流感医学知识培训专家讲座.pptx

流感流感 Influenza与与禽流感禽流感Avian Influenza流感医学知识培训第1页流感流感侵入人体魔鬼侵入人体魔鬼“Influenza”“被魔鬼侵入被魔鬼侵入”据据WHO提供材料，当前得到确证第提供材料，当前得到确证第1次流感大流行是在次流感大流行是在19欧洲大陆。欧洲大陆。19春，英格兰就发觉了零星流感病人。到春，英格兰就发觉了零星流感病人。到19，欧洲大陆也发，欧洲大陆也发觉少许流感患者。觉少许流感患者。19美国被卷入战争。大批运输船将美国美国被卷入战争。大批运输船将美国士兵从大西洋彼岸运到欧洲。在士兵从大西洋彼岸运到欧洲。在1个多月海上航行期间，个多月海上航行期间，流感病毒在美军士兵中肆虐。幸存士兵又将流感病毒带到流感病毒在美军士兵中肆虐。幸存士兵又将流感病毒带到欧洲战场，引发了欧洲乃至世界流感大流行。欧洲战场，引发了欧洲乃至世界流感大流行。全世界在这次流感大流行中死亡人数高达万（全世界在这次流感大流行中死亡人数高达万（4-54-5千万）千万）西班牙西班牙流感流感。流感医学知识培训第2页流感流感 Influenza今后，流感又有今后，流感又有2 2次世界性大流行次世界性大流行:19571957年年 1958 1958年年 香港香港 亚洲亚洲流感流感 200万万19681968年年 1969 1969年年香港香港 香港流感香港流感 100万万另外，在不一样国家和地域，流感还有较小流行。另外，在不一样国家和地域，流感还有较小流行。19771977俄罗斯流感俄罗斯流感急性呼吸道传染病急性呼吸道传染病:骤发高热、头痛、全身酸痛、乏力及骤发高热、头痛、全身酸痛、乏力及轻微呼吸道症状。轻微呼吸道症状。流感病毒尤其是甲型流感病毒，易发生变异，而且传染性流感病毒尤其是甲型流感病毒，易发生变异，而且传染性强，传输快速，易引发流行强，传输快速，易引发流行epidemic及大流行及大流行pandemic。流感病毒经流感病毒经空气飞沫空气飞沫传输，人群普遍易感。传输，人群普遍易感。流感医学知识培训第3页流感病毒属正粘病毒科，病毒颗粒呈球形，直径为流感病毒属正粘病毒科，病毒颗粒呈球形，直径为80-12080-120nmnm。病毒。病毒基因组是分节段基因组是分节段（甲，乙型毒株含（甲，乙型毒株含8 8个节段，而丙型仅含个节段，而丙型仅含7 7个节段，少一个编码神经氨酸个节段，少一个编码神经氨酸酶蛋白节段），酶蛋白节段），-ssRNA。依据病毒粒依据病毒粒核蛋白（核蛋白（NPNP）和膜蛋白（和膜蛋白（MPMP）抗原特征及抗原特征及其基因特征其基因特征不一样，流感病毒分为甲、乙、丙三型。不一样，流感病毒分为甲、乙、丙三型。乙、丙型只感染人类。乙、丙型只感染人类。甲型流感病毒可感染人及其它物种。又能够分成甲型流感病毒可感染人及其它物种。又能够分成H H1-15 1-15 N N1-91-9亚型。理论上甲型流感可分为亚型。理论上甲型流感可分为135135种之多。种之多。流感病毒流感病毒 Influenza virus流感医学知识培训第4页The envelope contains two species of glycoprotein(haemagglutinin and neuraminidase)and a non-glycosylated protein(M2).Underlying the envelope is a layer of M1(membrane or matrix)protein,which encloses the helical nucleocapsid(eight segments of ssRNA coated with nucleoprotein)and several other proteins.Influenza A virus流感医学知识培训第5页n19181918年年 西班牙流感西班牙流感 H H1 1N N1 1n19571957年年 香港流感香港流感 H H2 2N N2 2n19681968年年 香港流感香港流感 H H3 3N N2 2流感医学知识培训第6页侵入人体魔鬼侵入人体魔鬼流感流感 流感病毒不耐热流感病毒不耐热,在在5656以上环境中数以上环境中数minmin即失去即失去致病力致病力,酸、乙醚、甲醛、紫外线和各种消毒剂如酸、乙醚、甲醛、紫外线和各种消毒剂如酒精、石炭酸和漂白粉等均可使病毒灭活。