实验室生物安全培训市公开课金奖市赛课一等奖课件.pptx

试验室生物安全培训n中华人民共和国卫生行业原则（WS 233-）微生物和生物医学试验室生物安全通用准则 General biosafety standard for microbiological and biomedical laboratories n1203公布公布0801实行实行第1页第1页范围 n本原则要求了微生物和生物医学试验室生物安全防护基本原则、试验室分级、各级试验室基本要求。本原则为最低要求。n本原则适合用于疾病预防控制机构、医疗保健、科研机构。第2页第2页定义1试验室生物安全防护 nbiosafety protection for laboratoriesn试验室工作人员所处理试验对象含有致病微生物及其毒素时，通过在试验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从原则化工作及操作程序和规程等方面采用综合办法，确保试验室工作人员不受试验对象侵染，确保周围环境有受其污染。第3页第3页定义2微生物危害评估nhazard assessment for microbesn对试验微生物和毒素也许给人或环境带来危害所进行评估。第4页第4页定义3气溶胶naerosol n悬浮于气体介质中粒径普通为0.001m1000m固体、液体微小粒子形成胶溶状态分散体系。第5页第5页定义4生物安全柜nbiosafety cabinetn处理危险性微生物时所用箱形空气净化安全装置。第6页第6页定义5 I级生物安全柜nclass biosafety cabinetn至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作时柜正面玻璃推拉窗打开二分之一，上部为观测窗，下部为操作窗口，外部空气由操作窗口吸进，而不也许由操作窗口逸出。工作状态时确保工作人员不受侵害，但不确保试验对象不受污染。第7页第7页定义6 II级生物安全柜nclass biosafety cabinet n至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化无涡流单向流空气。工作时正面玻璃推拉窗打开二分之一，上部为观测窗，下部操作窗口。外部空气由操作窗口吸进，而不也许由操作窗口逸出。工作状态下遵守操作规程时既确保工作人员不受侵害，也确保试验对象不受污染。第8页第8页定义7III级生物安全柜nclass III biosafety cabinetn至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化无涡流单向流空气，正面上部为观测窗，下部为手套箱式操作口。箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品完全隔绝。第9页第9页定义8物理克制设备nphysical containment devicen用物理或机械办法预防致病微生物逸出设备第10页第10页定义9高效空气过滤器nHEPA(high efficiency particulate air)filter n在额定风量下，对粒径不小于等于0.3m粒子捕集效率在99.97%以上及气流阻力在245Pa下列空气过滤器。第11页第11页定义10相对压强nrelative pressuren绝对压强减去大气压强之值。第12页第12页定义11窗口期n病毒感染人体后但尚未产生抗体前一段时间，在此期间病毒在人体内大量复制，抗体检测呈阴性。第13页第13页试验室生物安全防护基本原则 n安全设备和个体防护 n试验室设计与建造特殊要求 n安全操作规程 n致病微生物及其毒素在试验室之间传递 n管理制度 n微生物危害评估第14页第14页总则n1.试验室生物安全防护内容包含安全设备、个体防护装置和办法，试验室特殊设计和建设要求，严格管理制度和标准化操作程序及规程。2.应将每一特定试验室从立项、建设到使用维护全过程中相关生物安全防护综合办法内容编入试验室生物安全手册中。必须设有专职生物安全责任人。3.生物安全防护试验室依据不同微生物和防护要求分为四个生物安全防护级别。第15页第15页安全设备和个体防护n安全设备和个体防护是确保试验室工作人员与致病微生物及其毒素直接接触一级屏障。n1.生物安全柜是最主要安全设备，形成最主要防护屏障。试验室应按要求分别配备、级生物安全柜。所有也许使致病微生物及其毒素溅出或产气愤溶胶操作，除事实上不可实行外，都必须在生物安全柜内进行。