球菌化脓性感染专家讲座.pptx
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1、第六章 球菌 球菌引发化脓性感染,故又称化脓性球球菌引发化脓性感染,故又称化脓性球菌。本章介绍临床最常见兼性厌氧球菌。本章介绍临床最常见兼性厌氧球菌、即葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌菌、即葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属和布兰汉菌属。属、奈瑟菌属和布兰汉菌属。球菌化脓性感染第1页第一节 葡萄球菌属 一、分一、分 类类 主要菌种有金黄色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,主要菌种有金黄色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,头状葡萄球菌,人葡萄球菌和腐生葡萄球菌。头状葡萄球菌,人葡萄球菌和腐生葡萄球菌。人体分离葡萄球菌还有溶血葡萄球菌、沃氏人体分离葡萄球菌还有溶血葡萄球菌、沃氏 葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌
2、、施葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施 氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔 氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌和中间葡萄球菌。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌和中间葡萄球菌。球菌化脓性感染第2页二、临床意义二、临床意义 凝固酶阳性葡萄球菌是主要致病菌,以急性凝固酶阳性葡萄球菌是主要致病菌,以急性 化脓性感染为特征,感染还可扩散或转移。化脓性感染为特征,感染还可扩散或转移。常见感染有疖痈、切口创伤等局部感染和常见感染有疖痈、切口创伤等局部感染和 骨髓炎等全身性感染。致病性与侵袭性
3、酶类骨髓炎等全身性感染。致病性与侵袭性酶类 (如血浆凝固酶如血浆凝固酶)和各种毒素相关。一些菌株和各种毒素相关。一些菌株 还能产生肠毒素引发食物中毒;产生剥脱毒还能产生肠毒素引发食物中毒;产生剥脱毒 素可引发人类烫伤样皮肤综合征;产生毒性素可引发人类烫伤样皮肤综合征;产生毒性 休克综合征毒素引发毒性休克综合征休克综合征毒素引发毒性休克综合征(TSS)(TSS)。球菌化脓性感染第3页 凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘膜凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘膜 正常菌群,是医院感染主要病原菌,正常菌群,是医院感染主要病原菌,其中表皮葡萄球菌引发人工瓣膜性心其中表皮葡萄球菌引发人工瓣膜性心 内膜炎、静脉导管感
4、染、腹膜透析性内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性 腹膜炎、血管移植物感染和人工关节腹膜炎、血管移植物感染和人工关节 感染等;腐生葡萄球菌则是女性尿路感染等;腐生葡萄球菌则是女性尿路 感染主要病原菌,成为主要条件感染主要病原菌,成为主要条件 致病菌和免疫受损患者感染菌。致病菌和免疫受损患者感染菌。球菌化脓性感染第4页感染发生常和细菌产生夹膜多糖或糖感染发生常和细菌产生夹膜多糖或糖萼相关,它能增强细菌与生物性瓣膜、萼相关,它能增强细菌与生物性瓣膜、导管等物质表面粘附或在其表面形成导管等物质表面粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌反抗杀菌物质作一层生物膜而保护细菌反抗杀菌物质作用。葡萄球菌耐药性已演
