自身免疫性疾病和其免疫检测专家讲座.pptx

第二十四章第二十四章本身免疫性疾病及其免疫检测本身免疫性疾病及其免疫检测自身免疫性疾病和其免疫检测第1页第一节第一节 概概 述述 一、本身免疫性疾病分类一、本身免疫性疾病分类 二、本身免疫性疾病共同特征二、本身免疫性疾病共同特征第二节第二节 本身免疫疾病与免疫损伤本身免疫疾病与免疫损伤 一、本身抗原一、本身抗原 二、免疫调整异常二、免疫调整异常 三、遗传原因三、遗传原因 第三节第三节 常见本身免疫性疾病常见本身免疫性疾病 一、由一、由型超敏反应引发本身免疫性疾病型超敏反应引发本身免疫性疾病 二、本身抗体免疫复合物引发本身免疫二、本身抗体免疫复合物引发本身免疫 性疾病性疾病 三、三、T T细胞对本身抗原应答引发本身免疫性细胞对本身抗原应答引发本身免疫性 疾病疾病自身免疫性疾病和其免疫检测第2页第四节第四节 常见本身免疫性疾病本身抗体检测常见本身免疫性疾病本身抗体检测 一、本身抗体特征一、本身抗体特征 二、抗核抗体检测与应用二、抗核抗体检测与应用 三、抗三、抗ENAENA抗体谱检测与应用抗体谱检测与应用 四、与小血管炎相关本身抗体检测与应用四、与小血管炎相关本身抗体检测与应用 五、与五、与RARA相关本身抗体检测与应用相关本身抗体检测与应用 六、与本身免疫性肝病相关本身抗体检测与应用六、与本身免疫性肝病相关本身抗体检测与应用 七、与桥本甲状腺炎相关本身抗体检测与应用七、与桥本甲状腺炎相关本身抗体检测与应用 八、与神经系统本身免疫性相关本身抗体检测与八、与神经系统本身免疫性相关本身抗体检测与 应用应用自身免疫性疾病和其免疫检测第3页第五节第五节 本身抗体检测临床应用本身抗体检测临床应用 一、本身抗体检测普通标准一、本身抗体检测普通标准 二、实二、实验室方法选择及结果确实认验室方法选择及结果确实认第六节第六节 本身免疫性疾病相关试验检测本身免疫性疾病相关试验检测 一、免疫球蛋白及补体检测及临床意义一、免疫球蛋白及补体检测及临床意义 二、淋巴细胞检测及临床意义二、淋巴细胞检测及临床意义 三、细胞因子检测及临床意义三、细胞因子检测及临床意义 四、循环免役复合物检测及临床意义四、循环免役复合物检测及临床意义思索题思索题小结小结自身免疫性疾病和其免疫检测第4页第一节第一节 概概 述述本身免疫耐受（本身免疫耐受（autoimmune-toleranceautoimmune-tolerance）:正常正常情况下，机体免疫系统能识别情况下，机体免疫系统能识别“自我自我”，对本，对本身组织成份不发生免疫应答反应，或仅产生微身组织成份不发生免疫应答反应，或仅产生微弱免疫应答，此为本身免疫耐受。弱免疫应答，此为本身免疫耐受。本身免疫本身免疫(autoimmunity):autoimmunity):是指机体免疫系统针是指机体免疫系统针对本身成份发生免疫应答反应，出现本身抗体对本身成份发生免疫应答反应，出现本身抗体或致敏淋巴细胞现象。或致敏淋巴细胞现象。本身抗体本身抗体(autoantibody):autoantibody):针对本身组织器官、针对本身组织器官、细胞及细胞内成份抗体。细胞及细胞内成份抗体。自身免疫性疾病和其免疫检测第5页本身免疫性疾病本身免疫性疾病(autoimmune disease(autoimmune disease，AID)AID)因本身免疫反应造成组织器官损伤或功效障因本身免疫反应造成组织器官损伤或功效障碍所致疾病。碍所致疾病。一、本身免疫性疾病分类一、本身免疫性疾病分类自身免疫性疾病和其免疫检测第6页系统性本身免疫病系统性本身免疫病 (systemic autoimmune(systemic autoimmune disease)disease)或器官非特异性或全身性本身免疫病或器官非特异性或全身性本身免疫病器官特异性本身免疫病器官特异性本身免疫病 (organ-specific(organ-specific autoimmune disease)autoimmune disease)或不足本身免疫病或不足本身免疫病按疾病累及系统区分按疾病累及系统区分按器官特异性分为两类按器官特异性分为两类 结缔组织疾病结缔组织疾病 神经肌肉疾病神经肌肉疾病 内分泌性疾病内分泌性疾病 消化系统疾病消化系统疾病 泌尿系统疾病泌尿系统疾病 血液系统疾病血液系统疾病生殖系统疾病生殖系统疾病 皮肤组织疾病皮肤组织疾病 循环系统疾病循环系统疾病自身免疫性疾病和其免疫检测第7页器官特异性器官特异性 非器官特异性非器官特异性桥本甲状腺炎桥本甲状腺炎 扩张性心肌炎扩张性心肌炎 本身免疫性溶血性贫血本身免疫性溶血性贫血 系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮原发性粘液水肿原发性粘液水肿 