不得用超净工作台代替生物安全柜。第16页第16页安全设备和个体防护n2.必要时试验室应配备其它安全设备，如设置配有排风净化妆置排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确保安全设备。n3.试验室所配备离心机应在生物安全柜或本原则2中所指其它安全设备中使用，不然必须使用安全密封专用离心杯。n4.必须给试验室工作人员配备必要个体防护用具。第17页第17页试验室设计与建造特殊要求n包括:n试验室选址、平面布置、围护结构、通风空调、安全装置及特殊设备等设计与建造特殊要求。第18页第18页安全操作规程n1.本标准针对不同等级生物安全防护试验室所要求安全操作规程，包含标准安全操作规程和特殊安全操作规程，必须在试验室生物安全手册中明列并加以执行。n2.针对不同微生物及其毒素应补充要求对应特殊安全操作规程，也应在各试验室生物安全手册中明列并加以执行。第19页第19页致病微生物及其毒素在试验室之间传递n致病微生物及其毒素在试验室之间传递必须严格按照国家现行相关管理办法执行。第20页第20页管理制度 n试验室基本管理 n试验室特殊管理第21页第21页试验室基本管理n1 试验室内布置和准入 a）在主试验室应合理设置清洁区、半污染区和污染区；b）非试验相关人员和物品不得进入试验室；c）在试验室内不得进食和饮水，或者进行其它与试验无关活动；d）试验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入试验室及其岗位之前必须通过试验室主任同意。第22页第22页试验室基本管理n2.试验室工作人员资格和培训 a）试验室工作人员必须是受过专业教育技术人员。在独立进行工作前还需在中高级试验技术人员指导下进行上岗培训，达到合格原则，方可开始工作；b）试验室工作人员必须被告知试验室工作潜在危险并接受试验室安全教育，自愿从事试验室工作；c）试验室工作人员必须遵守试验室所有制度、要求和操作规程。d）三级和四级生物安全防护试验室工作人员在开始工作前必须留本底血清进行相关检测，以后定期复检。如有疫苗必须进行免疫注射。第23页第23页试验室特殊管理n为避免和处理源于不安全操作引起意外事故，必须严格执行下列原则：n1.针对也许危险原因，设计确保安全工作程序。2.事迈进行有效培训和摸拟训练。3.对于意外事故要能够提供包括紧抢救助或专业性保健治疗办法，足以应付紧急情况。第24页第24页试验室特殊管理n4.试验室事故处理：工作人员在操作过程中发生意外，如针刺和切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内、衣物污染、污染试验台面等均视为安全事故。应视事故类型等不同情况，马上进行紧急处理。详细办法必须形成书面文件并严格恪守执行。在紧急处理同时必须向相关教授和领导汇报，并详细统计事故经过和损伤详细部位和程度等，由教授评定是否需要进行预防性治疗。n5 应填写正式事故记录表，并按要求汇报给国家对应级别卫生主管部门。第25页第25页微生物危害评估 n当建设使用传染性或有潜在传染性材料试验室前，必须进行微生物危害评估。应依据传染性微生物致病能力程度、传播路径、稳定性、感染剂量、操作时浓度和规模、试验对象起源、是否有动物试验数据、是否有有效预防和治疗办法等诸原因进行微生物危害评估。第26页第26页微生物危害评估n1.通过微生物危害评估拟定对象微生物应在哪一级生物安全防护试验室中进行操作。n2.依据危害评估结果，制定相应操作规程、试验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面文献并严格遵守执行。第27页第27页试验室分类、分级n分类：普通生物安全防护试验室(不使用试验脊椎动物和昆虫)和试验脊椎动物生物安全防护试验室。n分级：每类生物安全防护试验室依据所处理微生物及其毒素危害程度各分为四级。各级试验室生物安全防护要求依次为：一级最低，四级最高。第28页第28页试验室合用范围n合用范围：n普通生物安全防护试验室n试验脊椎动物生物安全防护试验室第29页第29页普通生物安全防护试验室-1、2 n1.一级生物安全防护试验室：n试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于对健康成年人已知无致病作用微生物，如用于教学普通微生物试验室等。n2.