5、变为医院感用。葡萄球菌耐药性已演变为医院感染和临床治疗棘手问题。染和临床治疗棘手问题。球菌化脓性感染第5页三、微生物特征 直径直径0.50.51.5m1.5m、革兰阳性球菌,、革兰阳性球菌,排列呈葡萄串样,无鞭毛和芽胞。排列呈葡萄串样,无鞭毛和芽胞。能形成荚膜。能形成荚膜。球菌化脓性感染第6页兼性厌氧菌,营养要求不高,最适生长温兼性厌氧菌,营养要求不高,最适生长温度度35353737,最适,最适 pH7.4 pH7.47.67.6。普通培。普通培养基上形成养基上形成2 23mm3mm呈金黄色、白色、柠檬呈金黄色、白色、柠檬色等不透明圆形凸起菌落,血琼脂平板上色等不透明圆形凸起菌落,血琼脂平板上
6、有透明溶血环。能在有透明溶血环。能在10101515NaClNaCl琼脂琼脂中生长,接种于高盐琼脂平板上,有利于中生长,接种于高盐琼脂平板上,有利于菌种检出。菌种检出。球菌化脓性感染第7页抵抗力最强,耐干燥,对各种抗生素和抵抗力最强,耐干燥,对各种抗生素和消毒剂不敏感。生化反应活泼、能分解消毒剂不敏感。生化反应活泼、能分解各种糖类和蛋白质,触酶阳性。各种糖类和蛋白质,触酶阳性。G+CmolG+Cmol为为30303939,携带青霉素酶和乙酰基转移,携带青霉素酶和乙酰基转移酶质粒,能经过转导转移耐药性。酶质粒,能经过转导转移耐药性。球菌化脓性感染第8页四、微生物检验 (一)(一)采取标本应防止正
7、常菌群污染。采取标本应防止正常菌群污染。(二)(二)直接显微镜检验直接显微镜检验 无菌体液如脑脊液和关节穿刺液涂片革无菌体液如脑脊液和关节穿刺液涂片革 兰染色,查见细菌含有主要临床价值;兰染色,查见细菌含有主要临床价值;其它体液标本如同时伴有炎性细胞也其它体液标本如同时伴有炎性细胞也 含有参考价值,可向临床初步汇报含有参考价值,可向临床初步汇报“查查 见属革兰阳性葡萄球菌见属革兰阳性葡萄球菌”。球菌化脓性感染第9页其它体液标本如同时伴有炎性细其它体液标本如同时伴有炎性细胞也含有参考价值,可向临床初胞也含有参考价值,可向临床初步汇报步汇报“查见属革兰阳性葡萄球菌查见属革兰阳性葡萄球菌”。球菌化脓
8、性感染第10页(三)分离培养与判定(三)分离培养与判定 临床标本可接种血平板,污临床标本可接种血平板,污 染标本接种在选择平板上,如甘染标本接种在选择平板上,如甘 露醇高盐平板,血液标本则用肉露醇高盐平板,血液标本则用肉 汤增菌培养基。汤增菌培养基。球菌化脓性感染第11页孵育过夜平板上可见直径约为孵育过夜平板上可见直径约为2-3mm2-3mm,呈金黄色、白色或柠檬色光滑、不呈金黄色、白色或柠檬色光滑、不透明、凸起圆形菌落,有时可见透明、凸起圆形菌落,有时可见-溶血环,挑取菌落作判定试验。溶血环,挑取菌落作判定试验。球菌化脓性感染第12页判定病原性葡萄球菌方法 1 1凝固酶试验凝固酶试验 试验所
9、用血浆为试验所用血浆为 EDTA EDTA抗凝兔血浆。金黄色葡萄球抗凝兔血浆。金黄色葡萄球 菌、中间型葡萄球菌展现阳性反菌、中间型葡萄球菌展现阳性反 应。应。球菌化脓性感染第13页(1)(1)玻片凝固酶试验:金黄色葡萄玻片凝固酶试验:金黄色葡萄 球菌表面有结合凝固酶球菌表面有结合凝固酶(聚集聚集 因子因子),与血浆中纤维蛋白原,与血浆中纤维蛋白原 交联使菌体快速凝聚。交联使菌体快速凝聚。球菌化脓性感染第14页(2)(2)试管凝固酶试验:细菌分泌到试管凝固酶试验:细菌分泌到 菌体外凝固酶被血浆中协菌体外凝固酶被血浆中协 同因子激活形成复合物,再使同因子激活形成复合物,再使 纤维蛋白原转变成纤维蛋