酒精、石炭酸和漂白粉等均可使病毒灭活。甲型流感病毒命名法甲型流感病毒命名法：型别型别/宿主宿主/分离地点分离地点/毒株序号（指采样时标本号）毒株序号（指采样时标本号）/分离年代（血凝素和神经氨酸酶亚型），如分离年代（血凝素和神经氨酸酶亚型），如:A/A/马马/黑龙江黑龙江/1/98/1/98（H3N8H3N8）流感医学知识培训第7页致病机制致病机制 感染鼻黏膜纤毛上皮细胞感染鼻黏膜纤毛上皮细胞侵犯气管、支气管侵犯气管、支气管碰到以往抗体；碰到以往抗体；若不一样，若不一样，V V进入细胞进入细胞进行性感染，进行性感染，12 d内引发呼吸道炎症内引发呼吸道炎症细细胞病变胞病变坏死、崩解；坏死、崩解；炎症反应有利于血液成份外渗（免疫细胞、抗体等）灭活炎症反应有利于血液成份外渗（免疫细胞、抗体等）灭活V或破坏感染或破坏感染细胞细胞缩短病程；缩短病程；发病早期发病早期13 d鼻咽分泌物中含大量病毒鼻咽分泌物中含大量病毒传染性最强，病程数天；传染性最强，病程数天；少数患者病毒向下呼吸道扩散少数患者病毒向下呼吸道扩散间质性肺炎；间质性肺炎；流感引发死亡多为流感引发死亡多为继发性细菌感染或体质弱并患其它慢性疾病继发性细菌感染或体质弱并患其它慢性疾病。特异性免疫特异性免疫体液免疫体液免疫HAHA抗体结合并覆盖病毒吸附位点；（抗体结合并覆盖病毒吸附位点；（NA抗体抑制抗体抑制V释放）释放）细胞免疫细胞免疫CTLCTL 流感医学知识培训第8页在流感病毒包膜上，有两种糖蛋白突起，血凝素在流感病毒包膜上，有两种糖蛋白突起，血凝素(HA)和神和神经氨酸酶经氨酸酶(NA)流感病毒吸附只与流感病毒吸附只与HA相关，相关，而与而与NA无关无关 （病毒感染性只能被抗血凝素抗血清所中和，不能被抗神病毒感染性只能被抗血凝素抗血清所中和，不能被抗神经氨酸酶抗血清中和经氨酸酶抗血清中和）流感病毒包膜上血凝素流感病毒包膜上血凝素(HA)三聚体结构（三亚基）三聚体结构（三亚基）流感医学知识培训第9页流感病毒包膜上血凝素流感病毒包膜上血凝素(HA)分分4个区个区1.细胞受体结合区：细胞受体结合区：流感病毒流感病毒VAP与宿主细胞表面糖蛋白受体与宿主细胞表面糖蛋白受体唾液酸唾液酸结合，这是结合，这是HA主要功效。其受体结合位点位于三聚体主要功效。其受体结合位点位于三聚体顶端，形似一个裂缝或小口袋。它是病毒包膜糖蛋白顶端，形似一个裂缝或小口袋。它是病毒包膜糖蛋白HA与细与细胞受体相互作用分子基础。胞受体相互作用分子基础。2.融合区：融合区：HA蛋白含有促膜融合活性，但蛋白含有促膜融合活性，但HA只有经蛋白酶切只有经蛋白酶切割产生割产生HA1和和HA2后才含有融合活性。后才含有融合活性。3.跨膜区：跨膜区：在靠近在靠近HA分子羧基端大约有分子羧基端大约有25个个AA残基组成非极残基组成非极性区即性区即HA跨膜区。跨膜区。4.膜内区：膜内区：HA分子羧基端最终分子羧基端最终10个个AA在病毒包膜内表面。在病毒包膜内表面。流感医学知识培训第10页流感医学知识培训第11页流感病毒变异流感病毒变异Error rates of DNA polymerases and RNA polymerasesRNA聚合酶无校正功效聚合酶无校正功效流感医学知识培训第12页流感病毒变异流感病毒变异Recombination between the DNAs of two virus strains流感医学知识培训第13页Template switching mechanism of recombination in ssRNA viruses.