二级生物安全防护试验室：n试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于对人或环境含有中档潜在危害微生物。第30页第30页普通生物安全防护试验室-3n3.三级生物安全防护试验室 n试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于主要通过呼吸路径使人传染上严重甚至是致死疾病致病微生物及其毒素，通常已有预防传染疫苗。n艾滋病病毒研究(血清学试验除外)应在三级生物安全防护试验室中进行。第31页第31页普通生物安全防护试验室-4n4.四级生物安全防护试验室 n试验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适合用于对人体含有高度危险性，通过气溶胶路径传播或传播路径不明，当前尚无有效疫苗或治疗办法致病微生物及其毒素。与上述情况类似不明微生物，也必须在四级生物安全防护试验室中进行。待有充足数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低档别试验室中处理。第32页第32页试验脊椎动物生物安全防护试验室n其合用微生物范围与同级普通生物安全防护试验室相同。第33页第33页一级生物安全防护试验室基本要求 1.安全设备和个体防护 1.1 普通不必使用生物安全柜等专用安全设备。1.2 工作人员在试验时应穿工作服，戴防护眼镜。1.3 工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。第34页第34页一级生物安全防护试验室基本要求n2 试验室设计和建造特殊要求 2.1 每个试验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。2.2 试验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯。2.3 试验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。2.4 试验室中家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持生物废弃物容器台(架)。2.5 试验室如有可启动窗户，应设置纱窗。第35页第35页二级生物安全防护试验室基本要求 1.安全设备和个体防护 1.1 也许产生致病微生物气溶胶或出现溅出操作均应在生物安全柜(II级生物安全柜为宜)或其它物理克制设备中进行，并使用个体防护设备1.2 处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(II级生物安全柜为宜)或其它物理克制设备中进行，并使用个体防护设备。上述材料离心操作假如使用密封离心机转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在试验室中进行。第36页第36页二级生物安全防护试验室基本要求n1.3 当微生物操作不也许在生物安全柜内进行而必须采用外部操作时，为预防感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用具或其它防溅出保护设备)。1.4 在试验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开试验室时，防护服必须脱下并留在试验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过工作服应先在试验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。1.5 当手也许接触感染材料、污染表面或设备时应戴手套。如也许发生感染性材料溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开试验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。第37页第37页二级生物安全防护试验室基本要求2.试验室设计和建造特殊要求 2.1 生物安全防护二级试验室必须满足本原则一级生物安全防护试验室中试验室设计和建造特殊要求各款要求。2.2 应设置实行各种消毒办法设施，如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。2.3 应设置洗眼装置。