检验科标本运送培训PPT培训课件.ppt

检验检验科科标标本本运送培运送培训训医医学学课课件件分析前的质量保证分析前的质量保证检验报告是临床医师诊治疾病，判断预后，评估健康状况的重要依据。检验数据的价值首先体现在它的准确性上，只有准确的检验结果才能正确指导临床诊疗。而检验结果的准确与否，除了受检验过程中(检验中)各种因素的影响外，还受到检验前许多因素的影响，如采集标本前病人的状态，标本采集是否规范，标本的存贮和运输是否合理等。国内外均有报道,检验结果误差中70%左右来自检验前(分析前),而且检验前(分析前)误差是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。另一方面，检验数据的价值还体现在检验报告的正确应用上，正确地解读检验结果是正确应用检验报告的前提。临床医师拿到检验报告后，首先要对检验数据做全面的分析，排除各种干扰因素，才能做出正确判断。实验前质量控制主要包括：患者的准备；标本的采集；标本的储存；标本的运送；标本送出及签收；标本的处理；已知的和需考虑的生物因素和干扰因素等。1、患者的准备一般要求患者处于安静状态；晨起时的精神、体力、情绪等因素的影响较小，是大部分标本采集的最佳时间；如可能，患者最好停服干扰检测的药物；根据项目和标本类别选择相应的容器。许多检测对饮食、饮水和药物有特殊要求2、标本的采集2.1正确的采集标本是保证检验质量的基础(1)避免干扰物污染，特别是定量分析标本；(2)标本采集部位和方法要正确；(3)标本标识一定要清晰无误；(4)无人为的溶血和混浊因素；(5)合理使用抗凝剂及防腐剂；(6)收集区温度最好不超过20;(7)微生物检验标本采集严格无菌概念；(8)标本采集后要尽快送至实验室。2.2标本采集时间：(1)空腹标本：一般指空腹8h后采集的标本。清晨空腹血液标本常用于临床生化定量测定，受饮食、体力活动、生理活动等的影响较小，易于发现和观察病理情况，而且重复性较好。(2)随时或急诊标本：指无时间限制或无法规定时间而必须采集的标本，被检者一般无法进行准备。随时或急诊标本主要用于体内代谢比较稳定以及受体内因素干扰少的物质的检查，或者急诊、抢救病人必须做的检查。(3)指定时间标本：即指定采集时间的标本，根据不同的检测要求有不同的指定时间，如24h尿蛋白定量、葡萄糖耐量试验、内分泌腺的兴奋或抑制试验、肾脏清除率试验等。2.3采集方法具体方法见血标本采集作业指导书。3、标本的储存标本采集后应尽快送至实验室，若不能及时送检，已采集的标本要按检验规定的贮存条件，如室温(18-25C)、冷藏(常规2-8C)、冰浴、温浴或防腐贮存，将标本直立置于稳定、干燥、避光、密闭的环境中，避免振摇，以免标本渗漏或溶血影响检测结果。血液标本采集后应及时分离血清或血浆，否则可发生红细胞与血清之间成分的相互转移，或红细胞中的某些酶分解待测物等，从而影响检验结果。4、标本的运送必须保证运送后标本所分析的结果与刚采集标本后分析的结果一致。如未及时送检，可能导致血细胞与血清长时间接触，发生下列变化：(1)由于血细胞的酵解作用，血糖以每小时5%15%的速率降低，即使在真空采血管中在较低温度下每小时也会降低1.9%,糖酵解产物乳酸和丙酮酸升高。(2)由于红细胞膜通透性增加和溶血加重，红细胞内化学成分发生转移和释放，酶活性受影响，血清无机磷、钾、铁、乳酸脱氢酶、天门冬氨酸转移酶、肌酸激酶等升高。(3)由于酯酶作用，胆固醇酯因分解而减少，游离脂肪酸增加。(4)酸性磷酸酶测定血标本室温放置12h测定结果降低50%。(5)电解质测定血标本未及时分离血清和血浆，可导致血钾测定结果偏高。标本采集的基本原则1、申请单填写要点每个检验项目或组合检验项目送一份标本，每一份标本附一张申请单。按照检验项目申请单的要求，采集特定的标本，并将标本送到指定的实验室。因此，检验申请单是实验检查的第一步。(1)病人身份识别信息：申请者必需清楚填写病人的姓名、性别、年龄、或其它有效识别身份的编号；(2)病人的病历信息：申请者必需清楚填写病人所在临床科室名称、病历号、床号、临床诊断、样本类型、样本的采集日期和时间(年、月、日、时、分)、申请者姓名、申请检验日期；(3)申请的检验项目：申请者必需清楚填写检验项目名称，项目名称应规范、准确，特别是申请组套项目时，一定要与组套内容一致，否则需填写具体单项；备注:有关的临床和治疗信息，特别是用药信息是检验师评价结果的必要条件。药物可能在体外影响分析方法或在体内引起病理变化，因此，要特别注意在申请单上提供此类信息。2、关于实验室标本拒收规定有下列情况时可考虑标本拒收：2.1标本属性不清、标记错误或无标记、标本标识与申请单标识不符；2.2抗凝剂比例错误；2.3标本收集管使用错误：(1)血沉(ESR0应使用1:4枸橼酸钠(黑帽)抗凝管，不能使用其他管；(2)凝血功能检测使用1:9枸椽酸钠(蓝帽)抗凝管，不能使用其他管；(3)K+、Na+、Ca2+可用非抗凝血，绝对不能使用EDTA2K、枸椽酸钠、草酸钠抗凝血，推荐使用肝素抗凝血；(4)全血细胞分析、ABO血型测定必须用EDTA(紫帽)抗凝管。