实验室生物性危害公开课一等奖优质课大赛微课获奖课件.pptx

1實驗室生物性危害生物簡介傳播途徑與健康危害生物安全等級實驗室操作技術安全設備實驗室設計動物實驗第1页第1页2生物植物:不具運動性行光合作用微生物:運動性?光合作用?動物:具運動性無光合作用第2页第2页3微生物病毒(VIRUS)細菌(BACTERIA)真菌(FUNGI)藻類(ALGAE)原生動物(PROTOZOA)第3页第3页4病毒(Virus)20-300 nm (1 nm=10-9 m)濾過性無完整細胞結構核酸+蛋白質外殼絕對寄生第4页第4页5細菌(Bacteria)細胞結構0.5-1um x 2-5 um (1 um=10-6 m)獨立自主第5页第5页6細菌型態 球菌(coccus)第6页第6页7細菌型態 桿菌與螺旋菌桿菌螺旋菌第7页第7页8真菌(Fungi)似植物體缺乏葉綠素本身酵素分解有機物包括：黴菌(mold)、酵母菌(yeast)與蕈類(mushrooms)多細胞或單細胞結構第8页第8页9疾病傳播方式：叮咬或吸入排泄物常以哺乳類動物為宿主(如：鼠如：鼠)節肢動物第9页第9页10高等植物花粉熱第10页第10页11高等動物實驗動物鼠兔貓狗猴等動物咬傷皮屑人畜共同傳染病節肢動物第11页第11页12生物性危害(Biohazards)植物、動物、微生物或是其植物、動物、微生物或是其產產物物可影響人類健康或是造成不舒適具潛在可影響人類健康或是造成不舒適具潛在風險風險生物性危害：感染感染過敏過敏中毒中毒第12页第12页13生物性危害生物性危害感染（感染（Infection）：生物體在人體：生物體在人體內內繁殖生長繁殖生長所致所致(如：流行性感冒、痲疹、肺結核如：流行性感冒、痲疹、肺結核)過敏（過敏（Allergy）：）：生物體以過敏原角色經重生物體以過敏原角色經重覆暴露致使人體免疫系統過度反應所致覆暴露致使人體免疫系統過度反應所致(如：過如：過敏性肺炎、氣喘、過敏性鼻炎敏性肺炎、氣喘、過敏性鼻炎)中毒（中毒（Toxicity）：）：暴露於生物體所暴露於生物體所產產生之毒生之毒素（細菌素（細菌內內毒素、細菌外毒素、真菌毒素）所毒素、細菌外毒素、真菌毒素）所致致(如：發燒、發冷、肺功效受損如：發燒、發冷、肺功效受損)第13页第13页14傳播方式傳播方式血液體液-傷口空氣-離心、氣懸、攪拌、實驗動物噴嚏動物咬傷與接觸實驗室中：第14页第14页15入門須知入門須知接觸生物、接觸生物、產產物、附著物物、附著物潛在危害潛在危害暴露也暴露也许许途徑途徑正確操作方式正確操作方式預防預防办办法法第15页第15页16實驗室危害研究1974丹麥Shinhoj：實驗室人員肝炎發生率為普通人倍1974英國Harrington&Shainnon：肺結核為普通人倍二次傳染：傳染至其它親人或朋友等1973&1978英國-人感染天花第16页第16页17生物安全等級生物安全等級考量原因：人體健康危害、傳播能力、考量原因：人體健康危害、傳播能力、控制控制办办法、治療法、治療办办法法其它：環境與社會衝擊、政治考量其它：環境與社會衝擊、政治考量現有分類：美國現有分類：美國、歐盟、世界衛生組織、歐盟、世界衛生組織、其它國家其它國家(如：加拿大與澳洲如：加拿大與澳洲)等級低等級低 危害低危害低第17页第17页18美國生物安全等級美國生物安全等級Biosafety in microbiological and biomedical laboratories,(CDC)93-8395第一級：普通操作下無第一級：普通操作下無(最低最低)危害者危害者第二級：實驗室中意外感染時含有中档第二級：實驗室中意外感染時含有中档程度健康危害者，如：程度健康危害者，如：influenza virus第18页第18页19美國生物安全等級美國生物安全等級(續續)第三級：臨床診斷教學第三級：臨床診斷教學硕硕士士產產等單位使等單位使用本土或外來物質時，可造成嚴重或致用本土或外來物質時，可造成嚴重或致命疾病者，如：命疾病者，如：Hantaan virus第四級：含有極度危險並可造成大流行第四級：含有極度危險並可造成大流行者，如：者，如：Ebola