恶性贫血恶性贫血 特发性血小板降低性紫癜特发性血小板降低性紫癜 干燥综合征干燥综合征甲状腺机能亢进甲状腺机能亢进 本身免疫性胃炎本身免疫性胃炎 特发性粒细胞降低症特发性粒细胞降低症 类风湿关节炎类风湿关节炎AddisinoAddisino病病 本身免疫性肝炎本身免疫性肝炎 绝经过早（少数病例）绝经过早（少数病例）硬皮病硬皮病1 1型糖尿病型糖尿病 原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化 男性不育（少数病例）男性不育（少数病例）多发性肌炎多发性肌炎/皮肌炎皮肌炎重症肌无力重症肌无力 原发性硬化性胆管炎原发性硬化性胆管炎 交感性眼炎交感性眼炎 混合性结缔组织病混合性结缔组织病多发性硬化症多发性硬化症 溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎 晶状体源性葡萄膜炎晶状体源性葡萄膜炎 系统性血管炎系统性血管炎脱髓鞘疾病脱髓鞘疾病 克罗恩病克罗恩病 抗磷脂综合征抗磷脂综合征 寻常型天疱疮寻常型天疱疮 本身免疫性肾小球肾炎本身免疫性肾小球肾炎 肺肾出血综合征肺肾出血综合征本身免疫病本身免疫病“病谱病谱”自身免疫性疾病和其免疫检测第8页1.1.多数病因不明多数病因不明2.2.患者以女性居多，并随年纪增加发病率有患者以女性居多，并随年纪增加发病率有所增加所增加3.3.有遗传倾向有遗传倾向4.4.患者血清中有各种本身抗体或本身反应性患者血清中有各种本身抗体或本身反应性致敏淋巴细胞存在致敏淋巴细胞存在二二、本身免疫性疾病共同特征、本身免疫性疾病共同特征自身免疫性疾病和其免疫检测第9页5.5.疾病有重合现象，即一个病人可同时患一疾病有重合现象，即一个病人可同时患一个以上本身免疫病个以上本身免疫病6.6.病程普通较长，多迁延为慢性病程普通较长，多迁延为慢性7.7.病损局部可发觉淋巴细胞、浆细胞、中性病损局部可发觉淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等浸润粒细胞等浸润8.8.免疫抑制剂治疗可取得一定疗效免疫抑制剂治疗可取得一定疗效自身免疫性疾病和其免疫检测第10页 在一些情况下，机体本身耐受遭到在一些情况下，机体本身耐受遭到破坏，禁忌细胞株活跃，机体免疫系统破坏，禁忌细胞株活跃，机体免疫系统针对一些本身组织成份产生了免疫应答，针对一些本身组织成份产生了免疫应答，就可能造成本身免疫病发生。就可能造成本身免疫病发生。第二节本身免疫疾病与免疫损伤第二节本身免疫疾病与免疫损伤自身免疫性疾病和其免疫检测第11页 隐蔽抗原释放隐蔽抗原释放 本身成份改变本身成份改变 共同抗原引发交叉反应共同抗原引发交叉反应一、本身抗原一、本身抗原自身免疫性疾病和其免疫检测第12页淋巴细胞旁路活化淋巴细胞旁路活化多克隆刺激剂旁路活化多克隆刺激剂旁路活化辅助刺激因子表示异常辅助刺激因子表示异常本身致敏本身致敏T T细胞与本身抗原应答细胞与本身抗原应答二、免疫调整异常二、免疫调整异常三、遗传原因三、遗传原因自身免疫性疾病和其免疫检测第13页第三节第三节 常见本身免疫性疾病常见本身免疫性疾病 因为病理性本身免疫应答可发生在体内任何组织器官，因为病理性本身免疫应答可发生在体内任何组织器官，临床上常以病理损害机制来区分各类本身免疫性疾病，而临床上常以病理损害机制来区分各类本身免疫性疾病，而许多本身免疫性疾病与超敏反应发生髻之亲密相关，所以，许多本身免疫性疾病与超敏反应发生髻之亲密相关，所以，可分为由可分为由型超敏反应引发本身免疫性疾病，由型超敏反应引发本身免疫性疾病，由型超敏型超敏反应引发本身免疫性疾病及由反应引发本身免疫性疾病及由T T细胞对本身抗原应答引发本细胞对本身抗原应答引发本身免疫性疾病。当两种或两种以上本身免疫病出现混合临身免疫性疾病。当两种或两种以上本身免疫病出现混合临床表现时，称为床表现时，称为混合性结缔组织病（混合性结缔组织病（mixed connective mixed connective tissue diseasetissue disease，MCTDMCTD）。）。