2.4微生物室拒收标准：(1)手工申请单无检验项目或检验项目不清楚的标本，项目非本实验室检验的标本；(2)申请单病人姓名和标本上的姓名不一致，可能为病人入院后修改过姓名，但是无法确认标本正确归属的，实验室可以拒收；(3)申请单和标本已经分离，标本容器上又无明确患者标识信息等；(4)空管，标本量过少，未达到规定要求的；(5)收集容器不正确,所有标本微生物培养均应用洁净、无菌、加盖、封闭容器收集送检。(6)检验申请项目与标本类型不符的。如：申请为血培养，实际送检为胸水标本。(7)标本外部有严重的遗洒、渗漏，怀疑标本可能有交叉污染的。(8)经询问确认标本采集部位不正确。(9)经询问，确认标本超过标本允许送达时间的，室温保存不超过2小时，4冷藏保存时间不得超过8小时；但血培养、淋球菌培养标本不能冷藏保存，应保温立即送检并接种(10)经询问确认标本保存、运输方式不正确的。(11)如果原始标本不可替代或很关键，如脑脊液和组织标本等，拒收应慎重。这些标本在拒收前与临床医生进行充分的沟通，以求发现弥补的办法。3、微生物标本采集基本原则(1)发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，三级医院微生物标本送检率不应低于70%。(2)尽量在抗菌药物使用前采集标本。(3)标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。(4)标本采集后应立即送至实验室。床边接种可提高病原菌检出率。(5)以棉拭子采集的标本如咽拭、肛拭或伤口拭子送检后应立即接种。(6)混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤口拭子，不可置肉汤培养基内送检。(7)盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。(8)送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。(9)一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检。(10)厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。(11)其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4环境中，脑脊液等则要在25保存。(12)患者标本中可能含有大量致病菌，不管标本运送距离远近，都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装好，防止送检过程中倒翻或碰破流出。标本采集要求和方法1、血液检验标本采集方法按照血标本采集部位的不同，分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。1.1静脉血采集方法、注意事项(1)止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压迫静脉时间不宜过长,以不超过40秒为宜，否则容易引起淤血、静脉扩张，并且影响某些指标的检查结果,如乳酸升高、pH值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。(2)采血时间与部位：大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血,输液不仅使血液稀释，而且对实验室检查结果发生严重干扰，特别是血糖和电解质。(3)避免溶血、杂质污染：采血器具必须无菌、干燥、洁净，避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为红细胞的某些成分与血清(浆)不同，样本溶血可使红细胞某些成分释放,影响实验室检查结果。(4)血样的采集：血样要求在每一天的同一时间采集，理想的时间是早晨7:00到8:00,尤其是以监测为目的时，更要保证标本采集时间的统一。最后一次食物和液体摄入应在前一天下午6:00到7:00(急诊检验例外)。(5)标本采集后须立即送检，放置过久影响检验结果。当取血不顺利时,切忌在同一处反复穿刺，易导致标本溶血或有小凝块，影响检测结果。(6)采集血培养标本时应先注射厌氧瓶，尽量减少接触空气时间。(7)微量元素测定采集标本的注射器和容器不能含游离金属1.2临床化学/免疫检验标本临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本,最好使用真空负压采血管。