2.4 试验室门宜带锁、可自动关闭。2.5 试验室出口应有发光批示标志。2.6 试验室宜有不少于每小时34次通风换气次数。第38页第38页三级生物安全防护试验室基本要求n1.安全设备和个体防护 1.1 试验室中必须安装级或级以上生物安全柜。1.2 所有涉及感染性材料操作应在生物安全柜中进行。当这类操作不得不在生物安全柜外进行时，必须采用个体防护与使用物理克制设备综合防护办法。1.3 在进行感染性组织培养、有也许产生感染性气溶胶操作时，必须使用个体防护设备。第39页第39页三级生物安全防护试验室基本要求n1.4 当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。1.5 工作人员在进入试验室工作区前，应在专用更衣室(或缓冲间)穿着背开式工作服或其它防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开试验室。可再次使用工作服必须先消毒后清洗。1.6 工作时必须戴手套(两副为宜)。一次性手套必须先消毒后丢弃。1.7 在试验室中必须配备有效消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药物。第40页第40页三级生物安全防护试验室基本要求n2.试验室设计和建造特殊要求n2.1选址 三级生物安全防护试验室可与其它用途房屋设在一栋建筑物中，但必须自成一区。该区通过隔离门与公共走廊或公共部位相隔。第41页第41页2.2平面布局na)三级生物安全防护试验室关键区包括试验间及与之相连缓冲间。b)缓冲间形成进入试验间通道。必须设两道连锁门，当其中一道门打开时，另一道门自动处于关闭状态。如使用电动连锁装置，断电时两道门均必须处于可打开状态。在缓冲间可进行二次更衣。c)当试验室通风系统不设自动控制装置时，缓冲间面积不宜过大，不宜超出试验间面积八分之一。d)级或级生物安全柜安装位置应远离试验间入口，避动工作人员频繁走动区域，且有助于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域气流流型。第42页第42页2.3围护结构na)试验室(含缓冲间)围护结构内表面必须光滑耐腐蚀、防水，以易于消毒清洁。所有缝隙必须加以可靠密封。b)试验室内所有门均可自动关闭。c)除观测窗外，不得设置任何窗户。观测窗必须为密封结构，所用玻璃为不碎玻璃。d)地面应无渗漏，光洁但不滑。不得使用地砖和水磨石等有缝隙地面。e)天花板、地板、墙间交角均为圆弧形且可靠密封，施工时应预防昆虫和老鼠钻进墙脚。第43页第43页2.4通风空调na)必须安装独立通风空调系统以控制试验室气流方向和压强梯度。该系统必须确保试验室使用时，室内空气除通过排风管道经高效过滤排出外，不得从试验室其它部位或缝隙排向室外；同时确保试验室内气流由“清洁”区域流向“污染”区域。进风口和排风口布局应使试验区内死空间减少到最小程度。b)通风空调系统为直排系统，不得采用部分回风系统。第44页第44页2.4通风空调nc)环境参数：相对于试验室外部，试验室内部保持负压。试验间相对压强以30Pa40Pa为宜，缓冲间相对压强以15Pa20Pa为宜。试验室内温、湿度以控制在人体舒适范围为宜，或依据工艺要求而定。试验室内空气洁净度以GB 50073洁净厂房设计规范中所定义七级至八级为宜。试验室人工照明应均匀，不眩目，照度不低于500lx。第45页第45页2.4通风空调nd)为确保试验室内气流由“清洁”区域流向“污染”区域，试验室内不应使用双侧均匀分布排风口布局。不应采用上送上排通风设计。由生物安全柜排出经内部高效过滤空气可通过系统排风管直接排至大气，也可送入建筑物排风系统。应确保生物安全柜与排风系统压力平衡。e)试验室进风应经初、中、高效三级过滤。第46页第46页2.4通风空调nf)试验室排风必须经高效过滤或加其它办法处理后，以不低于12ms速度直接向空中排放。该排风口应远离系统进风口位置。处理后排风也可排入建筑物排风管道，但不得被送回到该建筑物任何部位。g)进风和排风高效过滤器必须安装在试验室设在围护结构上风口里，以避免污染风管。h)试验室通风系统中，在进风和排风总管处应安装气密型调整阀门，必要时可完全关闭以进行室内化学熏蒸消毒。第47页第47页2.4通风空调ni）试验室通风系统中所使用所有部件均必须为气密型。所使用高效过滤器不得为木框架。j）应安装风机启动自动联锁装置，确保试验室启动时先开排风机后开送风机。关闭时先关送风机后关排风机。