自身免疫性疾病和其免疫检测第14页抗血细胞表面抗原抗体引发本身免疫性疾病抗血细胞表面抗原抗体引发本身免疫性疾病(如如:AIHA;ITP):AIHA;ITP)抗细胞表面受体抗体引发本身免疫性疾病抗细胞表面受体抗体引发本身免疫性疾病(如如:MG;Graves disease):MG;Graves disease)细胞外抗原本身抗体引发本身免疫性疾病细胞外抗原本身抗体引发本身免疫性疾病（如：（如：Good pastureGood pasture综合征）综合征）一、由一、由II型超敏反应引发本身免疫型超敏反应引发本身免疫性疾病性疾病自身免疫性疾病和其免疫检测第15页如：如：SLESLE；RARA二、本身抗体二、本身抗体免疫复合物引发免疫复合物引发本身免疫性疾病本身免疫性疾病自身免疫性疾病和其免疫检测第16页如：如：DM1DM1；MSMS三、三、T细胞对本身抗原应答引发细胞对本身抗原应答引发本身免疫性疾病本身免疫性疾病自身免疫性疾病和其免疫检测第17页第四节第四节 常见本身免疫性疾病本身常见本身免疫性疾病本身抗体检测抗体检测 本身抗体（本身抗体（autoantibodyautoantibody）是指抗本身细胞内、细胞表面和细胞外抗是指抗本身细胞内、细胞表面和细胞外抗原免疫球蛋白，是本身免疫和本身免疫病主要原免疫球蛋白，是本身免疫和本身免疫病主要特征之一，一些本身免疫病伴有特征性本身抗特征之一，一些本身免疫病伴有特征性本身抗体体(谱谱)分类分类:脏器特异性本身抗体脏器特异性本身抗体 脏器非特异性本身抗体脏器非特异性本身抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第18页本身免疫性疾病主要标志本身免疫性疾病主要标志高滴度存在于本身免疫性疾病患者高滴度存在于本身免疫性疾病患者与疾病活动性相关与疾病活动性相关参加免疫病理性损伤参加免疫病理性损伤一、本身抗体特征一、本身抗体特征自身免疫性疾病和其免疫检测第19页本身抗体本身抗体免疫球蛋白免疫球蛋白补体补体淋巴细胞淋巴细胞细胞因子细胞因子本身免疫性疾病主要试验检测本身免疫性疾病主要试验检测自身免疫性疾病和其免疫检测第20页 19481948年年 HaragravesHaragraves等发觉等发觉 LE LE 细胞现象细胞现象 19571957年年 HolborowHolborow等应用等应用IIFIIF检测检测ANAANA 1961 1961年年 BeckBeck等发觉等发觉ANAANA不一样荧光染色模型不一样荧光染色模型 60706070年代年代IIFIIF、IDID、CIECIE应用应用新本身抗体新本身抗体 19791979年年 TowbinTowbin等应用免疫印迹技术检测本身抗体等应用免疫印迹技术检测本身抗体 8080年代年代IBIB、RIPRIP应用应用蛋白多肽水平认识本身抗原蛋白多肽水平认识本身抗原 19871987年年DNADNA基因重组技术开始应用本身抗体研究基因重组技术开始应用本身抗体研究 近十年应用分子生物学技术近十年应用分子生物学技术 本身抗体研究发展简史本身抗体研究发展简史自身免疫性疾病和其免疫检测第21页标志抗体标志抗体相关疾病相关疾病dsDNAdsDNASLESLESmSmSLESLESSBSSBSSSS着丝点抗体着丝点抗体PSSPSS（局限型）局限型）Scl-70Scl-70抗体抗体PSSPSS（弥漫型）弥漫型）AKAAKA、抗、抗CCPCCP抗体抗体RARAJo-1Jo-1抗体抗体PM/DMPM/DM高滴度高滴度RNPRNP抗体抗体MCTDMCTD肝肾微粒体抗体（肝肾微粒体抗体（LKM-1LKM-1）型本身免疫性肝炎型本身免疫性肝炎平滑肌抗体（平滑肌抗体（SMASMA）型本身免疫性肝炎型本身免疫性肝炎AMAAMA（M2M2）PBCPBC常见本身免疫性疾病标志抗体常见本身免疫性疾病标志抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第22页间接免疫荧光法（间接免疫荧光法（IIFIIF）ELISAELISA免疫印迹法（免疫印迹法（Western-blotWestern-blot）酶免疫斑点法酶免疫斑点法检测本身抗体惯用方法检测本身抗体惯用方法自身免疫性疾病和其免疫检测第23页抗核抗体（抗核抗体（ANAANA）抗可提取性核抗原抗体（抗可提取性核抗原抗体（ENAENA）抗中性粒细胞胞浆抗体（抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCAANCA）类风湿因子（类风湿因子（RFRF）抗角蛋白抗体（抗角蛋白抗体（AKAAKA）抗环瓜氨酸肽抗体（抗抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCPCCP抗体）抗体）抗心磷脂抗体（抗心磷脂抗体（ACLAACLA）常检测本身抗体常检测本身抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第24页 抗核抗体抗核抗体:以真核细胞（如以真核细胞（如HEp-2HEp-2细胞、细胞、肝细胞）各种细胞核成份为靶抗原所检肝细胞）各种细胞核成份为靶抗原所检测本身抗体总称。测本身抗体总称。二、抗核抗体检测与应用二、抗核抗体检测与应用自身免疫性疾病和其免疫检测第25页抗核抗体抗核抗体谱谱自身免疫性疾病和其免疫检测第26页1.1.