标本采集主要注意事项：(1)化学项目大多数需要空腹采静脉血，多个单项化学检测项目组合检验时一般可采一管血；(2)采血量视检查项目多少不同而异，通常为4.05.0ml;(3)多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血：血培养无添加剂管凝血管有添加剂管有添加剂管的顺序为：橼酸盐管肝素管EDTA管草酸盐/氟化钠管不论是抗凝血还是非抗凝血，为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间，血液标本收集后，须尽可能早地送检。1.3红细胞沉降率(血沉，ESR)检测标本静脉采集枸橼酸钠(109mmol/L,即32.06g/L)抗凝血(枸橼酸钠1:4抗凝管采血),黑帽管。采血注意事项：(1)单独采1管血，准备采血至2ml刻度线(抗凝剂：全血=1:4);(2)采血后立即上下颠倒混合510次；(3)采血后应尽快送检(必须2h内检测)1.4血常规(全血细胞分析)检验标本一般用EDTA2K1.52.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。采血注意事项：(1)采血后立即上下颠倒混匀，510次，不可用力震荡；(2)应按抗凝管刻度采血至2ml,可不用空腹；(3)采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过2小时WBC形态会发生改变);(4)血型与血常规可采1管血。1.575克葡萄糖耐量试验(OGTT)/胰岛素释放试验/C-肽释放试验1.5.1病人准备：试验前3日，每日进食碳水化合物量不低于250-300克，且维持正常活动，影响试验的药物(如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3日前停用，试验前病人应1016小时不进食。1.5.2标本采集：临床上常用方法是清晨抽空腹血后，口服75克葡萄糖，再于给糖后0.5、1、2小时各采血2ml/1次(共4次)。1.5.3标本保存：采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血，于28保存。1.6高血压系列检验标本1.6.1高血压四项,属外送项目(金域检验)(1)病人准备：-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平，一般要在停药后2周测定肾素活性(PRA),利血平等代谢慢的药物应在停药3周测定。不宜停药的病人改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体PRA水平，故病人测定PRA前3天应适当减少食盐摄入量，最好同时测定取血前24小时尿钠含量，以供分析PRA结果时参考；(2)标本采集：静脉取血45ml,拔除针头后缓慢注入到专用抗凝管中,盖好管塞后上下颠倒5次,混匀后2500转/分,离心510分钟,分离血浆,将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检,需尽快冰冻保存(-15)。溶血标本不能检测；(3)标本类型、标本量：专用抗凝管采血(EDTA2K抗凝管),分离血浆,取2ml送检；(4)注意事项：申请单上应注明抽血时的体位(卧位：病人在早上6-8时起床前，取静脉血；立位：病人起床后活动3小时，取静脉血。)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。1.6.2醛固酮(1)病人准备：留样前应停服利尿剂至少3周，停服抗高血压药物1周；(2)标本采集：血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝，采集后立即分离血浆，置-20保存待测；尿液标本则留取24小时尿量，用1015mL浓盐酸防腐；(3)申请单上注明：抽血时的体位(卧位、立位)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);尿液标本要准确记录24小时尿量。1.7皮质醇标本采集及注意事项正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律，一般为早上8点、下午4点和晚上12点采血，送检时请务必在申请单上注明采血时间。1.8微量元素检测标本采集要求1.8.1采血时不能戴乳胶手套(对锌有污染),可使用“PE”(塑料)手套(或不戴手套把手洗干净)。1.8.2必须使用检测仪器厂家提供的专用管，使用专用管前，请检查管中是否有蛋白沉淀剂。1.8.3采集方法：采集手指末梢血，擦去第一滴血后用定量专用吸管准确吸起20ul血液注入专用管中送检。(一般持检查单到检验科采血)1.8.4如不能及时送检，应放置室温保存。1.8.5溶血对结果影响较大，应尽量避免。若血浆为溶血标本，视为不合格标本。1.9基因检测标本采集要求：1.9.1所有用于基因诊断的标本必须用无菌试管或容器留取,严禁使用肝素抗凝管，采集标本时注意无菌操作。