癌基因、抑癌基因和生长因子-专家讲座.pptx

第第 二二 十十 章章 癌基因、抑癌基因与生长因子癌基因、抑癌基因与生长因子Oncogenes,Anti-oncogenesand Growth Factors癌基因、抑癌基因和生长因子-第1页人乳腺癌细胞人乳腺癌细胞（human breast cancer cell）人肺癌细胞人肺癌细胞人肺癌细胞人肺癌细胞癌基因、抑癌基因和生长因子-第2页 肿瘤（肿瘤（肿瘤（肿瘤（tumortumor）良性肿瘤（良性肿瘤（良性肿瘤（良性肿瘤（benignbenign）：不转移）：不转移）：不转移）：不转移 （分裂失控）（分裂失控）（分裂失控）（分裂失控）恶性肿瘤（恶性肿瘤（恶性肿瘤（恶性肿瘤（malignantmalignant）:转移、侵润转移、侵润转移、侵润转移、侵润 上皮组织：癌（上皮组织：癌（上皮组织：癌（上皮组织：癌（carcinomacarcinoma）癌（癌（癌（癌（cancercancer）结缔组织和肌肉：肉瘤（结缔组织和肌肉：肉瘤（结缔组织和肌肉：肉瘤（结缔组织和肌肉：肉瘤（sarcomasarcoma）其它（血液）：白血病等（其它（血液）：白血病等（其它（血液）：白血病等（其它（血液）：白血病等（leukemia)leukemia)癌细胞特征癌细胞特征癌基因、抑癌基因和生长因子-第3页生长层叠生长层叠癌基因、抑癌基因和生长因子-第4页侵润性侵润性侵润性侵润性(invasive)(invasive)；扩散性（；扩散性（；扩散性（；扩散性（diffusiblediffusible良性肿瘤（良性肿瘤（良性肿瘤（良性肿瘤（benignbenign）和恶性肿瘤（和恶性肿瘤（和恶性肿瘤（和恶性肿瘤（malignantmalignant）侵润性和扩散性侵润性和扩散性癌基因、抑癌基因和生长因子-第5页转移转移Metastasis癌基因、抑癌基因和生长因子-第6页癌基因、抑癌基因与生长因子关系癌基因、抑癌基因与生长因子关系癌基因癌基因抑癌基因抑癌基因细胞细胞细胞细胞生长因子生长因子正调控正调控正调控正调控负调控负调控负调控负调控产物产物产物产物癌基因、抑癌基因和生长因子-第7页第第 一一 节节 癌癌 基基 因因OncogenesOncogenes癌基因、抑癌基因和生长因子-第8页癌基因发觉癌基因发觉19101910年年年年Rous Rous 发觉发觉发觉发觉鸡肉瘤病毒鸡肉瘤病毒鸡肉瘤病毒鸡肉瘤病毒(RSV-RNARSV-RNA反转录病毒）。反转录病毒）。反转录病毒）。反转录病毒）。19631963年年年年DulbecoDulbeco发觉发觉发觉发觉正常细胞正常细胞正常细胞正常细胞感染病毒可感染病毒可感染病毒可感染病毒可恶变为癌细恶变为癌细恶变为癌细恶变为癌细胞胞胞胞。19701970年年年年BaltimoreBaltimore发觉病毒感染宿主时，发觉病毒感染宿主时，发觉病毒感染宿主时，发觉病毒感染宿主时，RNARNA经逆转经逆转经逆转经逆转录酶合成录酶合成录酶合成录酶合成DNADNA并整合到宿主并整合到宿主并整合到宿主并整合到宿主DNADNA，从而造成宿主细，从而造成宿主细，从而造成宿主细，从而造成宿主细胞恶性转化。胞恶性转化。胞恶性转化。胞恶性转化。19701970年年年年MareinMarein证实细胞恶性转化与证实细胞恶性转化与证实细胞恶性转化与证实细胞恶性转化与RSVRSV基因组中一基因组中一基因组中一基因组中一个特定基因个特定基因个特定基因个特定基因srcsrc相关，该基因被命名为相关，该基因被命名为相关，该基因被命名为相关，该基因被命名为病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因（viral oncogene,v-oncviral oncogene,v-onc）,即即即即v-srcv-src。癌基因、抑癌基因和生长因子-第9页l l 1976年年Bishop证实证实正常细胞正常细胞中存在与中存在与v-oncogene同源序列同源序列细胞癌基因细胞癌基因(cellular oncogene,c-onc)。与。与v-src对应对应者名为者名为c-src。l l 80年代初年代初Weinberg 等几个试验室经过等几个试验室经过转染试验证实人体细胞中转染试验证实人体细胞中癌基因癌基因H-ras。l l 现已发觉现已发觉100各种各种oncs。癌基因、抑癌基因和生长因子-第10页Bishope,Varmous：劳氏肉瘤病毒怎样使正：劳氏肉瘤病毒怎样使正常细胞转化为恶性生长？常细胞转化为恶性生长？