植物组织培养课程论文--——百合的组织培养研究.docx
《植物组织培养课程论文--——百合的组织培养研究.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《植物组织培养课程论文--——百合的组织培养研究.docx(14页珍藏版)》请在咨信网上搜索。
1、百合的组织培养天津师范大学生命科学学院植物组织培养课程论文百合的组织培养研究摘要:百合是百合科百合属,多年生草本球根植物。是著名的观赏花卉,可食用,有很高的利用价值。利用组织培养进行繁育是百合无毒化和商品化的必要途径。由于百合的常规繁殖率低,易感染病毒,所以对繁殖技术提出了更高的要求,人工繁殖技术对百合具有重要的意义。本实验主要通过植物组织培养手段,以MS为基本培养基,以百合鳞茎为外植体,对其进行灭菌消毒,并置于温度为25摄氏度,湿度为80%的温箱中,8小时睡眠16小时光照的情况下进行培养。随后观察其生长情况,并拍照记录。本次实验外植体成功发育成愈伤组织,并长出芽。此实验主要在于掌握植物组织培
2、养技术,了解其方法过程。关键词:组织培养;百合;无菌操作目录摘要I一、文献综述11.1百合组织培养技术进展11.2植物组织培养概述1参考文献:2二、百合植物组织培养32.1实验试剂32.2仪器32.3生物材料3三、实验步骤33.1培养基的配制33.1.1配制培养基母液的配制方法33.1.2 完全培养基的制备43.2兰州百合外植体灭菌处理和初代培养4四、实验结果及讨论54.1实验结果54.2讨论10百合的组织培养一、文献综述1.1百合组织培养技术进展百合植物资源丰富,栽培历史悠久,花色多样,它不仅适用于庭院栽培,布置花境,也可盆栽观赏,并早已成为花卉研究领域的佼佼者。百合虽然观赏性很高,但大多抗
3、性很弱,尤其抗寒性。一般在东北地区种植商品百合时, 每年秋季必须起球,窖藏或者冷库存放,这大大增加了百合的生产成本,限制了东北地区花卉业的发展。随着百合在国内外鲜切花市场的走俏,百合花生产和消费逐年增加,但由于百合种球繁殖率低,病毒侵染造成退化,难于满足切花生产需要。目前主要采用组织培养进行百合脱毒和快速繁殖,以促进百合商品种球的生产。但是百合试管苗小鳞茎较小,结鳞茎时间较长,移植成活率低,制约了工厂化商品生产。目前国内繁殖百合主要通过进口鳞茎进行繁殖。但是市场售价较高,而且有时鳞茎质量难以保证、繁殖率低、易造成鳞茎退化。采用组织培养的方法在很短时间内可以得到大量的组培苗,而且一般在第二年即可
4、开花。11.2植物组织培养概述植物组织培养是一种将植物体的部分细胞或组织与母体分离,在适当的条件下加以培养,使它们能够生长、发育、分化与增殖的技术。原理是来自植物细胞的全能性分化能力,也就是植物体内的某一类细胞,能够独立发育并且分化成为完整的植物成体。植物组织培养能够以少量的母体培养出大量的植物,这使植物组织培养有许多的用途,例如基础植物学与遗传学研究,以及农业上的育种与品种保留。2植物组织培养是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官、组织或细胞以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株。1902年,德国著名植物学
5、家G.Haberlanclt根据细胞学理论,大胆地提出了高等植物的器官和组织可以不断分割,直到单个细胞,即植物体细胞,在适当的条件下,具有不断分裂和繁殖,发育成完整植株的潜力的观点。1943年,美国人White在烟草愈伤组织培养中,偶然发现形成一个芽,证实了G.Haberlanclt的论点。组织培养选用的基础培养基一般较多采用的是MS。采用固体培养基较多,因为相比液体培养基,固体培养基在操作上更方便,被广泛使用。在基础培养基里添加一定的外源激素,可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官,最终可获得再生植株或者次生产物。常用的激素类型有生长素类、细胞分裂素类、赤霉素等。3参考文献:1:周威,
6、百合的组织培养,科技向导,2011年第09期2:https:/zh.wikipedia.org/wiki/%E6%A4%8D%E7%89%A9%E7%B5%84%E7%B9%94%E5%9F%B9%E9%A4%8A3:梁一池,杨华,植物组织培养技术的研究进展,福建林学院学报,2002, 22(1):93-96二、百合植物组织培养2.1实验试剂NH4NO3, KNO3, CaCl22H2O, MgSO47H2O, KH2PO4, KI, H2BO3,MnSO44H2O, ZnSO47H2O, Na2MoO42H2O, CuSO45H2O, CoCl26H2O, Na2EDTA2H2O,FeSO4
7、7H2O,烟酸,甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇;琼脂,蔗糖,蒸馏水,NAA,6-BA,1mol/L HCl,1mol/L NaOH;75%酒精。2.2仪器冰箱、天平、酸度计或pH试纸、电炉、高压灭菌锅、超净工作台、光照培养箱、三角瓶、容量瓶、量筒、移液管、烧杯、培养皿、滤纸、牛皮纸、绳、玻璃棒、镊子、刀等。2.3生物材料百合三、实验步骤3.1培养基的配制 3.1.1配制培养基母液的配制方法 a) 大量元素的配制:依次称取KNO3 19g、NH4NO3 16.5g、MgSO47H2O 3.7g、KH2PO4 0.17g、CaCl22H2O 4.4g ,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后
