微生物--遗传与变异2.ppt

一、基因突变一、基因突变（gene mutation）一个基因内部遗传结构或一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变序列的任何改变 简称简称突变突变，是变异的一种，泛指细胞内（或病毒，是变异的一种，泛指细胞内（或病毒粒内）遗传物质的粒内）遗传物质的分子结构分子结构或或数量数量突然发生的可遗传突然发生的可遗传的变化，可自发或诱导产生。的变化，可自发或诱导产生。突变几率一般很低突变几率一般很低（1010-6-61010-9-9）表型表型基因型基因型这里主要介绍几种常用的由于基因突变而造成微生物这里主要介绍几种常用的由于基因突变而造成微生物表型变化的突变型及其分离表型变化的突变型及其分离（一）突变类型（一）突变类型突变株的表型突变株的表型非选择性突变株非选择性突变株选择性突变株选择性突变株抗性突变型（株）抗性突变型（株）营养缺陷型（株）营养缺陷型（株）条件致死突变型（株）条件致死突变型（株）形态突变型（株）形态突变型（株）抗原突变型（株）抗原突变型（株）产量突变型（株）产量突变型（株）（三）基因突变的特点（三）基因突变的特点1 1、自发性、自发性 各种性状的突变，可在无人各种性状的突变，可在无人为的诱变因素处理下自发地产生。为的诱变因素处理下自发地产生。2 2、不对应性、不对应性 突变的性状与引起突变的原突变的性状与引起突变的原因间无直接的对应关系。因间无直接的对应关系。这是突变的一个重要特点，也是容易引起争论这是突变的一个重要特点，也是容易引起争论的问题。的问题。变量试验变量试验涂布试验涂布试验影印平板培养法影印平板培养法3 3、稀有性、稀有性 自自发发突突变变虽虽可可随随时时发发生生，但但其其突突变变率率却却是是极极低和稳定的，一般在低和稳定的，一般在1010-6-61010-9-9间。间。4 4、独立性、独立性 某某一一基基因因的的突突变变率率不不受受它它种种基基因因突突变变率率的的影影响响。如如：在在某某一一群群体体中中，既既可可发发生生抗抗青青霉霉素素又又可可发生抗链霉素的突变型。发生抗链霉素的突变型。5 5、可诱变性、可诱变性 自自发发突突变变的的频频率率可可因因诱诱变变剂剂的的影影响响而而大大为为提提高（高（101010105 5倍）。倍）。6 6、稳定性、稳定性 突变产生的新遗传性状是稳定和可遗传的。突变产生的新遗传性状是稳定和可遗传的。7 7、可逆性、可逆性 野野生生型型菌菌株株某某一一性性状状可可发发生生正正向向突突变变，也也可发生相反的回复突变（也称回变）。可发生相反的回复突变（也称回变）。（四）基因突变自发性和不对应性的实验证明（四）基因突变自发性和不对应性的实验证明三个经典实验：三个经典实验：变量试验变量试验涂布试验涂布试验影印平板培养法影印平板培养法证明证明突变的性状突变的性状与引起突变的与引起突变的原因原因间间无直接对应无直接对应关系关系！变量实验（fluctuation analysis）Salvador Luria and Max Delbruck（1943）Salvador LuriaMax DelbruckThe Nobel Prize in Physiology or Medicine 1969影印实验（replica plating）Joshua Lederberg and Esther Lederberg（1952）Joshua LederbergJ.Lederberg is awarded the Noble Prize in Medicine and Physiology in 1958仅影响一对碱基仅影响一对碱基影响一段染色体影响一段染色体（五）基因突变及其机制（五）基因突变及其机制1 1 自发突变自发突变（spontaneous mutation）自发突变自发突变（spontaneous mutation）是指生物体是指生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变。