10、白。纤维蛋白原转变成纤维蛋白。球菌化脓性感染第15页2.2.耐热核酸酶试验耐热核酸酶试验 大多数金大多数金 黄色葡萄球菌、施氏葡萄球黄色葡萄球菌、施氏葡萄球 菌、中间葡萄球菌、猪葡萄菌、中间葡萄球菌、猪葡萄 球菌能产生耐热核酸酶。球菌能产生耐热核酸酶。球菌化脓性感染第16页将待测菌过夜肉汤培养物置沸将待测菌过夜肉汤培养物置沸水浴水浴15min15min后,滴加于含甲苯胺蓝后,滴加于含甲苯胺蓝核酸琼脂上已打好直径为核酸琼脂上已打好直径为2 25mm5mm小孔内,置小孔内,置3535孵育,孵育,1h1h后观察后观察结果,绕孔周围蓝色琼脂转变为结果,绕孔周围蓝色琼脂转变为粉红环为阳性。粉红环为阳性。
11、球菌化脓性感染第17页大多数表皮葡萄球菌和金黄色葡大多数表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌为阳性。球菌和猪葡萄球菌为阳性。磷酸酶试验磷酸酶试验 球菌化脓性感染第18页将待测菌种点种在加有硝基酚将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐磷酸盐pH5.6pH5.66.8MH6.8MH琼脂上,琼脂上,孵育孵育181824h24h,菌落周围出现黄,菌落周围出现黄色为阳性。色为阳性。球菌化脓性感染第19页 溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为 试验阳性。试验阳性。将孵育将孵育
12、24h24h斜面培养物接种在含斜面培养物接种在含 吡咯烷酮吡咯烷酮-萘基酰胺肉汤中萘基酰胺肉汤中,35 ,35 孵育孵育2h2h,加入试剂后,加入试剂后2 2分钟内展现分钟内展现 深紫红色为阳性。深紫红色为阳性。吡咯烷酮芳基酰胺酶试验吡咯烷酮芳基酰胺酶试验球菌化脓性感染第20页(四)药品敏感性试验 葡萄球菌属细菌药敏试验选择抗生素:葡萄球菌属细菌药敏试验选择抗生素:A A组组(常规首选药品常规首选药品)为苯唑西林、青为苯唑西林、青 霉素;霉素;B B组组(临床使用主要药品临床使用主要药品)阿齐霉素、阿齐霉素、克林霉素、甲氨苄啶磺胺甲嗯唑、克林霉素、甲氨苄啶磺胺甲嗯唑、万古霉素;万古霉素;球菌化
13、脓性感染第21页C C组组(对对A A组耐受、过敏或无反应者组耐受、过敏或无反应者)用环丙沙星、庆大霉素、氯霉素;用环丙沙星、庆大霉素、氯霉素;U U组组(尿道中分离细菌尿道中分离细菌)用诺氟沙星、用诺氟沙星、呋喃妥因。呋喃妥因。球菌化脓性感染第22页耐甲氧西林葡萄球菌耐甲氧西林葡萄球菌经过药敏试验可筛选出耐甲氧西林葡萄球菌经过药敏试验可筛选出耐甲氧西林葡萄球菌(methecillin resistant Staphylococcus(methecillin resistant Staphylococcus,MRS)MRS),它是携带,它是携带mec Amec A基因、编码低亲和力基因、编码低
14、亲和力青霉素结合蛋白造成耐甲氧西林、全部头孢青霉素结合蛋白造成耐甲氧西林、全部头孢菌素、碳青霉烯类、青霉素类菌素、碳青霉烯类、青霉素类+青霉素酶抑青霉素酶抑制剂抗生素葡萄球菌,该菌是医院内感染制剂抗生素葡萄球菌,该菌是医院内感染主要病原菌,感染多发生于免疫缺点患者、主要病原菌,感染多发生于免疫缺点患者、老弱患者及手术、烧伤后患者、极易造成老弱患者及手术、烧伤后患者、极易造成感染暴发流行,治疗困难、病死率高。感染暴发流行,治疗困难、病死率高。球菌化脓性感染第23页(六六)检验结果分析与汇报检验结果分析与汇报葡萄球菌是临床上常见细菌,经涂葡萄球菌是临床上常见细菌,经涂片染色镜检观察革兰阳性球菌和经
15、典片染色镜检观察革兰阳性球菌和经典菌落形态,若触酶试验阳性者,应先菌落形态,若触酶试验阳性者,应先用凝固酶试验检验,将其分成凝固酶用凝固酶试验检验,将其分成凝固酶阳性和凝固酶阴性细菌。阳性和凝固酶阴性细菌。球菌化脓性感染第24页前者大多为金黄色葡萄球菌,应及前者大多为金黄色葡萄球菌,应及时快速判定和进行药敏试验,尽快时快速判定和进行药敏试验,尽快汇报临床。后者大多是从输液导管、汇报临床。后者大多是从输液导管、人工植入组织中分离出细菌,应人工植入组织中分离出细菌,应视为病原菌,须判定到菌种。视为病原菌,须判定到菌种。球菌化脓性感染第25页对凝固酶阴性葡萄球菌,可先用呋对凝固酶阴性葡萄球菌,可先用