virus第19页第19页20生物危害管理生物危害管理防範防範办办法：减少或避免實驗室工作人員、其法：减少或避免實驗室工作人員、其它人員與外面環境之暴露它人員與外面環境之暴露初級防範初級防範办办法：法：避免工作人員及實驗環境暴露避免工作人員及實驗環境暴露二級防範二級防範办办法：法：保護實驗室外環境保護實驗室外環境(含社區環境含社區環境)第20页第20页21生物危害管理生物危害管理办办法法實驗室操作程序安全設備：操作櫃、密閉式容器、個人防護具實驗室設計90%操作10%硬體設計與設備實驗室安全第21页第21页22實驗室操作程序實驗室操作程序標準微生物操作程序：所有生物等級標準微生物操作程序：所有生物等級其它操作管理要求：其它操作管理要求：第二級至第四級第二級至第四級高等級涵蓋低等級高等級涵蓋低等級人員訓練人員訓練第22页第22页23標準微生物操作程序標準微生物操作程序實驗進行中門禁管制實驗進行中門禁管制避免避免污污染實驗染實驗產產品品非該實驗室人員暴露非該實驗室人員暴露避免生物物質外洩避免生物物質外洩實驗進行中第23页第23页24標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)洗手接觸具感染性物質、脫掉手套後、離開實驗室前使用具殺菌效果之洗手乳液第24页第24页25標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)严禁飲食、抽煙、處理隱形眼鏡、化妝能够喝水嗎？NO普通常識最易違反第25页第25页26標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)消毒工作檯面天天至少一次發生生物物質洩漏或噴濺後第26页第26页27標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)严禁以口吸取液體第27页第27页28標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)減少噴濺及氣霧減少噴濺及氣霧產產生生第28页第28页29標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)耐用、防漏密閉、可滅菌之容器耐用、防漏密閉、可滅菌之容器第29页第29页30標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)高溫高壓滅菌處理所高溫高壓滅菌處理所有培養物、儲存物及有培養物、儲存物及其它具感染廢棄物其它具感染廢棄物15 pounds 121 C 30 min第30页第30页31標準微生物操作程序標準微生物操作程序(續續)以防穿刺、防洩漏、可密封容器運送尖銳物品與檢體第31页第31页32其它操作管理要求其它操作管理要求(第二級第二級)嚴格門禁：特殊訓練人員進出標示：警告標誌、負責人姓名電話、進出特殊要求工作人員免疫接種與定期檢驗特殊危險物安全手則定期訓練、意外通報無關動物管制小心操作尖銳物品不脫針、不折斷針頭、不回套、單手回套、防穿刺洩漏搜集筒不徒手處理破碎玻璃第32页第32页33其它操作管理要求(第三級)隨時關閉實驗室門確認工作人員熟悉標準操作程序與相關設施須在生物安全操作櫃中處理感染性物質，並宜使用抗污紙墊所有也许遭感染物品(含：實驗衣)均須經消毒後才丟棄、使用或送洗不可有與工作無關之動植物存在第33页第33页34其它操作管理要求(第四級)特殊門禁：上鎖、多人管制、進出時間、登記、緊急應變办法必須經由更衣室(更換所有衣物、手套、鞋)及淋浴室才得進出實驗區域、緊急應變办法物品運送：雙門設備(如：高溫高壓消毒器)自實驗室或生物安全操作櫃中移出具活性第四級物質時：放入兩層密閉防破裂容器中再經消毒處理(如：消毒槽浸泡)第34页第34页35其它操作管理要求(第四級)(續)除須保持活性生物外，其它物質移出前均須高溫高壓滅菌或消毒不得有不相關動植物與衣物完善通報系統：意外、相關疾病與醫療處理、檢疫、隔離等第35页第35页36安全設備：生物安全操作櫃避免暴露於處理微生物過程中所產生噴濺或氣懸物質依是否具人員保護、產品保護、以及完全隔離等分為 I、II、III級第36页第36页37安全設備：生物安全操作櫃(續)物理性阻隔金屬或玻璃板固定式手套空氣阻隔空氣過濾系統紫外線滅菌燈第37页第37页38安全設備：生物安全操作櫃(續)I 級：未過濾向內氣流(75ft/min)人員保護手套或無手套設計操作物未受保護離心器等之置放多被 II 級取代第38页第38页39安全設備：生物安全操作櫃(續)II 級：過濾內向氣流(75ft/min)人員與操作物保護IIA/B3第39页第39页40安全設備：生物安全操作櫃(續)II 級：分為Type A、B1、B2、B3(循環氣流與排出氣流百分比、最小表面風速)第40页第40页41安全設備：生物安全操作櫃(續)II 級應用：生物安全等級第二級：氣霧或噴濺、高濃度生物安全等級第三級生物安全等級第四級+連身正壓工作服IIB2第41页第41页42安全設備：生物安全操作櫃(續)III級：完全氣密式內在負壓手套操作高效率濾材雙層過濾排出物人員、外界環境與操作物最高保護生物安全等級第三、四級第42页第42页43其它安全設備密閉式容器如：安全離心器(预防離心時氣霧外洩)個人防護設備實驗衣物、安全眼鏡、呼吸防護具、手套、面具、鞋第43页第43页44安全設備(第一級)無須特殊防護設備建議穿著實驗衣，以免污染外出服皮膚受傷或出疹時，須戴手套預期噴濺時，使用安全眼鏡或面罩第44页第44页45安全設備(第二級)II 