nk)不得在试验室内安装分体空调器。第48页第48页2.5安全装置及特殊设备 na)必须在主试验室内设置级或级生物安全柜。其安装位置应满足d)中要求。b)连续流离心机或其它也许产气愤溶胶设备应置于物理克制设备之中，该装置应能将其也许产气愤溶胶经高效过滤器过滤后排出。在试验室内所必须设置所有其它排风装置(通风橱、排气罩等)排风均必须通过高效过滤器过滤后方可排出。其室内布置应有助于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域气流流型。第49页第49页2.5安全装置及特殊设备nc)试验室中必须设置不产生蒸汽高压灭菌锅或其它消毒装置。d)试验间与外部应设置传递窗。传递窗双门不得同时打开，传递窗内应设物理消毒装置。感染性材料必须放置在密闭容器中方可通过传递窗传递。e）必须在试验室入口处明显位置设置压力显示报警装置，显示试验间和缓冲间负压情况。当负压批示偏离预设区间必须能通过声、光等手段向试验室内外人员发出警报.可在该装置上增长送、排风高效过滤器气流阻力显示。第50页第50页2.5安全装置及特殊设备n f）实验室启动工作期间不能停电。应采用双路供电电源。如难以实现，则应安装停电时可自动切换后备电源或不间断电源，对关键设备(生物安全柜、通风橱、排气罩以及照明等)供电。g)可在缓冲间设洗手池：洗手池供水截门必须为脚踏、肘动或自动开关。洗手池如设在主实验室，下水道必须与建筑物下水管线分离，且有明显标志。下水必须通过消毒处理。洗手池仅供洗手用，不得向内倾倒任何感染性材料。供水管必须安装防回流装置。不得在实验室内安设地漏。第51页第51页2.6其它na)试验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。b)试验室中家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器台(架)。家具和设备边角和突出部位应光滑、无毛刺，以圆弧形为宜。c)所需真空泵应放在试验室内。真空管线必须装置在线高效过滤器。d)压缩空气等钢瓶应放在试验室外。穿过围护结构管道与围护结构之间必须用不收缩密封材料加以密封。气体管线必须装置在线高效过滤器和防回流装置。第52页第52页2.6其它ne)试验室中应设置洗眼装置。f)试验室出口应有发光批示标志。g)试验室内外必须设置通讯系统。h)试验室内试验统计等资料应通过传真机发送至试验室外。第53页第53页四级生物安全防护试验室n四级生物安全防护试验室分为：安全柜型试验室和穿着正压服型试验室。在安全柜型试验室中，所有微生物操作均在级生物安全柜中进行。在穿着正压服型试验室中，工作人员必须穿着特殊正压服式保护服装。第54页第54页1.安全设备和个体防护n1.1 在试验室中所有感染性材料操作都必须在级生物安全柜中进行。假如工作人员穿着整体由生命维持系统供气正压工作服，则相关操作可在级生物安全柜中进行。1.2 所有工作人员进入试验室时都必须换上全套试验室服装，包括内衣、内裤、衬衣或连衫裤、鞋和手套等。所有这些试验室保护服在淋浴和离开试验室前均必须在更衣室内脱下。第55页第55页2.安全柜型试验室设计和建造特殊要求n2.1 选址。试验室应建造在独立建筑物内或试验室建筑物内独立区域。第56页第56页2.2 平面布局na)试验室关键区域由安放有级生物安全柜房间(安全柜室)和进入通道构成。进入通道至少有三个部分，依次为外更衣室、淋浴室和内更衣室。任何相邻门之间都有自动连锁装置，预防两个相邻门被同时打开。对于不能从更衣室携带进出安全柜室材料、物品和器材，应在安全柜室墙上设置含有双门结构高压灭菌锅，并有浸泡消毒槽、熏蒸室或带有消毒装置通风传递窗，以便进行传递或消毒。必须设置带气闸室紧急出口通道。第57页第57页2.2 平面布局n b)安全柜室四周可设置缓冲区，为环形走廊或缓冲房间，属关键区域一部分。缓冲区建设要求同三级生物安全防护试验室。第58页第58页2.3围护结构na)安全柜房间和内侧更衣室墙壁、地板、天花板等内部应形成密封内壳。地板应整体密封，墙角成圆弧形。房间内表面应防水、耐腐蚀。结构内全部缝隙都应密封。尽也许减小安全柜室和内更衣室门周围缝隙并可密封以利消毒。安全柜室地板上全部下水管都直接通往液体消毒系统，下水道口和其它服务管线安装高效过滤器并预防害虫进入。第59页第59页2.3围护结构nb）进入试验室门可自动关闭，能够上锁。所有在试验室内外传递物品设备都必须为双开门结构，两门之间也必须有自动连锁装置。