以首先检出该抗体患者名字命名，如抗以首先检出该抗体患者名字命名，如抗SmSm、抗抗Sa Sa 抗体等；抗体等；2.2.以以相相关关疾疾病病命命名名，如如抗抗Scl-70Scl-70、抗抗SS-ASS-A、抗抗SS-B SS-B 抗体等；抗体等；3.3.以以抗抗原原部部位位命命名名，如如抗抗核核仁仁抗抗体体、抗抗线线粒粒体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等；体抗体、抗核膜抗体、抗细胞浆抗体等；4.4.以以抗抗原原化化学学名名称称分分类类命命名名，如如抗抗DNADNA、抗抗RNPRNP、抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体,抗核小体抗体等。抗核小体抗体等。抗核抗体抗核抗体谱谱分类和命名分类和命名自身免疫性疾病和其免疫检测第27页间接免疫荧光法间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence,IIFindirect immunofluorescence,IIF）酶免疫斑点法酶免疫斑点法 ELISA ELISA 免疫印迹法免疫印迹法 （Western-blotWestern-blot）抗核抗体检测方法抗核抗体检测方法自身免疫性疾病和其免疫检测第28页间接免疫荧光法示意图间接免疫荧光法示意图HEp-2HEp-2细胞细胞肝组织切片肝组织切片荧光标识抗体荧光标识抗体病人血清（待检抗体）病人血清（待检抗体）自身免疫性疾病和其免疫检测第29页 细胞核细胞核 细胞浆细胞浆 细胞骨架细胞骨架 细胞周期细胞周期 均质型均质型 核糖体型核糖体型 肌蛋白型肌蛋白型 中心体型中心体型 斑点型斑点型 线粒体型线粒体型 波形纤维蛋白型波形纤维蛋白型 纺缍体型纺缍体型 核仁型核仁型 高尔基体型高尔基体型 细胞角蛋白型细胞角蛋白型 纺缍丝型纺缍丝型 着丝点型着丝点型 溶酶体型溶酶体型 原肌球蛋白型原肌球蛋白型 中间体型中间体型 周围型周围型 颗粒型颗粒型 纽带蛋白型纽带蛋白型 PCNAPCNA型型 核点型核点型(dots)dots)IIF检测检测ANA荧光染色模型荧光染色模型自身免疫性疾病和其免疫检测第30页斑点型（斑点型（nRNP/Sm）高滴度抗高滴度抗U1-nRNPU1-nRNP为为MCTDMCTD特征。抗特征。抗SmSm抗体对抗体对SLESLE含有高度特异性。含有高度特异性。斑点型斑点型（SSA/SSB）抗抗SSASSA最常出现于最常出现于SSSS及新生儿红斑狼疮及新生儿红斑狼疮 （100%100%）。抗）。抗SSBSSB抗体几乎仅见于女性，抗体几乎仅见于女性，可出现于可出现于SSSS和和SLESLE。自身免疫性疾病和其免疫检测第31页均质型均质型 抗抗dsDNAdsDNA抗体抗体 抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体(histone)histone)抗抗ssDNAssDNA抗体抗体 抗核小体抗体抗核小体抗体(nucleosome)nucleosome)自身免疫性疾病和其免疫检测第32页周围型周围型 可见于胶原病、可见于胶原病、PBCPBC、CAHCAH等患者等患者 自身免疫性疾病和其免疫检测第33页核点型核点型（DOTS）见于见于SLESLE、SSSS、PBCPBC、风湿病风湿病 抗着丝点型抗着丝点型 PSSPSS局限型标志抗体局限型标志抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第34页抗原纤维蛋白型抗原纤维蛋白型 仅见于仅见于5%5%10%10%PSSPSS，男性高于女性，男性高于女性 抗抗RNARNA多聚酶多聚酶型抗体型抗体 仅见于硬皮病患者，阳性率为仅见于硬皮病患者，阳性率为4%4%自身免疫性疾病和其免疫检测第35页抗抗PM-SclPM-Scl（PM-1PM-1）抗体抗体 见于重合综合征（多发性肌炎见于重合综合征（多发性肌炎PM/PM/皮肌炎皮肌炎 DM/DM/弥漫性弥漫性PSS PSS）自身免疫性疾病和其免疫检测第36页抗抗Scl-70型型 PSS PSS 弥漫型标志抗体弥漫型标志抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第37页增殖细胞核抗原增殖细胞核抗原型型（PCNA）SLESLE特异性抗体，与发生弥漫性增殖性肾小球肾炎相关特异性抗体，与发生弥漫性增殖性肾小球肾炎相关自身免疫性疾病和其免疫检测第38页抗核糖体抗核糖体P蛋白蛋白（rib-P）抗体抗体抗线粒体抗体抗线粒体抗体（AMA）SLESLE标志抗体标志抗体原发性胆汁性肝硬化标志抗体原发性胆汁性肝硬化标志抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第39页抗抗Jo-1抗体抗体抗高尔基体抗体抗高尔基体抗体多发性肌炎（多发性肌炎（PMPM）标志抗体标志抗体偶见于偶见于SLESLE和和SSSS自身免疫性疾病和其免疫检测第40页抗肌动蛋白抗体抗肌动蛋白抗体见于本身免疫性慢性活动型肝炎见于本身免疫性慢性活动型肝炎 自身免疫性疾病和其免疫检测第41页抗双链抗双链DNADNA抗体抗体 抗抗dsDNAdsDNA抗体与细胞核抗体与细胞核DNADNA（外围区）脱（外围区）脱氧核糖磷酸框架结合。