中药材检验8.ppt
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1、薄层层析可分为吸附薄层层析和分配薄层层析,我们常用的是吸附薄层层析。吸附薄层层析的原理即不同物质在吸附剂和溶剂之间发生连续不断的吸附、解吸附、再吸附、再解吸附。易被吸附的物质相对移动得慢,难被吸附的物质相对移动的快,经过一段时间的展开,不同物质就彼此分开,从而形成相互分离的斑点。1 1 薄层色谱的规范化操作薄层色谱的规范化操作1.1薄层板的制备市售薄层板:临用时要活化,即110加热30分钟。自制薄层板:除另有规定外,取1份吸附剂和3份水(或相应的溶剂),向一个方向研磨,研至有些挂壁,除去表面气泡后,倒入涂布器中,移动速度要均匀,板的厚度0.2-0.3mm,在平台上晾干,110加热30分钟进行活
2、化。1.2点样点样时不要刺破板面。点样后将板放入干燥器中,待溶剂完全挥干后再进行展开。高效板 普通板距底边距离 8-10mm 10-15mm 圆点直径 2mm 3mm条带宽度 4-8mm 5-10mm点间距 5mm 8mm2 2 影响薄层色谱的主要因素影响薄层色谱的主要因素 薄层色谱是一种敞开系统的色谱技术,除材料和器材外,外界环境条件对被分离物质的层析行为影响较大,其次由于分析的全过程是横向的离线多步操作,所以操作技巧也明显影响色谱质量,因而薄层色谱是一种较难驾驭的技术。为提高薄层色谱分离水平,需注意以下几个影响因素.2.1供试品溶液的影响供试品溶液纯度影响:如果供试品提取过程中带来杂质太多
3、,那么薄层色谱斑点很难辨认(如图)。制备样品所用的溶剂一般要求溶解度不宜太大,粘度不宜太高,沸点适中。供试品溶液浓度的影响:供试品溶液浓度过浓,易产生拖尾或形成一条甚至展不上去。解决办法是将供试品稀释。供试品溶液纯度影响供试品溶液浓度影响2.2薄层板质量的影响薄层板质量对色谱质量有很大影响,如使用不合格的预制板或手铺不均匀的自制板,得到的谱图很难辨认(如图)。因此,薄层板的制备一定要均匀。2.3上样技术的影响薄层色谱的点样量无论是供试品还是对照品均不宜过大,点样量过大斑点分离不清(如图)。2.4吸附剂的活性与相对湿度的影响吸附剂的活性是由表面能与表面积决定的。表面积越大,吸附力越大,活性越高。
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