研究表明：劳氏肉瘤病毒致癌能力与病毒基研究表明：劳氏肉瘤病毒致癌能力与病毒基因组单个基因相关，即因组单个基因相关，即src基因。基因。src基因本是正常细胞基因组一部分（原癌基因本是正常细胞基因组一部分（原癌基因），被病毒基因），被病毒“劫持劫持”后，病毒则含有致后，病毒则含有致癌能力。癌能力。癌基因、抑癌基因和生长因子-第11页Bishop和和Varmus1989年诺贝尔生理学和医学奖年诺贝尔生理学和医学奖BishopVarmus癌基因、抑癌基因和生长因子-第12页 美国毕晓普和瓦慕斯等人研究表明：动物体内美国毕晓普和瓦慕斯等人研究表明：动物体内美国毕晓普和瓦慕斯等人研究表明：动物体内美国毕晓普和瓦慕斯等人研究表明：动物体内癌基因不是来自病毒，而是因为在动物正常细癌基因不是来自病毒，而是因为在动物正常细癌基因不是来自病毒，而是因为在动物正常细癌基因不是来自病毒，而是因为在动物正常细胞基因中原来就存在一个庞大癌基因族，正常胞基因中原来就存在一个庞大癌基因族，正常胞基因中原来就存在一个庞大癌基因族，正常胞基因中原来就存在一个庞大癌基因族，正常情况下这些情况下这些情况下这些情况下这些原癌基因原癌基因原癌基因原癌基因是不活跃，但当受到病毒是不活跃，但当受到病毒是不活跃，但当受到病毒是不活跃，但当受到病毒入侵或碰到物理、化学等原因作用时，就可能入侵或碰到物理、化学等原因作用时，就可能入侵或碰到物理、化学等原因作用时，就可能入侵或碰到物理、化学等原因作用时，就可能被激活，突变为癌基因。这也就解释了化学污被激活，突变为癌基因。这也就解释了化学污被激活，突变为癌基因。这也就解释了化学污被激活，突变为癌基因。这也就解释了化学污染、吸烟、放射线辐射等原因致癌原因染、吸烟、放射线辐射等原因致癌原因染、吸烟、放射线辐射等原因致癌原因染、吸烟、放射线辐射等原因致癌原因。Bishop和和Varmus1989年诺贝尔生理学和医学奖年诺贝尔生理学和医学奖癌基因、抑癌基因和生长因子-第13页癌基因、抑癌基因和生长因子-第14页癌基因癌基因(oncogene)(oncogene)细胞内控制细胞生长和分化基因，它细胞内控制细胞生长和分化基因，它结构结构异常或表示异常异常或表示异常，能够，能够引发细胞癌变引发细胞癌变。癌基因癌基因癌基因癌基因病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因病毒癌基因(v-oncogenev-oncogene)细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因(c-oncogene(c-oncogene)癌基因、抑癌基因和生长因子-第15页1.病毒癌基因病毒癌基因(virus oncogene,V-onc)一、病毒癌基因一、病毒癌基因存在于存在于病毒基因组中癌基因病毒基因组中癌基因，它不编码，它不编码病毒结组成份，对病毒复制也没有作用，病毒结组成份，对病毒复制也没有作用，但能够使细胞连续增殖。但能够使细胞连续增殖。癌基因、抑癌基因和生长因子-第16页2.2.病毒癌基因发觉病毒癌基因发觉19071907年，年，年，年，Peyton Rous Peyton Rous从母鸡身上恶性结缔组织（肉瘤）中提取滤液，接种从母鸡身上恶性结缔组织（肉瘤）中提取滤液，接种从母鸡身上恶性结缔组织（肉瘤）中提取滤液，接种从母鸡身上恶性结缔组织（肉瘤）中提取滤液，接种到健康鸡体内，鸡患上一样肿瘤。到健康鸡体内，鸡患上一样肿瘤。到健康鸡体内，鸡患上一样肿瘤。到健康鸡体内，鸡患上一样肿瘤。19101910年，年，年，年，RousRous从鸡肉瘤滤液中发觉了第从鸡肉瘤滤液中发觉了第从鸡肉瘤滤液中发觉了第从鸡肉瘤滤液中发觉了第一个逆转录病毒（一个逆转录病毒（一个逆转录病毒（一个逆转录病毒（retrovirusretrovirus），即），即），即），即RousRous肉瘤病毒（肉瘤病毒（肉瘤病毒（肉瘤病毒（Rous sarcoma virusRous sarcoma virus，RSVRSV），并证实该鸡肉瘤滤液可诱发新肿瘤，推测），并证实该鸡肉瘤滤液可诱发新肿瘤，推测），并证实该鸡肉瘤滤液可诱发新肿瘤，推测），并证实该鸡肉瘤滤液可诱发新肿瘤，推测RSVRSV是诱发鸡肉瘤原因。是诱发鸡肉瘤原因。是诱发鸡肉瘤原因。是诱发鸡肉瘤原因。当初，当初，当初，当初，RoseRose虽对虽对虽对虽对RSVRSV怎样引发肿瘤并不清楚，但因开创了病毒与肿瘤发生怎样引发肿瘤并不清楚，但因开创了病毒与肿瘤发生怎样引发肿瘤并不清楚，但因开创了病毒与肿瘤发生怎样引发肿瘤并不清楚，但因开创了病毒与肿瘤发生关系研究而取得了关系研究而取得了关系研究而取得了关系研究而取得了19661966年诺贝尔医学与生理学奖年诺贝尔医学与生理学奖年诺贝尔医学与生理学奖年诺贝尔医学与生理学奖。