新型PET管氧显像剂18F--HX4的临床研究教学文稿.docx

此文档收集于网络，如有侵权请联系网站删除复口J人学硕士学位论文中文摘要新型PET乏氧显像剂18FmHX4的临床研究第一部分新型PET乏氧显像剂18FmHX4的 制备及临床应用安全性评价【摘要】 目的：评价新型PET乏氧显像剂18FHX4的标记方法，并观 察其临床应用安全性。材料与方法：本研究方案经复旦大学附属华山医 院伦理委员会批准，检查前均征得患者知情同意，并签署知情同意书。 以新型硝基咪唑类化合物标记前体HX4(4一(2一硝基一1H一咪唑基)甲基1H1，2，3三唑3(2硝基苯磺酰氧基)丙醇乙酯)为原料，通过博F离 子亲核取代反应标记，最终产物博FHX4用标准品坤FHX4在HPLC下 对照确认，记录标记次数及每次的标记率和产率。2009年6月至2010 年1月16例肿瘤患者入组本研究。所有患者行18FHX4 PETCT显像， 分别于FHX4注射后90min及120min进行图像采集，观察18FHX4 的临床应用安全性及图像质量。结果：共进行18FHX4标记15次，标 记时间约为55min，平均产率为25士5(EOS)；质量控制结果均在正常 范围内。16例患者注射”FHX4后均未出现任何不良反应。显像清晰， 18FHX4能选择性地浓聚于肿瘤组织内。结论：18FHX4标记方法可靠、 方便，HX4临床应用安全，显像清晰，并能选择性地在肿瘤内浓聚，为 进一步临床研究打下了坚实的基础。【关键词】18F-HX4；放射性核素标记：安全性；PET；肿瘤乏氧【中图分类号】R8第二部分新型PET乏氧显像剂18FHX4的 肿瘤乏氧显像评价【摘要】目的：对比新型PET乏氧显像剂18F-HX4与传统PET乏氧显 像剂18F-FMISO在恶性肿瘤患者的PETCT显像，并与内源性乏氧标志 物CA IX的表达水平进行相关性分析，评价18F-HX4作为PET乏氧显此文档仅供学习和交流复旦大学硕士学位论文像剂的乏氧检测能力。材料与方法：2009年6月至2010年1月16例行18FHX4 PETCT乏氧显像的患者入组本研究。所有患者于F-HX4 PETCT显像第二天行FFMISO PETCT显像。其中10例择日行手术， 手术切除肿瘤送病理科作CA IX免疫组化染色和表达分析。比较FHx4及博FFMISO显像SUVmax与TM值，并分别与CA IX表达 水平进行相关性分析。结果：18FHX4与18F-FMISO显像均表现为9例 (11个病灶)显像阳性，7例(9个病灶)显像阴性。11个阳性病灶”F-HX4 90min及120min显像的SUVmax及TM值分别为13l士033、156士042 (90min)、129士037、167士032(120min)。FFMISO 120min显像 的SUVmax及TM值分别为173士041、200士065。CA IX免疫组化染 色分析，10位患者的11个标本中总阳性表达率为818，表达()(+) (+)(+)者分别为2、3、3、3例。比较MFHX4 90rain显像与120rain显像，SUVmax、TM值间的差异均无统计学意义(t=0762，p=0466； t=1771，p=0110)。”FFMISO显像的SUVmax及TM值均高于 18FHX4。”FHX4显像SUVmax与CA IX表达水平高度相关，18FFMISO显像的SUVmax与CA IX表达水平中度相关，两者的TM 值均与CA IX表达水平无显著相关性。结论：18FHX490min显像与 120min显像无显著差异，18FFMISO显像SUVmax及TM值高于 ”FHX4，但18FHX4显像与CA IX表达水平关系更密切，18FHX4可 作为PET乏氧显像剂应用于肿瘤乏氧显像，比18F-FMISO更真实反应 肿瘤乏氧情况。【关键词】18F-HX4；18F-FMISO；PET；CA IX；肿瘤乏氧【中图分类号】R8第三部分18F-FDG与肿瘤乏氧检测【摘要】 目的：分析18F-FDG显像与乏氧显像及CA IX表达水平的相 关性，探讨18FFDG显像与乏氧显像及肿瘤乏氧的关系，评价18F-HX4 的临床应用价值。材料与方法：2009匀z 6月至2010年1月12例行18F-HX4 及1 8FFMISO PETCT乏氧显像的患者于第三天行1 8FFDG PETCT显 像。其中7例患者，显像后择同行手术。分析18F-FDG显像SUVmax3复旦人学硕_Jj学位论文与18F。