氧核糖磷酸框架结合。抗抗dsDNAdsDNA抗体是抗体是SLESLE患者特征性标志抗体。患者特征性标志抗体。其抗体滴度与疾病活动程度有相关性，其抗体滴度与疾病活动程度有相关性，抗体滴度动态测定为监控治疗提供了有抗体滴度动态测定为监控治疗提供了有效试验室伎俩。效试验室伎俩。抗双链抗双链DNADNA抗体抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第42页检测方法及应用检测方法及应用间接免疫荧光检测，是当前国内外临床常间接免疫荧光检测，是当前国内外临床常规检测抗规检测抗dsDNAdsDNA抗体最惯用方法。抗体最惯用方法。抗抗dsDNAdsDNA抗体诊疗抗体诊疗SLESLE特异性可达特异性可达95%95%100%100%，但其敏感性仅为，但其敏感性仅为30%30%50%50%，所以抗，所以抗dsDNAdsDNA抗体阴性不能排除抗体阴性不能排除SLESLE诊疗。诊疗。检测方法及应用检测方法及应用自身免疫性疾病和其免疫检测第43页抗抗dsDNA抗体抗体SLESLE特异性抗体，与病情活动度相关。特异性抗体，与病情活动度相关。自身免疫性疾病和其免疫检测第44页抗核小体抗体抗核小体抗体 核小体（核小体（nucleosomenucleosome）是真核生物细是真核生物细胞核染色质基本单位胞核染色质基本单位 。凋亡细胞是核小。凋亡细胞是核小体主要起源，当体主要起源，当SLESLE患者吞噬细胞对凋亡患者吞噬细胞对凋亡细胞去除能力受损或降低，造成核小体细胞去除能力受损或降低，造成核小体在患者体内大量存积，激活在患者体内大量存积，激活B B细胞产生细胞产生抗抗核小体抗体（核小体抗体（Antinucleosome antibody Antinucleosome antibody,AnuA,AnuA）。）。自身免疫性疾病和其免疫检测第45页检测及应用检测及应用AnuAAnuA检测通常采取检测通常采取ELISAELISA检测法。检测法。AnuAAnuA含有同抗含有同抗ds-DNAds-DNA抗体相同诊疗特异性，抗体相同诊疗特异性，可到达可到达95%95%，在系统性硬化（，在系统性硬化（SScSSc）病中可有）病中可有20%20%50%50%低浓度阳性率，其它本身免疫性疾低浓度阳性率，其它本身免疫性疾病中该抗体均为阴性。病中该抗体均为阴性。AnuAAnuA表示与表示与SLESLE病情活动分数相关。病情活动分数相关。检测及应用检测及应用自身免疫性疾病和其免疫检测第46页 抗抗ENA抗体谱抗体谱:可提取核抗原抗体总称可提取核抗原抗体总称 临床常检测抗临床常检测抗ENAENA抗体谱主要包含：抗体谱主要包含：抗抗SmSm 抗抗U1-RNPU1-RNP 抗抗SSASSA 抗抗SSBSSB 抗抗Jo-1Jo-1 抗抗Scl-70Scl-70 抗抗rib-Prib-P蛋白蛋白三、抗三、抗ENA抗体谱检测与应用抗体谱检测与应用自身免疫性疾病和其免疫检测第47页抗可提取抗可提取性性核抗原（核抗原（ENA）抗体）抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第48页 双向免疫扩散（双向免疫扩散（IDID）对流免疫电泳（对流免疫电泳（CIECIE）免疫印迹法（免疫印迹法（Western-blotWestern-blot）ELISAELISA 酶免疫斑点法酶免疫斑点法 ENA检测方法检测方法自身免疫性疾病和其免疫检测第49页免疫印迹法免疫印迹法 SDS-PAGESDS-PAGE电泳电泳转移电泳转移电泳酶免疫检测酶免疫检测免疫印迹法免疫印迹法自身免疫性疾病和其免疫检测第50页自身免疫性疾病和其免疫检测第51页 抗可提取抗可提取性性核抗原（核抗原（ENAENA）抗体）抗体 抗抗SmSm抗体：抗体：SLESLE标识性抗体（标识性抗体（20%20%30%30%）抗抗nRNPnRNP抗体抗体：MCTD 95%MCTD 95%100%100%（高滴度）（高滴度）抗抗SSASSA抗体：抗体：PSS 60%PSS 