RousRousHugginsHuggins癌基因、抑癌基因和生长因子-第17页3.病毒基因组结构病毒基因组结构PromoterPromoter LTR LTR gag gag pol pol env env srcsrc LTR LTR 长末端长末端长末端长末端重复序列重复序列重复序列重复序列癌基因癌基因癌基因癌基因正常病毒基因正常病毒基因正常病毒基因正常病毒基因病毒病毒病毒病毒关键蛋白关键蛋白关键蛋白关键蛋白逆转录逆转录逆转录逆转录酶和整合酶酶和整合酶酶和整合酶酶和整合酶病毒病毒病毒病毒 外膜蛋白外膜蛋白外膜蛋白外膜蛋白酪氨酸激酶酪氨酸激酶酪氨酸激酶酪氨酸激酶EnhancerEnhancer癌基因、抑癌基因和生长因子-第18页4.4.病毒癌基因形成病毒癌基因形成癌基因、抑癌基因和生长因子-第19页一些肿瘤相关病毒一些肿瘤相关病毒 癌基因、抑癌基因和生长因子-第20页二、细胞癌基因二、细胞癌基因1.1.细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因细胞癌基因(cellular-oncogene,C-onc)(cellular-oncogene,C-onc)存在于生物正常细胞基因组中癌基因，或存在于生物正常细胞基因组中癌基因，或存在于生物正常细胞基因组中癌基因，或存在于生物正常细胞基因组中癌基因，或称原癌基因称原癌基因称原癌基因称原癌基因(proto-oncogenes,pro-onc)(proto-oncogenes,pro-onc)。未。未。未。未激活癌基因，促进正常细胞生长、增殖、分化、激活癌基因，促进正常细胞生长、增殖、分化、激活癌基因，促进正常细胞生长、增殖、分化、激活癌基因，促进正常细胞生长、增殖、分化、发育。发育。发育。发育。原癌基因原癌基因癌基因（癌基因（oncogeneoncogene）突变突变癌基因、抑癌基因和生长因子-第21页1.v-onc通常丢失通常丢失c-onc两端一些序列两端一些序列2.v-onc没有内含子没有内含子3.v-onc外显子与同源外显子与同源c-onc也有微小差异也有微小差异4.v-onc出现碱基取代或缺失较出现碱基取代或缺失较c-onc常见常见病毒癌基因病毒癌基因v-onc 与细胞癌基因与细胞癌基因c-onc差异差异癌基因、抑癌基因和生长因子-第22页2.2.细胞癌基因特点细胞癌基因特点广泛存在广泛存在广泛存在广泛存在于生物界中；于生物界中；于生物界中；于生物界中；基因序列基因序列基因序列基因序列高度保守高度保守高度保守高度保守；作用经过其作用经过其作用经过其作用经过其产物蛋白质产物蛋白质产物蛋白质产物蛋白质来表达；来表达；来表达；来表达；被激活被激活被激活被激活后，形成癌性细胞转化基因。后，形成癌性细胞转化基因。后，形成癌性细胞转化基因。后，形成癌性细胞转化基因。癌基因、抑癌基因和生长因子-第23页3.3.细胞癌基因分类及其产物细胞癌基因分类及其产物依据原癌基因表示产物在细胞中定位和功效依据原癌基因表示产物在细胞中定位和功效依据原癌基因表示产物在细胞中定位和功效依据原癌基因表示产物在细胞中定位和功效分为：分为：分为：分为：1.1.srcsrc家族家族家族家族 酪氨酸蛋白激酶酪氨酸蛋白激酶酪氨酸蛋白激酶酪氨酸蛋白激酶2.2.rasras家族家族家族家族 P21 P21（信号传导体信号传导体信号传导体信号传导体）3.3.mycmyc家族家族家族家族 核内核内核内核内DNADNA结合蛋白结合蛋白结合蛋白结合蛋白4.4.sissis家族家族家族家族 P28(P28(类人血小板源类人血小板源类人血小板源类人血小板源生长因子生长因子生长因子生长因子)5.5.mybmyb家族家族家族家族 核内核内核内核内转录因子转录因子转录因子转录因子癌基因、抑癌基因和生长因子-第24页当前发觉只一个基因，即当前发觉只一个基因，即当前发觉只一个基因，即当前发觉只一个基因，即c-c-sissis。定位：定位：定位：定位：人类第人类第人类第人类第2222号染色体，号染色体，号染色体，号染色体，5 5个外显子；个外显子；个外显子；个外显子；编码：编码：编码：编码：241241个氨基酸蛋白质（个氨基酸蛋白质（个氨基酸蛋白质（个氨基酸蛋白质（p28p28）；）；）；）；特点：特点：特点：特点：与人类血小板衍生生长因子（与人类血小板衍生生长因子（与人类血小板衍生生长因子（与人类血小板衍生生长因子（PDGFPDGF）有）有）有）有87%87%同源性，同源性，同源性，同源性，可与可与可与可与PDGFPDGF受体结合。