在无人工干预下自然发生的低频率突变。自发突变的原因自发突变的原因（1 1）背景辐射和环境因素）背景辐射和环境因素（3 3）DNADNA复制过程中碱基配对错误复制过程中碱基配对错误（2 2）微生物自身有害代谢产物）微生物自身有害代谢产物一个一个10001000bpbp的基因自发突变频率约为的基因自发突变频率约为1010-6-6例如，过氧化氢等例如，过氧化氢等例如，天然的宇宙射线等例如，天然的宇宙射线等（4 4）由转座因子引起的插入或缺失的诱导）由转座因子引起的插入或缺失的诱导诱发突变诱发突变简称简称诱变诱变，是指通过人为的方法，是指通过人为的方法，利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。频率的手段。2.2.诱发突变诱发突变（induced mutation）凡具有诱变效应的任何因素，都称凡具有诱变效应的任何因素，都称诱变剂诱变剂（mutagen）。(1)(1)碱基的置换碱基的置换（substitution）碱基的置换只涉及一对碱基被另一对碱基所置换，碱基的置换只涉及一对碱基被另一对碱基所置换，属于典型的属于典型的点突变点突变（pointmutation）。染色体的染色体的微小损伤微小损伤（microlesion）碱基的置换碱基的置换转换转换（transition）颠换颠换（transversion）一个嘌呤一个嘌呤另一个嘌呤另一个嘌呤一个嘧啶一个嘧啶另一个嘧啶另一个嘧啶一个嘌呤一个嘌呤另一个嘌呤另一个嘌呤一个嘧啶一个嘧啶另一个嘧啶另一个嘧啶置换的机制置换的机制 直接引起置换的诱变剂直接引起置换的诱变剂一类可一类可直接直接与核酸的碱基发生化学反应的化学与核酸的碱基发生化学反应的化学诱变剂，在体内（诱变剂，在体内（in vivo）或离体（或离体（in vitro）条件条件下均有作用。下均有作用。间接引起置换的诱变剂间接引起置换的诱变剂引起这类变异的诱变剂都是一些引起这类变异的诱变剂都是一些碱基类似物碱基类似物（base analog）。5-5-溴尿嘧啶（溴尿嘧啶（5-5-BUBU）、）、5-5-氨基尿嘧啶（氨基尿嘧啶（5-5-AUAU）、）、8-8-氮鸟嘌呤（氮鸟嘌呤（8-8-NGNG）、）、2-2-氨基嘌呤（氨基嘌呤（2-2-APAP）6-6-氯嘌呤（氯嘌呤（6-6-CPCP）等。等。它们的作用是通过活细胞的代谢活动掺入到它们的作用是通过活细胞的代谢活动掺入到DNADNA分子中分子中后而引起的，故是间接的。后而引起的，故是间接的。(2)(2)移码突变移码突变（frame-shift mutation，phase-shift mutation）指诱变剂使指诱变剂使DNADNA序列中的一个或少数几个核苷酸序列中的一个或少数几个核苷酸发生发生增添增添（插入插入）或）或缺失缺失，从而使其后面的全部，从而使其后面的全部遗传密码发生遗传密码发生阅读框阅读框发生改变，并进一步引起转录发生改变，并进一步引起转录和转译错误的一类突变。和转译错误的一类突变。由移码突变所产生的突变株，称为由移码突变所产生的突变株，称为移码移码突变株突变株（frame-shift mutant）。DNADNA分子的分子的微小损伤微小损伤点突变点突变(3)(3)染色体畸变染色体畸变（chromosomal aberration）电离辐射电离辐射（X X射线等射线等）烷化剂烷化剂亚硝酸等亚硝酸等某些强烈理化因子某些强烈理化因子引引起起点突变点突变DNADNA的大损伤的大损伤（macrolesion）DNADNA的大损伤的大损伤（macrolesion）染色体畸变染色体畸变缺失缺失（deletion）重复重复（duplication）插入插入（insertion）易位易位（translocation）倒位倒位（inversion）染色体结构上染色体结构上染色体数目的变化染色体数目的变化DNADNA序列通过序列通过非同源重组非同源重组的方式，的方式，从染色体某一部位转移到从染色体某一部位转移到同一染色体上另一部位同一染色体上另一部位或或其他染色体上某一部位其他染色体上某一部位的现象，的现象，称为称为转座转座（transposition）。