16、呋喃唑酮纸片(喃唑酮纸片(100g/100g/片片),杆菌肽,杆菌肽纸片纸片(0.04u(0.04u片片)作药敏试验和氧化作药敏试验和氧化酶试验,以此与微球菌属细菌判别,酶试验,以此与微球菌属细菌判别,微球菌对杆菌肽敏感而对呋喃唑酮微球菌对杆菌肽敏感而对呋喃唑酮耐药、氧化酶试验阳性,与葡萄球耐药、氧化酶试验阳性,与葡萄球菌属恰好相反。菌属恰好相反。球菌化脓性感染第26页若药品敏感性试验是甲氧西林耐药若药品敏感性试验是甲氧西林耐药菌株,则汇报该菌株耐全部青霉菌株,则汇报该菌株耐全部青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和素、头孢菌素、碳青霉烯类和-内内酰胺药酰胺药-内酰胺酶抑制剂类抗生素,内酰胺酶抑制剂类
17、抗生素,同时对氨基糖苷类,大环内酯类和同时对氨基糖苷类,大环内酯类和四环素类抗生素也耐药。四环素类抗生素也耐药。球菌化脓性感染第27页第二节第二节 链球菌属链球菌属 一、分一、分类类分分类类发发生生改改变变,D群群链链球球菌菌独独立立为为肠肠球球菌菌属属,N群群链链球球菌菌为为乳乳球球菌菌属属。判判定定仍仍用用传传统统分分类类方方法法,分为:分为:1.含有含有A、C、G抗原群抗原群溶血性链球菌。溶血性链球菌。包含包含:菌落直径大于菌落直径大于0.5mmA群化脓群化脓性链球菌性链球菌,C群、群、G群马链球菌和似马链群马链球菌和似马链球菌;球菌;菌落直径小于菌落直径小于0.5mm具具A、C、G抗原
18、,称米勒链球菌,主要包含咽喉炎抗原,称米勒链球菌,主要包含咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌链球菌、中间型链球菌和星座链球菌3种。种。还有溶血和不溶血细菌。还有溶血和不溶血细菌。球菌化脓性感染第28页2.含有含有B抗原群抗原群溶血性链球菌又称溶血性链球菌又称无乳菌。无乳菌。3.溶血或草绿色溶血包含肺炎链球溶血或草绿色溶血包含肺炎链球菌和草绿色链球菌群。菌和草绿色链球菌群。4.不溶血不溶血D群抗原链球菌称牛链球菌。群抗原链球菌称牛链球菌。球菌化脓性感染第29页二、临床意义 化脓性链球菌是致病力最强链球菌化脓性链球菌是致病力最强链球菌,能产生各种毒素、能产生各种毒素、M蛋白、脂磷壁酸和蛋白、脂
19、磷壁酸和链激酶、链道酶、透明质酸酶等致病因链激酶、链道酶、透明质酸酶等致病因子,可引发咽炎、呼吸道感染、丹毒、子,可引发咽炎、呼吸道感染、丹毒、心内膜炎和脑膜炎等,产毒株还可引发心内膜炎和脑膜炎等,产毒株还可引发猩红热。该群细菌可致变态反应性疾病猩红热。该群细菌可致变态反应性疾病如急性肾小球肾炎,风湿热等。如急性肾小球肾炎,风湿热等。球菌化脓性感染第30页无乳链球菌是新生儿脑膜炎常见菌,无乳链球菌是新生儿脑膜炎常见菌,该菌定居于妇女生殖道,故感染多发于出该菌定居于妇女生殖道,故感染多发于出生后生后24h,以肺炎为主。晚发型为产后,以肺炎为主。晚发型为产后7天天至至3月月,以脑膜炎和菌血症为主。
20、以脑膜炎和菌血症为主。B群链球菌对成人侵袭力较弱,主要有群链球菌对成人侵袭力较弱,主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎肾盂肾炎、子宫内膜炎;糖尿病泌尿生殖道糖尿病泌尿生殖道功效失调,肿瘤和免疫功效低下者易受功效失调,肿瘤和免疫功效低下者易受B群链球菌感染。群链球菌感染。球菌化脓性感染第31页C、G群群溶血性链球菌可引发上溶血性链球菌可引发上述相同感染。米勒链球菌是口腔、述相同感染。米勒链球菌是口腔、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常菌群,引发手术和创伤等内源性感染。菌群,引发手术和创伤等内源性感染。球菌化脓性感染第32页肺炎链球菌是大叶性肺炎、支气肺炎链球菌是大叶性肺炎、支
