酶工程设备生物质原料的预处理设备公开课一等奖优质课大赛微课获奖课件.pptx
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1、第四章第四章 培养基及培养基灭菌设培养基及培养基灭菌设备备第1页第1页一、培养基概述(一)定义及分类 1.定义 2.分类(1)按成份不同划分:天然培养基:试验室、工业上 合成培养基:试验室 半合成培养基:工业上(2)依据物理状态划分 固体培养基:微生物分离鉴定、计数、保留 半固体培养基:观测微生物运动特性、鉴定菌株 液体培养基:试验室、工业大规模生产 第2页第2页(二)培养基准备及要求(二)培养基准备及要求1.1.微生物培养基:微生物培养基:孢子培养基:(固体)孢子培养基:(固体)基本配制要求是:营养不要太丰富;所用无机盐浓基本配制要求是:营养不要太丰富;所用无机盐浓度要适量;注意度要适量;注
2、意pHpH和湿度。和湿度。灭菌灭菌 :121121,保持,保持20-30min20-30min 种子培养基:营养成份要求比较丰富和完全,氮源种子培养基:营养成份要求比较丰富和完全,氮源和维生素含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好和维生素含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好 灭菌灭菌 :121121,保持,保持15-20min15-20min 发酵培养基:发酵培养基:构成除有菌体生长所必需元素和化合物外,还要有构成除有菌体生长所必需元素和化合物外,还要有产物所需特定元素、前体和增进剂等产物所需特定元素、前体和增进剂等 灭菌灭菌 :121121,保持,保持15-0min15-0min第3页第3页2.2
3、.动物细胞培养基:动物细胞培养基:天然培养基:试验室天然培养基:试验室 合成培养基:工业合成培养基:工业 无血清培养基:工业无血清培养基:工业 灭菌:微孔滤膜过滤除菌灭菌:微孔滤膜过滤除菌3.3.植物细胞培养基:植物细胞培养基:组分:无机盐类,碳源,维生素,植物生长激素,有组分:无机盐类,碳源,维生素,植物生长激素,有机氮源,有机酸等机氮源,有机酸等 灭菌:灭菌:115-120115-120,保持,保持1520min1520min 微孔滤膜过滤除菌微孔滤膜过滤除菌第4页第4页二、培养基灭菌二、培养基灭菌1、培养基灭菌定义 用物理或化学方法从培养基中杀灭有生活能力细菌营养体及其孢子,或从中将其除
4、去。灭菌与消毒区分:2、培养基灭菌目标 杀灭培养基中微生物,为后续发酵过程创造无菌条件 3、培养基灭菌要求 (1)达到要求无菌程度(10-3)(2)尽也许降低营养成份破坏 第5页第5页4 4、灭菌办法、灭菌办法化学灭菌:化学灭菌:射线灭菌:射线灭菌:干热灭菌法:干热灭菌法:惯用于空玻璃器皿、金属器具灭菌。惯用于空玻璃器皿、金属器具灭菌。过滤灭菌:过滤灭菌:微孔滤膜过滤除菌;大多用于热敏性物料微孔滤膜过滤除菌;大多用于热敏性物料湿热灭菌:湿热灭菌:121,保持,保持2030min 第6页第6页5 5、湿热灭菌原理、湿热灭菌原理(1 1)原理:)原理:蒸汽在冷凝时释放出大量潜能,并且含有蒸汽在冷凝
5、时释放出大量潜能,并且含有强大穿透力,在高温和水存在时,微生物细胞强大穿透力,在高温和水存在时,微生物细胞中蛋白质极易发生不可逆凝固性变性,致使微中蛋白质极易发生不可逆凝固性变性,致使微生物在短时间内死亡。生物在短时间内死亡。湿热灭菌效果,取决与致死温度和致死时湿热灭菌效果,取决与致死温度和致死时间。间。第7页第7页(2 2)微生物热死规律)微生物热死规律-对数残留定律对数残留定律 培养基中微生物受热死亡速率培养基中微生物受热死亡速率 与残留微生物数量成正比。与残留微生物数量成正比。式中式中N N:表示培养基残留活菌数:表示培养基残留活菌数,个个 t t:受热时间,:受热时间,min min
6、K K:反应速度常数(比死亡速率),:反应速度常数(比死亡速率),min-1min-1 K=f(K=f(灭菌温度、菌种、培养基等灭菌温度、菌种、培养基等)将对数残留定律积分形式变换为:将对数残留定律积分形式变换为:式中式中 N N0 0:开始灭菌时原菌数,个;:开始灭菌时原菌数,个;N Nt t:经时间:经时间t t后残留菌数,个;后残留菌数,个;k k:意义同上:意义同上 t t:表示理论灭菌时间:表示理论灭菌时间第8页第8页(3)培养基灭菌温度选择 灭菌温度选择应考虑原因主要有:a.微生物热致死温度:应高于该温度,通常以芽孢为准。b.营养成份破坏 灭菌温度选择,应是在确保灭菌效果前提下,尽
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