8、再将它们混溶,以防互相发生反应,最后用容量瓶定容至1L,转入试剂瓶中,贴上标签,置冰箱冷藏保存。 b) 微量元素的配制:依次称取MnSO44H2O 2.23g、ZnSO47H2O 0.86g、H3BO3 0.32g、KI 0.083g、Na2Mo2H2O 0.025g、CuSO45H2O 0.0025g、CoCl26H2O 0.0025g ,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,再将它们混溶,最后用容量瓶定容至1L,转入试剂瓶中,贴上标签,置冰箱冷藏保存。 c) 铁盐的配制:称取FeSO47H20 1.390g、Na2EDTA1.856g,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,再将它们混溶,最后用容量瓶定容至50
9、0ml,保存在玻璃瓶中,贴上标签,置冰箱冷藏保存。d) 有机物母液的配制: 依次称取甘氨酸0.1g、盐酸硫胺素 0.005g、盐酸吡哆醇0.025g、烟酸0.025g、肌醇5g,用少量蒸馏水充分溶解,最后定容至250ml,转入试剂瓶中,贴上标签,置冰箱冷藏保存。 e) 激素溶液的配制:分别称取6-BA、NAA各10mg,将6-BA用1ml的0.1mmol/L的NaOH溶液溶解,将NAA用1ml无水乙醇预溶,待溶解完全后,分别用容量瓶定容至100ml,即得到0.1mg/ml的母液(实验时按需要量取)。 3.1.2 完全培养基的制备 1. 取出母液并按添加顺序放好,将实验所需的量筒,移液枪,烧杯,
10、移液管,吸耳球和玻璃棒等放在实验台上,以备实验所需。 2. 取一干净的烧杯,加入1/3左右(配制培养基总量的1/3左右)的蒸馏水,取大量元素母液150ml、微量元素母液15ml、铁盐母液15ml、机物母液7.5ml,上述溶液移入容量瓶中,加蒸馏水定容。3. 将定容好的培养基倒入烧杯中,称取琼脂粉,倒入上面配好的溶液中,放在电炉上加热,直到琼脂粉完全熔化溶液透明。4. 然后称取蔗糖45g搅拌溶解。5. 初代培养基按1mg/L 6-BA 15微升、0.1mg/L NAA1.5微升。用移液枪精确量取所需激素母液,加入培养基中。 6. 用精密试纸或PH计调整pH至6.0。用配制好的0.1mol/L的H
11、Cl和0.1mol/L的NaOH溶液来调节pH值。 7. 稍微冷却后,分装入以洗净的三角培养瓶中。再用布塞和牛皮纸封口,最后用绳子扎紧。 8. 另取适量滤纸(多张/组)、培养皿(2套/组),用牛皮纸包好扎紧;另取去离子水适量装入盐水瓶,盖好塞子;另取小镊子和刀等包好(2套/组)。 9. 将步骤7、8所准备的物品统一放入高压锅内,120KPa灭菌30min左右。灭菌后从灭菌锅中取出培养基,平放在实验台上令其冷却凝固,放入超净台备用。在开始操作前将所用器材放入超净台,打开紫外灯进行消毒。3.2兰州百合外植体灭菌处理和初代培养 将买来的新鲜兰州百合的鳞茎拨开,洗去上面的泥土,在用流动的自来水冲洗2h
12、,用前再用蒸馏水洗1-2遍放到4度冰箱保存待用。在超净工作台上采用75%的酒精溶液侵泡90s,去离子水水冲洗3次,然后用3%NaClO3溶液浸泡15min,用去离子水冲洗3次,进行外植体消毒处理。然后放在无菌滤纸上,用无菌刀切成0.5cm大小的小块,凹面向上,接种于培养基上。每人接种1瓶,每瓶接种3块外植体。培养条件: 25、湿度80%、光照8h/d、光照强度2000lx。每5天向培养箱中加一次水,每隔两天进行观察和记录生长情况,一周左右鳞片的颜色会发生变化,由刚开始的白色慢慢有点变紫色,培养10天左右鳞片由淡绿色慢慢变为绿色。四、实验结果及讨论4.1实验结果图1:5月20日,第4天,生长正常
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 植物 组织培养 课程 论文 百合 研究
1、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
2、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,个别因单元格分列造成显示页码不一将协商解决,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
3、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
4、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【天****】。
5、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
6、文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【天****】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。