60%75%75%，其它，其它CTDCTD 抗抗SSBSSB抗体：抗体：PSS 10%PSS 10%40%40%，其它，其它CTDCTD 抗抗Scl-70Scl-70抗体：抗体：SSc 25%SSc 25%75%,75%,标识性抗体标识性抗体 抗抗Jo-1Jo-1抗体：抗体：PM/DM 25%PM/DM 25%，标识性抗体，标识性抗体 抗抗rRNPrRNP抗体：抗体：SLESLE特异性抗体（特异性抗体（10%10%30%30%）自身免疫性疾病和其免疫检测第52页抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophil anti-neutrophil cytoplasmic autoantibodies,cytoplasmic autoantibodies,ANCA ANCA）是一组是一组以人中性粒细胞胞浆成份为靶抗原，以人中性粒细胞胞浆成份为靶抗原，与临床各种小血管炎性疾病亲密相关与临床各种小血管炎性疾病亲密相关本身抗体，对系统性血管炎、炎症性本身抗体，对系统性血管炎、炎症性肠病等疾病诊疗与判别诊疗含有主要肠病等疾病诊疗与判别诊疗含有主要意义。意义。四、与小血管炎相关本身抗四、与小血管炎相关本身抗 体检测与应用体检测与应用自身免疫性疾病和其免疫检测第53页 荧光染色型荧光染色型 靶抗原靶抗原 胞浆型胞浆型(cANCA)(cANCA)蛋白酶蛋白酶3 3（PR3PR3）杀菌杀菌/通透性增高蛋白通透性增高蛋白（BPIBPI）核周型核周型(pANCA)(pANCA)髓过氧化物酶（髓过氧化物酶（MPOMPO）组织蛋白酶组织蛋白酶G G（Cath-GCath-G）乳铁蛋白（乳铁蛋白（LFLF）白细胞弹性蛋白酶（白细胞弹性蛋白酶（HLEHLE）非经典型非经典型(aANCA)(aANCA)兼有两种特征兼有两种特征ANCAANCA荧光染色型与靶抗原荧光染色型与靶抗原自身免疫性疾病和其免疫检测第54页周围型抗中性粒细胞胞浆抗体周围型抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）主要见于炎症性肠病（溃疡性结肠炎和克罗恩病）主要见于炎症性肠病（溃疡性结肠炎和克罗恩病）自身免疫性疾病和其免疫检测第55页胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)主要见于主要见于WegenersWegeners肉芽肿及微小多动脉炎肉芽肿及微小多动脉炎自身免疫性疾病和其免疫检测第56页 ANCA临床应用临床应用 髓过氧化物酶（髓过氧化物酶（MPOMPO）与显微镜下多血管炎、坏死性新与显微镜下多血管炎、坏死性新 月月 体体 型型 肾肾 小小 球球 肾肾 炎炎、过过 敏敏 性性 肉肉 芽芽 肿肿 性性 血血 管管 炎炎 相关相关杀菌杀菌/通透性增高蛋白（通透性增高蛋白（BPIBPI）主要见于肺部炎症性疾病主要见于肺部炎症性疾病 并与长久慢性绿脓杆菌感染有一定关系并与长久慢性绿脓杆菌感染有一定关系 蛋白酶蛋白酶3 3（PR3PR3）与与WegenersWegeners肉芽肿（肉芽肿（WGWG）亲密相关。亲密相关。仅仅cANCAcANCA诊疗诊疗WGWG特异性大于特异性大于90%90%，联合，联合PR3PR3 可超出可超出95%95%，活动期几乎活动期几乎100%100%阳性。阳性。组织蛋白酶组织蛋白酶G(Cath-G)G(Cath-G)白细胞弹性蛋白酶白细胞弹性蛋白酶(HLE)HLE)乳铁蛋白乳铁蛋白(LF)LF)可可见于见于SLESLE、IBDIBD、PBCPBC、PSCPSC等等自身免疫性疾病和其免疫检测第57页RARA早期诊疗相关本身抗体早期诊疗相关本身抗体 抗角质层蛋白抗体（抗角质层蛋白抗体（AKAAKA）：）：19791979年年 YoungYoung等汇报等汇报 靶抗原：靶抗原：filaggrinfilaggrin（40KD40KD）抗核周因子（抗核周因子（APF):1964APF):1964年年 NienhuisNienhuis等汇报等汇报 靶抗原：靶抗原：profilaggrinprofilaggrin（37-41KD37-41KD）及其降解产物）及其降解产物 抗聚抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（角蛋白微丝蛋白抗体（AFAAFA）：）：19931993年年SimonSimon等汇报等汇报 靶抗原：靶抗原：filaggrinfilaggrin（40KD40KD）抗抗SaSa抗体：抗体：19941994年年 DespresDespres等汇报等汇报 靶抗原靶抗原:50/55KD:50/55KD非酰基多肽，半抗原非酰基多肽，半抗原-瓜氨酸瓜氨酸 