1.9.2为避免污染,送检基因诊断标本项目需单人单项目单管。1.9.3采集方法：(1)血液标本抽取病人静脉血，置无菌试管中室温自然凝固或2000转/分离心，取分离出的血清置28保存，不超过24小时，血清标本不宜反复冻融；(2)女性分泌物标本分泌物标本采样应在非月经期进行；采样前3天内不使用阴道内药物，不冲洗阴道；24小时内不应有性行为；采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去，更换棉拭子，将棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处，旋转35周，以保证取得较多的柱状上皮标本，对于怀疑HPV感染的患者，尽量采集病变部位标本，可提高HPV的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的采集管中，旋紧管盖；男性分泌物标本：先清洁尿道口，将棉拭子伸入男性尿道1cm,旋转35次获得标本，将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖；疱疹液或疣体标本：对于生殖器或肛周有疣状体增生，怀疑为尖锐湿疣者，采集疣体表面脱落细胞。用生理盐水润湿棉拭子，用力来回擦拭疣状组织表面三次，取得脱落细胞。将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖。1.10骨髓检查的要求和注意事项1.10.1涂片要求：二张血片，六张骨髓片，怀疑白血病则需八张骨髓片。骨髓血片注明“B”,骨髓片注明“M”,以示区别。1.10.2申请单注意事项：(1)病例摘要:应填写全面，尤其是肝、脾、淋巴结、出血状况等与血液病相关的症状以及药物的应用等均应填写清楚；(2)化验结果：血常规结果一定不能缺，如果可能，MCV、MCH、MCHC及分类也一并填上；(3)采取骨髓部位也应填上，如果采取骨髓时不顺，应重抽，以免耽误病人；(4)写上主治医生联系方式，如科室电话、手机号码等(以便与临床密切联系)。2、尿液常规检验标本采集2.1尿标本种类按检查目的，常可采用下列标本：*晨尿：最好，安静状态下留取清晨第一次尿，该标本为浓缩尿.其细胞和管型等形态完整，适合做各种有形成分的检查和尿蛋白、尿糖等项目的测定。*随机尿：较常用，适用于门诊和急诊病人常规检验.结果易受多种因素影响。*24h尿：用于尿液成分定量检查分析。(1)24h尿采集方法：留尿当日早晨7时排空尿液，之后每次排尿均收集于一大容器内.至次日早晨7时最后一次尿液共24小时之间的所有尿液全部收集于洁净容器内。在收集期内第一次尿收集后加入防腐剂甲苯混匀，放阴凉处保存，全部收集完毕测量并记录24h总尿量，混匀后取50毫升置于有盖容器内送检即可。(2)24h尿可用于检测CRE、BUN、K、Na、CL、Ca、P、UA、GLU等特殊实验尿(如3h、8h、12h等计时尿和餐后尿等),则应按医嘱要求进行留尿，并注明用药时间，便于分析比对。*清洁尿(中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿):用于病原微生物学培养、鉴定和药敏。2.2尿液标本收集容器要求(1)清洁、干燥、有盖、便于标记和转送、一次性使用，有较大开口便于收集；(2)避免阴道分泌物、精液、粪便等污染，还应注意避免烟灰、纸屑等异物混入；(3)无干扰化学物质(如表面活性剂、消毒剂)混入，不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿收集标本；(4)能收集足够尿液，最好大于50ml,如收集定时尿，容器应足够大,并加盖，必要时加防腐剂；(5)如需培养应在无菌条件下，用无菌容器收集中段尿液。2.3尿液采集方法尿液常规检查标本应按以下原则进行采集：(1)尿液检验最好留取新鲜标本及时检查，否则尿液生长细菌，使其中的化学成分发生变化。新鲜晨尿最佳,以清晨第一次尿为宜，较浓缩，条件恒定，便于对比。门、急诊患者亦可随机留取。在留取24h或12h尿液时，根据检测目的加入防腐剂。(2)尿标本的采集方法多采用自然排尿法，需要注意避免阴道分泌物、精液、粪便等污染；对自然排尿困难或需细菌培养者，可在无菌操作下用导尿法或膀胱穿刺法采集。(3)尿中某些化学物质及有形成分不稳定，一经排出后易发生物理、化学变化；而尿中原有或污染的细菌生长也可导致成分改变，如葡萄糖被分解。因此，采集的尿应加盖后尽快送检，在采集后2h内完成有关检查。(4)如不能及时送检或收集较长时段尿样,可采取化学防腐(不能用于微生物检查)、冷藏等保存措施；尿液标本冰箱可保存68h但细胞等有型成分会有破坏，会有结晶析出。(5)根据不同检测目的选择不同的防腐剂：临床最多用的尿液防腐剂为：1.甲醛(formalin),用于尿液有形成分检查，浓度为400mg/L尿液，即40%;2.