甾体激素类药物的分析专题知识讲座专家讲座.pptx

甾体激素类药品甾体激素类药品分析分析甾体激素类药物的分析专题知识讲座第1页基本结构：环戊烷骈多氢菲基本结构：环戊烷骈多氢菲ABCD12345678910111213141516171819甾体激素类药物的分析专题知识讲座第2页分类：分类：甾体激素甾体激素肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素性激素性激素雄性激素及蛋雄性激素及蛋白同化激素白同化激素孕激素孕激素雌激素雌激素甾体激素类药物的分析专题知识讲座第3页肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素氢化可松氢化可松甾体激素类药物的分析专题知识讲座第4页肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素醋酸地塞米松醋酸地塞米松甾体激素类药物的分析专题知识讲座第5页雄性激素雄性激素丙酸睾酮丙酸睾酮甾体激素类药物的分析专题知识讲座第6页蛋白同化激素蛋白同化激素苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙甾体激素类药物的分析专题知识讲座第7页孕激素孕激素黄体酮黄体酮甾体激素类药物的分析专题知识讲座第8页雌激素雌激素炔雌醇炔雌醇甾体激素类药物的分析专题知识讲座第9页一、结构与性质一、结构与性质 1.肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素主要活性基团主要活性基团性性 质质 4 3 酮酮UV、与羰基试、与羰基试剂反应剂反应 C17 醇酮醇酮基基还还 原原 性性甾体激素类药物的分析专题知识讲座第10页2.雄性激素及蛋白同化激素雄性激素及蛋白同化激素主要活性基团主要活性基团性性 质质 4 3 酮酮UV、与羰基、与羰基试剂反应试剂反应 C17 羟基羟基可成酯可成酯甾体激素类药物的分析专题知识讲座第11页3.孕激素孕激素主要活性基团主要活性基团性性 质质 4 3 酮酮UV、与羰基试、与羰基试剂反应剂反应C17 甲酮基甲酮基与亚硝基铁氰与亚硝基铁氰化纳反应化纳反应C17 乙炔基乙炔基与与AgNO3反应反应甾体激素类药物的分析专题知识讲座第12页4.雌激素雌激素主要活性基团主要活性基团性性 质质A环为环为3OH 苯环苯环UV、与重氮苯、与重氮苯磺酸盐反应磺酸盐反应C17 乙炔基乙炔基与与AgNO3反应反应C17 羟基羟基可成酯可成酯甾体激素类药物的分析专题知识讲座第13页二、判别试验二、判别试验（一）与强酸呈色反应（一）与强酸呈色反应甾体激素甾体激素类药品类药品呈色呈色H2SO4 H3PO4 HClO4 HCl（母核）（母核）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第14页(二二)官能团反应官能团反应肾上腺肾上腺皮质激皮质激素药品素药品呈色呈色四氮唑盐四氮唑盐OH1 C17 醇酮基醇酮基还原性还原性A.呈色反应呈色反应甾体激素类药物的分析专题知识讲座第15页肾上肾上腺皮腺皮质激质激素药素药品品Cu2O橙红色橙红色碱性碱性酒石酸铜酒石酸铜B.沉淀反应沉淀反应Ag黑色黑色氨制硝酸银氨制硝酸银甾体激素类药物的分析专题知识讲座第16页甾酮类甾酮类激素药激素药品品呈色呈色羰基试剂羰基试剂2.C3酮基和酮基和C20酮基酮基惯用羰基试剂：惯用羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼甾体激素类药物的分析专题知识讲座第17页异烟腙（黄色）异烟腙（黄色）睾酮睾酮甾体激素类药物的分析专题知识讲座第18页黄体酮黄体酮异烟双腙（黄色）异烟双腙（黄色）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第19页含有甲酮含有甲酮基或活泼基或活泼亚甲基甾亚甲基甾体激素类体激素类药品药品呈色呈色亚硝基铁氰化纳亚硝基铁氰化纳间二硝基酚间二硝基酚芳香醛芳香醛3.甲酮基甲酮基甾体激素类药物的分析专题知识讲座第20页黄体酮黄体酮蓝紫色蓝紫色亚硝基铁亚硝基铁 氰化纳氰化纳其它甾体其它甾体淡橙色淡橙色不显色不显色甾体激素类药物的分析专题知识讲座第21页黄体酮黄体酮甾体激素类药物的分析专题知识讲座第22页蓝紫色蓝紫色甾体激素类药物的分析专题知识讲座第23页有机氟有机氟F有机破坏有机破坏有机氯有机氯Cl4.有机卤素有机卤素茜素氟蓝茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸亚铈硝酸硝酸硝酸银硝酸银AgCl 呈色呈色 甾体激素类药物的分析专题知识讲座第24页茜素氟蓝茜素氟蓝蓝紫色蓝紫色F-甾体激素类药物的分析专题知识讲座第25页雌激素雌激素类药品类药品红色偶红色偶 氮染料氮染料重氮苯磺酸重氮苯磺酸5.酚羟基酚羟基甾体激素类药物的分析专题知识讲座第26页含炔基含炔基甾体激甾体激素素银盐沉淀银盐沉淀硝酸银硝酸银6.乙炔基乙炔基甾体激素类药物的分析专题知识讲座第27页炔雌醇炔雌醇白白甾体激素类药物的分析专题知识讲座第28页KOH(三三)制备衍生物测定制备衍生物测定m.p.