受体结合。受体结合。受体结合。Sis癌家族癌家族癌基因、抑癌基因和生长因子-第25页PDGF/sisPDGF/sis作用：作用：作用：作用：PDGFPDGF能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞增能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞增能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞增能促进结缔组织细胞及神经胶质细胞增殖，故殖，故殖，故殖，故c-c-sissis作用于作用于作用于作用于PDGFRPDGFR，可，可，可，可刺激细胞生长及转化刺激细胞生长及转化刺激细胞生长及转化刺激细胞生长及转化。癌基因、抑癌基因和生长因子-第26页Erb癌家族癌家族表示产物：表示产物：细胞骨架蛋白细胞骨架蛋白作用：作用：在细胞运动、分裂、信息传递、能在细胞运动、分裂、信息传递、能量转换、代谢调控以及维持细胞形态方面量转换、代谢调控以及维持细胞形态方面含有主要作用。含有主要作用。癌基因、抑癌基因和生长因子-第27页人人人人erb-Berb-B编码是编码是编码是编码是“掐头掐头掐头掐头”表皮生长因子表皮生长因子表皮生长因子表皮生长因子(EGF)(EGF)受体，这个受体，这个受体，这个受体，这个“截短截短截短截短”受体和其配体受体和其配体受体和其配体受体和其配体-表皮生长因子长久结合，从而可永远向细胞表皮生长因子长久结合，从而可永远向细胞表皮生长因子长久结合，从而可永远向细胞表皮生长因子长久结合，从而可永远向细胞内传导促进生长信号。内传导促进生长信号。内传导促进生长信号。内传导促进生长信号。与野生型受与野生型受与野生型受与野生型受体相比，跨体相比，跨体相比，跨体相比，跨膜区域无改膜区域无改膜区域无改膜区域无改变，但受体变，但受体变，但受体变，但受体两端变短，两端变短，两端变短，两端变短，尤其是全部尤其是全部尤其是全部尤其是全部细胞外结构细胞外结构细胞外结构细胞外结构区域都被删区域都被删区域都被删区域都被删除。除。除。除。癌基因、抑癌基因和生长因子-第28页癌基因、抑癌基因和生长因子-第29页定位：定位：定位：定位：c-c-srcsrc定位于第定位于第定位于第定位于第2020号染色体，号染色体，号染色体，号染色体，1717个外显子个外显子个外显子个外显子编码：编码：编码：编码：60kDa 60kDa蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质,具酪氨酸蛋白激酶具酪氨酸蛋白激酶具酪氨酸蛋白激酶具酪氨酸蛋白激酶 (tyrosine protein kinase (tyrosine protein kinase，TPK)TPK)活性。活性。活性。活性。特点：特点：特点：特点：有一个有一个有一个有一个250250个氨基酸组成同源结构区，个氨基酸组成同源结构区，个氨基酸组成同源结构区，个氨基酸组成同源结构区，其表示产物均含有其表示产物均含有其表示产物均含有其表示产物均含有TPKTPK活性。活性。活性。活性。作用：作用：作用：作用：经过激酶磷酸化作用，使其结构发生改经过激酶磷酸化作用，使其结构发生改经过激酶磷酸化作用，使其结构发生改经过激酶磷酸化作用，使其结构发生改变，增加激酶对底物活性，加速生长信号在胞内传递，变，增加激酶对底物活性，加速生长信号在胞内传递，变，增加激酶对底物活性，加速生长信号在胞内传递，变，增加激酶对底物活性，加速生长信号在胞内传递，与细胞无限生长关系亲密。与细胞无限生长关系亲密。与细胞无限生长关系亲密。与细胞无限生长关系亲密。src家族家族 癌基因、抑癌基因和生长因子-第30页 癌基因、抑癌基因和生长因子-第31页ras家族家族数量：数量：数量：数量：H-rasH-ras、K-rasK-ras、N-rasN-ras H H、K-rasK-ras分别来自大鼠肉瘤病毒分别来自大鼠肉瘤病毒分别来自大鼠肉瘤病毒分别来自大鼠肉瘤病毒HarveyHarvey、KirstenKirsten株株株株 N-ras N-ras从入神经母细胞瘤从入神经母细胞瘤从入神经母细胞瘤从入神经母细胞瘤(neuroblastoma)(neuroblastoma)中取得中取得中取得中取得 编码：编码：编码：编码：4 4个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成，蛋白质为蛋白质为蛋白质为蛋白质为21Kd21Kd特点特点特点特点：编码氨基酸次序有：编码氨基酸次序有：编码氨基酸次序有：编码氨基酸次序有8585同源性，主要同源性，主要同源性，主要同源性，主要 位于细胞膜内侧面，属位于细胞膜内侧面，属位于细胞膜内侧面，属位于细胞膜内侧面，属GG蛋白蛋白蛋白蛋白作用：作用：作用：作用：参加细胞增殖信号细胞内转导过程，是维参加细胞增殖信号细胞内转导过程，是维参加细胞增殖信号细胞内转导过程，是维参加细胞增殖信号细胞内转导过程，是维 持细胞生长和分化主要信号转换器。