结核分枝杆菌专家讲座.pptx

结核分枝杆菌结核分枝杆菌(M.tuberculosis)(M.tuberculosis)结核分枝杆菌第1页分枝杆菌属主要特点：分枝杆菌属主要特点：直或微弯曲，分枝状生长直或微弯曲，分枝状生长G+,G+,但不易着色但不易着色:细胞壁含有大量脂质细胞壁含有大量脂质又称又称抗酸杆菌抗酸杆菌 (acid-fast bacilli)(acid-fast bacilli)惯用惯用抗酸染色抗酸染色判定，呈判定，呈抗酸染色阳性抗酸染色阳性分枝杆菌属细菌种类繁多，可分为：分枝杆菌属细菌种类繁多，可分为：结核分枝杆菌结核分枝杆菌牛分枝杆菌牛分枝杆菌麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌 结核分枝杆菌第2页一、生物学性状一、生物学性状1.1.形态与染色形态与染色 l细长细长,稍有弯曲稍有弯曲l分枝状分枝状排列或聚集成团排列或聚集成团 l无无鞭毛，无芽胞，有荚膜鞭毛，无芽胞，有荚膜 lMuchMuch颗粒：颗粒：在结核性脓肿在结核性脓肿和痰标本中有时可见非抗和痰标本中有时可见非抗酸性酸性G+G+颗粒颗粒。（。（L L型）型）结核分枝杆菌第3页齐齐-尼尼(Ziehl-Neelsen)(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法抗酸染色法 l以以5 5石炭酸复红石炭酸复红加温染色加温染色l再用再用3 3盐酸酒精盐酸酒精脱色脱色l然后用然后用美蓝美蓝复染复染结果：结果：分枝杆菌呈红色分枝杆菌呈红色 其它细菌和背景物质为其它细菌和背景物质为蓝色蓝色抗酸性是分枝杆菌属主要染色特征，是判别细菌主要指标抗酸性是分枝杆菌属主要染色特征，是判别细菌主要指标结核分枝杆菌第4页罗氏培养基罗氏培养基：乳白色或米黄色，干燥、：乳白色或米黄色，干燥、表面粗糙呈颗粒样或表面粗糙呈颗粒样或菜花状菜花状菌落。菌落。2.2.培养特征培养特征l专性需氧专性需氧l生长迟缓生长迟缓l营养要求高营养要求高结核分枝杆菌第5页3 3生化反应生化反应l不发酵糖类不发酵糖类l耐热触酶试验：结核分枝杆菌（耐热触酶试验：结核分枝杆菌（-）非结核分枝杆菌（非结核分枝杆菌（+）结核分枝杆菌第6页4.4.抵抗力抵抗力 四怕：四怕：四不怕：四不怕：l怕湿热怕湿热 不怕干燥不怕干燥l怕紫外线怕紫外线 不怕酸碱不怕酸碱l怕乙醇怕乙醇 不怕碱性染料不怕碱性染料l怕抗痨药品怕抗痨药品 不怕青霉素不怕青霉素结核分枝杆菌第7页5.5.变异性变异性l形态结构变异：形态结构变异：结核杆菌结核杆菌L L型型：颗粒状、丝状：颗粒状、丝状l毒力变异：毒力变异：卡介苗（卡介苗（BCGBCG）：）：19081908年，年，CalmetteCalmette和和GuerinGuerin将将有有毒毒牛牛分枝杆菌培养在含甘油、胆汁、马铃薯培养分枝杆菌培养在含甘油、胆汁、马铃薯培养基中，经基中，经1313年年230230次次传代而取得传代而取得减毒活疫苗株减毒活疫苗株，用，用于预防结核病。于预防结核病。l耐药性变异：耐药性变异：耐异烟肼及其它抗结核药品结核菌株日益增多耐异烟肼及其它抗结核药品结核菌株日益增多结核分枝杆菌第8页二、致病性和免疫性二、致病性和免疫性（一）（一）致病物质致病物质 1 1.脂质：脂质：磷脂（磷脂（phosphatidephosphatide）索状因子索状因子 (cord factor(cord factor）硫酸脑苷脂硫酸脑苷脂 (sulfatide)(sulfatide)蜡质蜡质 D(wax-D)D(wax-D)2 2.蛋白质蛋白质 3 3.多糖：多糖：荚荚膜膜结核分枝杆菌第9页1 1.脂质：脂质：l磷脂：磷脂：能促进单核细胞增生能促进单核细胞增生,增强菌体蛋白质致增强菌体蛋白质致敏作用敏作用,抑制蛋白酶对病灶组织溶解抑制蛋白酶对病灶组织溶解,形成形成干酪干酪样坏死样坏死；使炎症中巨噬细胞转变为类上皮细胞，；使炎症中巨噬细胞转变为类上皮细胞，从而形成从而形成结核结节结核结节。l索状因子：索状因子：抑制白细胞游走引发抑制白细胞游走引发慢性肉芽肿。慢性肉芽肿。l蜡质蜡质D D：含有佐剂作用含有佐剂作用,可激发机体产生可激发机体产生迟发迟发型型超敏反应。超敏反应。l硫酸脑苷脂：硫酸脑苷脂：使细菌使细菌在吞噬细胞中长久存活。在吞噬细胞中长久存活。结核分枝杆菌第10页2 2.蛋白质蛋白质 与蜡质与蜡质D D结合产生结合产生迟发型超敏反应迟发型超敏反应,并并引发引发组织坏死组织坏死病理过程及全身病理过程及全身中毒症状中毒症状,促进结核结节形成。促进结核结节形成。