甾体激素类药物的分析专题知识讲座第29页甾体激素类药物的分析专题知识讲座第30页（四）水解产物反应（四）水解产物反应甾体激素类药物的分析专题知识讲座第31页甾体激素类药物的分析专题知识讲座第32页-3-酮酮 240nm苯环苯环 280nm（五）（五）UV法法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第33页33003000cm-130002700cm-119001650cm-116501450cm-11000650cm-1（六）（六）IR法法37503300cm-1甾体激素类药物的分析专题知识讲座第34页醋酸可松醋酸可松结构特征：结构特征：43酮、酮、C17 OHC20 酮基、酮基、C11 酮基、醋酸酯酮基、醋酸酯甾体激素类药物的分析专题知识讲座第35页结构特征：结构特征：43酮、酮、C17 OH C17乙炔基乙炔基炔诺酮炔诺酮甾体激素类药物的分析专题知识讲座第36页结构特征：酚羟基、结构特征：酚羟基、C17 OH C17 乙炔基乙炔基炔雌醇炔雌醇甾体激素类药物的分析专题知识讲座第37页（七）（七）TLC法法 主要用于甾体激素类药品主要用于甾体激素类药品制剂判别制剂判别 方法：对照品法方法：对照品法 要求供试品溶液所显主斑要求供试品溶液所显主斑点点颜色颜色和和位置位置与对照品溶液主与对照品溶液主斑点相同。斑点相同。甾体激素类药物的分析专题知识讲座第38页（八）（八）HPLC法法 主要用于甾体激素类药品主要用于甾体激素类药品制剂判别（如：醋酸曲安奈德制剂判别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）软膏、醋酸氟轻松软膏）方法：对照品法方法：对照品法 要求在含量测定项下统计要求在含量测定项下统计色谱图中，供试品峰色谱图中，供试品峰tR与对照与对照品峰品峰tR一致。一致。甾体激素类药物的分析专题知识讲座第39页三、三、杂质检验杂质检验（一）其它甾体（一）其它甾体1.定义定义 与标示药品结构不一样甾与标示药品结构不一样甾体化合物都称为体化合物都称为“其它甾体其它甾体”甾体激素类药物的分析专题知识讲座第40页Li/NH3 C2H5OH弱酸弱酸雌二醇雌二醇3甲醚甲醚苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙合成路线合成路线III甾体激素类药物的分析专题知识讲座第41页强酸强酸苯丙酰氯苯丙酰氯HClIII甾体激素类药物的分析专题知识讲座第42页3.特点特点 （1）可能存在多个甾体杂质）可能存在多个甾体杂质 （2）结构类似）结构类似2.起源起源 原料、中间体、异构体、原料、中间体、异构体、降解产物降解产物甾体激素类药物的分析专题知识讲座第43页4.方法（含有一定分离能力）方法（含有一定分离能力）TLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法）HPLC法（类似高低浓度对比法）法（类似高低浓度对比法）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第44页（1）TLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法）判定方法：判定方法：v 要求杂质斑点数目要求杂质斑点数目v 要求杂质斑点颜色要求杂质斑点颜色甾体激素类药物的分析专题知识讲座第45页特点：特点：（1）简便易行，不需特殊仪器；）简便易行，不需特殊仪器；（2）不需对照品；）不需对照品；（3）只能控制单个杂质限量；）只能控制单个杂质限量；（4）要求杂质与主成份显色灵敏）要求杂质与主成份显色灵敏度靠近。度靠近。甾体激素类药物的分析专题知识讲座第46页（2）HPLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法）判定方法：判定方法：v 要求杂质峰数目要求杂质峰数目v 要求杂质峰面积要求杂质峰面积甾体激素类药物的分析专题知识讲座第47页（二）游离磷酸（二）游离磷酸地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠氢化可松磷酸钠氢化可松磷酸钠倍他米松磷酸钠倍他米松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠对照品法对照品法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第48页原理：原理：方法：方法：甾体激素类药物的分析专题知识讲座第49页（对照液对照液 0.0035%KH2PO4）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第50页（三）甲醇和丙酮（三）甲醇和丙酮（灵敏度法）（灵敏度法）甲醇甲醇 不得出峰不得出峰 检测限检测限=3.1ng丙酮丙酮 5.0%内标法内标法+校正因子校正因子GC法法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第51页炔雌醇炔雌醇甾体激素类药物的分析专题知识讲座第52页（四）雌酮（四）雌酮原理原理 