持细胞生长和分化主要信号转换器。持细胞生长和分化主要信号转换器。持细胞生长和分化主要信号转换器。癌基因、抑癌基因和生长因子-第32页rasras与与与与GTPGTP结合时为活化状态，结合时为活化状态，结合时为活化状态，结合时为活化状态，GTPGTP水解后，水解后，水解后，水解后，rasras与与与与GDPGDP结合形式为非活化状态。结合形式为非活化状态。结合形式为非活化状态。结合形式为非活化状态。癌基因、抑癌基因和生长因子-第33页Myc癌家族癌家族mycmyc基因是较早发觉一组癌基因，包含基因是较早发觉一组癌基因，包含基因是较早发觉一组癌基因，包含基因是较早发觉一组癌基因，包含C-myc,N-myc,L-C-myc,N-myc,L-myc,myc,分别定位于分别定位于分别定位于分别定位于8 8号染色体号染色体号染色体号染色体,2,2号染色体和号染色体和号染色体和号染色体和1 1号染色体。与之号染色体。与之号染色体。与之号染色体。与之同源病毒癌基因存在于同源病毒癌基因存在于同源病毒癌基因存在于同源病毒癌基因存在于MC29MC29及其它一些含有高度致癌性及其它一些含有高度致癌性及其它一些含有高度致癌性及其它一些含有高度致癌性猿逆转录病毒中。猿逆转录病毒中。猿逆转录病毒中。猿逆转录病毒中。编码：编码：编码：编码：3 3个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成，个外显子组成，Exon 1Exon 1不编码，缺乏不编码，缺乏不编码，缺乏不编码，缺乏ATGATG，但，但，但，但 多个终止密码子；另外两个外显子表示多个终止密码子；另外两个外显子表示多个终止密码子；另外两个外显子表示多个终止密码子；另外两个外显子表示62-64kDa62-64kDa或或或或66-66-67kDa67kDa蛋白蛋白蛋白蛋白 特点：特点：特点：特点：位于核内，属于位于核内，属于位于核内，属于位于核内，属于DNADNA结合蛋白类，与结合蛋白类，与结合蛋白类，与结合蛋白类，与DNADNA复制起动复制起动复制起动复制起动相关相关相关相关mybmyb家族编码产物本身就是反式作用因子。家族编码产物本身就是反式作用因子。家族编码产物本身就是反式作用因子。家族编码产物本身就是反式作用因子。作用：作用：作用：作用：两个家族癌基因产物都位于细胞核内，可与一些特两个家族癌基因产物都位于细胞核内，可与一些特两个家族癌基因产物都位于细胞核内，可与一些特两个家族癌基因产物都位于细胞核内，可与一些特定定定定DNADNA相结合，影响相结合，影响相结合，影响相结合，影响DNADNA复制起动过程或对转录进行调控，复制起动过程或对转录进行调控，复制起动过程或对转录进行调控，复制起动过程或对转录进行调控，从而实现其调整细胞生长、增殖、分化目标。从而实现其调整细胞生长、增殖、分化目标。从而实现其调整细胞生长、增殖、分化目标。从而实现其调整细胞生长、增殖、分化目标。癌基因、抑癌基因和生长因子-第34页mycmyc基因家族及其产物可促进细胞增殖基因家族及其产物可促进细胞增殖基因家族及其产物可促进细胞增殖基因家族及其产物可促进细胞增殖,永生永生永生永生化化化化,去分化和转化等去分化和转化等去分化和转化等去分化和转化等,在各种肿瘤形成过程中处于在各种肿瘤形成过程中处于在各种肿瘤形成过程中处于在各种肿瘤形成过程中处于主要地位。主要地位。主要地位。主要地位。mycmyc基因家族中基因家族中基因家族中基因家族中3 3个组员对肿瘤形成及在肿瘤个组员对肿瘤形成及在肿瘤个组员对肿瘤形成及在肿瘤个组员对肿瘤形成及在肿瘤类型方面存在差异。类型方面存在差异。类型方面存在差异。类型方面存在差异。C-mycC-myc扩增与肿瘤发生与转归亲密相关；扩增与肿瘤发生与转归亲密相关；扩增与肿瘤发生与转归亲密相关；扩增与肿瘤发生与转归亲密相关；N-mycN-myc扩增对肿瘤预后判断有意义；扩增对肿瘤预后判断有意义；扩增对肿瘤预后判断有意义；扩增对肿瘤预后判断有意义；L-mycL-myc扩增与肿瘤易患性和预后在不一样肿扩增与肿瘤易患性和预后在不一样肿扩增与肿瘤易患性和预后在不一样肿扩增与肿瘤易患性和预后在不一样肿瘤中表现不一样。