c)任何窗户都要求防破碎并密封。d)在试验室墙洞上安装用于对级生物安全柜和安全柜室传递出来物品进行消毒双开门高压灭菌锅。其外门在试验室外启动。缝隙必须良好密封。第60页第60页2.4通风空调 na)必须安装精心设计建造直排式通风系统。该系统进风和排风设计应确保定向气流由最小危险区流向最大潜在危险区。进风口和排风口布局应使试验区内死空间减少到最小程度。b)必须监测相邻区域压差和气流流向，并安装报警器。在外更衣室入口处安装压强仪表盘，显示和监测试验室内各区压强或压差和进风、排风风量。第61页第61页2.4通风空调nc)必须设计安装通风系统自动控制和警报装置以确保试验室内不出现正压并保持各房间压强和压差正常。级生物安全柜排风必须直接与排风管道相连。排风管道必须单独设置，不得与建筑物排风系统相连。第62页第62页2.4通风空调nd)环境参数：安全柜室必须保持负压程度最高，其相对压强不得高于60Pa；安全柜室、内更衣室、淋浴室和外更衣室相对压强依次增高，相邻房间之间应有压差，保持在10Pa15 Pa之间。关键区域空气洁净度以七级至八级为宜。试验室人工照明应均匀，不眩目，照度不低于500 1x。第63页第63页2.4通风空调ne)进风为三级过滤系统，最后一级必须经讨高效过滤器过滤。f)来自整个关键区域排风必须连续通过两个高效过滤器处理。排风口应远离试验室区和进风口。g)进风和排风高效过滤器必须安装在试验室各房间设在围护结构上风口里，以避免污染风管。高效过滤器风口结构必须在更换高效过滤器之前实现就地消毒。或采用可在气密袋中进行更换过滤器结构，以后再对高效过滤器进行消毒或焚烧。每台高效过滤器安装前后都必须进行检测，运营后每年也必须进行一次检测。第64页第64页2.5安全装置及特殊设备 na)安全柜室必须设置级生物安全柜。b)高压灭菌锅门必须自动控制，只有在灭菌循环完毕后，其外门方可启动。c）必须提供双开门液体浸泡槽、熏蒸消毒室或用于消毒通风气闸室，对来自级生物安全柜和安全柜室不能高压消毒物品进行消毒，使其安全进出。第65页第65页2.5安全装置及特殊设备nd)假如有中央真空管线系统，不应在安全柜室以外空间使用。在线高效过滤器尽也许靠近每个使用点或截门处。滤器应易于现场消毒或更换。其它通往安全柜室气、液管线要求安装保护装置以预防回流。第66页第66页2.5安全装置及特殊设备ne)自内更衣室(含卫生间)，安全柜室水池下水、地漏以及高压消毒室和其它起源流出液体在排往下水道之前，必需通过消毒，最好用加热消毒法。地漏必须有充斥对被试验传染性物质有效化学消毒剂水封，它们直接通往消毒系统。下水道口和其它服务管线均应安装高效过滤器。自淋浴室和外更衣室、厕所排出液体能够不通过任何处理直接排到下水道中。对液体废弃物消毒效果必须通过证实。第67页第67页2.5安全装置及特殊设备nf)必须为试验室关键区(安全柜室、内更衣室、淋浴室和外更衣室)通风系统、警报器、照明、进出控制和生物安全柜设置能够自动启动紧急电源。第68页第68页 2.6其它 na)工作台表面应无缝或为密封表面。应不透水，耐腐蚀、耐热。b)试验室家具应简朴，为开放结构，且牢固。试验台、安全柜和其它设备之间留有空间以便能够清理和消毒。椅子和其它设施表面应铺上非纤维材料使之容易消毒。家具和设备边角和突出部位应光滑、无毛刺，以圆弧形为宜。第69页第69页2.6其它nc)在安全柜室。内外更衣室近门处安装非手动操作或自动洗手池。d)试验室与外部必须设有通讯系统，宜设闭路电视系统。e)试验室内试验统计等资料必须通过传真机发送至试验室外。第70页第70页3.穿着正压服型试验室设计和建造特殊要求 n 3.1选址：试验室应建造在独立建筑物内或试验室建筑物内独立区域。第71页第71页3.2平面布局 na)试验室关键区域由安放有级生物安全柜房间(主试验室)和进入通道构成。进入通道包括更衣区和消毒区。更衣区依次为外更衣室、淋浴室和内更衣室，消毒区为化学淋浴室，工作人员离开主试验室时首先通过化学淋浴消毒正压防护服表面。关键区任何相邻门之间都有自动连锁装置，预防两个相邻门被同时打开。对于不能从更衣室携带进出主试验室材料、物品和器材，应在主试验室墙上设置含有双门结构高压灭菌锅、浸泡消毒槽、熏蒸室或带有消毒装置通风传递窗，以便进行传递或消毒。必须设置带气闸室紧急出口通道。第72页第72页3.2平面布局nb)安全柜室四周可设置缓冲区，为环形走廊或缓冲房间，属关键区域一部分。缓冲区建设要求同三级生物安全防护试验室。