 表达 双子叶 大多数单子叶T-DNA Ti质粒的T-DNA上 显微 提纯 雌 输卵管或子宫 Ca2+ 感受态(在一定的温度下促进)感受态 “
15、探针”与基因组DNA杂交 是否插入了目的基因是否转录出了mRNA 蛋白质 抗虫鉴定(抗虫、抗病鉴定属于个体生物学水平鉴定)【典题反馈】例题1 ABD反馈1 A反馈2 (3)可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互补的) (4)DNA连接酶反馈3 (1)限制性核酸内切酶 DNA连接酶 导入酿酒酵母菌 (2)DNA分子杂交 抗原一抗体杂交或淀粉酶活性 该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基中,培养基中淀粉被水解的区域,遇碘不再变蓝色,产生透明圈 (3)测定相同培养条件下不同工程茵菌株的淀粉酶活性和酒精产量 (4)工具酶主要来自微生物;最重要的目的基因供体库之一;目的基因的
16、载体之一;作为受体细胞;提供用于发酵的工程菌【课堂反馈】7、(1) 平 T4DNA连接酶 (2) 黏性 DNA连接酶8、(1)限制酶 GAATTC 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 黏性末端 (2) DNA 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌吟脱氧核苷酸 磷酸二酯键 T4DNA连接酶 9、(1)DNA分子 (2)能 二者具有相同的黏性末端 (3)DNA复制 蛋白质10、(1) 普通质粒A和重组质粒都含有抗氨苄青霉素基因(2)有的能生长,有的不能生长期 导入普通质粒A的的细菌能生长,因为普通质粒A上有抗四环素基因;导入重组质粒的细菌不能生长,因为目的基因插在四环素基因中,抗四环素基因中,抗四环
17、素基因的结构被破坏(3)活动 是受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质,即人的生长激素。 13 基因工程的应用一、植物基因工程的成果:植物基因工程技术主要用于提高农作物的 能力,以及改良农作物的 和利用植物生产 等方面。二、转基因动物生产药物 成果:乳腺生物反应器。1基因来源:药用基因+蛋白基因+启动子。(四)转基因动物作器官移植的供体1器官供体:抑制或除去抗原决定基因。2成果:利用克隆技术培育没有免疫排斥反应的猪器官。(五)基因工程药物1来源:转基因。2成果:人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、激素等。三、基因治疗1概念:把导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。2成果
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