瘤中表现不一样。瘤中表现不一样。瘤中表现不一样。近年来研究表明近年来研究表明近年来研究表明近年来研究表明,myc,myc基因产物基因产物基因产物基因产物,尤其是尤其是尤其是尤其是c-mycc-myc在诱导细胞凋亡过程中也起主要作用。在诱导细胞凋亡过程中也起主要作用。在诱导细胞凋亡过程中也起主要作用。在诱导细胞凋亡过程中也起主要作用。癌基因、抑癌基因和生长因子-第35页1.1.细胞外细胞外细胞外细胞外生长因子生长因子生长因子生长因子 sissis-P28-P282.2.跨膜跨膜跨膜跨膜生长因子受体生长因子受体生长因子受体生长因子受体c-c-srcsrc、c-c-ablabl、c-c-mosmos 、c-c-rafraf3.3.细胞内细胞内细胞内细胞内信号传导体信号传导体信号传导体信号传导体:酪氨酸蛋白激酶等：酪氨酸蛋白激酶等：酪氨酸蛋白激酶等：酪氨酸蛋白激酶等：c-c-srcsrc、c-c-ablabl、c-c-rasras、c-c-masmas、H-H-rasras、K-K-rasras、N-N-rasras、crkcrk4.4.核内核内核内核内转录因子转录因子转录因子转录因子 mycmyc、fosfos4.4.原癌基因产物与功效原癌基因产物与功效癌基因、抑癌基因和生长因子-第36页癌基因、抑癌基因和生长因子-第37页癌基因在细胞内分布癌基因在细胞内分布癌基因、抑癌基因和生长因子-第38页正常细胞正常细胞正常细胞正常细胞肿瘤细胞肿瘤细胞肿瘤细胞肿瘤细胞 在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受到在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受到在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受到在正常情况下，病毒癌基因无活性，一旦受到辐射或化学致癌剂影响，就会全部或部分活化，辐射或化学致癌剂影响，就会全部或部分活化，辐射或化学致癌剂影响，就会全部或部分活化，辐射或化学致癌剂影响，就会全部或部分活化，诱导肿瘤发生。诱导肿瘤发生。诱导肿瘤发生。诱导肿瘤发生。三、癌基因活化三、癌基因活化癌基因、抑癌基因和生长因子-第39页1.1.取得开启子与增强子取得开启子与增强子2.2.基因易位基因易位3.3.原癌基因扩增原癌基因扩增4.4.点突变点突变1.1.1.1.出现新表示产物出现新表示产物出现新表示产物出现新表示产物 2.2.2.2.出现过量正常表示产物出现过量正常表示产物出现过量正常表示产物出现过量正常表示产物3.3.3.3.出现异常、截短表示产物出现异常、截短表示产物出现异常、截短表示产物出现异常、截短表示产物癌基因活化机制癌基因活化机制活化结果活化结果活化结果活化结果活化机制活化机制活化机制活化机制癌基因、抑癌基因和生长因子-第40页原癌基因原癌基因转变为转变为癌基因癌基因癌基因、抑癌基因和生长因子-第41页 在各种人源性肿瘤细胞株中在各种人源性肿瘤细胞株中在各种人源性肿瘤细胞株中在各种人源性肿瘤细胞株中c-mybc-myb和和和和c-mycc-myc基因基因基因基因所转录出所转录出所转录出所转录出mRNAmRNA显著增多。原因：显著增多。原因：显著增多。原因：显著增多。原因：取得了强开启取得了强开启取得了强开启取得了强开启子子子子。如禽类白细胞增生病毒如禽类白细胞增生病毒如禽类白细胞增生病毒如禽类白细胞增生病毒(avian leukocytosis (avian leukocytosis virus,ALV)virus,ALV)并不含并不含并不含并不含v-oncv-onc，但，但，但，但ALVALV前病毒整合到宿前病毒整合到宿前病毒整合到宿前病毒整合到宿主正常细胞主正常细胞主正常细胞主正常细胞c-mycc-myc基因上游基因上游基因上游基因上游,而而而而ALVALV两侧两侧两侧两侧LTRLTR同时同时同时同时整合整合整合整合,其其其其5-5-端端端端LTRLTR所含强开启子致使所含强开启子致使所含强开启子致使所含强开启子致使c-mycc-myc癌基因癌基因癌基因癌基因活化而转录出活化而转录出活化而转录出活化而转录出c c-myc-myc mRNA,mRNA,使使使使c-mycc-myc表示表示表示表示比正常时比正常时比正常时比正常时增高几十甚至上百倍增高几十甚至上百倍增高几十甚至上百倍增高几十甚至上百倍。取得开启子与增强子取得开启子与增强子1.