甲苯(toluene),常用于尿糖和尿蛋白等化学成分的定性或定量检查，520m1/L尿液；3.浓盐酸(hydrochloricacid),用于定量测定尿醛固酮、儿茶酚胺等，浓度为1m1/L尿液。(6)沉渣检查：清晨空腹第一次尿,应在1h内送检。标本置于干燥、洁净的容器尿杯中，至少10ml。一般情况下，由患者自己采集中段尿。女性患者应清洗外阴部后留取。(7)特殊试验外，晨尿或随机尿要留取中段尿送检，女性在经期不宜做尿液检查。3、粪便常规检验标本采集粪便常规检查标本采集方法及注意事项：(1)采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别，一般检验留取新鲜的自然排出的粪便35g,必要时可肛拭子采取，放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内，贴好标识送检。标本容器最好用内层涂蜡的硬纸盒，便于检查后焚毁。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内，勿混入消毒剂及其它化学药品。(2)盛粪便标本的容器必须有盖，有明显标记。要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查，表面无异常时应从粪便表面、深处及粪端多处取材；采取标本后及时送检，否则可因PH及消化酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解。(3)不应留取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液，可导致某些项目检测结果出现错误。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等异物，易混淆实验结果。不应该从卫生纸或衣裤、纸尿裤等物品上留取标本，不能用棉签有棉絮端挑取标本。(4)做大便隐血试验时，应嘱患者于检查前3d内禁食肉类、含动物血的食物、某些蔬菜，禁服铁剂和维生素C等对实验有干扰作用的药物。选取外表及内层粪便收集于合格容器内及时送检，长时间放置可使反应的敏感度降低。(5)细菌检验用标本应全部用无菌操作收4、浆膜腔积液检验标本采集4.1浆膜腔积液检查标本(1)浆膜腔积液标本一般由临床医生行无菌穿刺术采集标本。(2)送检标本量：理学检查、化学检查、细胞学检查各留取2mI;细菌学检查用无菌管采集标本，厌氧茵培养留取1mI,结核菌检查留取10ml。(3)标本采集后必须立即送检(否则可出现细胞变性，标本凝集，细菌溶解)。(4)用于细胞学检查时,可在标本中加适量EDTA盐抗，但还需留取1管不加抗凝剂的标本用于观察积液的凝固性；化学检查标本宜用肝素抗凝。4.2脑脊液标本采集(1)由临床医师行腰椎穿刺术采集标本。(2)采集后的脑脊液分别收集于3个无菌试管中，每管12ml,第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查(脑脊液常规)。(3)标本必须立即送检，放置过久影响结果，如细胞破坏、变性或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，使细胞计数降低，分类不准确等；存放的脑脊液葡萄糖会分解，使检测结果降低。4.3胸、腹水标本采集(1)由临床医师行无菌穿刺术，最好留取中段液体于消毒容器内，立即送检。(2)为防止出现凝块、细胞变性、细菌破坏自溶等，标本中应加入抗凝剂。常规及细胞学检查宜用EDTA-2K抗凝，生化检查标本宜用肝素抗凝。4.4关节腔穿刺液标本采集后第1管作微生物及一般性状检查，第2管用肝素抗凝作细胞学及化学检查。4.5前列腺和精液检查前列腺液标本应由临床医师进行前列腺按摩术采集，可直接滴在玻片上；若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液。疑为前列腺结核、脓肿或肿瘤的患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失败或检查结果阴性，而明确有临床指征者，可隔35天后重新复查。精液采集最好在实验室附近，室温应控制在2035,采集标本前禁欲37天.采集精液前排净尿液。可用手淫法或其它方法，将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内。因精子生成日间变动较大，不能仅凭一次检查结果做诊断。一般应间隔12周检查一次，连续检查23次。4.6细菌培养之脑脊液、胸腹水穿刺液、关节腔穿刺液标本采集(1)应在用药前采集,由临床医生以无菌条件下进行腰椎穿刺采集脑脊液35ml,因脑膜炎球菌易自溶，流感嗜血杆菌也易死亡,故盛于无菌试管或小瓶中保温立即送检。或将脑脊液5ml直接注射于血培养儿童瓶中送检即可。