流感病毒变异流感病毒变异流感医学知识培训第14页Influenza virus reassortment流感病毒变异流感病毒变异流感医学知识培训第15页流感病毒抗原变异流感病毒抗原变异抗原漂移抗原漂移 antigenic drift 编码表面抗原（编码表面抗原（HA、NA）基因点突变累积造）基因点突变累积造成抗原位点改变，属量变，变异幅度小。成抗原位点改变，属量变，变异幅度小。epidemic流感医学知识培训第16页抗原转变抗原转变 antigenic shift 因为基因组重排造成新亚型出现，属因为基因组重排造成新亚型出现，属质变，变异幅度大。质变，变异幅度大。流感病毒抗原变异流感病毒抗原变异pandemic流感医学知识培训第17页禽流感禽流感(Avian Influenza)Avian Influenza Virus(AIV)n禽类病毒性流行性感冒禽类病毒性流行性感冒 n由由A A型流感病毒引发禽类一个从呼吸系统到严型流感病毒引发禽类一个从呼吸系统到严重全身败血症等多中症狀传染病，禽类在感染重全身败血症等多中症狀传染病，禽类在感染后死亡率很高后死亡率很高 n禽流感病症及发病早期，都与普通流感类似，禽流感病症及发病早期，都与普通流感类似，但发烧可高至但发烧可高至4141度，且较普通流感轻易影响肝度，且较普通流感轻易影响肝功效，也较易引致淋巴細胞減少及呼吸衰竭，功效，也较易引致淋巴細胞減少及呼吸衰竭，甚至甚至多器官功效衰竭而死亡多器官功效衰竭而死亡流感医学知识培训第18页兽医焚烧已感染禽流感鸡鸭尸体兽医焚烧已感染禽流感鸡鸭尸体 法国让泽农民在一家农场检验鸡法国让泽农民在一家农场检验鸡 流感医学知识培训第19页流感医学知识培训第20页美国疾病控制和预防中心公布一张未标明日期彩色电美国疾病控制和预防中心公布一张未标明日期彩色电子显微照片。它显示出子显微照片。它显示出H5N1型禽流感病毒（金黄色）型禽流感病毒（金黄色）在在MDCK细胞（绿色）培养液中活动状态细胞（绿色）培养液中活动状态流感医学知识培训第21页放大放大15万倍万倍H5N1型禽流感病毒电镜照片型禽流感病毒电镜照片流感医学知识培训第22页国际疫情国际疫情地域地域(时间时间)感染数感染数死亡数死亡数越南越南10106 65252泰国泰国30302020柬埔寨柬埔寨7 77 7埃及埃及50502222阿塞拜疆阿塞拜疆8 85 5香港香港20207 7印尼印尼137137112112 土耳其土耳其12124 4人人全球全球 387人感染人感染 死死245人人（从（从/9）禽流感禽流感 /9/10中国大陆中国大陆 25人人 17人人流感医学知识培训第23页流感医学知识培训第24页流感医学知识培训第25页禽流感病毒禽流感病毒于环境中存活情形于环境中存活情形 WHOWHO研研究究指指出出禽禽流流感感病病毒毒能能长长期期存存活活在在受受感感染染禽禽类类粪粪便便、水水和和纸纸巾巾中中，且且在在低低温温环环境境中中存存活活时时间间更更久久，如如在在水水中中于于2222可可生生存存4d4d，00以以下下生生存存30d30d；在在冰冰冻物品冻物品中更可中更可无限期生存无限期生存。流感医学知识培训第26页NATURE|(6 MAR):422流感医学知识培训第27页H5N1H3N2 H1N1基因转变禽人人(H5N1 具具人体人体接收器接收器)猪猪流感医学知识培训第28页传染路径传染路径 n消化道、呼吸道、皮肤损伤和眼结膜等路径，消化道、呼吸道、皮肤损伤和眼结膜等路径，主要主要经由呼吸道粘液或粪便直接接触传染或间经由呼吸道粘液或粪便直接接触传染或间接由污染水及饲料等传播。接由污染水及饲料等传播。