HX4、储F-FMISO显像SUVmax、TM值的相关性及其与CA IX 表达水平的相关性。结果：”F-FDG显像，12例患者的16个病灶均表 现为阳性，SUVmax平均值为1174+571。FFDG显像SUVmax与 18F-HX4、MF-FMISO显像的SUVmax、TM值以及CA IX表达水平无 明显相关性。结论：培FFDG PET显像不能特异性反映肿瘤乏氧情况， 与18FHX4联合应用，能够提供更完整的肿瘤信息。【关键词l坶F-HX4；1 8FFDG；PET；CA IX；肿瘤乏氧【中图分类号】R84复旦大学硕士学位论文Engl ish AbstractThe ClinicaI Research onA New Hypoxia Tracer18FHX4Part IThe Radiolabeling and Clinical SafetyEvaluation of 18FHX4Purpose：Evaluation the radiolabelation method and clinical safety of1sFHX4MaterialsandMethods：Use thenew nitroimidazole compound，HX4，asprecursor,Fradiolabelledvianucleophilicsubstitution，The final product，F-HX4，was comfirmed by comparisonwith standard 1 9FHX4 under HPLCTimes of radiolabelation， radiolabeling efficiency and productivity of each time were recorded16 cases of tumor patient from June 2009 to January 20 1 0 were enrolled inAlllthe patients underwent the 8F-HX4 PETCT scan and informed consentswere signed in advanceImages were acquired 90min and 1 20min after11inj ection of 8F-HX4 respectivelyObserve the clinical safety 8F-HX4 andimage quality of 18F-HX4 PETCTResults：18F-HX4 was radiolabeled 15 times totallyThe retention time of radioactive peak ofF-HX4 was consistent with the UV peak of standard 1 9FHX4Radiochemical purity 98and specific activity500GBqm01Quality control results were all wimin the normal rangeNo adverse reaction was observed after inj ection among all the 1 6 patientsThe images acquired were clear which show that 18FHX4 accumulated in tumor tissue selectivelyConclusion：Theradiolabelationmethod of埔FHX4 was reliableconvenientThe application of 18F-HX4 is clinical safeKey words：18F-HX4，radiolabel，clinical safety,PET,tumor hypoxia Chinese book cIassificatiOn code：R85复旦人学硕1：学位论文Part l|Evaluation of 18FHX4 as A New PET hypoxia ImagingPurpose：Compare博FHX4 with traditional PET hypoxia imaging agent， 博FFMISO and compare both of the imaging agent with