插入激活插入激活癌基因、抑癌基因和生长因子-第42页正常细胞正常细胞正常细胞正常细胞肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤1 1肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤2 2肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤3 3肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤4 4用逆转录病毒载体时必需考虑细胞癌基因插入激活病毒使病毒使病毒使病毒使c-mycc-mycc-mycc-myc癌基因活化几个插入方式癌基因活化几个插入方式癌基因活化几个插入方式癌基因活化几个插入方式c-mycc-myc基因表示产物：基因表示产物：基因表示产物：基因表示产物：DNADNA结合蛋白结合蛋白结合蛋白结合蛋白癌基因、抑癌基因和生长因子-第43页 癌基因从染色体正常位置上易位（癌基因从染色体正常位置上易位（癌基因从染色体正常位置上易位（癌基因从染色体正常位置上易位（trnaslocationtrnaslocation）至另一染色体某一位置上，使其调控环境发生改变，至另一染色体某一位置上，使其调控环境发生改变，至另一染色体某一位置上，使其调控环境发生改变，至另一染色体某一位置上，使其调控环境发生改变，从相对静止状态转为激活状态。从相对静止状态转为激活状态。从相对静止状态转为激活状态。从相对静止状态转为激活状态。如早幼粒细胞白血病患者有如早幼粒细胞白血病患者有如早幼粒细胞白血病患者有如早幼粒细胞白血病患者有(15:17)(15:17)染色体易位染色体易位染色体易位染色体易位,而慢性粒细胞白血病患者费城而慢性粒细胞白血病患者费城而慢性粒细胞白血病患者费城而慢性粒细胞白血病患者费城(Philadelphia)(Philadelphia)染色染色染色染色体为体为体为体为9:229:22染色体易位形成。染色体易位形成。染色体易位形成。染色体易位形成。人人人人BurkittBurkitt淋巴瘤细胞中淋巴瘤细胞中淋巴瘤细胞中淋巴瘤细胞中,位于位于位于位于8 8号染色体上号染色体上号染色体上号染色体上c-mycc-myc移移移移到到到到14 14 号染色体上免疫球蛋白重链基因号染色体上免疫球蛋白重链基因号染色体上免疫球蛋白重链基因号染色体上免疫球蛋白重链基因(Immunoglobulin heavy chain gene)(Immunoglobulin heavy chain gene)调整区附近调整区附近调整区附近调整区附近,与与与与该该该该区活性很高开启子连接而受到激活区活性很高开启子连接而受到激活区活性很高开启子连接而受到激活区活性很高开启子连接而受到激活。2.基因易位基因易位癌基因、抑癌基因和生长因子-第44页人人人人BurkittBurkitt淋巴瘤细胞染色体易位淋巴瘤细胞染色体易位淋巴瘤细胞染色体易位淋巴瘤细胞染色体易位t t（8 8：1414），致使），致使），致使），致使c-mycc-myc激活激活激活激活正常正常正常正常8 8 8 8正常正常正常正常14141414缺点缺点缺点缺点8 8 8 8缺点缺点缺点缺点14141414c-mycc-mycc-mycc-mycc-mycc-mycc-mycc-myc癌基因、抑癌基因和生长因子-第45页慢性髓细胞性白病细胞慢性髓细胞性白病细胞慢性髓细胞性白病细胞慢性髓细胞性白病细胞c-ablc-abl基因可从基因可从基因可从基因可从9 9号染色体易位到号染色体易位到号染色体易位到号染色体易位到2222号染色号染色号染色号染色体上体上体上体上bcrbcr基因旁基因旁基因旁基因旁,组成一个含组成一个含组成一个含组成一个含bcrbcr基因调整区和基因调整区和基因调整区和基因调整区和ablabl基因酪氨酸激酶基因酪氨酸激酶基因酪氨酸激酶基因酪氨酸激酶活性区融合基因活性区融合基因活性区融合基因活性区融合基因(fusion gene)(fusion gene)，表示融合蛋白质为，表示融合蛋白质为，表示融合蛋白质为，表示融合蛋白质为结构功效改变结构功效改变结构功效改变结构功效改变蛋白激酶蛋白激酶蛋白激酶蛋白激酶(protein kinase)(protein kinase)。癌基因、抑癌基因和生长因子-第46页mycABLTRLTRmycProvirusmyc mRNA癌基因、抑癌基因和生长因子-第47页mycABProvirusLTRLTRmycmyc mRNA癌基因、抑癌基因和生长因子-第48页mRNAH chain genesAmRNAH chain genesc-mycB癌基因、抑癌基因和生长因子-第49页人类恶性肿瘤中，癌基因扩增（人类恶性肿瘤中，癌基因扩增（人类恶性肿瘤中，癌基因扩增（人类恶性肿瘤中，癌基因扩增（amplificationamplification）现象比较常见。