級生物安全操作櫃使用情形：也许產生氣霧或噴濺操作步驟，如：離心、研磨、攪拌、劇烈搖盪或混合、超音波震盪、開啟內外壓差大之感染源容器使用高濃度或大量感染源穿著實驗衣，不可穿至其它非實驗區域，工作單位清洗或丟棄接觸感染源時須戴手套，建議穿戴雙層手套，且不得穿離實驗室操作櫃外有噴濺也许時，須保護臉部第45页第45页46安全設備(第三級)必須使用手套，並穿著實驗衣(同第二級要求)使用 II 或 III 級生物安全操作櫃在操作櫃外作業時，務必使用個人防護設備(如：特殊防護衣物、呼吸防護具、手套、面具)與物理性防護設備(如：安全離心器)第46页第46页47所有活動必須在：III級生物安全操作櫃II級生物安全操作櫃，並穿戴連身式具支持生命系統通風設備之正壓工作服例外，如：設施內已完全消毒未使用第四級生物更衣室內更換實驗衣物，離開更衣室前除去個人防護設備安全設備(第四級)第47页第47页48實驗室設計目的：保護實驗室內與實驗室外工作人員不慎外洩病源時不會導致社區民眾或動物感染設計：將實驗室與其它公用場所分開消毒設備，如：高溫高壓滅菌鍋洗手設備定向氣流通風系統淨化空氣處理系統氣閘式入口設計警示區出入控制獨棟實驗室第48页第48页49實驗動物以動物替换人類為研究對象進行實驗鼠、兔、猴、猩猩等實驗動物房：動物哺育、管理實驗室延伸傳染：生成氣霧、皮膚黏膜接觸、動物咬傷、動物抓傷、實驗後組織或器官切片處理、屍體處理第49页第49页50實驗動物房設計原則向內開啟自動門易於清洗建材與動線規劃(無死角)乾淨/污染緩衝區：減少交互感染非必要不設地板排水口排水口下U型管放置消毒劑專用電梯第50页第50页51實驗動物標準操作原則與標準微生物操作程序類似洗手：操作動物後、脫除手套後、離開動物房前严禁飲食、抽煙、處理隱形眼鏡、化妝小心操作以減少氣霧產生如：清除動物籠中鋪墊物時第51页第51页52實驗動物標準操作原則(續)消毒工作檯面保持關閉大門動物房內廢棄物在丟棄前須高溫高壓滅菌消毒感染性動物屍體：裝入密閉防漏容器後予以焚化第52页第52页53實驗動物特殊操作原則制訂生物安全守則與遵行步驟嚴格門禁：具備生物危害知識符合特殊規定(如：免疫接種)遵循出入步驟無免疫疾病第三級以上(含)：限制小孩、孕婦進入第四級：門鎖非相關之動植物管制第53页第53页54實驗動物特殊操作原則(續)穿著實驗衣或制服，離開時換掉第三級以上(含)：前扣式實驗衣不適當小心使用以及丟棄尖銳物品不可用手直接處理破碎玻璃器皿運送感染性動物、廢棄物等：置於耐用、防漏容器中第54页第54页55實驗動物特殊操作原則(續)人工或機器清洗飼養籠 機器清洗：最後沖洗水溫82 C第二級以上(含)：先須高溫高壓滅菌消毒第三級以上(含)：飼養籠內鋪墊材料在移除或清洗前須先高溫高壓滅菌消毒第三級以上(含)：半封閉式飼養(如：開放式動物籠於抽氣櫃中)第55页第55页56實驗動物特殊操作原則(續)第四級：僅能經更衣室與沐浴室進入動物房更換所有衣物不洗頭者使用頭罩佩戴個人防護設備離開時須沐浴並更換衣物實驗衣物須先滅菌處理再清洗第56页第56页57實驗動物安全設備第二級以上(含)生物安全操作櫃、物理性防護办法、個人防護設備非人類之靈長類動物房：佩戴臉部、眼睛及呼吸道保護設備 處置感染性動物：佩戴手套第57页第57页58實驗動物安全設備(續)第三級：I、II級生物安全操作櫃飼養感染動物依需要配备安全鞋與消毒洗腳池第四級：III級生物安全操作櫃飼養感染動物穿著具通氣維生系統之連身式正壓裝第58页第58页59動物房設施洗手設備第三級以上(含)：腳動、肘動或自動 高溫高壓滅菌設備動物房內廢氣：應排至戶外不得循環至其它房間第三級以上(含)：雙門設計窗戶封死門自動關閉氣體單向流入室內高效率過濾濾材可完全密封式建築以便於燻煙消毒第59页第59页60動物房設施第四級：所有物品須經雙門滅菌室、煙燻室及氣密裝置進出水槽、生物安全操作櫃、地面排水口、滅菌器等排放液體須先以熱消毒後始可排入下水道第60页第60页61第61页第61页62第62页第62页63第63页第63页64第64页第64页65參考資料參考資料Biosafety reference manual,AIHAFundamentals of biosafety,Professional development course,AIHCE 基礎微生物學基礎微生物學,王西華王西華&王進琦王進琦Laboratory-acquired infections,Collins&KennedyInfectious diseases handbook for emergency care personnel,ACGIH微生物及生物醫學實驗室之安全微生物及生物醫學實驗室之安全,行政院衛生行政院衛生署譯署譯第65页第65页