转座（转座（transpositiontransposition）凡具有转座作用的一段凡具有转座作用的一段DNADNA序列，称序列，称转座因子转座因子（transposible element，TE），），又称又称跳跃基因跳跃基因（jumping gene）、可移动基因可移动基因（moveable gene）、）、可移动遗传因子可移动遗传因子（mobile genetic element）。）。转转座座因因子子插入序列插入序列（insertion sequence，IS）转座子转座子（transposon，Tn）MuMu噬菌体噬菌体（mutator phage）转座噬菌体转座噬菌体（transposable phage）进化研究进化研究抗药性产生机制抗药性产生机制各种研究用的突变株的获得各种研究用的突变株的获得转座作用的频率为转座作用的频率为1010-5-51010-7-7“自发基因工程自发基因工程”、“内源性基因工程内源性基因工程”转座因子的特点转座因子的特点 在转座时，通过转座因子的复制，可将新形成的拷贝在转座时，通过转座因子的复制，可将新形成的拷贝以非同源重组的方式转移到染色体的新部位上；以非同源重组的方式转移到染色体的新部位上；在转座因子两端各有一段一定长度的末端重复序列，在转座因子两端各有一段一定长度的末端重复序列，包括包括正向重复正向重复（direct repeat）和和反向重复反向重复（inverted repeat，或或颠倒重复颠倒重复）；每个转座因子还带有一个对转座有特异功能的每个转座因子还带有一个对转座有特异功能的转座酶转座酶基因基因（transposase gene）。（六（六）紫外线对紫外线对DNADNA的损伤及其修复的损伤及其修复嘧啶（敏感性）嘌呤嘧啶（敏感性）嘌呤紫外线紫外线（ultraviolet ray，U.V.U.V.）嘧啶二聚体嘧啶二聚体（TTTT，TCTC，CCCC）和水合物和水合物 把经把经UVUV照射后的微生物照射后的微生物立即立即暴露于暴露于可见光可见光下时，下时，可明显降低其死亡率的现象，称为可明显降低其死亡率的现象，称为光复活作用光复活作用。1.1.光复活作用光复活作用（photoreactivation，photorestoration）最早是最早是A.Kelner（19491949）在在Streptomyces griseus（灰色链霉菌）中发现的。后来，在许多微生灰色链霉菌）中发现的。后来，在许多微生物中都得到了证实。物中都得到了证实。2.2.切除修复切除修复（excision repair）是活细胞内一种用于修复被是活细胞内一种用于修复被UVUV等诱变剂（包括等诱变剂（包括烷化剂、烷化剂、X X射线和射线和射线等）损伤后射线等）损伤后DNADNA的修复方式的修复方式之一之一，又称又称暗修复暗修复（dark repair），通过通过酶切作酶切作用用去除嘧啶二聚体，随后重新合成一段正常去除嘧啶二聚体，随后重新合成一段正常DNADNA链链的核酸修复方式。的核酸修复方式。二、突变与育种二、突变与育种 （一（一）自发突变与育种自发突变与育种 （breeding by spontaneous mutation）1.1.从生产中育种从生产中育种在生产第一线易获得较优良的生产菌株。在生产第一线易获得较优良的生产菌株。2.2.定向培育优良菌株定向培育优良菌株 定向培育定向培育是一种利用微生物自发突变，并采用是一种利用微生物自发突变，并采用特定的选择条件，通过对微生物群体不断移植以选育特定的选择条件，通过对微生物群体不断移植以选育出较优良菌株的古老方法。出较优良菌株的古老方法。