the endogenous hypoxia markers，CA IX to evaluate the clinical application of埔F-HX4 Materials and Methods：The 16 patients undergoing哺FHX4 PETCT in1Part I underwent 8F-FMISO PETCT the second dayTen Of the 1 6 patientshad surgery later and the tumor resctions were sent to pathology laboratory for immunohistochemical analysis of CA IX expressionCompare the SUVmax and TM of 18F-HX4 and博F-FMISOCorrelation analyses between the imaging agents and CA IX were done respectivelyResults：In both 18FHX4 and 18FFMISO PETCT,lesions of seven patients show negative and lesions of the other nine patients show positiveWhile in18F-HX4 PETCT the average SUVmax and TM at 90min and 120min ofthe 1 1 positive leisions were 13 1士033，156 4-042(90min)and 129 4- 037，167士O32(120min)，the average SUVmax and TM at 120min in 18F-FMISO were 173+04 1，200土065The immunohistochemical analysis of CA IX expression showed the positive rate was 8 1。8for 1 1 leisions from 10 patients and the numbers of(-)，(+)，(+)，(+)were 2，3，3，3 separatedlyThere was no significant difference between the images1acquired at 90 min and at 1 20min after injection of 8F-HX4(t=0762，p=0。466：tI771，p-01 1 0)The average SUVmax and TM ofFFMISO1were higher than those of陪F-HX4The SUVmax of 8F-HX4 was highlycorrelated with CA IX expression and that of 18F-FMISO was moderately correlated with CA IX expressionThe TM of both the imaging agents were not correlated with CA IX expressionConclusion：Although the SUVmaxand TM of 18F-FMISO were higher than those of 18F-HX4the correlation11between 8F-HX4 and CA IX was higher than that between 8FFMIO andCA IXFHX4 can be used as a hypoxia imaging agent which may beIbetter than sFFMISOKey words：18F-HX4：18F-FMISO；PET；CA IX：tumor hypoxiaChinese book cIasslficatiOn code：R86复旦大学硕士学位论文Part18FFDG and Tumor Hypoxia andAssessment of Tumor HypoxiaPurpose：Compare 18F-FDG with 18F-HX4 and CA IXAnalyze