第73页第73页3.3安全装置及特殊设备 n同三级生物安全防护试验室第74页第74页3.4 通风空调na)试验区必须保持负压程度最高，其相对压强不得高于80Pa；试验区、化学消毒淋浴室、内更衣室、淋浴室和外更衣室相对压强依次增高，相邻房间之间保持10Pa15Pa压差。关键区域空气洁净度以七级至八级为宜。b)除上述条款外，其它与本原则6.4.2.4中各款要求相同。第75页第75页3.5 安全装置及特殊设备na)主试验室必须设置至少为级生物安全柜。b)进入主试验室工作人员必须穿着正压防护服，由高效过滤器提供保护生命支持系统供应呼吸用气。生命支持系统包括提供超量呼吸气体正压供气装置，报警器和紧急支援气罐。工作服内气压相对周围环境为连续正压。必须为生命支持系统设置自动启动紧急电源。c)除上述条款外，其它与安全柜型试验室安全装置及特殊设备中各款要求相同。第76页第76页3.6 其它n与安全柜型试验室“其它”中各款要求相同。第77页第77页试验脊椎动物生物安全防护试验室 n1.在设计试验脊椎动物生物安全防护试验室时必须同时满足本原则中相应级别生物安全防护试验室和GBl4925试验动物 环境及设施中要求。2.在设计试验脊椎动物生物安全防护试验室时必须充足考虑动物活动本身产生危险(如产气愤溶胶，撕咬抓挠对人危害等)，并在安全操作规程、安全设备和个体防护、试验室设计建设方面采用必要办法。3.使用试验脊椎动物生物安全防护试验室必须与普通动物繁殖设施实行物理隔离。第78页第78页试验脊椎动物生物安全防护试验室n4.三级试验脊椎动物生物安全防护试验室中动物必须置于带有净化通风装置负压箱笼系统内。5.四级试验脊椎动物生物安全防护试验室中动物，在安全柜型试验室中必须置于级生物安全柜中；在穿着正压服型试验室中，工作人员必须穿着正压服，动物则必须置于带有净化通风装置负压箱笼系统内。第79页第79页生物危险标志使用 n1.在二级以上生物安全防护试验室入口明显位置处必须贴有生物危险标志，并标明级别。2.所有盛装传染性物质容器表面明显位置处必须贴有生物危险原则，并按所在生物安全防护试验室级别标明相同级别。第80页第80页一级生物安全防护试验室安全操作规程n1.严禁非工作人员进入试验室。参观试验室等特殊情况须经试验室责任人同意后方可进入。2.接触微生物或含有微生物物品后，脱掉手套后和离开试验室前要洗手。3.严禁在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。4.以移液器吸取液体，严禁口吸。第81页第81页一级生物安全防护试验室安全操作规程n5.制定锋利器具安全操作规程。6.按照试验室安全规程操作，减少溅出和气溶胶产生。7.天天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒。8.所有培养物、废弃物在运出试验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出试验室灭活物品必须放在专用密闭容器内。9.制定有效防鼠防虫办法。第82页第82页二级生物安全防护试验室安全操作规程n常规微生物操作规程中安全操作要点 n1.同一级生物安全防护试验室安全操作规程1-9。n2.试验室入口处须贴上生物危险标志,内部明显位置须贴上相关生物危险信息,包括使用传染性材料名称,责任人姓名和电话号码。第83页第83页二级生物安全防护试验室特殊安全操作规程n1.进行感染性试验时，严禁别人进入试验室，或必须经试验室责任人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫克制剂工作人员必须经试验室责任人同意方可在试验室或动物房内工作。n2.试验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、需要免疫、责任人姓名和电话、进入试验室特殊要求及离开试验室程序。3.工作人员应接受必要免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。第84页第84页二级生物安全防护试验室特殊安全操作规程n4.并依据需要定期搜集血清样本，应有检测汇报，如有问题及时处理。n5.将生物安全程序纳入原则操作规范或生物安全手册，由试验室责任人专门保管，工作人员在进入试验室之前要阅读规范并按照规范要求操作。6.工作人员要接受相关潜在危险知识培训，掌握预防暴露以及暴露后处理程序。每年要接受一次最新培训。7.