卡介苗（牛型结核分枝杆菌）卡介苗（牛型结核分枝杆菌）的培育，花了的培育，花了1313年年（二（二）诱变育种诱变育种（breeding by induced mutation）诱变育种诱变育种是指利用物理、化学等诱变剂处理均是指利用物理、化学等诱变剂处理均匀而分散的微生物细胞群，在促进其突变率显著提匀而分散的微生物细胞群，在促进其突变率显著提高的基础上，采用简便、快速和高效的高的基础上，采用简便、快速和高效的筛选方法筛选方法，从中挑选出从中挑选出少数符合育种目的的突变株少数符合育种目的的突变株，以供科学，以供科学实验或生产实践使用。实验或生产实践使用。筛选筛选诱变诱变诱诱变变育育种种定向的定向的更重要更重要随机的随机的可获得供工业和实验室应用的各种菌株；可获得供工业和实验室应用的各种菌株；提高有用代谢产物的产量；提高有用代谢产物的产量；减少杂质、提高产品质量、扩大品种和简化工艺等。减少杂质、提高产品质量、扩大品种和简化工艺等。诱变育种具有重大的实践意义诱变育种具有重大的实践意义诱变育种的特点诱变育种的特点（1 1）提高突变率，扩大突变谱）提高突变率，扩大突变谱 （2 2）有效地改良个别、单一性状）有效地改良个别、单一性状 （3 3）缩短育种年限）缩短育种年限 （4 4）定向变异和有益突变的频率低）定向变异和有益突变的频率低 诱变育种的工作程序诱变育种的工作程序1 1 活化菌种活化菌种2 2 前培养前培养 对数期对数期3 3 菌悬液制备菌悬液制备 1*101*108 8个个/ml/ml4 4 紫外照射紫外照射 暗室中操作暗室中操作5 5 后培养后培养 （防止诱变后延迟现象）（防止诱变后延迟现象）6 6 稀释涂布稀释涂布诱变育种的基本原则：诱变育种的基本原则：（1 1）选择简便有效的诱变剂）选择简便有效的诱变剂（2 2）挑选优良的出发菌株挑选优良的出发菌株（3 3）处理单细胞或单孢子悬液）处理单细胞或单孢子悬液（4 4）选用最适的诱变剂量选用最适的诱变剂量（5 5）充分利用复合处理的协同效应）充分利用复合处理的协同效应（6 6）利用和创造形态、生理与产量间的相关指标）利用和创造形态、生理与产量间的相关指标（7 7）设计高效筛选方案）设计高效筛选方案（8 8）创造新型筛选方法）创造新型筛选方法诱变育种应注意的几个问题诱变育种应注意的几个问题1.诱变剂的选择诱变剂的选择（高效，简便）（高效，简便）物理诱变剂：物理诱变剂：频度低、大损伤，难修复，且操作简便；频度低、大损伤，难修复，且操作简便；化学诱变剂：化学诱变剂：频度高，点突变，易回复突变，操作麻烦。频度高，点突变，易回复突变，操作麻烦。(NTG（亚硝基胍）（亚硝基胍）超诱变剂）超诱变剂）UV是最常用的一种诱变剂是最常用的一种诱变剂2.诱变因素剂量的选择诱变因素剂量的选择 突变率突变率随剂量的增加而提高，但到达一定程度后，再提随剂量的增加而提高，但到达一定程度后，再提高剂量高剂量,反而会使突变率下降。反而会使突变率下降。正变正变较多出现在较多出现在偏低剂量偏低剂量中，而中，而负变负变较多出现在较多出现在偏高剂偏高剂量量中。中。UV的剂量的剂量:固定固定UV功率和照射距离功率和照射距离,以照射时间长短来以照射时间长短来确定剂量多少。确定剂量多少。（致死率：（致死率：70-80%）最适剂量：最适剂量：在提高突变率的基础上，既能扩大变异幅度，在提高突变率的基础上，既能扩大变异幅度，又能使变异向正突变范围移动的剂量。又能使变异向正突变范围移动的剂量。3.3.出发菌株的选择出发菌株的选择出发菌株：出发菌株：指用于诱变育种的起始菌株指用于诱变育种的起始菌株出发菌株的选择标准：出发菌株的选择标准：具有有利性状具有有利性状（如高产、生长速度快、营养要求粗（如高产、生长速度快、营养要求粗放、标记明显等）；放、标记明显等）；对诱变剂敏感对诱变剂敏感 1.1.抗性突变株的筛选抗性突变株的筛选 （1 1）抗终代谢物结构类似物的突变株）抗终代谢物结构类似物的突变株 用途：筛选相应代谢物的高产菌株用途：筛选相应代谢物的高产菌株 （2 2）抗药性突变株）抗药性突变株 用途：筛选相应药物用途：筛选相应药物(抗生素抗生素)的高产菌株的高产菌株或遗传标记制作或遗传标记制作 突变体选择和检出突变体选择和检出筛选的方法筛选的方法-梯度平板法梯度平板法敏感敏感菌苔菌苔 抗抗性性菌落菌落加入含异烟肼的上层加入含异烟肼的上层 加入不含异烟肼的底层加入不含异烟肼的底层 异烟肼（异烟肼（“雷米封雷米封”）是是吡哆醇吡哆醇的结构类的结构类似物，利用含异烟肼梯度平板筛选异烟肼抗性似物，利用含异烟肼梯度平板筛选异烟肼抗性突变株，可达到定向培育突变株，可达到定向培育吡哆醇高产突变株吡哆醇高产突变株的的目的。