现象比较常见。现象比较常见。现象比较常见。如在人类急性粒细胞白血病如在人类急性粒细胞白血病如在人类急性粒细胞白血病如在人类急性粒细胞白血病HL60 HL60 细胞株、结细胞株、结细胞株、结细胞株、结肠癌、乳腺癌及小细胞肺癌等各种肿瘤细胞中均肠癌、乳腺癌及小细胞肺癌等各种肿瘤细胞中均肠癌、乳腺癌及小细胞肺癌等各种肿瘤细胞中均肠癌、乳腺癌及小细胞肺癌等各种肿瘤细胞中均证实有证实有证实有证实有c-mycc-myc基因扩增；神经母细胞瘤中有基因扩增；神经母细胞瘤中有基因扩增；神经母细胞瘤中有基因扩增；神经母细胞瘤中有N-N-mycmyc扩增等。在一些肿瘤中对应扩增等。在一些肿瘤中对应扩增等。在一些肿瘤中对应扩增等。在一些肿瘤中对应癌基因表示蛋白量癌基因表示蛋白量癌基因表示蛋白量癌基因表示蛋白量增加几十倍到上千倍增加几十倍到上千倍增加几十倍到上千倍增加几十倍到上千倍。3.3.原癌基因扩增原癌基因扩增癌基因、抑癌基因和生长因子-第50页4 点突变（点突变（point mutation）单个碱基突变而单个碱基突变而单个碱基突变而单个碱基突变而改变了编码蛋白改变了编码蛋白改变了编码蛋白改变了编码蛋白质功效使癌基因质功效使癌基因质功效使癌基因质功效使癌基因激活激活激活激活.K-ras K-ras，N-ras N-ras，H-ras H-ras，1212、1313、61 codon61 codon突变突变突变突变癌基因、抑癌基因和生长因子-第51页 当点突变发生后当点突变发生后当点突变发生后当点突变发生后:（1 1）该蛋白活性大大增强；）该蛋白活性大大增强；）该蛋白活性大大增强；）该蛋白活性大大增强；（2 2）该蛋白稳定性增加；）该蛋白稳定性增加；）该蛋白稳定性增加；）该蛋白稳定性增加；（3 3）会引发）会引发）会引发）会引发RNARNA错误剪接而错误剪接而错误剪接而错误剪接而改变蛋白质结构和功改变蛋白质结构和功改变蛋白质结构和功改变蛋白质结构和功效效效效。原癌基因原癌基因原癌基因原癌基因rasras活化活化活化活化。H-rasH-ras基因由基因由基因由基因由356356个碱基组成个碱基组成个碱基组成个碱基组成,其第一个外显子中第其第一个外显子中第其第一个外显子中第其第一个外显子中第1212个密码子（第个密码子（第个密码子（第个密码子（第3535位碱基）位碱基）位碱基）位碱基）在正常细胞中为在正常细胞中为在正常细胞中为在正常细胞中为G,G,而在肿瘤细胞中突变为而在肿瘤细胞中突变为而在肿瘤细胞中突变为而在肿瘤细胞中突变为T T，其编，其编，其编，其编码码码码p21p21蛋白第蛋白第蛋白第蛋白第1212位氨基酸由正常细胞甘氨酸残基突位氨基酸由正常细胞甘氨酸残基突位氨基酸由正常细胞甘氨酸残基突位氨基酸由正常细胞甘氨酸残基突变为肿瘤细胞缬氨酸残基突变引发其编码蛋白质变为肿瘤细胞缬氨酸残基突变引发其编码蛋白质变为肿瘤细胞缬氨酸残基突变引发其编码蛋白质变为肿瘤细胞缬氨酸残基突变引发其编码蛋白质之间微小结构改变能造成功效上极大差异之间微小结构改变能造成功效上极大差异之间微小结构改变能造成功效上极大差异之间微小结构改变能造成功效上极大差异,造成造成造成造成GTPGTP酶活性下降，使酶活性下降，使酶活性下降，使酶活性下降，使p21p21失去结合、水解失去结合、水解失去结合、水解失去结合、水解GTPGTP作用。作用。作用。作用。癌基因、抑癌基因和生长因子-第52页正常正常正常正常细胞细胞细胞细胞H-rasH-ras基因基因基因基因碱基序列碱基序列碱基序列碱基序列:ATG ACG GAA TAT AAG CTG GTG GTG GTG GGC GCC ATG ACG GAA TAT AAG CTG GTG GTG GTG GGC GCC GGGGC GGT GTGC GGT GTG肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤H-rasH-ras碱基序列碱基序列碱基序列碱基序列:ATG ACG GAA TAT AAG CTG GTG GTG GTG GGC GCC ATG ACG GAA TAT AAG CTG GTG GTG GTG GGC GCC GGT TC GGT GTGC GGT GTG正常正常正常正常细胞细胞细胞细胞p21p21蛋白蛋白蛋白蛋白氨基酸序列氨基酸序列氨基酸序列氨基酸序列:Met Thr Glu Tyr Lys Leu Val Val Val Gly Ala