n有有教授认为主要是经过粪便中大量病毒粒子污教授认为主要是经过粪便中大量病毒粒子污染空气而传输，人员和车辆往來是传输禽流感染空气而传输，人员和车辆往來是传输禽流感主要原因，另外吸血昆虫可传播病毒，带毒种主要原因，另外吸血昆虫可传播病毒，带毒种蛋可進行垂直传输蛋可進行垂直传输。n水棲候水棲候鸟鸟在自然界中在自然界中携帶携帶H H5 5N N1 1病毒最多病毒最多。流感医学知识培训第29页禽流感禽流感潜伏期潜伏期 n感染禽流感感染禽流感临床症状潜伏期从几小時到临床症状潜伏期从几小時到几天不等几天不等n普通发病率高、死亡率低普通发病率高、死亡率低n但高致病力毒株感染时，发病率和死亡但高致病力毒株感染时，发病率和死亡率可达率可达100%100%流感医学知识培训第30页禽流感禽流感症状症状n人人类患上禽流感后，潜伏期普通为类患上禽流感后，潜伏期普通为7(1-4)d以內，以內，早期早期症状与其它流感非常相同，主要表现为发烧、症状与其它流感非常相同，主要表现为发烧、流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛、全身不适时，流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛、全身不适时，部分患者可有结膜炎、恶心、腹痛、腹泻、稀水部分患者可有结膜炎、恶心、腹痛、腹泻、稀水样便等消化道症狀，样便等消化道症狀，通常通常27d內內会自然痊愈会自然痊愈n年纪较大、治疗过迟患者年纪较大、治疗过迟患者病情病情会快速发展成进行会快速发展成进行性肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积性肺炎、急性呼吸窘迫综合征、肺出血、胸腔积液、全血細胞減少、肾衰竭、败血症休克及液、全血細胞減少、肾衰竭、败血症休克及Reye综合征等各种并发症而死亡综合征等各种并发症而死亡 流感医学知识培训第31页禽流感禽流感治治疗疗n以下抗病毒以下抗病毒药剂可抑制流感病毒，使症狀药剂可抑制流感病毒，使症狀减轻病程缩短，应在减轻病程缩短，应在发病早期发病早期24-48h服用，服用，方能有效控制病情方能有效控制病情n金刚胺金刚胺(amantadine):仅对仅对A型流感有效，会型流感有效，会产生神经及肠胃系統副作用，抗药性高，使产生神经及肠胃系統副作用，抗药性高，使用需注意用需注意nRimantadine:仅对仅对A型流感有效，抗药性高型流感有效，抗药性高n克流感克流感(tamiflu):副作用较低副作用较低流感医学知识培训第32页食品安全食品安全n普通只要以普通只要以56加加热热3h、60加热加热30min或或100加热加热1min均可杀灭病毒均可杀灭病毒;n只要只要将鸡肉、鸡蛋等食品确实煮熟食用，将鸡肉、鸡蛋等食品确实煮熟食用，且充分加热就能够降低被感染几率且充分加热就能够降低被感染几率。流感医学知识培训第33页预防办法预防办法n降低与禽类接触降低与禽类接触 n养成良好个人卫生养成良好个人卫生习惯习惯 n切勿切勿食用未烹煮肉类食用未烹煮肉类 n降低出入公共场所降低出入公共场所 n均衡饮食，适当运动，提升本身免疫力均衡饮食，适当运动，提升本身免疫力n出出现疑似症狀，依指示戴口罩就医现疑似症狀，依指示戴口罩就医年年11月月2-3日在北京召开日在北京召开 H5N1 pandemic flu流感医学知识培训第34页世卫组织被指夸大甲流威胁世卫组织被指夸大甲流威胁 建教授组进行调查建教授组进行调查 中新网中新网年年4月月13日电：日电：大约大约1年前，世界卫生组织因甲型年前，世界卫生组织因甲型H1N1流感出现流感出现而发出而发出21世纪首个流感大流行警告，但今后一直有舆论批评世卫世纪首个流感大流行警告，但今后一直有舆论批评世卫受到商业利益影响，夸大甲流威胁。世卫受到商业利益影响，夸大甲流威胁。世卫12日组成教授调查小组，日组成教授调查小组，针对相关争议展开调查。针对相关争议展开调查。