目的。所谓所谓结构类似物结构类似物（又称代谢拮抗物）是指那些（又称代谢拮抗物）是指那些在结构上和代谢终产物（氨基酸、嘌呤、维生在结构上和代谢终产物（氨基酸、嘌呤、维生素等）相似的物质。素等）相似的物质。2 2、营养缺陷型突变株的筛选、营养缺陷型突变株的筛选（1 1）与筛选有关的）与筛选有关的3类培养基类培养基基本培养基基本培养基MM-MM-只能满足野生型菌株生长只能满足野生型菌株生长完全培养基完全培养基CM CM+补充培养基补充培养基SM AB SM AB 满足一切营养缺陷型菌株生长满足一切营养缺陷型菌株生长满足相应的营养缺陷型菌株生长满足相应的营养缺陷型菌株生长（2 2）与营养缺陷型突变有关的）与营养缺陷型突变有关的3类遗传型个体类遗传型个体（3）筛选步骤（）筛选步骤（5步）步）诱变处理诱变处理淘汰野生型淘汰野生型检出缺陷型检出缺陷型鉴定缺陷型鉴定缺陷型淘汰野生型淘汰野生型即浓缩缺陷型，以提高检出率即浓缩缺陷型，以提高检出率抗生素法抗生素法（G G+细菌：细菌：青霉素；青霉素；酵母菌和霉菌：酵母菌和霉菌：制霉菌素）制霉菌素）菌丝过滤法菌丝过滤法（丝状真菌、放线菌）丝状真菌、放线菌）方法：方法：营养缺陷型的检出营养缺陷型的检出方法:逐个检出法逐个检出法夹层培养法夹层培养法限量补充培养法限量补充培养法影印平板法影印平板法影印平板法影印平板法营养缺陷型的鉴定营养缺陷型的鉴定生长谱法：生长谱法：快速，直观快速，直观分两步：分两步：a.a.三大类生长因子要求（氨基酸、维生素、核苷酸）的鉴定三大类生长因子要求（氨基酸、维生素、核苷酸）的鉴定b.b.具体到某一种生长因子的鉴定具体到某一种生长因子的鉴定(哪一种氨基酸哪一种氨基酸,哪一种哪一种 维生素维生素,或哪一种碱基或哪一种碱基)具体操作具体操作:一般采用一般采用“滤纸片法滤纸片法”a.不含维生素的酪素水解液或氨基酸混合液 b.维生素混合液 c.0.1%碱水解酵母核酸液a b c三大类生长因子的鉴定：三大类生长因子的鉴定：以氨基酸缺陷为例进行说明以氨基酸缺陷为例进行说明将将1818种氨基酸按右表分为种氨基酸按右表分为6 6组组特点：特点：每每2 2组只有一种共同物质组只有一种共同物质单一营养物质要求的鉴定：单一营养物质要求的鉴定：组组别别化合物代号化合物代号11789 10 11227 12 13 14 15338 12 16 17 18449 13 16 19 2055 10 14 17 19 2166 11 15 18 20 211 3 52 4 6（3）营养缺陷型的用途）营养缺陷型的用途生产菌生产菌(氨基酸、核苷酸、维生素等高产菌需求氨基酸、核苷酸、维生素等高产菌需求)研究代谢途径和杂交、转化等遗传规律的遗传标记研究代谢途径和杂交、转化等遗传规律的遗传标记本节小结本节小结1、表型变化的突变性、表型变化的突变性2、基因突变的分子基础、基因突变的分子基础3、DNA的损伤的修复的损伤的修复4、诱变育种、诱变育种1.1.营养缺陷型营养缺陷型（auxotroph）某一野生型菌株因发生基因突变而某一野生型菌株因发生基因突变而丧失丧失合成一种或合成一种或几种生长因子、碱基或氨基酸的能力，几种生长因子、碱基或氨基酸的能力，只有从周围环境只有从周围环境或培养基中获得这些或培养基中获得这些营养或其前体物营养或其前体物（precursor）才才能能正常生长繁殖的变异类型，称为正常生长繁殖的变异类型，称为营养缺陷型营养缺陷型。