抗环瓜氨酸肽抗体（抗抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCPCCP抗体）：抗体）：1998 Schellekens1998 Schellekens五、与五、与RARA相关本身抗体检测与应用相关本身抗体检测与应用自身免疫性疾病和其免疫检测第58页 类风湿因子类风湿因子（rheumatoid factor,rheumatoid factor,RFRF）为抗变性为抗变性IgG IgG FcFc本身抗体，主要是本身抗体，主要是IgMIgM型型 致病机理：致病机理：RF RF与体内变性与体内变性IgGIgG结合形成免疫复合结合形成免疫复合物，激活补体或被吞噬细胞吞噬，产生炎物，激活补体或被吞噬细胞吞噬，产生炎性介质造成组织炎性损伤，使患者发生骨性介质造成组织炎性损伤，使患者发生骨关节炎及血管炎。关节炎及血管炎。自身免疫性疾病和其免疫检测第59页1.1.胶乳颗粒凝集试验胶乳颗粒凝集试验 定性、半定量，敏感性和特异性不定性、半定量，敏感性和特异性不高，测定高，测定IgM-RFIgM-RF 2.2.速率散射比浊法（速率散射比浊法（ARRAYARRAY、IMAGEIMAGE）定量、准确、快速，测定定量、准确、快速，测定IgM-RFIgM-RF 3.ELISA3.ELISA 定量、准确，可测定不一样类型定量、准确，可测定不一样类型RFRF检测方法检测方法自身免疫性疾病和其免疫检测第60页 （1 1）RFRF在在RARA、SLESLE、PSSPSS等各种本身免疫性疾等各种本身免疫性疾病患者中均可被检出。病患者中均可被检出。疾病疾病阳性率（阳性率（%）RARA7979SLESLE3030SSSS9595SclerosisSclerosis8080PMPM8080MCTDMCTD2525 临床应用临床应用自身免疫性疾病和其免疫检测第61页（2 2）RFRF滴度与滴度与RARA患者临床表现呈正相关，患者临床表现呈正相关，IgM-RFIgM-RF效价效价8080IU/mlIU/ml并伴有严重关节功效障碍时通并伴有严重关节功效障碍时通常提醒患者预后不良。常提醒患者预后不良。（3 3）IgG-RFIgG-RF与与RARA患者滑膜炎、血管炎和关节患者滑膜炎、血管炎和关节症状亲密相关，常伴随症状亲密相关，常伴随IgM-RFIgM-RF同时出现，在正常人同时出现，在正常人及非及非RARA患者中极难检出。患者中极难检出。（4 4）IgA-RFIgA-RF与与RARA患者关节症状严重程度及骨质破患者关节症状严重程度及骨质破坏有显著相关性。坏有显著相关性。自身免疫性疾病和其免疫检测第62页AKAAKA主要见于主要见于RARA，阳性率，阳性率36%36%59%59%，特异，特异性性95%95%99%99%，其，其出现能够先于临出现能够先于临床表现；高滴度床表现；高滴度可预示较严重可预示较严重RARA类型。类型。抗角蛋白抗体抗角蛋白抗体（AKAAKA）自身免疫性疾病和其免疫检测第63页惯用方法惯用方法：ELISAELISA临床意义临床意义：RARA特异性本身抗体，敏感性特异性本身抗体，敏感性65%65%85%85%，特异性为，特异性为94%94%98%98%；高浓度抗；高浓度抗CCPCCP抗体是抗体是RARA发生关节侵蚀危险因子之一，发生关节侵蚀危险因子之一，定量检测有利于判断预后。定量检测有利于判断预后。抗环瓜氨酸肽抗体（抗抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCPCCP抗体）抗体）自身免疫性疾病和其免疫检测第64页本身免疫性肝病是与本身免疫亲密相关特殊类本身免疫性肝病是与本身免疫亲密相关特殊类型肝病，其诊疗和治疗完全不一样于普通慢性型肝病，其诊疗和治疗完全不一样于普通慢性病毒性肝炎病毒性肝炎本身免疫性肝炎本身免疫性肝炎(AIH)(AIH)原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化(PBC)PBC)原发性硬化性胆管炎原发性硬化性胆管炎(PSC)(PSC)重合综合征重合综合征六、与本身免疫性肝病相关本六、与本身免疫性肝病相关本身抗体检测与应用身抗体检测与应用自身免疫性疾病和其免疫检测第65页 在多在多种累及肝胆疾患本身免疫疾病中，本身种累及肝胆疾患本身免疫疾病中，本身抗体在发病机制中起主要作用抗体在发病机制中起主要作用 本身免疫性肝病含有相对特异性本身抗体谱本身免疫性肝病含有相对特异性本身抗体谱 本身抗体检测对本身免疫性肝病诊疗及判别本身抗体检测对本身免疫性肝病诊疗及判别诊疗含有主要意义诊疗含有主要意义本身免疫性肝病与本身抗体本身免疫性肝病与本身抗体自身免疫性疾病和其免疫检测第66页本身免疫性肝病及其本身抗体谱本身免疫性肝病及其本身抗体谱 