Zimmermann反应反应碱性碱性KOH乙醇乙醇高纯度高纯度甾体激素类药物的分析专题知识讲座第53页硒硒四、四、起源起源 合成中用二氧化硒合成中用二氧化硒(SeO(SeO2 2)脱氢脱氢原理原理方法方法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第54页四、含量测定四、含量测定（一）（一）UV法法-3-酮酮 240nm（）肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素孕激素 苯环苯环 280nm（）雌激素雌激素甾体激素类药物的分析专题知识讲座第55页（二）反应分光光度法（二）反应分光光度法1.适合用于非分光光度活性药品适合用于非分光光度活性药品2.使待测组分光谱位移，防止干扰使待测组分光谱位移，防止干扰3.增加测定灵敏度增加测定灵敏度4.增加选择性增加选择性弱、非分弱、非分光光度活光光度活性药品性药品强分光强分光光度活光度活性药品性药品化学反应化学反应甾体激素类药物的分析专题知识讲座第56页 肾上腺皮质激素类肾上腺皮质激素类C17-醇酮基醇酮基强还原性强还原性1.原理原理OH-还原还原四氮唑比色法四氮唑比色法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第57页OOH-分子重排分子重排甾体激素类药物的分析专题知识讲座第58页蓝四氮唑蓝四氮唑（BT）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第59页双甲瓒（暗蓝）双甲瓒（暗蓝）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第60页2.方法方法ChP TTC（RT）BP TTC（RT）USP BT对照品法对照品法4045暗暗甾体激素类药物的分析专题知识讲座第61页3.讨论讨论（1）基团对反应速度影响基团对反应速度影响C11=O C11OHC21OH C21-酯酯C16不论何种取代基不论何种取代基甾体激素类药物的分析专题知识讲座第62页（2）溶剂、水分影响溶剂、水分影响含水量含水量5%含水含水10%A10%含水含水30%几无反应几无反应 无醛无水乙醇无醛无水乙醇醛醛 A 无水乙醇无水乙醇甾体激素类药物的分析专题知识讲座第63页（3）O2与光线影响与光线影响反应过程反应过程反应产物反应产物怕光怕光避光、快速避光、快速O2影响影响颜色强颜色强度和稳度和稳定性定性隔绝空气、隔绝空气、快速、充快速、充N2甾体激素类药物的分析专题知识讲座第64页（4）碱种类及加入次序）碱种类及加入次序反应应在强碱性（反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行条件下进行以以氢氧化四甲基铵氢氧化四甲基铵结果最正确结果最正确加入次序：加入次序：甾体激素类药物的分析专题知识讲座第65页（5）温度与时间温度与时间t甲瓒分解甲瓒分解%ChP 25 4045BP 30 1h甾体激素类药物的分析专题知识讲座第66页4.特点：特点：缺点缺点 影响原因太多影响原因太多 优点优点 测定结果能指示药品测定结果能指示药品 稳定性（氧化及降稳定性（氧化及降 解产物无此反应）解产物无此反应）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第67页肾上腺皮质激素、肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同雄性激素和蛋白同化激素、孕激素化激素、孕激素C3酮基酮基1.原理原理HCl（缩合）（缩合）异烟肼比色法异烟肼比色法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第68页异烟腙（黄色）异烟腙（黄色）甾体激素类药物的分析专题知识讲座第69页2.方法方法暗暗45对照品法对照品法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第70页3.讨论讨论反应速度反应速度（1）C3=O C17=O、C20=O C11=O 不反应不反应反应专属性反应专属性 C3酮基酮基甾体激素类药物的分析专题知识讲座第71页（2）溶剂选择）溶剂选择异烟肼盐酸盐异烟肼盐酸盐甲醇、乙醇甲醇、乙醇无水甲醇无水甲醇无水乙醇无水乙醇甾体激素类药物的分析专题知识讲座第72页（3）水分、）水分、O2与光线影响与光线影响含水量含水量腙水解腙水解A%不挥发溶剂、不吸收水分时不挥发溶剂、不吸收水分时 O2与光线无影响与光线无影响甾体激素类药物的分析专题知识讲座第73页酸、异烟肼量酸、异烟肼量(3)盐酸盐酸:异烟肼异烟肼=2:1样品样品:异烟肼异烟肼=1:8 酸度酸度 异烟肼盐异烟肼盐酸度酸度 A温度温度(4)t 甾体激素类药物的分析专题知识讲座第74页1.1.原理原理max=465max=515雌激素雌激素Kober反应比色法反应比色法甾体激素类药物的分析专题知识讲座第75页