结核分枝杆菌第11页(二二)所致疾病所致疾病l所致疾病所致疾病结核病结核病以肺结核（痨病）常见以肺结核（痨病）常见l感染方式感染方式呼吸道呼吸道消化道消化道皮肤损伤皮肤损伤结核分枝杆菌第12页1.1.肺部感染肺部感染l原发感染（首次）原发感染（首次）多发生于儿童。多发生于儿童。原原发发综综合合征征 (原原发发病病灶灶淋淋巴巴管管肺肺门门淋淋巴巴结结肺门淋巴结肿大肺门淋巴结肿大)。90%90%以以上上原原发发感感染染形形成成纤纤维维化化或或钙钙化化,不不治治自自愈愈。少数病灶扩散，引发少数病灶扩散，引发肺外结核病。肺外结核病。l继发性感染（再次）继发性感染（再次）多见成人多见成人病灶局限，干酪样坏死、结核结节。病灶局限，干酪样坏死、结核结节。开放性肺结核（痰中含结核杆菌）开放性肺结核（痰中含结核杆菌）结核分枝杆菌第13页2.2.肺外感染肺外感染 经淋巴、血液循环、痰菌被咽入消化道经淋巴、血液循环、痰菌被咽入消化道等引发肺外结核病。等引发肺外结核病。如：结核性脑膜炎如：结核性脑膜炎 泌尿生殖系统结核病泌尿生殖系统结核病 骨与关节结核病骨与关节结核病 肠结核病等肠结核病等结核分枝杆菌第14页结核菌素（结核菌素（OTOT）试验）试验1.1.概念：概念：是应用结核菌素进行皮肤试验是应用结核菌素进行皮肤试验,经过观察局部是否出现经过观察局部是否出现迟发型超敏反应，迟发型超敏反应，判断机体判断机体有没有有没有结核杆菌感染结核杆菌感染和对该菌和对该菌免疫力。免疫力。三、三、免疫性免疫性结核分枝杆菌第15页2.2.结核菌素试剂结核菌素试剂（1 1）旧结核菌素旧结核菌素 (old tuberculin,OT)(old tuberculin,OT)：结核菌蛋白结核菌蛋白（2 2）纯蛋白质衍化物纯蛋白质衍化物 (purified protein(purified protein derivative,PPD),derivative,PPD),是是 OT OT 经三氯醋酸沉淀经三氯醋酸沉淀后纯化物。后纯化物。PPD PPD 有两种：一个用结核分枝杆菌制成有两种：一个用结核分枝杆菌制成 PPD-C PPD-C 和用和用 BCG BCG 制成制成 BCG-PPD BCG-PPD。结核分枝杆菌第16页3.3.方方法法 取取PPD-CPPD-C和和BCG-PPDBCG-PPD各各5 5单位单位,分分别注入两前臂皮内，别注入两前臂皮内，48-72h48-72h后观察后观察结果。结果。结核分枝杆菌第17页4.4.结果与分析结果与分析红肿硬结直径红肿硬结直径（1 1）阳性反应（阳性反应（5mm5mm）-机体已感染过结核分枝机体已感染过结核分枝杆菌或卡介苗接种成功杆菌或卡介苗接种成功（2 2）强阳性反应（强阳性反应（15mm15mm）-可能有活动性结核可能有活动性结核,应深入做其它检验。应深入做其它检验。（3 3）阴性反应（阴性反应（5mm5mm）1 1）未感染过结核分枝杆菌）未感染过结核分枝杆菌 2 2）感染早期）感染早期 3 3）严重结核病患者）严重结核病患者 4 4）患有其它疾病细胞，如麻疹等造成细胞免）患有其它疾病细胞，如麻疹等造成细胞免疫功效低下者；艾滋病；肿瘤；用过免疫抑制剂疫功效低下者；艾滋病；肿瘤；用过免疫抑制剂者。者。结核分枝杆菌第18页5 5.实际应用实际应用(1)(1)选择接种选择接种BCGBCG对象，了解对象，了解BCGBCG接种是否接种是否成功成功(2)(2)流行病学调查流行病学调查(3)(3)婴幼儿结核病诊疗参考婴幼儿结核病诊疗参考(4)(4)细胞免疫功效测定细胞免疫功效测定结核分枝杆菌第19页四四、微生物学检验法、微生物学检验法1 1采集采集标本（痰液）标本（痰液）集菌（集菌（4g/L NaOH4g/L NaOH处理处理15min15min）2 2.涂片镜检：涂片镜检：抗酸染色法抗酸染色法3 3.分离培养（罗氏培养基，分离培养（罗氏培养基，3-43-4周）周）4 4.动物试验（豚鼠）动物试验（豚鼠）5 5.快速诊疗快速诊疗结核分枝杆菌第20页五五、防治标准、防治标准WHOWHO提出控制结核病主要方法：提出控制结核病主要方法：发觉和治疗痰菌阳性患者发觉和治疗痰菌阳性患者 新生儿接种卡介苗新生儿接种卡介苗1.1.预防：预防：卡介苗，结核菌素皮内试验卡介苗，结核菌素皮内试验 2.2.治疗：治疗：标准是早期发觉标准是早期发觉,早期治疗早期治疗,联适用联适用药药,彻底治愈。彻底治愈。惯用药品有异烟肼、利福平、链霉素、惯用药品有异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇等。乙胺丁醇等。结核分枝杆菌第21页