(2)穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液。一般由临床医生穿刺抽取。标本的采集应在患者用药之前，或停药12天后进行。胸水、腹水可抽取510ml,心包液、关节可抽取25ml,将所得穿刺液分别盛于含有和不含有抗凝剂的无菌试管或小瓶中，充分混匀后，立即送检。5、微生物检验标本采集微生物学检验标本的正确采集、运送及处理，与细菌的培养、鉴定结果有十分密切的关系；对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS、炭疽、肺鼠疫等)患者采集标本时,必须按国家规范化要求严格注意生物安全；医生、护士、检验人员均应重视微生物学检验标本正确采集的有关问题，并有责任向患者及其家属进行正确采集标本的宣传和指导。5.1微生物学检验标本采集、运送、验收和处理注意事项5.1.1标本采集(1)申请单标记必须清楚(姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等),以便实验室能够合理选择培养环境和培养基；(2)尽量在抗生素应用前采集标本，以提高阳性检出率和避免漏检；(3)标本采集应严格执行无菌操作；(4)咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本，应插入运送培养基送检；(5)痰、尿液、伤口拭子等混有正常菌群的标本，不可放入肉汤培养基内送检；(6)采集标本的容器必须经灭菌处理，但不可用消毒剂。5.1.2标本运送(1)标本采集后应尽快送到微生物实验室；(2)标本采集后在室温下超过2h未送达实验室，可视为不合格标本。5.1.3注意事项(1)微生物检验样本必须按要求采集转运，否则将影响检查结果.并给评价其意义带来麻烦甚至误导。(2)微生物样本极易被污染，污染的样本杂菌大量繁殖抑制病原菌生长，条件致病菌也是致病菌，如污染条件致病菌将误导临床，造成对患者的损害以及经济和时间的浪费。(3)某些标本离体极易死亡，应在床边采取和接种或立即保温送至实验室检验。室温放置或延迟送检，可使检出的阳性率降低；不能使用冷藏的样本检验。(4)厌氧菌样本采取必须隔绝空气，混入空气的样本影响检验结果，不能使用。5.2.2粪便标本采集和处理(1)采集时间：腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便；伤寒患者于发病2w以后采集粪便；怀疑霍乱时立即采集粪便送检。(2)采集方法：自然排便法：取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分，23g或12ml,盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检；若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法，将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约45cm(幼儿23cm),轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。5.2.3痰及下呼吸道标本采集和处理(1)自然咳痰法：晨痰为佳；先冷开水洗漱、清洁口腔和牙齿；再用力咳出呼吸道深部的痰，吐至无菌容器中；痰量不得少于1ml;痰咳出困难时可先雾化吸入NaCI溶液(100g/L,加温到45)使痰容易咳出。查结核分枝杆菌，应留取24小时痰。(2)小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。(3)支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法，此采集方法必须由医生操作。气管导管法：气管插管吸取下呼吸道痰液。气管镜采集法：用气管镜在肺内病灶附近用导管吸取或活用支气管刷直接取得。(4)呼吸道标本采集方法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光坐，头向上仰，口张大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人咽后壁，悬雍垂后侧涂抹数次，立即放入无菌试管中。注意事项：痰经过口腔，所以患者应用清水漱口数次，尽量排除口腔内大量杂菌。5.2.4血液及骨髓培养标本(1)血培养标本采集指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征可作为血培养的重要指征：发热(38)或低热(36)寒热白细胞增多(10109/L,特别是在有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多时)粒细胞减少(成熟的多核白细胞1109/L)血小板减少皮肤粘膜出血昏迷多器官衰竭(2)最常用的方法为血液增菌培养法。