世卫尤其从组织以外请来世卫尤其从组织以外请来29位教授，组成国际卫生条例检讨委员会，位教授，组成国际卫生条例检讨委员会，从从12日起，在瑞士日内瓦举行日起，在瑞士日内瓦举行3天成立会议。世卫总干事陈冯富珍天成立会议。世卫总干事陈冯富珍强调，教授小组应是强调，教授小组应是“独立、可信和透明独立、可信和透明”。甲型甲型 H1N1流感流感A H1N1/06/08国际在线专稿：据克罗地亚国家报国际在线专稿：据克罗地亚国家报6月月7日报道，日报道，日前，英国相关部门一项调查显示，日前，英国相关部门一项调查显示，WHO 3名教授从生名教授从生产达菲药厂收受贿赂，有意制造了甲型流感病毒恐慌。产达菲药厂收受贿赂，有意制造了甲型流感病毒恐慌。流感医学知识培训第35页n禽流感病毒致病力改变范围很大。流感病毒禽流感病毒致病力改变范围很大。流感病毒感染引发疾病可能是不显著或是温和一过性感染引发疾病可能是不显著或是温和一过性综合征，甚至是综合征，甚至是100%发病率和发病率和/或死亡率疾或死亡率疾病。病。n疾病症状可能表现在呼吸道、肠道或生殖系疾病症状可能表现在呼吸道、肠道或生殖系统，并随病毒种类、动物种别、龄期、并发统，并随病毒种类、动物种别、龄期、并发感染、周围环境及宿主免疫状态不一样而不感染、周围环境及宿主免疫状态不一样而不一样。一样。n禽流感病毒毒力主要决定于病毒粒子复制速禽流感病毒毒力主要决定于病毒粒子复制速率和血凝素蛋白裂解位点附近率和血凝素蛋白裂解位点附近氨基酸组成氨基酸组成。Avian Influenza Virus,(AIV)检测检测 流感医学知识培训第36页n n临床诊疗：临床诊疗：（1）高致病性禽流感：）高致病性禽流感：暴发时家禽大批急性暴发时家禽大批急性死亡，产蛋停顿，呼吸道症状，头部、颜面死亡，产蛋停顿，呼吸道症状，头部、颜面部和颈部浮肿，无毛部皮肤（冠肉髯、脚部）部和颈部浮肿，无毛部皮肤（冠肉髯、脚部）发绀、肿、出血、坏死，白绿色下痢。发绀、肿、出血、坏死，白绿色下痢。（2）低致病性禽流感：）低致病性禽流感：无症状急性感染，死无症状急性感染，死亡率为亡率为5%15%，产蛋率下降，产蛋率下降5%50%，呼吸道病变、气管水肿、干酪样渗出物、气呼吸道病变、气管水肿、干酪样渗出物、气囊炎，肾脏肿大、尿酸盐从容。囊炎，肾脏肿大、尿酸盐从容。禽流感病毒禽流感病毒检测检测流感医学知识培训第37页n n试验室诊疗试验室诊疗 仅依据临诊症状及剖检病变，极仅依据临诊症状及剖检病变，极难确诊，必须进行试验室诊疗。难确诊，必须进行试验室诊疗。（1）病毒分离）病毒分离（2）血清学检测）血清学检测（3）病毒定型及定性）病毒定型及定性（4）致病性（毒力）测定）致病性（毒力）测定（5）基因诊疗）基因诊疗 禽流感病毒禽流感病毒检测检测流感医学知识培训第38页生物安全试验室生物安全试验室P1试验室试验室研究病毒研究病毒危险性较低危险性较低，试验人员连口罩都不，试验人员连口罩都不用带，穿上白大褂就能够了，试验人员在这里很放松；用带，穿上白大褂就能够了，试验人员在这里很放松；P2试验室试验室研究是研究是中度危险病源中度危险病源，像，像肝炎、流感冒肝炎、流感冒等等，等等，要求戴防护性很好口罩；要求戴防护性很好口罩；P3试验室试验室研究是研究是高度危险病毒高度危险病毒，传染性很强，而且无，传染性很强，而且无疫苗，试验人员保护办法要比疫苗，试验人员保护办法要比P1/P2试验室严密得多；试验室严密得多；P4试验室试验室全球级别最高生物安全试验室，研究是全球级别最高生物安全试验室，研究是极度极度危险病毒危险病毒，比如令人谈之色变，比如令人谈之色变Ebola病毒病毒，进入这种试验室工，进入这种试验室工作人员，处于防护服严密保护之下，连空气都不能在试验室作人员，处于防护服严密保护之下，连空气都不能在试验室内呼吸，红色螺旋状管子，是专门用来向室内输送新鲜空气，内呼吸，红色螺旋状管子，是专门用来向室内输送新鲜空气，试验人员一进入试验室，要先屏住呼吸，马上接上这种管子，试验人员一进入试验室，要先屏住呼吸，马上接上这种管子，然后才能呼吸。