疾病类型疾病类型 相关本身抗体相关本身抗体 本身免疫性肝炎（本身免疫性肝炎（AIH AIH）型型AIH ANA/ASMAAIH ANA/ASMA 型型AIH anti-LKM-1 anti-LC-1 AIH anti-LKM-1 anti-LC-1 型型AIH anti-SLA AIH anti-SLA(可溶性肝抗原可溶性肝抗原)原发性胆汁性肝硬化（原发性胆汁性肝硬化（PBCPBC）AMA(M2/M4/M8/M9)AMA(M2/M4/M8/M9)anti-gp210 anti-gp210，sp100 sp100 ACA ACA 原发性硬化性胆管炎（原发性硬化性胆管炎（PSCPSC）pANCA pANCA 本身免疫性肝病及其本身抗体谱本身免疫性肝病及其本身抗体谱自身免疫性疾病和其免疫检测第67页 抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体(TG Ab)(TG Ab)抗甲状腺过氧化物酶抗体（抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO Ab TPO Ab）抗促甲状腺素受体抗体（抗促甲状腺素受体抗体（TSH-R AbTSH-R Ab）七、与桥本甲状腺炎相关本身抗七、与桥本甲状腺炎相关本身抗体检测与应用体检测与应用自身免疫性疾病和其免疫检测第68页l重症肌无力（重症肌无力（MGMG）本身抗体谱：）本身抗体谱：抗骨胳肌抗体（抗骨胳肌抗体（ASAASA）、抗乙酰胆碱受体）、抗乙酰胆碱受体(AchR)(AchR)抗体抗体l多发性硬化（多发性硬化（MSMS）本身抗体谱：）本身抗体谱：抗抗髓髓鞘鞘碱碱性性蛋蛋白白（MBPMBP）抗抗体体、抗抗脑脑苷苷脂脂抗抗体体、抗抗神神经经结苷脂抗体结苷脂抗体l急急性性炎炎症症性性脱脱髓髓鞘鞘性性多多发发性性神神经经病病（格格林林巴利综合征）本身抗体谱：巴利综合征）本身抗体谱：抗髓鞘糖脂抗体、抗髓鞘硫脂抗体抗髓鞘糖脂抗体、抗髓鞘硫脂抗体 八、与神经系统本身免疫性相关八、与神经系统本身免疫性相关本身抗体检测与应用本身抗体检测与应用自身免疫性疾病和其免疫检测第69页大多数本身免疫患者血清中可测到高效大多数本身免疫患者血清中可测到高效价本身抗体，尤其是有些本身抗体检测已纳入价本身抗体，尤其是有些本身抗体检测已纳入一些本身免疫性疾病诊疗标准中，本身抗体检一些本身免疫性疾病诊疗标准中，本身抗体检测已是临床免疫检测一项主要试验室指标。测已是临床免疫检测一项主要试验室指标。第五节第五节 本身抗体检测本身抗体检测临床应用临床应用自身免疫性疾病和其免疫检测第70页 筛查性试验与确诊性试验项目标合理组合筛查性试验与确诊性试验项目标合理组合选择相关本身抗体检测项目选择相关本身抗体检测项目切忌盲目标全方面检测切忌盲目标全方面检测 试验中应同时设置阳性和阴性对照试验中应同时设置阳性和阴性对照一、本身抗体检测普通标准一、本身抗体检测普通标准自身免疫性疾病和其免疫检测第71页 95%95%99%99%可排除可排除SLESLE （）（）SLE SLE治疗缓解治疗缓解 病情特重（大量病情特重（大量ICIC沉积消耗抗体）沉积消耗抗体）（）（）低滴度低滴度 常见于常见于RARA等其它本身免疫性疾病等其它本身免疫性疾病高滴度可作为诊疗高滴度可作为诊疗SLESLE依据依据ENAENA抗体谱检测抗体谱检测 （）（）不能排除不能排除抗抗dsDNAdsDNA、SmSm、ribrib抗体抗体 （）（）可帮助诊疗可帮助诊疗ANAANA初筛初筛二、试验室方法选择及结果确实认二、试验室方法选择及结果确实认自身免疫性疾病和其免疫检测第72页本身免疫性疾病本身免疫性疾病ANAANA阳性率（阳性率（%）SLESLE8080100100MCTDMCTD95100RARA20204040PSSPSS8595PM/DMPM/DM3050SSSS7080溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎2626慢性活动性肝炎慢性活动性肝炎3040其它风湿病其它风湿病2050ANAANA在本身免疫性疾病中检出率在本身免疫性疾病中检出率 自身免疫性疾病和其免疫检测第73页第六节第六节 本身免疫性本身免疫性疾病相关试验检测疾病相关试验检测 在本身免疫病患者体内，因有各种本身抗在本身免疫病患者体内，因有各种本身抗原存在，本身抗体种类也可有交叉重合现象，原存在，本身抗体种类也可有交叉重合现象，故试验中检测出各种本身抗体阳性时还必须结故试验中检测出各种本身抗体阳性时还必须结合临床症状进行综合分析。合临床症状进行综合分析。自身免疫性疾病和其免疫检测第74页本