营养缺陷型突变株营养缺陷型突变株在遗传学、分子生物学、遗传育种在遗传学、分子生物学、遗传育种和遗传工程等研究中和遗传工程等研究中十分重要十分重要表型判断的标准：表型判断的标准：在基本培养基上能否生长在基本培养基上能否生长营养缺陷型的表示方法：营养缺陷型的表示方法：基因型：基因型：所需营养物的前三个英文所需营养物的前三个英文小写斜体字母小写斜体字母表示：表示：hisC（组氨酸缺陷型，其中的大写字母组氨酸缺陷型，其中的大写字母C同一表型中不同基因的突变同一表型中不同基因的突变）表型：表型：同上，但同上，但第一个字母大写第一个字母大写，且不用斜体：，且不用斜体：HisCHisChisC缺陷型缺陷型hisC野生型野生型2.2.抗性突变型抗性突变型（resistant mutant）指野生型菌株因发生基因突变，指野生型菌株因发生基因突变，使菌株对使菌株对对某化对某化学药物或致死物理因子学药物或致死物理因子，特别是抗生素，产生抗性，特别是抗生素，产生抗性的的抗性变异类型抗性变异类型。特特 点：点：正选择标记正选择标记（突变株可直接从抗性平板上获得（突变株可直接从抗性平板上获得在加有相应在加有相应抗生素的平板上，只有抗性突变能生长。所以很容抗生素的平板上，只有抗性突变能生长。所以很容易分离得到。易分离得到。）表示方法：表示方法：所抗药物的所抗药物的前三个小写斜体英文字母前三个小写斜体英文字母加上加上“r”表示。表示。strr对链霉素的对链霉素的抗性抗性strs对链霉素的对链霉素的敏感性敏感性抗性突变菌株抗性突变菌株在遗传学、分子生物学、遗传育种在遗传学、分子生物学、遗传育种和遗传工程等研究中和遗传工程等研究中极为重要极为重要3.3.条件致死突变型条件致死突变型（conditional lethal mutant）某菌株或病毒经基因突变后，在某种条件下某菌株或病毒经基因突变后，在某种条件下可可正常正常地生长、繁殖并呈现其固有的表型，而在地生长、繁殖并呈现其固有的表型，而在另一种条件下却另一种条件下却无法无法生长、繁殖，这种突变类型生长、繁殖，这种突变类型称为称为条件致死突变型条件致死突变型。在在2525下可感染其下可感染其E.coli宿主宿主在在3737却不能感染却不能感染TsTs突变株突变株即即温度敏感突变株温度敏感突变株（temperature sensitive mutant，Ts Ts mutant）是一类典型的条件是一类典型的条件致死突变株。致死突变株。E.coli的某些菌株的某些菌株在在3737下正常生长下正常生长不能在不能在4242下生长下生长某些某些T4T4噬菌体突变株噬菌体突变株产生产生TsTs突变的原因突变的原因在某特定的温度下具有功能在某特定的温度下具有功能在另一温度（一般为较高温度）下则无功能在另一温度（一般为较高温度）下则无功能突变使某些重要蛋白质的结构和功能发生改变，突变使某些重要蛋白质的结构和功能发生改变，4.4.形态突变型形态突变型（morphological mutant）指由于突变而引起的个体或菌落形态的指由于突变而引起的个体或菌落形态的非选择性变异非选择性变异。个体变异个体变异孢子有无、孢子颜色、孢子有无、孢子颜色、鞭毛有无或荚膜有无等的突变鞭毛有无或荚膜有无等的突变菌落变异菌落变异菌落表面光滑、粗糙、菌落表面光滑、粗糙、噬菌斑的大小或清晰度等的突变噬菌斑的大小或清晰度等的突变特点：特点：非选择性突变非选择性突变突变株和野生型菌株均可生长，但可从形态突变株和野生型菌株均可生长，但可从形态特征上进行区分。特征上进行区分。举例：举例：菌落颜色变化菌落颜色变化半乳糖苷酶基因的插入失活半乳糖苷酶基因的插入失活重组子菌落重组子菌落白色白色非重组子菌落非重组子菌落兰色兰色平板法的优点：平板法的优点：快速简便，工作量小，结果直观性强（例如可用快速简便，工作量小，结果直观性强（例如可用上述变色圈、透明圈、抑制圈、生长圈或沉淀圈上述变色圈、透明圈、抑制圈、生长圈或沉淀圈等方法测定某代谢产物的量）；等方法测定某代谢产物的量）；平板法的缺点：平板法的缺点：在培养皿平板上固态培养的结果不一定能反映摇瓶在培养皿平板上固态培养的结果不一定能反映摇瓶培养或发酵罐中液体培养的结果。培养或发酵罐中液体培养的结果。back1