the relationship among 18F-FDG,18F-HX4 and CA IX expressionMaterials1and Methods：12 ofthe 16 patients undergoing 8F-HX4 PETCT in Part I1underwent 8F-FDG PETCT the third daySeven of the 1 2 patients had1surgeryAnalyze the correlation of SUVmax of 8F-FDG with SUVmax andTM ofFHX4 for all the 1 2 patientsFor those that had surgery,also analyze the correlation between SUVmax of 18F-FDG and CA IX expression Results：16 leisions from 12 patients all show 18F-FDG uptake and the average SUVmax was 1 1744-571Significant correlation was found neither11between 8FFDG and 8FHX4nor between 18FFDG and CA IXexpressionConclusion：博FFDG cannot reflect the situation of tumour hypoxiaCombined use of 18F-HX4 and 18F-FDG provide more complete tumor information leading more appropriate therapeutic plan and promisingprognosisKey words：18F-HX4；18F-FDG；PET；CA IX；tumor hypoxiaChinese book classification code：R87复旦大学硕士学位论文中英文缩写词英文缩写英文全称中文名称CA IXCarbonic Anhydrase IX碳酸酐酶9CDCCelldivision-cycle Protein细胞分裂周期蛋白 CTComputerized Tomography计算机断层扫描 EPOErythropoietin促红细胞生成素FDGF1uorodeoxyglucose氟脱氧葡萄糖FMISOFluoromisonidazole1-H1(318F】氟2羟基 丙基)一2一硝基咪唑GLUT Glucose Transporter 葡萄糖转运蛋白 HGF Hepatocyte Growth Factor 肝细胞生长因子 HIF一1 Hypoxiainduced Factor 1 缺氧诱导因子一1 IMIH Intensity Modulated Radiation调强放射治疗TherapyPETPositron Emission Tomography正电子发射计算机断层显像PDGFPlateletderived Growth Factor血小板源性生长因子SPStreptavidinperosidase链霉素亲和过氧化物酶SPECTSingle photon emission computed单光子发射计算机断层tomography显像SUVStandardized Uptake Value标准摄取值VEGFVascularEndothelialGrowth血管内皮细胞生长因子FactorVoIVrolume of Interest三维感兴趣区复口_人学颁1j学位论义鸪E刍刖昌乏氧，是指可利用的氧减少或氧分压降到临界值以下的状态，限制 甚至终止细胞、组织和器官的生理功能。肿瘤乏氧，即肿瘤供氧不足， 在实体肿瘤中是一个常见现象，亦是恶性肿瘤的一个重要特征【1。1955 年，Thomlinson和Gray在分析163例肺鳞癌新鲜手术标本时首次发现 乏氧细胞。在显微镜下他们发现：肿瘤细胞是以血管为中心呈环状排列， 在靠近血管的那些细胞由于氧和营养物质供应充分，细胞增殖迅速：在 离血管半径超过200肛m的区域，细胞大量坏死形成坏死区；而介于这两 者之间有一层厚度约为10Um20pm的细胞层，由于距离血管有一定距离，使氧扩散的速率逐渐减慢，氧张力下降，导致这部分细胞氧供不足， 即为乏氧细胞jj。