21、气管炎病原菌,还可引发中耳炎、乳管炎病原菌,还可引发中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜菌血症。荚膜突炎、鼻窦炎、脑膜菌血症。荚膜侵袭力起主要作用,溶血素、神经胺侵袭力起主要作用,溶血素、神经胺酸酶也是其主要致病物质。酸酶也是其主要致病物质。球菌化脓性感染第33页草绿色链球菌是人体正常菌群,从草绿色链球菌是人体正常菌群,从血液中分离出该菌常被认为是污染血液中分离出该菌常被认为是污染细菌。然而它可引发瓣膜异常患者细菌。然而它可引发瓣膜异常患者亚急性细菌性心内膜炎。血液链球菌、亚急性细菌性心内膜炎。血液链球菌、温和链球菌、格氏链球菌、口腔链球温和链球菌、格氏链球菌、口腔链球菌、中间型链球菌、常分离自深部脓
22、菌、中间型链球菌、常分离自深部脓肿、尤其是肝和脑脓肿。肿、尤其是肝和脑脓肿。球菌化脓性感染第34页三、微生物特征三、微生物特征直径小于直径小于2m革兰阳性球菌,呈链状排革兰阳性球菌,呈链状排列,无芽胞和动力,形成荚膜。肺炎链球菌列,无芽胞和动力,形成荚膜。肺炎链球菌呈矛尖状,宽端相对尖端向外。呈矛尖状,宽端相对尖端向外。兼性厌氧菌,肺炎链球菌和草绿色链球菌兼性厌氧菌,肺炎链球菌和草绿色链球菌一些菌种需要一些菌种需要CO2:促进其生长。营养要求:促进其生长。营养要求高,须在培养基中加入血液、血清。最适生高,须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度长温度3537,pH7.47.6,血平板上形,血平
23、板上形成灰白色,透明表面光滑小菌落,围绕菌成灰白色,透明表面光滑小菌落,围绕菌落形成落形成、三种特征性溶血现象,液三种特征性溶血现象,液体培养形成絮状和颗粒沉淀。体培养形成絮状和颗粒沉淀。球菌化脓性感染第35页发酵葡萄糖和各种糖,不产气,乳发酵葡萄糖和各种糖,不产气,乳酸为代谢终末产物,触酶阴性。链球酸为代谢终末产物,触酶阴性。链球菌基因菌基因DNA中中G+Cmol为为3134。抗原结构复杂,主要有多糖抗原和蛋抗原结构复杂,主要有多糖抗原和蛋白抗原,前者位于细胞壁以此可将链白抗原,前者位于细胞壁以此可将链球菌分类为球菌分类为A、D、C、D、F、G等等13群。群。本菌属对干燥和消毒剂敏感,除肺本
24、菌属对干燥和消毒剂敏感,除肺炎链球菌外,较少引发细菌耐药性。炎链球菌外,较少引发细菌耐药性。球菌化脓性感染第36页四、微生物检验四、微生物检验1.主要采咽拭标本、痰液、脓汁和血液主要采咽拭标本、痰液、脓汁和血液等标本,采集后在等标本,采集后在2h内送验,对内送验,对B群群溶血链球菌检验,第溶血链球菌检验,第3537周妊娠周妊娠妇女阴道分泌物,置于含多粘菌素妇女阴道分泌物,置于含多粘菌素(10gm1)和萘啶酸和萘啶酸(15ggm1)选择性培养肉汤中孵育选择性培养肉汤中孵育1824h,再,再作分离培养。作分离培养。球菌化脓性感染第37页2.直接显微镜检验标本涂片革兰染色直接显微镜检验标本涂片革兰染
25、色镜检,见链状排列革兰阳性球菌有镜检,见链状排列革兰阳性球菌有助于无正常菌群污染标本,荚膜肿助于无正常菌群污染标本,荚膜肿胀试验用于检验肺炎链球菌。胀试验用于检验肺炎链球菌。3.直接检测抗原咽拭标本直接检测抗原咽拭标本A群和阴群和阴道标本道标本D群链球菌可用抗原检测,群链球菌可用抗原检测,先将标本放于含亚硝酸液中孵育片先将标本放于含亚硝酸液中孵育片刻,用刻,用ELISA方法检测。标本含菌方法检测。标本含菌数少可出现假阴性。数少可出现假阴性。球菌化脓性感染第38页4.分离培养与判定分离培养与判定用血平板培养有利于识别溶血特征和用血平板培养有利于识别溶血特征和深入判定。初代分离需用深入判定。初代分
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