严格遵守下列要求，预防利器损伤：第85页第85页二级生物安全防护试验室特殊安全操作规程n7.1 除特殊情况(肠道外注射和静脉切开等)外，禁止在试验室使用针、注射器及其它利器。尽也许使用塑料器材代替玻璃器材。7.2 尽也许应用一次性注射器，用过针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。用过针头必须直接放人防穿透容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运输到特定区域消毒，最好进行高压消毒。7.3 尽也许使用无针注射器和其它安全装置。7.4 禁止用手处理破碎玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃容器在丢弃之前必须消毒。第86页第86页二级生物安全防护试验室特殊安全操作规程n8.培养基、组织、体液及其它含有潜在危险性废弃物须放在防漏容器中储存、运送及消毒灭菌。9.试验设备在运出修理或维护前必须进行消毒。10.人员暴露于感染性物质时，及时向试验室责任人汇报，并统计事故通过和处理方案。11.严禁将无关动物带入试验室。第87页第87页三级生物安全防护试验室 n常规微生物操作规程中安全操作要点 与二级生物安全防护试验室要求相同。第88页第88页三级生物安全防护试验室 特殊安全操作规程 n1 试验室门必须关上。2 进入试验室工作人员必须经试验室责任人同意，严禁干扰正在操作或辅助工作人员。严禁免疫耐受和正在使用免疫克制剂工作人员进入试验室；严禁暂时有病或有皮肤破损者在试验室工作；严禁未成年人进入试验室。3 试验室入口处必须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、需要免疫、试验室责任人或其它相关责任人姓名和电话、进入试验室特殊要求及离开试验室程序。第89页第89页三级生物安全防护试验室 特殊安全操作规程n4 建立严格试验室规章制度，相关人员进入试验室时必须明确进入和离开试验室程序。建立出入登记册制度。5 工作人员应接受必要免疫接种和检测(如乙肝疫苗、卡介苗)，并定期进行检查。6 搜集工作人员和其它风险人群基本血清留底，以后依据需要定期搜集血清样本，应有检测汇报，如有问题及时处理。第90页第90页三级生物安全防护试验室 特殊安全操作规程n7 将生物安全程序纳入试验室原则操作规范或生物安全手册，向所有工作人员提供生物安全手册。告知工作人员试验室特殊危险，工作人员要阅读并按照规范要求操作。n8 试验室及其辅助工作人员要接受相关潜在危险知识培训，掌握预防暴露以及暴露后处理程序。每年要接受最新培训。第91页第91页三级生物安全防护试验室 特殊安全操作规程n9 在进入试验室之前，试验室责任人有责任向全部工作人员提供标准微生物学操作规范和技术，仪器操作规范。并由教授提供特殊培训。10 试验所需物品必须经传递窗送入。11 严格恪守以下要求，预防利器损伤：11.1 除肠道外注射和静脉切开等特殊情况，禁止在试验室使用针、注射器及其它利器。尽也许用塑料器材取代玻璃器材。第92页第92页三级生物安全防护试验室 特殊安全操作规程n11.2 注射和吸取感染性液体时必须用一次性注射器，用过针头禁止折弯、折断、剪断、重新盖上帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。应将其放在不锈钢容器中。非一次性利器必须放到厚壁容器中，运到特定区域消毒，最终进行高压消毒。11.3 尽也许使用无针注射器和其它安全装置，装有污染针、利器及破碎玻璃容器在丢弃之前必须进行高压灭菌。禁止用手处理破碎玻璃器具。第93页第93页三级生物安全防护试验室 特殊安全操作规程n12 严禁在开放试验台上和容器内进行感染性物质操作，应在生物安全柜或其它物理设备中进行。生物安全柜内工作台表面用适当消毒剂清理。n13 培养基、组织、体液及其它废弃物必须放在防漏容器中储存及运送。14 感染性试验结束后，尤其在感染性物质溢出和溅出后，应由专业人员或通过正规培训人员进行消毒和清理。试验室中必须备有溢出物处理程序文献。第94页第94页三级生物安全防护试验室 特殊安全操作规程n15 污染设备在运出维修前必须消毒。所有废弃物或物品，在丢弃或重新使用前必须消毒。16 建立试验室事故和暴露汇报系统。感染性物质溢出及暴露事故发生后，必须及时消毒处理，并向试验室责任人汇报，并统计事故过程和处理通过。17 严禁将无关动植物带入试验室。第95页第95页