培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。每瓶需要810ml。儿童瓶为需氧瓶每瓶需血液13ml,另外，脑脊液和胸腹水也可用血液增菌培养瓶，但仅需要儿童瓶，标本量与血液相同。抗生素治疗前，严格无菌静脉采血810ml(儿童l4ml);无菌注入专用培养瓶(成人、儿童、需氧菌、厌氧茵、L型茵需要不同培养瓶)中送检；如已用抗生素不能停用时，可于48h内分别于下次用抗生素之前，采取3份6瓶血液标本送检；必要时可需氧菌、厌氧茵(占10%)和L型菌同时培养；疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同时间，多次采血或动脉采血进行培养；必要时可取骨髓l2ml,无菌注入专用培养瓶中送检。注意事项：血液在正常情况下为无菌标本，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。一般病人在发病初期12天或发热高峰时采集血液标本，用一次性注射在肘静脉采血，采血前局部皮肤应彻底消毒。对亚急性细菌性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动脉采血为宜。5.2.5脓汁和病灶分泌物培养标本采集前局部消毒后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。标本采集后立即置无菌管内送检。5.2.6泌尿生殖道培养标本(1)尿道分泌物：清洗尿道、采取尿道、溢出的脓性等分泌物,或用无菌拭子插入尿道2-4cm处轻轻转动后取出,置无菌试管中送检。(2)阴道、宫颈分泌物、通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管1-2cm处分泌物,置无菌试管中送检。避免阴道分泌物污染拭子。(3)宫腔分泌物：在必要时用外套保护膜的灭菌导管抽取。(4)前列腺液：清洗尿道、冲洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液于无菌容器内送检。(5)精液:受检者应5天未排精,清洗尿道后手淫或体外排精法,射精于无菌容器内送检。(6)溃疡分泌物：灭菌生理盐水溶液清洗患处,用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物,置无菌试管中送检。5.2.7厌氧菌感染培养标本(1)标本采集：标本不能被正常菌群污染,采集时尽量避免接触空气,立即送检,严格遵守无菌操作。血液及其他体液(胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液等)注入厌氧血培养,立即送检。深部脓肿,在病灶部位开放前取材,可用针管抽取,针头用无菌胶塞密封,也可用血气采集针抽取,立即送检。抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。2)标本运送：标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送实验室。运送方法:a.注射器运送(标本抽取后尽快排除空气)或接种专门的运送培养基中直接运送；b.含运送培养基的无氧小瓶运送；c.厌氧罐运送(组织块);d.大量液体标本运送时要装满标本瓶并立即驱氧,加盖运送；e.一般不采用棉拭子法。(3)建议使用微生物检验组合微生物检验结果回报时间:细菌学涂片:快速回报标本中可能的病原微生物；普通细菌培养：(3天)厌氧培养：(7天)真菌培养：(5天)微生物分子生物学检测：5.2.8真菌感染培养标本(1)浅部真菌感染标本采集皮肤：常规消毒皮肤，从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑，置无菌平皿内送检，皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织；指(趾)指甲消毒指(趾)指甲并去掉其表面部分，取可疑病变部分，用刀片修成小薄片56片置无菌容器内送检；毛发：采集根部断折处，至少56根送检。(2)深部真菌感染标本采集血液:无菌采血810ml,注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中，立刻送检，如不能立刻送检时血培养瓶应放室温，但不可超过4h;脑脊液采样量不少于35ml,分别注入两支无菌试管中送检(一管做真菌培养和墨汁染色、一管测隐球菌抗原和其他培养);呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染标本采集同一般细菌培养标本。认真学习，相互沟通，搭建检验与临床和谐、促进、互惠、相互理解的桥梁！!谢谢