根据形成机制的不同，肿瘤乏氧可分为慢性乏氧和急性乏氧两种4】。 远离血管的肿瘤细胞因超过了氧的有效弥散距离而处于乏氧状态，这种 由于超过了功能性血管有效供氧范围而引起的乏氧称为慢性乏氧；由于 肿瘤血管网结构和功能异常或肿瘤组织间液压升高使血管内血流暂时 减少或阻滞，导致血管周围细胞缺氧，这种由血管原因所致的短暂血流 中断，引起血管周围细胞乏氧称为急性乏氧，6】。实验观察及研究表明：乏氧可诱导肿瘤细胞内生长因子(HGF一1 0【、 HGF2a)、血管内皮生长因子(VEGF)和细胞分裂周期蛋白(CDC) 的表达，导致细胞对放疗、化疗及生物治疗的敏感性显著降低，从而大 大降低射线、药物等对肿瘤细胞的杀伤力7-1 3。此外，乏氧细胞由于处 于严重的缺氧状态，主要依靠糖的无氧酵解维持存活，此时的肿瘤细胞 无分裂能力，但仍保持其增殖能力，一旦乏氧状况得到改善即可分裂， 成为肿瘤复发及转移的重要危险因素(H，”】。目前有不少针对肿瘤乏氧的治疗措施，包括利用先进的调强放疗 (IMRT)技术给予乏氧肿瘤区域高剂量的照射【16,t7】、通过确定再氧合 状态调整放疗分割方式【l819】、针对性地应用乏氧增敏剂，并进行有效的 监控和评估等【20211。此外，些能在乏氧条件下被激活或是能特异性地聚集于乏氧组织中的新型化疗药物也正在研发中【221。因此，如果能在治 疗前检测肿瘤的乏氧范围和程度，并根据肿瘤的乏氧状态信息制定出个 体化的治疗方案，将有可能改善疗效及预后2引。近年来，随着影像学、免疫学、分子生物学以及计算机技术的发展， 已建立了多种较可靠的恶性肿瘤乏氧检测方法。其中，应用较广泛的具复旦大学硕士学位论文体方法主要有以下四种：(1)氧电极测定；(2)组织形态学分析；(3) DNA带断裂分析；(4)乏氧标志物的测定。但各方法均存在一定的局 限性。氧电极测定是目前唯一能够直接测定肿瘤含氧状况的方法，被视为 肿瘤乏氧检测的“金标准”24,25，但此法具有工作量大、创伤性大、结 果较实际情况偏高、反映肿瘤整体乏氧状况能力差以及增加肿瘤转移机 会等不足，使其实际应用受到限制【26。291。组织形态分析通过分析肿瘤的供血情况(肿瘤组织内毛细血管间 距、血管密度、肿瘤坏死程度、周围正常组织内的血管与肿瘤最近的距 离等)间接反映肿瘤的含氧量【30,31】，是最早应用于临床的方法，但是当 供应肿瘤的血管内血液携氧不足时，其分析结果可能无法真实反映肿瘤 的含氧情况132】。DNA断裂带分析则是根据有氧细胞与乏氧细胞受到电离辐射后 DNA损伤程度的不同(有氧细胞约为乏氧细胞的34倍)判断肿瘤的 乏氧状况【33,34】，但此方法只适用于单次大剂量(4Gy)的电离辐射后， 这在很大程度上限制了临床应用【3 51。近年来，现代分子生物学和功能性影像学迅速发展，乏氧标志物的 检测成为研究热点。乏氧标志物根据其来源不同可分为内源性乏氧标志 物和放射性乏氧标志物。前者是肿瘤细胞在乏氧状态下为了适应生长微 环境上调的一些内源性基因表达，如乏氧诱导因子1(HIF1)、碳酸酐 酶9(CA IX)等【3 61，应用特异性抗体和免疫组化技术测定肿瘤中内源 性乏氧标志物的表达水平可间接反映肿瘤的含氧情况：后者则是一些在 乏氧条件下能在乏氧细胞中滞留的外源性化合物，对其进行放射性核素 标记后注入体内，待其在体内分布稳定后再进行PET、PETCT或SPECT 显像，可以对肿瘤乏氧进行定性和定量检钡lJ E37,3s，其中具有代表性的有 18F-FMISO、“CuATSM等。上述各种检测方法中，除放射性乏氧标志物检测外，均属有创性活 体组织检测，易受样本误差影响，且不易进行重复测定。而放射性乏氧 标志物的测定是利用放射性核素示踪技术进行显像的一种影像学检查 方法，属于无创性检查；能对肿瘤整体显像进而全面地反映肿瘤的乏氧 状况：重复检测简单方便，可进行动态的肿瘤乏氧监测，因此被认为是 目前最有前途的肿瘤乏氧检测方法之一。根据底物的不同，放射性乏氧标志物可分为三大类【39】：(1)以2 硝基咪唑为底物的“香草型标志物(“vanilla”markers)；(2)以螯9复日大学硕_j学位论文合金属为底物的“巧克力”型标志物(“chocolate”markers)；(3)同 时含有螯合金属和2硝基咪唑的“巧克力旋转”型标志物。其中，“香 草”型标志物亦称为硝基咪唑类化合物，是目前研究最广泛的放射性乏 氧标志物。硝基咪唑是一种亲脂性的辛醇，其水分离系数为O42，因此很容易 从血液扩散到组织内，并通过细胞膜进入细胞内。