然后才能呼吸。流感医学知识培训第39页试验室诊疗试验室诊疗 （1）病毒分离）病毒分离 n n取样：取样：取样：取样：喉头、气管、肺、气囊、肝、脾、脑及直肠喉头、气管、肺、气囊、肝、脾、脑及直肠内容物等。（置于加有青霉素内容物等。（置于加有青霉素10000 U/ml，链霉素链霉素10000 U/ml组织培养液或组织培养液或50%葡萄糖磷酸盐缓冲液葡萄糖磷酸盐缓冲液中中4保留或运输，不超出保留或运输，不超出48h。）。）n n接种：接种：接种：接种：用上述溶液将病料制成用上述溶液将病料制成10%乳剂乳剂-70保留保留或或3000 r/m离心离心5min，取上清液用取上清液用0.2-0.45um滤膜滤膜过滤除菌，取滤液过滤除菌，取滤液0.3ml，尿囊腔接种尿囊腔接种9-11日龄日龄SPF鸡胚，每份样品最少接种鸡胚，每份样品最少接种5个鸡胚。个鸡胚。禽流感病毒禽流感病毒检测检测流感医学知识培训第40页试验室诊疗试验室诊疗（1）病毒分离）病毒分离 n n孵化孵化孵化孵化:374d(剔除接种后剔除接种后24h内死亡鸡胚内死亡鸡胚)，置于，置于4 612h杀死鸡胚，吸收尿囊液，同时采取绒毛尿杀死鸡胚，吸收尿囊液，同时采取绒毛尿囊膜。尿囊液中若含有囊膜。尿囊液中若含有AIV时，时，HA试验呈阳性。试验呈阳性。n n判断：判断：判断：判断：若初代尿囊液若初代尿囊液HA试验呈阴性，需再传一代，试验呈阴性，需再传一代，取尿囊液取尿囊液1:10稀释接种稀释接种0.3ml/胚，再呈阴性则判断为胚，再呈阴性则判断为阴性反应；若呈阳性，用阴性反应；若呈阳性，用ND抗血清进行抗血清进行HI试验，若试验，若呈阴性反应时再结合以下血清学诊疗可初步判定为呈阴性反应时再结合以下血清学诊疗可初步判定为AIV感染。感染。禽流感病毒禽流感病毒检测检测流感医学知识培训第41页（2）血清学检测）血清学检测n利用利用AGP(琼脂凝胶扩散试验琼脂凝胶扩散试验)、ELISA方法可检测方法可检测A型流感病毒共有特异性抗体或抗原，已判定标准型流感病毒共有特异性抗体或抗原，已判定标准AIV制备抗原可用检测可疑鸡群血清抗体（此步骤制备抗原可用检测可疑鸡群血清抗体（此步骤可在病毒分离前进行）。可在病毒分离前进行）。n将上述病毒分离时采取鸡胚尿囊膜用将上述病毒分离时采取鸡胚尿囊膜用PBS（pH=7.2）洗净，排尽囊中液体，研磨乳剂，重复冻融洗净，排尽囊中液体，研磨乳剂，重复冻融3次，次，3000r/m离心离心10min，取上清液，用终浓度取上清液，用终浓度0.1%福尔马林经福尔马林经3736h灭活，即可用作灭活，即可用作AGP抗原抗原（3个膜可制做约个膜可制做约1ml抗原）。用已知标准抗血清抗原）。用已知标准抗血清与其进行与其进行AGP试验，判定分离病毒试验，判定分离病毒。禽流感病毒禽流感病毒检测检测流感医学知识培训第42页（3）病毒定型及定性）病毒定型及定性 nH和和N亚型：确定亚型需用已定型（亚型：确定亚型需用已定型（H1H5，N1 N9）一系列单特异性抗血清做一系列单特异性抗血清做HI(血凝抑制血凝抑制)试试验，所以应交专门机构进行验，所以应交专门机构进行。（4）致病性（毒力）测定）致病性（毒力）测定 nHPAIV判定标准（美国家畜卫生协会）判定标准（美国家畜卫生协会）（5）基因诊疗）基因诊疗 利用利用PCR方法直接检出病毒基因，较常规病毒分离方法直接检出病毒基因，较常规病毒分离法速度快，特异性高，而且可克服因野外取料混法速度快，特异性高，而且可克服因野外取料混有其它病毒造成误诊。有其它病毒造成误诊。禽流感病毒禽流感病毒检测检测一些病毒能够与人或动物红细胞发生凝集一些病毒能够与人或动物红细胞发生凝集红细胞凝集反红细胞凝集反应（应（HA）。这种凝集反应克被加入特异性血清所抑制）。这种凝集反应克被加入特异性血清所抑制红细胞凝集抑制试验（红细胞凝集抑制试验（HI）。）。流感医学知识培训第43页