硝基咪唑进入细胞后， 在细胞内硝基还原酶的作用下，有效基团(RN02)发生还原，产生自 由基阴离子(RN02)。在正常氧水平的细胞中，还原基团可重新被氧化 并扩散到细胞外：而在乏氧细胞中，由于氧缺乏RN02无法再氧化，而 是被进一步还原为RNHOH或RNH2，RNHOH或RNH2与细胞内含硫基 的大分子物质通过共价键不可逆结合进而滞留在乏氧细胞内。将硝基眯 唑用放射性核素标记后经静脉注入人体，经过一定的时间，当其在体内 的浓度分布相对稳定后，可使用PET、PETCT或SPECT扫描仪在体外 探测体内放射性核素发出的信号，从而确定放射性乏氧显像剂在体内的 部位，由此得到其在体内的分布图像【40,41】。大量研究已证实了硝基咪唑 类化合物在头颈部肿瘤、肺癌、前列腺癌、鼻咽癌和脑胶质瘤等肿瘤中 作为乏氧显像剂的可行性【4H41。18FFMISO是目前临床上公认的硝基咪唑类乏氧显像剂，在过去的20年里一直被用于肿瘤乏氧检测，是第一个用于肿瘤乏氧检测的PET 乏氧显像剂45481。但是正常组织对18F-FMISO的清除率慢、乏氧区域和 周围正常组织对比不明显、成像时间晚进而造成影像质量下降、患者等 待时间长等缺点一定程度上限制了其临床应用。因此，需要发展一种更 理想的乏氧显像剂，在不减低乏氧检测灵敏度的同时克服18FFMISO的 缺点。近年来，研究人员对州FFMISO的衍生物进行了大量的研究，包括：lBFFAZA49,50】、I 8FFETA51】、18FFETNIMl52,53】、18FEF5Is4】、1 8FEF3【s5，56】、18F-EFl57】及124I-IAZA58_60】等。但是，大多数研究尚处于临床前试验阶 段，临床试验报道少，且各项研究结果间存在很大差异，尚缺乏统一的 结论。18F-HX4是目前最新的1 8F-FMISO衍生物之一，它在18F和2硝基 咪唑基团之间插入了三唑环。目前，已有两家中心(USC中心、Maastro 中心)对FHX4进行了的研究。临床前研究显示，博FHX4肌肉摄取 低，J下常组织清除率强，在嫁接了异种肿瘤的小鼠以及患有特发性肿瘤 的猴子中信噪比高。而临床研究结果则显示：18FHx4的J临床应用安全，IO复旦大学硕士学位论文注射后无明显的不良反应，TM值介于115201。与其他的硝基咪唑 类显像剂进行比较发现：(1)对于头颈部肿瘤，18FHX4注射后5580 分钟时即可显示良好的TM值(14)，而其他显像剂通常需要等待 120240分钟后才可进行显像；(2)在肺癌中，博FHX4的TM值与 埔FFMISO相似，且随显像时间的延长仅中度增高，提示较短的等待时 间(约90分钟)即可进行显像；(3)全部数据显示90分钟时是18FHX4 的最佳成像时间。临床前研究及临床研究结果均提示，18FHX4在一定 程度上克服了博FFMISO清除率慢、乏氧区域和周围正常组织对比不明 显、成像时间晚等不足，具有良好的研究前景【611。本课题自主标记MFHX4并对其进行研究。主要分三个部分进行， 第一部分主要观察18FHX4的标记过程及其临床应用的安全性；第二部 分对比了18FHX4显像与18FFMISO显像，并分别与CAIX表达水平进 行相关性分析，评价18FHX4作为PET乏氧显像剂的乏氧检测能力；而 在第三部分中，则进行了18F-FDG显像与乏氧显像以及CA IX表达水平 的相关性分析，进一步探讨18FHX4的临床应用价值。复日J大学硕士学位论文第一部分新型PET乏氧显像剂18F-HX4的 制备及临床应用安全性评价肿瘤中普遍存在乏氧的情况，乏氧能降低肿瘤对治疗的敏感性611， 严重影响疗效及预后621。肿瘤乏氧显像是目前国内外研究的热点，但是 仍缺乏一个理想的乏氧显像剂。埔F-HX4是一种新型PET乏氧显像剂， 本研究自主标记18F-HX4并进行16例肿瘤患者的乏氧显像，对18FHX4 的同位素标记方法及临床应用安全性进行评价。材料与方法1实验材料及仪器11主要试剂(1)HX4标准品及前体：纯度大于99，由西门子公司分子影像 部门提供。(2)磷酸二氢钠、磷酸三钠，国药集团化学试剂有限公司。 (3)无水乙醇，上海试剂一厂。 (4)无水乙醇，USP级，美国Aldrich公司。 (5)高纯氮气，纯度99995，上海有机所优化特种气体供应公司。12主要仪器(1)电子天平：hangping FA2004，上海天平仪器厂。 (2)反相C1 8柱：Waters公司。 (3)高效液相色谱分析仪：Waters，l 525 Binary HPLC泵，Wate rsDelta 600。(4)放射性检测器：德国EG&G公司，LB508，Bioscan，Flowcount。 (5)紫外检测仪：Waters 2487。 (6)活度计：CRC一15R，CAPINTEC公司。(7)RDSlll型回旋加速器(质子能量为11Mev，最大束流509A)， 美国CTI公司制造。复旦大学硕士学位论文2临床研究对象2009年6月至2010年1月，16例恶性肿瘤患者入组本研究，其中 男11例、女5例，年龄1 583(58士15)岁。16例患者中，头颈部恶 性肿瘤12例(鳞癌10例、腺癌1例、黑色素瘤1例)，肺癌2例(均 为腺癌)，其他肿瘤2例(乳腺癌肝转移1例，盆腹腔巨大占位1例)(表 11)。所有患者均行18FHX4 PETCT显像。本研究方案经复旦大学附 属华山医院伦理委员会批准，检查前征得患者知情同意，并签署知情同 意书。表1-1患者基本情况及临床资料 编号性别年龄病理类型0lF47乳腺癌肝转移02M1 5(回盲部)纤维腺瘤03M46(右上颌窦)腺样囊性癌04F75(右舌)鳞状细胞癌05M59(下咽)溃疡型鳞癌06F64右上颌窦癌07F46鼻咽癌08M5l鼻咽癌09M63(左喉)上皮内局部癌变10M83(右腮腺区)基底鳞癌11M58(右口底)中分化鳞癌12M54(左上肺)腺癌13M63(左上肺)腺癌，分化较差14M79(全喉)浅表糜烂型鳞癌，I-II级15F63黑色素瘤16M62左颊部浸润性分化型鳞癌3显像设备显像设备为SIEMENS公司的Biograph 64 PETCT。复q人学硕士学位论文4 18F-HX4的制备及质量控制41 18FHX4的制备过程电甚器MeCNo声。飞85C 10 mi舀Cn卅“。一Aq Ha 10010 min八C唧LC纯化唑仓 晗18F-HX4的合成示意图411标记中间体的制备18F离子用回旋加速器(CTRDSlll)以核反应80(P，n)18F生 产，产生的18F离子1850MBq(600mCi)经阴离子交换柱(QMA)吸 附，用15ml的K2C03和K2-22的混合溶液洗脱至反应管中，加入20ml乙腈蒸发除水后，加入1，0ml HX4前体(1820rag)的乙腈溶液。在 82下反应10min，然后用冷却氮气吹干，加入10molL。1盐酸溶液10ml 在100下反应10min。4，1318FHX4的纯化 上述水解后的混合溶液，加入20toolL1乙酸钠溶液O5ml中和，3ml注射用水稀释，传入制备型HPLC的LOOP环中(流动相为乙醇：20mmol磷酸二氢钠缓冲液，流速为5mlmin一；固定相为C18柱)，以 放射检测器收集所需要的组分，并传入个预先加入300rag抗坏血酸的 无菌瓶中，然后进行无菌过滤，取样进行放射性HPLC鉴定，并且与 HX4标准品的HPLC图谱对照。取样待放射性衰变后进行热源、无菌等 检测。42放化纯度和稳定性检测以冷HX4标准品制定些标准溶液，制定标准曲线以确定产品中 放射性峰的性质和比活度。未反应的18F参考Rt为：29min，产品18F-HX4 参考Rt为79min。HPLC的流动相为5乙醇溶液，流速O4mlminl，紫外吸收在330nm。14复旦大学硕士学位论文4。3物理学鉴定铅玻璃下肉眼观察物理性状，应澄清无沉淀。测定放射性活度，并 计算放射性浓度、半衰期及放射性核纯度。放射性活度采用美国 CAPINTEC公司的CRC15R活度计测定。计算放射性浓度，参考范围 为37111 0MBqml。半衰期采用时间计算法，计算公式为 Tl2=6931n(AoA10)】，Tl2应在105110min之间。放射性核纯度样品送至上海欣科药业有限公司，用多道分析仪行检测，核纯度应大于98。44化学鉴定测定pH值、放化纯度、比活度、乙腈痕量、乙醇含量及Kz22痕量。 pH值采用广泛pH试纸检测，应在5080之间。放化纯度采用HPLC 法(流动相为5乙醇溶液，流速为06mLmin；固定相为反相C18柱； 德国EG&G放射性检测器LB508；waters2487紫外检测器，吸收波长 330nm)，18FHX的放射图谱与19FHX4标准品的紫外图谱对照，放化 纯度应大于95。计算比活度，比活度应大于148GBq”mol。乙腈痕量的和乙醇含量的检测送至中国科学院有机化学研究所作气相色谱分析，乙腈含量应小于40ppm，乙醇含量应在l一6之间。K